Departamento

de Bioqumica
Biologa Celular y Molecular 2013

Gluclisis

Campeones mundiales de atletismo 2013 !

200 mts; 19.66 s!

10.000 mts; 30:43.37!

Gluclisis
La gluclisis o gliclisis (del griego glycos, azcar y lysis, ruptura), es la va
metablica encargada de oxidar la glucosa con la nalidad de obtener
energa para la clula Secuencias de 10 reacciones que metabolizan una
molcula de glucosa 2 piruvato + 2 ATP
Proceso anaerbico (no requiere O2)
El desGno metablico del Piruvato depender de [O2]:
Anaerobiosis: fermentacin lcGca (eucariotas) o alcohlica (bacterias)
Aerobiosis: oxidacin a CO2 + ATP

Glucosa es el nico combusGble que el cerebro uGliza en condiciones

normales y es el nico combusGble que pueden usar los glbulos rojos
casi todos los organismos uGlizan glucosa como fuente de energa!

Gluclisis: ruta de conversin de energa en muchos organismos

Ruta metablica comn a casi todas las clulas, tanto
procariotas como eucariotas
En eucariotas, la gluclisis ocurre en el citosol:

Estrategia general de la gluclisis

La estrategia general es atrapar la
glucosa en la clula y transformarla en
un producto que se pueda cortar en
dos unidades fosforiladas de 3C
3 etapas:
1er etapa: conversin de glucosa en Fructosa
1,6-bifosfato (fosforilacin, isomerizacin y
2da fosforilacin)
2da etapa: ruptura de la Frc 1,6-BiPi en dos
fragmentos de 3C interconverGbles
3er etapa: produccin de ATP a travs de la
oxidacin de los fragmentos de 3C a Piruvato

Ingreso de glucosa a las clulas

La entrada de glucosa a las clulas
se produce por medio de la difusin
facilitada mediada por un grupo de
receptores/ transportadores de
membrana denominados Glut:
- Glut 1: en todos los tejidos
- Glut 2: Hgado y pncreas
- Glut 3: Cerebro
- Glut 4: Msculo + Tej.
Adiposo (insulina
dependiente)

1. !Hexoquinasa atrapa la glucosa en las clulas y

comienza la gluclisis!

Hexoquinasa: amplia especificidad de sustrato, Km = 0,1 mM"

Glucoquinasa: especfica para glucosa, Km = 10 mM"

Reaccin de transferencia del grupo fosforilo

La transferencia del grupo fosforilo es una de las
reacciones fundamentales en bioqumica
Quinasas: enzimas que catalizan la transferencia de un
fosforilo desde el ATP a un aceptor
Hexoquinasa: cataliza transferencia de un grupo fosforilo
a un azcar de 6C (hexosa)
X-Ray: la unin de la glucosa a la
enzima induce un gran cambio
conformacional en la hexoquinasa
cierre de los dos lbulos de manera
tal que unicamente el grupo
hidroxilo del C 6 queda expuesto
para aceptar el fosforilo del ATP

2. !Conversin de G-6P en F-6P!

Isomerizacin conversin de una aldosa (hemiacetal)

en una cetosa (hemicetal)
Incluye pasos intermedios

3. !Fosforilacin de la F-6P a F-1,6 BiP!

Reaccin catalizada por Fosfo-fructo-kinasa (PFK),

enzima alostrica !
Principal reaccin de regulacin de la gluclisis:!
!

Moduladores positivos: !ADP, AMP, F-2,6 DP!

Moduladores negativos: !ATP, citrato!

Estrategia general de la gluclisis

La estrategia general es atrapar la
glucosa en la clula y transformarla en
un producto que se pueda cortar en
dos unidades fosforiladas de 3C
3 etapas:
1er etapa: conversin de glucosa en Fructosa
1,6-bifosfato (fosforilacin, isomerizacin y
2da fosforilacin)
2da etapa: ruptura de la Frc 1,6-BiPi en dos
fragmentos de 3C interconverXbles
3er etapa: produccin de ATP a travs de la
oxidacin de los fragmentos de 3C a Piruvato

4. !Rotura de la F 1,6 BiP en DHAP y G-3P!

A parXr de ahora, todos los intermediarios de la gluclisis sern

productos de 3C en vez de unidades de 6C

5. !Interconversin de las triosas fosfato!

