Crecimiento microbiano

En microbiologa el crecimiento se define como el incremento

en el nmero de clulas.
La biparticin o fisin binaria
es el proceso por el cual una
clula se divide para formar dos
clulas iguales.
La formacin de dos clulas a
partir de una, se llama
generacin y el tiempo
requerido para la divisin es el
tiempo de generacin o tiempo
de duplicacin.

Fisin binaria
Durante la fisin binaria cada clula
recibe una copia del cromosoma, de
los ribosomas, complejos
macromoleculares, as como
monmeros y iones inorgnicos para
existir como una clula
independiente.
El ADN se ancla a la membrana y as,
cada clula hija se queda con una
copia.
Hay formacin de un septo que dar
lugar a cada una de las clulas, las
envolturas rodean a cada copia del
ADN, dando lugar a la separacin de
las clulas.

Fisin binaria
La formacin de
septo y la
posterior
separacin
celular difiere
segn el tipo de
bacteria.

Current Biology 19, R812 R822 (2009)

Crecimiento bacteriano
La presencia de
protenas
especficas en
los polos indica
la orientacin
del crecimiento
de las hifas.

Current Biology 19, R812 R822 (2009)

Protenas Fts
Las protenas Fts (filamentous
temperature sensitive) interactan
para formar el aparato de divisin
llamado divisoma.
FtsZ polimeriza y forma una anillo
en el centro de la clula.
FtsA es una enzima ATP hidrolasa
que provee la energa para
ensamblar protenas en el
divisoma.
ZipA ancla a FtsZ a la membrana
citoplasmtica.
FtsI es una protena involucrada en la sntesis de peptidoglucano y
es tambin llamada protena de unin a penicilina (PBP) debido a
que su actividad es bloqueada por el antibitico.

Replicacin del ADN

La replicacin del ADN ocurre previo a la
formacin del anillo FtsZ, ste se forma en el
espacio entre los cromosmas duplicados.

MinC es un inhibidor de la divisin celular y

previene que FtsZ ensamble el anillo hasta
que el centro se encuentre formado.
MinE inhibe la actividad de MinC y se ancla
al centro de la divisin.
FstK participa en la segregacin del
genoma.
FstZ tambin tiene actividad de GTP
hidrolasa, libera energa para la
polimerizacin y despolimerizacin, as como
para el ensamblaje y desensamblaje del
anillo.

Protena MreB y la forma de las bacterias

La presencia de la protena
MreB se ha relacionado con la
forma de las bacterias no
cocoides.
FtsZ tubulina bacteriana.
MreB actina bacteriana.

Nature Cell Biology 5, 175 - 178 (2003)

Forma
de las
bacterias
MreB vs.
FtsZ

Autolisinas
Las enzimas autolisinas tienen
una funcin similar a la lisozima,
realizan pequeos orificios o
poros por los que se van
aadiendo los nuevos
componentes celulares.
Las autolisinas forman parte del
complejo divisoma.
La sntesis del nuevo
peptidoglucano deja en la
clulas Gram positivas una
cicatriz.
La formacin de poros y la
sntesis debe ser coordinada
para evitar la autolisis de la
clula.

Bactoprenol y transpeptidacin
El bactoprenol acarrea los precursores de la pared celular, en el
periplasma interacta con la enzima que inserta los precursores
de pared celular y cataliza la formacin del enlace glucosdico.

La transpeptidasa forma el enlace peptdico entre las cadenas

de aminocidos de las unidades de murena.

Crecimiento exponencial
Cuando un cultivo se duplica
de manera regular durante
un intervalo de tiempo, se
denomina crecimiento
exponencial.

Una grfica aritmtica del

crecimiento muestra un
incremento constante
mientras que una logartmica,
permite calcular el tiempo de
generacin cuando el
crecimiento es exponencial.

Tiempo de generacin
Nmero de
generaciones

2n

Nmero
total de
clulas

20

21

22

23

24

16

25

32

26

64

Tiempo de generacin (G)

es el tiempo requerido
para que una clula se
divida o una poblacin se
duplique.

G = t/n
En donde t es el tiempo
total de incubacin y n es el
nmero de generaciones.

