Diagnostico de laboratorio de

Brucelosis y Fiebre Tifoidea

Alberto Flrez Granda
Enfermedades Infecciosas y
Tropicales

INTRODUCCIN
1. Trmino brucelosis : conjunto de enfermedades
ocasionadas, tanto en el hombre como en animales
(zoonosis) por microorganismos del gnero Brucella.
2. Incluye diferentes formas clnicas de infeccin
humana as como los diversos cuadros que se
presentan en el ganado, sobre todo en forma de
abortos epizoticos.

3. La expresin "brucelosis humana", es ms correcta

que las denominaciones "fiebre ondulante" o "fiebre
de Malta", que hacen referencia a una de sus
caractersticas clnicas o a una localizacin
geogrfica.

ESPECIE

HUESPED NATURAL

ENFERMEDAD CLNICA

B. melitensis

Pequeos rumiantes
(cabras-ovejas)

Grave aguda con

complicaciones comunes

B. abortus

Bvidos

Leve, complicaciones
supuradas raras

B. suis

Cerdos - roedores

Supurada destructiva con

manifestaciones crnicas

B. cannis

Perros

Leve, complicaciones
supuradas raras

Zoonosis

Gnero Brucella
Cocobacilos gramnegativos aerobios de
crecimiento intracelular facultativo

Se adquiere la infeccin

Indirecta: ingesta de productos lcteos contaminados: leche,queso

Directa: contacto con animales enfermos (secreciones, inhalacin)

Estructura
Especies lisas

Especies rugosas

El lipopolisacrido se compone
de una parte lipdica (lpido A) y
de una parte polisacrida.

Rugosas Naturales: B. ovis y B.

canis.

Se puede distinguir un ncleo,

unido a la parte lipdica, y una
cadena O, expuesta al exterior.

Cadena O: es la parte
inmunodominante y la que
interviene en las pruebas
serolgicas clsicas.

Mutantes rugosas de las cepas

lisas
Ambas NO reaccionan frente a
los anticuerpos anticadena O.

Esquema simplificado de la membrana externa de

la pared celular de Brucella

Distribucin mundial 2010

Transmisin
1. Asociada al consumo de leche, queso fresco y otros
derivados lcteos, fundamentalmente de origen
caprino contaminados y no pasteurizados.
2. Contacto con productos, subproductos y desechos
como tejidos o excreciones de animales enfermos y
por inoculacin.
3. Inhalacin de polvo de corrales o mataderos.
4. Atender animales enfermos, manipular carne y
vsceras de animales infectados y trabajar en
laboratorios.

Puerta de
entrada
Donde es vehiculizada y
fagocitada por los PMN
y macrfagos

Es inicialmente
fagocitada

Desde all puede invadir el

torrente sanguneo

Por los leucocitos PMN y los

monocitos

Ganglios regionales
correspondientes

Si sobrepasa esta
barrera

Alcanza la va
linftica

CUADROS CLNICOS
Caracterizada por su extraordinario
polimorfismo clnico, curso ondulante y su
tendencia a presentar recadas y
evolucionar a la cronicidad, debido a la
capacidad de supervivencia intracelular
del microorganismo causal.
Periodo de incubacin:
>% casos:10 - 20 das

CUADROS CLNICOS
1. Brucelosis aguda.- Desde el inicio de la
sintomatologa clnica hasta tres meses de
evolucin.
2. Brucelosis subaguda.- Evolucin de 3 meses a
1 ao.
3. Brucelosis crnica.- Perodo de evolucin > 1
ao.

Diagnostico
Historia y Ex Fsico
Clnica
1.
2.
3.
4.

Curso de la enfermedad

Ocupacin
Queso
Fresco
Viajes
Signos y
sntomas

Serologa cuantitativa
Hemocultivos

Directo
1. Cultivo.1.

Mtodo diagnstico definitivo.

2.

Hemocultivo, AMO,LCR, articular, exudado purulento, etc.

3.

El medio de Ruiz Castaeda (usa fase slida y otra lquida)

ms apropiado para dx. (10% CO2)
1. > % procesos agudos: incubacin 2-4 das.
2. < % presenta crecimiento entre 5-15 das.
3. Excepcional 30-45 das.

2.

Enfermedad aguda.- hemocultivos (+) 90-95%.

3.

En fracaso teraputico o reinfeccin .- hemocultivo (+) 60%.

Directo
1. Se han evaluado tres sistemas: VITAL (bioMrieux),
BACTEC (Becton-Dickinson) y BACT/ALERT (Organon
Teknika). BACTEC ms eficaz.
2. Todos los aparatos estudiados presentan falsos (-),
entonces hacer subcultivos.
3. En casos de muestras contaminadas (abscesos, restos
placentarios, etc.) deben utilizarse medios selectivos:
medio modificado de Thayer-Martin.

