ESTUDIO DIAGNSTICO DE LA ECOTOXICIDAD DE

AFLUENTES DEL RO GUADALQUIVIR, EN EL REA

COMPRENDIDA ENTRE LAS TIPAS Y EL ANGOSTO DE SAN
LUIS, PROVINCIA CERCADO-TARIJA.
Por: M. Rosalva Angulo Reyes
Ingeniera Qumica, docente tiempo completo del Departamento de Ingenieras y Ciencias
Exactas, Universidad Catlica Boliviana San Pablo Tarija. Calle Coln N 734, telf. 46647970 int. 104. rosalva_angulo@ucbtja.edu.bo
IV-Angulo-01
Palabras clave: Bioensayos, toxicidad, Lactuca sativa, Allium cepa, Unidades Txicas, ro
Guadalquivir, Tarija.
RESUMEN
En este trabajo de investigacin se realiz el estudio diagnstico ecotoxicolgico del Ro
Guadalquivir, en el tramo comprendido entre Las Tipas en la zona de Aranjuez hasta el
Angosto de San Luis en El Temporal, el propsito del mismo fue proporcionar informacin
confiable de los parmetros ecotoxicolgicos de calidad del agua del ro Guadalquivir y de
algunos de sus afluentes, de los que hasta ahora no se tena ninguna referencia. El
diagnostico busc determinar el nivel de ecotoxicidad presente en los afluentes del ro
Guadalquivir, a travs del empleo de bioensayos estandarizados de toxicidad aguda,
utilizando semillas de Lactuca sativa (lechuga variedad White Boston) y bulbos de Allium
cepa (cebolla amarilla) como bioindicadores.
Producto de este diagnstico y del clculo del nivel de toxicidad se puede afirmar que
existe fitotoxicidad en algunos de los cuerpos de agua estudiados y en algunos casos se
obtuvieron resultados de toxicidad inversa. El parmetro de referencia empleado fue el
valor de las Unidades Txicas (UT) calculadas en funcin de la concentracin de inhibicin
media CI50.
Se ve que los valores de UT, empleando como bioindicador L. sativa, de las quebrada de
Sossa y el Angosto de San Luis las clasifican como muy txicas y en el caso de la quebrada
El Toro como txica, similar situacin se observa para la muestras empleando bulbos de
Allium cepa como bioindicador, donde la clasificacin va desde txica a muy txica para la
quebrada de Sagredo y moderadamente txica para las quebradas de Sossa y El Toro.
Estos resultados sugieren la necesidad de realizar estudios ms extensos aumentando el
nmero de bioindicadores utilizados.
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ESTUDIO DIAGNSTICO DE LA ECOTOXICIDAD DE

AFLUENTES DEL RO GUADALQUIVIR, EN EL REA
COMPRENDIDA ENTRE LAS TIPAS Y EL ANGOSTO DE SAN
LUIS, PROVINCIA CERCADO-TARIJA.
1. INTRODUCCIN.
La calidad del agua tal como lo establece la Ley 1333 y sus reglamentos se ha establecido
preferentemente, mediante anlisis fisicoqumicos, que son ms precisos en valor absoluto,
pero proporcionan informacin parcial y puntual. Por otra parte, el nfasis en el control de
los vertidos a los diferentes cuerpos de agua, ros, lagos, etc. se ha abocado principalmente
a la contaminacin orgnica y de organismos patgenos, mientras que la problemtica del
efecto de los contaminantes presentes en descargas de mezclas complejas, como las aguas
residuales crudas, es poco considerada (Ramrez R. y col., 2008). Algunas de las causales
de esta falencia se relacionan con el elevado costo de los anlisis de contaminantes
considerados en nuestra legislacin como parmetros de control complementario y especial
as como con la falta de infraestructura, equipamiento y experiencia necesarios, para la
deteccin de contaminantes txicos complejos que pueden generar riesgos para la salud
humana y los ecosistemas naturales.
Como respuesta a esto en las ltimas dos dcadas, ha surgido un nmero creciente de
investigadores e iniciativas cientficas, que sugieren que los criterios de anlisis
fisicoqumicos por s solos, son insuficientes para determinar el efecto de mezclas
complejas de contaminantes sobre los ecosistemas acuticos y la salud de las personas e
instan a incluir bateras de bioensayos como mtodos rpidos, de bajo costo y escaso
requerimiento instrumental, para analizar y monitorear la calidad de cuerpos de agua dulce.
(Ramrez y col., 2008) (Bohrquez-Echeverry y Campos-Pinilla, 2007) (Bruchchen y col.
2013) (Castillo, M., 2004)
rea de estudio.
El estudio comprendi el trayecto del ro Guadalquivir perteneciente a la provincia Cercado
del departamento de Tarija, iniciando desde Las Tipas, zona de Aranjuez, a la altura de la
caseta de bombeo de COSAALT hasta el angosto de San Luis, zona El Temporal.
Dentro de este tramo se seleccionaron los siguientes puntos intermedios de muestreo: la
quebrada Sossa, a la altura del mercado San Martn, antes de su descarga al ro
Guadalquivir. La quebrada Sagredo, metros antes de su unin con el ro. La quebrada El
Monte, en la zona del Tejar, detrs de la Academia de Polica y la quebrada del Toro.
Duracin del trabajo de campo.
La parte experimental de este trabajo comprendi los meses de julio a noviembre del ao
2014, se escogi esta poca del ao por ser la de mayor dficit hdrico y por tanto en la que
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el efecto del aporte de contaminantes provenientes de las quebradas que desembocan en el

