UNIVERSIDAD INTERSERRANA DEL ESTADO DE PUEBLA-AHUACATLAN

4 SEMESTRE

INGENIERIA AGROINDUSTRIAL.
MICROBIOLOGIA
REPORTE: TINSION GRAM.
ALUMNO: EDGAR PEREZ APARICIO DOCENTE: ING. J. VICTORIANO RAMIREZ
ROMUALDO

INTRODUCCION
En microbiologa el microscopio se utiliza de forma rutinaria, ya que proporciona
importante informacin para la identificacin temprana y definitiva de los
microorganismos.
En la valoracin de las muestras, es trascendente el poder de resolucin del microscopio, el
cual se define como la capacidad que posee un objetivo para distinguir la distancia mnima
entre dos puntos del objeto para que se puedan visualizar como dos puntos separados. El
poder de resolucin de un objetivo es el responsable de la calidad, claridad, nitidez y fineza
detallada de la imagen, y depende de la longitud de onda () del haz de luz utilizado y de la
apertura numrica del objetivo empleado. El mximo poder de resolucin en un
microscopio de luz emitida es de 0.2 m, por lo que se requiere de una amplificacin entre
1000-1400x, mientras que el poder de resolucin del ojo humano es de aproximadamente
0.2 mm. Para aprovechar esta ventaja de los microscopios, se han desarrollado tcnicas
tintoriales que destacan las caractersticas morfolgicas de los microorganismos.2 Existe
una gran variedad de tinciones que pueden ser aplicadas dentro del campo de la
microbiologa.3

ANTECEDENTES
Las tinciones en microbiologa son las primeras herramientas que se utilizan en el
laboratorio para el diagnstico de las enfermedades infecciosas. Desde hace ms de un siglo
han ayudado a resolver problemas de etiologa microbiana. Hay una gran variedad de
tinciones, que se han ido desarrollando para la deteccin de los diferentes agentes
infecciosos en los que se incluyen bacterias, parsitos y hongos. La tincin de Gram se
considera bsica en la valoracin inicial de muestras para anlisis bacteriolgico, mientras
que la tincin de Wright se ocupa para el diagnstico de enfermedades muy particulares en
el rubro de la parasitologa. Hay tcnicas tintoriales especficas de gran utilidad, como la
tincin de Ziehl-Neelsen, que se utiliza para el diagnstico de enfermedades crnicas como
la tuberculosis o la actinomicosis, o la tincin de azul de lactofenol, que preserva e
identifica a los componentes estructurales de los hongos. Las diferentes tinciones en el
laboratorio microbiolgico tienen una utilidad fundamental para el diagnstico y
tratamiento oportuno de mltiples patologas de etiologa infecciosa.
OBJETIVO
Analizar y comprender los distintos tipos y mtodos de tincin en microbiologa
para la deteccin de bacterias

MATERIALES Y METODOS

1.
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3.
4.
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8.
9.

Tinsion Gram.
Frotis bacteriano
Cristal violeta (1 min)
Lavar con agua
Agregar lugol (1 min)
Lavar con alcohol acetona
Agregar safranina (30 segundos)
Lavar con agua
Secar con aire
Frotis teido para observacin

a)
b)
c)
d)
e)
f)
g)
h)
i)
j)

Material
Microscopio
Porta cubre objetos
Vaso de precipitados
Pizeta
Agua destilada
Asa
Solucin cristal violeta
Solucin alcohol acetona
Solucin lugol
Safranina acuosa

Procedimiento:
Sobre un portaobjetos de vidrio, limpio y seco, se coloca una gota del material que se va a
teir (si es lquido) o se hace rodar el hisopo con que se tom la muestra. Una vez que el
hisopo ha tocado la superficie del portaobjetos, que no est estril, ya no puede ser
empleado para inocular los medios de cultivo. Puede usarse una aguja estril para transferir
una pequea cantidad de un cultivo bacteriano a la superficie del portaobjetos. Este material
es suspendido en una gota de agua o solucin salina previamente colocada sobre el
portaobjetos. El material se frota directamente sobre el portaobjetos, donde puede
visualizarse con facilidad. El material colocado en el portaobjetos se deja secar al aire o
bien se pasa varias veces por la zona azul de la llama de un mechero de Bunsen hasta que el
vidrio est tan caliente que moleste al tacto pero no queme despus, se lava con agua para
despus agregarle el lugol por 1 min y este se lava con alcohol acetona, y agregar
safranina por 30 segundos lavar con agua y despus de esta secar con aire o
pasarlo por el mechero de modo que o queme la muestra

UNIVERSIDAD INTERSERRANA DEL ESTADO DE PUEBLA-AHUACATLAN

4 SEMESTRE

INGENIERIA AGROINDUSTRIAL.
MICROBIOLOGIA
REPORTE: TINSION GRAM.
ALUMNO: EDGAR PEREZ APARICIO DOCENTE: ING. J. VICTORIANO RAMIREZ
ROMUALDO

Imagen 1. Vista
desde el
microscopio

Imagen 3.
2. Deteccin
de gram negativas

Imagen 4. Deteccin
de gram negativas

BIBLIOGRAFIA
1. Decr D, Barbut F, Petit JC. Role of the microbiology laboratory in the
diagnosis of nosocomial diarrhea. Pathol Biol (Pars). 2000; 48: 733-744.
2. Keller PJ. Imaging morphogenesis: technological advances and biological
insights. Cience. 2013; 340: 123-168.
3. Madison BM. Application of stains in clinical microbiology. Biotech Histochem. 2001;
76: 119-125.
4. Luis SBM, Altava B. Introduccin a la qumica orgnica. Universitat Jaume;1997.