Mecanismo de accin de la TPI:

Kcat/KM = 108 reaccin controlada por difusin

Es decir, cada vez que la enzima y el sustrato se
encuentran, se produce la catlisis
El encuentro del sustrato y la enzima esta
controlado por difusin consXtuye el paso
limitante de la catlisis
TPI es un ejemplo de enzima cinXcamente
perfecta:

Estructura y Mecanismo de accin de la TPI:

Estrategia general de la gluclisis

La estrategia general es atrapar la
glucosa en la clula y transformarla en
un producto que se pueda cortar en
dos unidades fosforiladas de 3C
3 etapas:
1er etapa: conversin de glucosa en Fructosa
1,6-bifosfato (fosforilacin, isomerizacin y
2da fosforilacin)
2da etapa: ruptura de la Frc 1,6-BiPi en dos
fragmentos de 3C interconverGbles
3er etapa: produccin de ATP a travs de la
oxidacin de los fragmentos de 3C a
Piruvato

6. !Oxidacin de un aldehdo a un cido permite la

formacin de un compuesto fosfato de alta
energa: oxidacin G-3P y formacina de 1,3-BiFG!

Gran parte de la energa de oxidacin del grupo

carbonilo a carboxilo se conserva en el anhdrido acilfosfato, Go de hidrlisis = -49,3 kJ/mol !(ATP = -30,5
kJ/mol) !

6. !Oxidacin de un aldehdo a un cido permite la

formacin de un compuesto fosfato de alta
energa: oxidacin G-3P y formacina de 1,3-BiFG!
Los pasos previos de la ruta transformaron a la glucosa
en dos moleculas de GAP, pero hasta ahora no se obtuvo
energa!
Por el contrario, hasta ahora se consumieron 2
molculas de ATP!
En las siguientes reacciones, la G contenida en el GAP
se va a aprovechar para impulsar la sntesis de ATP!
Compuestos Acil-Fosfato: anhdrido mixto del cido
fosfrico y un cido carboxlico.!
Estos compuestos tienen un gran potencial para la
transferencia del grupo fosforilo!
Uno de sus grupos fosfato ser transferido al ADP para
formar ATP!

6. !Reaccin catalizada por la Gliceraldehido-3fosfato deshidrogenasa (GAPDH): oxidacin G-3P

y formacina de 1,3-BiFG!
2 procesos: !
- oxidacin de un aldehdo a su cido carboxlico por el
NAD+!
G =
-50 kJmol-1
- Unin del cido carboxlico al fosfato inorgnico para
formar el acil-fosfato 1,3-BiFG:!
G =
+50 kJmol-1

Mecanismo de accin de la G3PDH: 2 procesos acoplados!

Mecanismo de accin de la G3PDH: formacin de un

intermediario de alta energa unido covalentemente a la
enzima como mecanismo de acoplamiento energtico!

Esencia del metabolismo: la G liberada en la oxidacin de

un C se convierte en un grupo fosfato de alta energa o con
alto potencial para la transferencia del fosforilo!

Mecanismo de accin de la G3PDH: 2 procesos acoplados!

Formacin de un intermediario de alta energa unido

covalentemente a la enzima como mecanismo de
acoplamiento energtico!

Nicotinamida adenina dinucletido (NAD)!

7. !Transferencia del P desde el 1,3-BiPG al ADP!

El 1,3-BiPG es un compuesto de alta energa con un

potencial para la transferencia de grupo fosforilo
mayor al del ATP "
Formacin de ATP a travs de la transferencia de un
grupo fosforilo proveniente de un sustrato fosforilado
se denomina Fosforilacin a nivel del sustrato!

Balance de las ltimas 2 reacciones:!

Gliceraldehdo-3-fosfato, un aldehdo, se
oxida a 3-fosfo-glicerato, un cido
carboxlico!
NAD+ se reduce a NADH!
Se forma ATP a partir de ADP y Pi y a
expensas de la energa liberada por la
oxidacin de un carbono!

8. !Conversin del 3-PG en 2-PG!

Mutasa: enzima que cataliza el movimiento

intramolecular de un grupo qumico!

Mecanismo de accin de la fosfoglicerato mutasa!

9. !Deshidratacin del 2-PG a PEP!

Go hidrlisis del fosfato de 2-PG = - 13 kJ/mol!

Go hidrlisis del fosfato de PEP = - 62 kJ/mol!
"
Esta diferencia se debe a una oxido-reduccin intramolecular con
redistribucin de energa en el PEP " "

10.!Transferencia del P desde el PEP al ADP!

