ECBTI- BIOTECNOLOGA -305689

UNAD
ECBTI
BIOTECNOLOGA_305689
PRODUCCIN DE ENZIMAS DE INTERS INDUSTRIAL
FEDRA LORENA ORTIZ B.
Directora de curso

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Propsitos de formacin
Qu el estudiante aplique los conocimientos de la
unidad 1, en la resolucin de un problema especfico
Qu el estudiante argumente cientficamente la
solucin al problema planteado.
Qu el estudiante indague los temas de la Unidad 1,
con el fin de ponerlos a consideracin en la resolucin
de un problema.

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Observaciones generales
Con el fin de que los estudiantes cumplan con los
propsitos de formacin es necesario que estudien
los siguientes temas:
Biotecnologa de las fermentaciones
Sistemas de Fermentacin
Biocatalisis.

Recursos Didcticos.
Ova Sobre fermentacin
Laboratorio virtual 2.
Artculos del tema.

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Qu son las enzimas? son molculas proteicas, que actan como

catalizadores de una reaccin bioqumica, es decir aumentan la
velocidad cataltica de dicha reaccin sin alterar los productos que se
generen al final de dicho proceso.

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CARACTERSTICAS DE LAS ENZIMAS

Son catalizadores muy activos en medios

acuosos y cada enzima acta bajo
condiciones especficas de temperatura,
pH, entre otros .
Son catalizadores muy especficos:
pueden modificar un nico substrato en
una mezcla de substratos muy similares.
Son catalizadores muy selectivos:
pueden modificar un nico enlace o un
nico grupo funcional en una molculas
que tenga varias posiciones modificables.

ENZIMAS COMO PRODUCTOS BIOTECNOLGICOS

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VENTAJAS :
Transforman rpidamente los sustratos a temperaturas moderadas y
a valores de pH cercanos a la neutralidad.
Alta especificada respecto al sustrato que distingue una mezcla
compleja as como respecto a la transformacin qumica que lleva
acabo.
Su actividad puede ser fcilmente controlada mediante un ajuste en
las condiciones de la reaccin (Inmovilizacin de la enzima)
Mejora las caractersticas de un proceso y su aceleracin.
Mejora el producto: Se puede utilizar un proceso enzimtico para
cambiar el sabor o la textura de un alimento.

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FUENTES DE ENZIMAS

Las enzimas pueden ser de origen vegetal, animal y

microbiana
Entre las enzimas de tipo vegetal, se encuentran las proteasas,
carbohidrasas ( las cuales descomponen residuos de azcares
de carbohidratos superiores, a-amilasas y b-amilasa)

Entre las enzimas de tipo animal estn la esterasa ( Lipasa se

produce en la mucosa gstrica, el pncreas; fosfotasas, que se
obtiene de tejidos animales seo, muscular, tripsina, y la
quimotripsina que se produce en el pncreas )
Las enzimas del tipo microbiano provienen de bacterias,
arqueas y de hongos.

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ENZIMAS DE ORIGEN MICROBIANO, DE INTERS INDUSTRIAL

Bacterias productoras
de alfa amilasa

La alfa amilasa es una enzima que se utiliza en la

industria del almidn, el alcohol y el papel, por lo
tanto tiene una alta importancia a nivel comercial, lo
que ha llevado a realizar diversas investigaciones en
Biotecnologa que permita optimizar su produccin.

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Los microorganismos que utilizan el almidn comnmente

denominados amilo lticos, pueden utilizar este polmero
porque tienen enzimas como la alfa amilasa la cual se
encarga de degradar el almidn hasta las molculas de
glucosa. El yodo se utiliza como indicador de presencia de
almidn, por lo tanto al colorearse de color oscuro, indica la
presencia del polisacrido.