N = No2n
N = No 2t/G
lnN = lnNo + (t/G) ln2

Donde N es el nmero de clulas

Tiempo de generacin
Si es igual a ln2/G, en donde es la velocidad de
crecimiento especfica, entonces la ecuacin queda:
lnN = lnNo + t

y = mx + b
Si despejamos G de la ecuacin queda:

t ln2

G = ___________________________
ln N - ln No

Tiempos de duplicacin
Bacteria

Medio

Tiempo de
duplicacin
(minutos)

Escherichia coli

Glucosa-sales

17

Bacillus megaterium

Sacarosa-sales

25

Streptococcus lactis

Leche

26

Staphylococcus aureus

Medio de infusin de
corazn

Streptococcus lactis

Medio con lactosa

Lactobacillus acidophilus

Leche

Rhizobium japonicum

Manitol-sales-extracto
de levadura

344-461

Mycobacterium tuberculosis

Medio definido

762-932

Treponema pallidum

Testculos de conejo

27-30
48
66-87

1980

Log del nmero de

microorganismos

Curva de crecimiento

B
D

A
Tiempo

Curva de crecimiento
A (Fase Lag). Periodo de latencia o adaptacin: no hay
aumento significativo de la densidad celular, el crecimiento es
asincrnico.
B (Fase Log). Periodo de crecimiento exponencial, el
crecimiento es sincrnico y se alcanza la mxima velocidad
de crecimiento.
C (Fase pre-estacionaria). Periodo de retardo, desaparece el
crecimiento exponencial, los microorganismos entran en
estrs.
D (Fase estacionaria). Periodo estacionario: no hay cambios
significativos de la densidad celular con respecto al tiempo,
existe un equilibrio entre los microorganismos vivos y muertos.
E (Fase de muerte). Fase en la que el equilibro desaparece y
predominan los microorganismos muertos. No hay nutrientes
para el recambio y las condiciones del medio de cultivo son
adversas para el crecimiento.

Tipos de cultivo
Cultivo en lote

Cultivo en lote alimentado

Cultivo en continuo

Temperatura

ptimo

(3)
Velocidad de
crecimiento

1. Gelificacin de la
membrana; los
procesos de
transporte se llevan a
cabo lentamente y
no hay crecimiento.

(2)

Mnimo
Mximo

(1)

Temperatura

(4)

2. Las reacciones enzimticas aumentan su velocidad.

3. Las reacciones enzimticas se llevan a cabo a su mxima
velocidad.
4. Desnaturalizacin de protenas y membrana citoplasmtica.
Lisis trmica.

Temperatura

Temperatura. Clasificacin
Clasificacin de microorganismos de acuerdo a su temperatura
ptima de crecimiento
Psicrfilos

0 - 20C

Flavobacterium sp. 13C

Mesfilos

20 - 40C

Escherichia coli 37C

Termfilos

40 60C

G. stearothermophylus 60C

Hipertermfilos

60 80C

Thermococcus celer

Termfilos extremos

> 80C

Pyrodictium brockii

Psicotrficos: Microorganismos que crecen a temperatura ambiente pero

causan contaminacin en condiciones de refrigeracin.

Temperatura

Nature 409, 1092-1101 (22 February 2001)

Microorganismos patgenos

E. coli

Trichomonas vaginalis

Candida albicans

Helicobacter pylori

pH
Microorganismos

pH
1
2

Acidfilos

3
4
5
6

Neutrfilos

7
8
9
10

Alcalfilos

11
12
13

14

pH

Nature 409, 1092-1101 (22 February 2001)

pH 3.33.5

pH 8.88.3

Oxgeno
Enzimas

Metabolismo

Ejemplos

Es necesario para el crecimiento,

contiene SOD y catalasa.

Respiracin
aerobia

Micrococcus luteus
P. aeruginosa

Aerobios
Obligados

Respiracin
aerobia,
anaerobia y
fermentacin

Enterobacter sp.
S. cerevisiae

Requieren baja concentracin de

O2, presentan SOD y catalasa.