Directo: PCR
Deteccin por PCR

til para identificar

y la diferenciar
diversas especies.

Resultado de la PCR Bruce-ladder: Cada especie presenta un perfil

caracterstico que permite su diferenciacin mediante una PCR
convencional.

Gran sensibilidad y
especificidad: para
Dx inicial como en
recadas.

DIAGNOSTICO INDIRECTO
1. Serologa.- >% de pruebas serolgicas usadas
para el dx detectan Ac frente a la cadena O del
lipopolisacrido de la membrana externa.
2. Gran especificidad en demostrar estos Ac, pero
no permiten afirmar la actualidad de la
infeccin.
Pueden verse falsos (+) con otras infecciones: V. cholerae, Francisella
tularensis, Yersinia enterocolitica serotipo 9. Tienen determinantes antignicos
comunes en los azcares de la cadena O.

Dx Indirecto
1. Rosa de Bengala.
2. Seroaglutinacin.
3. Prueba de Coombs anti-Brucella.

4. Cuantificar las Ig anti-Brucella.

1. Prueba de Aglutinacin en Tubo
2. Prueba del 2 Mercapto-etanol

1. Rosa de Bengala
1. Brucelas suspendidas en tampn lactato pH 3,6 y
teidas con rosa de bengala, lo que permite una mejor
visualizacin de la reaccin de aglutinacin y se
confronta con el suero problema sin diluir.
2. Es una prueba de aglutinacin rpida.

3. Muestra una buena correlacin con la seroaglutinacin.

1. Rosa de Bengala
4. Puede ser negativa, en raros casos, en pacientes con
una infeccin de muy pocos das de evolucin o de
curso muy prolongado.
5. Suele emplearse como prueba de deteccin.
6. Proporciona una aproximacin diagnstica en pocos
minutos con una sensibilidad (95-99%) y especificidad
(98%) altas.
7. Mide M e Ig G.

Rosa de Bengala

Reaccin de Huddleson o reaccin de aglutinacin

rpida en placa

1. Se enfrentan cantidades decrecientes del suero a

investigar con cantidades constantes de Ag y se
observa la presencia o no de aglutinacin.
2. Este Ag reacciona Ac de B. abortus, B. melitensis y B.
suis.
3. Ttulo 1/160 se considera en zona endmica el punto
de corte en el diagnstico de la enfermedad.
4. Se interpreta conociendo antecedentes del enfermo y
la clnica.
5. >% Ac IgM (<% IgG1, IgG2 e IgA) (descienden de 3-6 meses, con
o sin curacin).

Prueba de Coombs anti-Brucella

1. Especialmente diagnstico de la brucelosis
crnica.
2. Demuestra presencia de Ac aglutinantes y
no aglutinantes, fundamentalmente IgG.
3. El suero de Coombs (Ig humana) se
encarga de facilitar la aglutinacin de Ac no
aglutinantes del suero problema, fijados a la
suspensin antignica de B. abortus.

Prueba de Coombs anti-Brucella

4. El ttulo obtenido es mnimo el de la
aglutinacin y es mas a mayor tiempo de
evolucin de la enfermedad.
5. Puede persistir prolongadamente y con
titulacin elevada aun en pacientes con terapia
adecuada y buena evolucin clnica.

Seroaglutinacin con 2mercaptoetanol

1. Modificacin de la seroaglutinacin: usa solucin
salina al 0,85% + 0,1M de 2-ME. Este compuesto
destruye las IgM sin interferir con las de IgG que
son las que se cuantifican.
2. En general, la prctica de la seroaglutinacin y la
prueba de Coombs conjuntamente, permiten el
diagnstico de la mayora de los casos.(1/160)
3. La limitacin ms importante de las pruebas de
aglutinacin es que no permiten conocer el
estado de actividad de la brucelosis.

Aglutinacin lenta en tubo de Wright (SAT)

Detecta anticuerpos IgM e IgG2, mediante la
tcnica de aglutinaciones seriadas de suero en
tubos.
Ttulos sugerentes > 1/160

Otras Pruebas indirectas

1. Fijacin de complemento
2. Inmunofluorescencia
indirecta (IFI)
3. ELISA indirecto (ELISA-I)
4. ELISA competitivo
(ELISA-C)

5. Prueba de
inmunodifusin en agar
(IDAG)
6. Polarizacin de
fluorescencia (FPA)

Definiciones Operativas

Norma Tcnica para el Diagnstico y Tratamiento de la Brucelosis Humana

NT No. 002 -MINSA/DGSP-V.01 - MINSA/DGSP-V.01 R.M. 978 2003/MINSA

Fiebre Tifoidea

Generalidades
1. Enfermedad bacteriana sistmica producida por
Salmonella Typhi y Paratyphi .
2. Letalidad asociada a complicaciones
gastrointestinales: perforacin y hemorragias
intestinales (10%).
3. Su reservorio natural es el hombre.