Segunda
fosforilacin a
nivel del
sustrato!

Balance energtico de la gluclisis!

Glucosa + 2ATP + 2NAD+ + 4ADP + 2Pi !
!
!2 Piruvato + 2ADP + 2NADH + 2H+ + 4ATP + 2H2O !
Glucosa + 2NAD+ + 2ADP + 2Pi !
!
!
!
2 Piruvato + 2NADH + 2H+ + 2ATP + 2H2O !
Glucosa + 6O2 !
!6CO2 + 6H2O!

Go = - 2840 kJ/mol!
Glucosa!
!
!2 Piruvato!

Go = - 586 kJ/mol!
2 NAD+ !
!
!2 NADH!

Go = + 440 kJ/mol!
2 ADP + Pi
!
!2 ATP!

Go = + 61 kJ/mol
!!
Del 100% de la energa contenida en una
molcula de glucosa:!
el 79,4% est an en los 2 piruvatos!
el 15,5% est en los 2 NADH!
el 2,1 % est en los 2 ATP!

Campeones mundiales de atletismo 2013 !

200 mts; 19.66 s!

10.000 mts; 30:43.37!

Posibles destinos del piruvato en el humano!

Posibles destinos del piruvato!

Posibles destinos del piruvato en el humano!

3 destinos del piruvato producido en la gluclisis!

Anaerbico!
(fermentacin lctica)!

Aerbico!
(oxidacin)!

Anaerbico!
(fermentacin alcohlica)!

Fermentacin lctica: una reduccin necesaria

para regenerar NAD+!

Fermentacin lctica!

Fermentacin alcohlica: otra solucin metablica

para regenerar NAD+ en microorganismos!

Fermentacin alcohlica!

Rutas alimentadoras de la gluclisis!

Gran nmero de glcidos (aparte de la glucosa)

entran finalmente a la ruta glucoltica:!
!
polisacridos: glucgeno y almidn!
disacridos: maltosa, lactosa, trehalosa,
sacarosa!
monosacridos: fructosa, manosa,
galactosa !

Regulacin de la gluclisis!
Las etapas de la gluclisis que estn reguladas por
enzimas clave:!
son generalmente fuertemente exergnicas e irreversibles
en las condiciones celulares!
estn lejos del equilibrio en el estado estacionario
metablico!
Estn limitadas por la enzima y no por el sustrato!

Las etapas glucolticas reguladas son aquellas

catalizadas por:!
Hexoquinasa !
Fosfofructoquinasa!
piruvatoquinasa!

Principales etapas de regulacin de la gluclisis!

Regulacin de la gluclisis: Etapa 1.

!Fosforilacin de la glucosa!
Hexoquinasa / Glucoquinasa!
Hexoquinasa:!
Km glucose = 0.1 mM!
Inhibidor alostrico G-6P!

!
Glucoquinasa:!
Km glucose = 10 mM!
V = [glucosa]!
Inhibidor alostrico F-6P a!
travs de otra protena que !
forma un complejo con la
glucoquinas!

Regulacin de la gluclisis: Etapa 3.

!Fosforilacin de la F-6P a F-1,6 BiP!
Fosfofructoquinasa-1!

Regulacin de la gluclisis: Etapa 3. !Activacin de

la Fosfofructoquinasa-1 por Frc 2,6-BiPi !

Metabolismo de la F-2,6 DP!

Regulacin de la gluclisis: Etapa 10.

!Transferencia del P desde el PEP al ADP!
Piruvato quinasa!
Moduladores alostricos positivos!
F1,6-DP!

Moduladores alostricos negativos!

ATP!
Alanina!
Acetil-CoA!
c. grasos de cadena larga!

Modulacin covalente por fosforilacin en hgado!

activa!

inactiva!

Regulacin de la gluclisis en el msculo!

Gluclisis en el diagnstico oncolgico!

Efecto Warburg: two unrelated observations in biochemistry,

one in plant physiology and the other in oncology, both due
to Nobel laureate Otto Heinrich Warburg.!

Gluclisis en el diagnstico oncolgico!

2-18fluoro-2-!
deoxiglucosa (FdG)!

Paciente 26a c/linfoma no

hodgkin cel B. PET-FDG:
grandes masas hipermetablicas
en cadenas ganglionares supraclavicular, paratraqueal e hiliar
derecha, pararticas bilaterales,
hilio heptico e ilaca derecha
indicativas de alto grado de
malignidad!

Principales destinos de la Glucosa