Respiracin
aerobia

Spirillum vollutans

Aerotolerantes

No requieren O2, pero crecen en

su presencia. Slo SOD.

Fermentacin

S. pyogenes
Clostridium sp.

Obligados

El O2 es letal, no contiene enzimas

destoxificantes

Fermentacin o
respiracin
anaerobia

Metanobacterium
formicicum

Facultativos

Microaeroflicos

Crecen mejor en presencia de

oxgeno, presentan SOD y
catalasa.

Anaerobios

Enzimas destoxificantes
O2 + e-
O2- + e- + 2H+
H2O2 + e- + H+
HO. + e- + H+
Reaccin general:

O2- Superxido
H2O2 Perxido de hidrgeno
H2O + OH. Radical hidroxilo
H2O Agua
O2 + 4e- + 4H+ 2H2O

Superxido dismutasa (SOD)

O2- + O2- + 2H+ H2O2 + O2
Catalasa
H2O2 + H2O2 2H2O + O2
Peroxidasa
H2O2 + NADH + H+ 2H2O + NAD+

Relacin con el O2
Crecimiento en medio fluido de Tioglicolato.

Aerobio
obligado

Aerobio
facultativo

Microaeroflico

Anaerobio
aerotolerante

Anaerobio
obligado

Cultivo de anaerobios
Jarra de anaerobiosis
NaHCO3 + NaBH4 + O2 CO2 + H2O + H2

Concentracin de solutos
Concepto

Definicin

No Halfilos

Crecen en concentraciones de 1-6 % de NaCl

Halfilos moderados

Crecen en concentraciones de 6-15% de NaCl

Halfilos extremos

Crecen en concentraciones de 15-30% de NaCl

Halotolerantes

Toleran disminuciones en el aw pero crecen mejor en

ausencia de solutos.

Osmfilos

Son capaces de vivir en altas concentraciones de azcares.

Xerfilos

Crecen en condiciones de aw bajo.

Actividad del Agua

aw es la relacin entre la presin de vapor del aire en

equilibrio con una sustancia o solucin a la presin de vapor

a la misma temperatura del agua pura.
aw

Medio de
crecimiento

Microorganismos que
desarrollan

1.000

Agua pura

Caulobacter, Spirillum

0.995

Sangre humana

Streptococcus, Escherichia

0.980

Agua salada

Pseudomonas, Vibrio

0.950

Pan

Muchos cocos G+

0.900

Miel de maple, jamn

Cocos G-

0.850

Salami

Saccharomyces rouxii

0.850

Pastel de frutas, jalea

Saccharomyces bailii, Penicillium

0.800

Lagos salados

Halobacterium, Halococcus

0.750

Cereales, dulces, frutas

secas

Xeromyces bisporus y otros hongos

xerfilos.

Solutos compatibles
Son compuestos que forman los microorganismos para
compensar la concentracin de solutos exterior.
Aminocidos: Glicina-betana y ectoina
CH2

CH3
CH3

N CH2
CH3

Glicina-Betana

CH2

COOCH3

COO-

Ectoina

Carbohidratos: Sacarosa y trehalosa

Poli alcoholes: Manitol y glicerol
Otros: KCl y propionato dimetilsulfnico (PDS)

Formacin de solutos compatibles

Organismo
Bacterias no fottrofas
Cianobacterias de agua dulce
Cianobacterias marinas
Algas marinas
Cianobacterias de lagos salados
Bacterias fototrpicas, anoxignicas
haloflicas
( Ectothiorhodospira)

Soluto principal

aw mximo

Glicina betana , prolina (G+),

glutamato (G-)

0.97 0.90

Sacarosa, trehalosa

0.98

a-glucosilglicerol
Manitol, glucosidos, prolina,
PDS

0.92

Glicina betana

0.90 0.75

Glicina betana. Ectona,

trehalosa

Arqueas halfilas extremas

(Halobacterium) y algunas
bacterias (Haloanaerobium)

KCl

0.75

Alga verde haloflica (Dunaliella)

Glicerol

0.75

Levaduras xerfilas

Glicerol

0.83 0.62

Hongos filamentosos xerfilos

Glicerol

0.72 0.61