Transmisin
Se propaga a travs de
alimentos, agua o
bebidas contaminadas.
Algunas personas
pueden convertirse en
portadores
de Salmonella typhi y
continuar expulsndola
en sus heces por aos,
diseminando la
enfermedad.

Clnica: 4 fases
incubacin 10 14 das

1. 1era semana: T sube lentamente con bradicardia relativa,

malestar general, dolor de cabeza y tos.
2. 2da semana: Postracin. T 40 C. Hay bradicardia. Inician
complicaciones. Vsceromegalia.
3. 3era semana: Si no se trata, las complicaciones son
frecuentes: Perforacin Intestinal, otros.
4. Finales de 3era semana/Principios de 4ta: La T corporal se
restablece, astenia persiste.

Salmonella: 3 tipos de Ag
1. Ag somtico (O)
2. Ag flagelar (H) o (d)
3. Ag capsular o de envoltura (Vi) o (K)

Laboratorio: reaccin de Widal

1. Indica presencia de Ac aglutinantes
(aglutininas) contra los Ag H (flagelar) u O
(somtico) de la S typhi.
2. Ac contra Ag O: 6 - 8 das iniciada la
enfermedad y desaparecen 3 - 6 meses.
3. Ac contra el Ag H: 8 - 12 das. Ttulos >
altos respecto a los anti-O. Persisten > 1
ao.
4. Ac contra el Ag Vi aparecen tardamente
(3era semana), lo hacen en ttulos bajos
1:10-1:20.

Limitacin del Test de Widal

1. 50 y 33% de pacientes con FT no tratada
no tienen aumento de los ttulos Anti-O y
Anti-H negativo respectivamente.
2. Presencia de Anti-O y Anti-H en la
poblacin sana.

Limitacin del Test de Widal

1. Considerar falsos (-), entre sus causas
tenemos:
a) Antibitico terapia temprana, la cual, retrasa
la aparicin de anticuerpos.
b) Uso de esteroides.
c) Medicin temprana de Ac (1era sem.)
d) Inmunodeficiencias adquiridas y congnitas.
e) Portadores crnicos de Salmonella typhi.
f) Infeccin por otros Gram (-)

Interpretacin
1. Considerar diagnostico si ttulos iniciales se
cuadruplican entre 1 - 4 semanas.
2. Sospecha de FT:
1. Anti-O 1:320
2. H 160 en zonas endmicas

3. Una reaccin negativa no excluye el dx de FT

con cuadro clnico compatible.

Conclusin
1. La reaccin de Widal no es el estndar de
oro para el diagnstico de FT.
2. Sobre diagnostica FT por sus numerosas
reacciones cruzadas.
3. La prueba no tiene valor si no hay cuadro
clnico compatible.

Cultivos
A. Hemocultivo.1. Examen > valor Dx.
2. 90% (+) 1era semana de
enfermedad.
3. 50% 3era semana.

B. Mielocultivo.1. Igual valor que Hemo.

2. >90% (+) 1era 4ta sem.

C. Coprocultivo.C. Valor en presencia de

un cuadro clnico
D. Puede ser positivo en
portadores crnicos.
E. Realizar >1 por
eliminacin continua o
intermitente.

EVALUACIN DE LOS. PROCEDIMIENTOS DIAGNOSTICOS DE

FIEBRE TIFOIDEA. Eduardo Gotuzzo, Jorge Guerra, Emilie Crosby,
Miguel Mir Quezada y Carlos Carrillo
Revistas/acta medica/1978_N1-4/pdf/a04.pdf

EVALUACIN DE LOS. PROCEDIMIENTOS DIAGNOSTICOS

DE FIEBRE TIFOIDEA. Eduardo Gotuzzo, Jorge Guerra, Emilie
Crosby, Miguel Mir Quezada y Carlos Carrillo
Revistas/acta medica/1978_N1-4/pdf/a04.pdf

Conclusin
1. Cultivo de gran utilidad: Mielo > especifico.
2. Control de recadas hasta 30 das de terminar
ATB.
3. La reaccin de Widal puede ser til pero con
escasa sensibilidad y especificidad.
4. El hemograma es altamente sensible pero
poco especifica.