En la caja petri, se puede observar las

colonias de bacterias, cuyo halo no esta
coloreado por el yodo, es decir no detecta
presencia de almidn y que por lo tanto se
puede decir que stas bacterias degradaron
el almidn a compuestos ms sencillos

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Los procesos de produccin de enzimas

microbianas se realizan mediante
cultivos aerbicos.
En general las enzimas se producen en
pequeas cantidades durante la fase de
crecimiento activo, pero se acumulan en
grandes cantidades en la fase
estacionaria del crecimiento.
Las enzimas inducibles como la alfa
amilasa se producen slo cuando en el
medio se encuentra el inductor
(sustrato)
La Amilasa, se produce mediante fermentacin de sustratos.
Durante la produccin es importantes el control de la temperatura , pH y la
presencia de compuestos qumicos inactivantes.

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La alfa amilasa.
Puede clasificarse segn su origen:
amilasa bacteriana o fngica Es una
enzima termoestable, es decir
funciona mejor y resiste altas
temperaturas, el promedio de
temperatura operativo es de entre
55 y 800C, adems trabaja con un pH
menor de 6 y con una concentracin
de calcio de entre 50 ppm y 100
ppm para su mejor rendimiento.

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PROBLEMA A RESOLVER

La bsqueda continua de microorganismos ms eficientes en la

produccin de alfa amilasa es una alternativa, para optimizar la
produccin de esta enzima de importancia comercial.
Para ello, se ha aislado tres cepas de microorganismos amiloliticos,
sin embargo se desea saber cul de las tres cepas es ms eficiente
en la degradacin de ste polisacrido. Para ello se ha realizado un
procedimiento de laboratorio (Remtase al laboratorio 2, del
laboratorio virtual del curso de Biotecnologa) y responda la siguiente
pregunta:
Pregunta 1. Cul de los microorganismos es ms efectivo?.
Fundamente su respuesta de acuerdo al experimento realizado.

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PROBLEMA 2.
Con los resultados anteriores se obtuvo la Cepa ms eficiente
en degradar el almidn, ahora se pretende optimizar las
condiciones para esta produccin. Para ello se desea
comparar dos medios de cultivo, los cules se prepararon as:
SUSTRATO

MEDIO 1

MEDIO 2

Fuente de Carbono

Harina de Yuca (10 g.L-1)

Harina de trigo (10 g.L-1)

Fuente de Nitrgeno

Harina de Frijol (5 g.L-1)

Harina de Sangre (5 g.L-1)

Mezcla de
micronutrientes

K (1 ml.L-1)

K (1 ml.L-1)

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PROBLEMA 2.
Las Condiciones de cultivo en los dos casos fueron: 5 das de
fermentacin en medio lquido y agitacin constante de 120 rpm. Se
realizo un experimento, en los cuales cada medio de cultivo se
incubo a dos temperaturas diferentes (30 0C y 35 0C), con tres
replicas. No se controlo el pH durante la fermentacin.
Al finalizar el experimento se obtuvieron los resultados que se
muestran en la tabla adjunta, los valores de pH final y
UA/enzimtica, corresponden al promedio de las tres replicas.

Medio de
cultivo

Temperatura
de incubacin

pH final medio UA/enzimtica

de cultivo

M1

300C

5.9

5.4

M1

350C

5,4

4.6

M2

300C

5.9

13.3

M2

350C

5.2

14.2

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PROBLEMA 2. Para explicar los resultados anteriores, es

necesario presentar una hiptesis de estudio. Para ello, Ud.
debe escoger una de las hiptesis que se propone a
continuacin y fundamente su posicin con evidencia terica y
emprica, tenga en cuenta que debe analizar todas las
variables del experimento, desde la composicin del medio de
cultivo hasta las condiciones de experimentacin. Socialcela
en su grupo de trabajo y desarrolle la Gua de actividades.

Hiptesis 1: Las variaciones en la actividad enzimtica se

debe a las diferencias en la concentraciones de almidn en
la fuentes de carbono
Hiptesis 2. Las diferencias en la actividad enzimtica se
debe a la presencia de inhibidores en el medio de cultivo 1
Hiptesis 3. Las variaciones en la actividad enzimtica se
debe a las diferencias del pH final del medio de cultivo

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MUCHOS XITOS