ro Guadalquivir es mayor.
2. OBJETIVOS.
Los objetivos del presente trabajo son:
1) Diagnosticar el nivel de ecotoxicidad de los cuerpos de agua contaminados por la
descarga de los efluentes urbanos e industriales y que desembocan en el ro
Guadalquivir, a travs del empleo de bioensayos estandarizados de toxicidad aguda.
2) Identificar los sitios que presenten niveles ms elevados de toxicidad con fines de
ampliar el nmero y variedad de bioensayos en estudios posteriores.
3. METODOLOGA.
El trabajo de investigacin comprendi dos etapas: la toma de las muestras de agua en
campo y la realizacin de los bioensayos de laboratorio.
El muestreo se realiz en cada uno de los sitios detallados en el acpite anterior, en todos
los casos se realizaron mediciones in situ de pH, temperatura (T), oxgeno disuelto (O.D.),
conductividad y adicionalmente la medicin de slidos disueltos totales (T.D.S.)
Las muestras se tomaron de acuerdo a las recomendaciones de la norma NB-496
(Ministerio de Medio Ambiente y Agua, 2014), y fueron conservadas en frio hasta su
traslado al laboratorio de anlisis de la Universidad Catlica Boliviana regional Tarija
(UCB-Tarija) donde se analizaron: alcalinidad total, dureza total, dureza de calcio, dureza
de magnesio, calcio total, magnesio total, nitrgeno amoniacal, sulfuros totales, hierro total,
nitritos, nitratos, sulfatos, cobre, cromo total (hexavalente), fosforo reactivo total y
demanda biolgica de oxgeno DBO5.
En cuanto a los bioensayos, se realizaron ensayos de toxicidad aguda con semillas de
lechuga (Lactuca sativa) variedad White Boston y de inhibicin del crecimiento promedio
de races en bulbos de Allium cepa, cebolla amarilla.
Para ambas especies se sigui los procedimientos descritos en la bibliografa por Castillo
(2004), Ramrez y col. (2008) y los protocolos de la US EPA (1989) y Fiskesj (1993).
Para las semillas de Lactuca sativa se determin como parmetro de referencia el ndice de
Germinacin (IG), mientras que para los bulbos de Allium cepa, se calcul el Porcentaje de
Inhibicin del desarrollo radicular, ambos parmetros utilizados para el clculo de la CI50.
Para el anlisis estadstico se utiliz el programa SPSS versin 22, se realiz la prueba de
normalidad con el test de Shapiro-Wilk, la de homogeneidad de varianzas con la prueba de
Levene, el anlisis de varianza ANOVA, y en los casos en los que el test ANOVA result
significativo se aplic la prueba de Dunnett, una prueba post hoc de comparaciones
mltiples frente al control (blanco), para el clculo de concentracin ms alta a la que no se
observa efecto (NOEC) y de la concentracin ms baja a la que se observa efecto (LOEC).
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En aquellas muestras que mostraron ms del 50% de inhibicin del crecimiento se calcul
tambin la concentracin de inhibicin media, CI50 empleando el anlisis PROBIT y la
toxicidad expresada en unidades de toxicidad UT:

Para la categorizacin de los niveles de toxicidad se utiliz la relacin propuesta por

Zagatto y col. (1988)
Tabla 1. Nivel de toxicidad basado en Unidades Txicas. Zagatto y col. (1988)
Nivel de Toxicidad
No txico
Levemente txico
Moderadamente txico
Txico
Muy txico

Unidades Txicas
1
> 1 1,3
>1,3 - 2
>2-4
>4

4. RESULTADOS Y DISCUSIN.
Bioensayos de las muestras ambientales.
Los bioensayos con las semillas de Lactuca sativa se realizaron los meses de julio, agosto y
noviembre del 2014. En los primeros dos se utiliz diluciones logartmicas: 1; 0,1; 0,01;
0,001 y 0,0001, pero debido a que la mayora de los valores no sobrepasaron el 50% de
inhibicin, no se pudo calcular de la CI50 y las UT. Luego de ajustar las concentraciones se
realiz un ltimo bioensayo en el mes de noviembre.
Los resultados de este bioensayo mostraron valores de toxicidad inversa, as por ejemplo en
el caso de la quebrada de Sossa, se observ que la muestra sin diluir promueve el desarrollo
radicular pero conforme baja su concentracin disminuye el IG y aumenta la inhibicin del
crecimiento, por lo que el valor de toxicidad aumenta. Para verificar si este comportamiento
anmalo no era producto de errores procedimentales se repiti la prueba con solo dos
rplicas de cada dilucin obteniendo similares resultados.
Podemos ver en los datos obtenidos en el mes de noviembre (tabla 2), que a pesar de haber
cambiado el rango de las diluciones, la tendencia en el comportamiento del IG calculado
para las semillas que crecieron en el agua de la quebrada de Sossa sigui siendo la misma,
habiendo mayor germinacin con la muestra sin diluir y disminuyendo sta conforme se
diluye la muestra, esa es la razn de sus elevado valores de UT que la clasifican como Muy
txica.
Se ha encontrado referencias en la bibliografa de resultados similares (BohrquezEcheverry y Campos-Pinilla, 2007), que reportaron que los bioensayos con Lactuca sativa
no mostraron efectos de inhibicin gradual sobre el crecimiento radicular y sobre la tasa de

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crecimiento, respectivamente, sino que se observaron efectos de exaltacin u hormesis1 al

disminuir las concentraciones de las muestras analizadas. En otros estudios sobre la
toxicidad de aguas residuales industriales tratadas, empleando tambin semillas de Lactuca
sativa, Garcia-Gonzalez y col. (2005) y Snchez y col. (2007) reportaron que la toxicidad,
medida en Unidades de Toxicidad aguda, en algunos casos aumentaba al disminuir los
valores de DBO5, DQO, despus del tratamiento, en lugar de disminuir.
El comportamiento de la muestra recolectada en la quebrada Sagredo muestra las mismas
irregularidades observadas antes, es decir los IG alternan entre valores altos y bajos sin
importar la dilucin, por esta razn no es posible calcular la CI50 ni las Unidades de
Toxicidad (UT)
Para el bioensayo del mes de noviembre, se emplearon cinco rangos de concentraciones:
12,5; 25, 50, 75 y 100%, adems del blanco con agua de grifo como medio de crecimiento.

Tabla2: Indicadores de toxicidad estimados para L. sativa como bioindicador, mes de

noviembre.
ANOVA
MUESTRA

Sig.

Las Tipas

0,000

Qda. Sossa

0,002
(1)

NOVIEMBRE
NOEC %

LOEC %

CL50 %

UT

CLASIFICACIN

----

12,5

50,64

1,97

25

50

13,88

7,47

n/d

n/d

n/d (*)

n/d (*)

-----

Moderadamente
Txico
Muy Txico

Qda. Sagredo

0,054

Qda. El Monte

0,003

n/d

12,5

n/d (**)

-----

-----

Qda. El Toro

0,004

12,5

25

29,12

3,43

Txico

El Angosto de San Luis

0,020

----

12,5

14,14

7,07

Muy Txico

(*) No se puede calcular el CI 50 porque ningn valor sobrepaso el 50% de inhibicin

(**) Todas las concentraciones ensayadas presentaron efecto inhibitorio, pero sin alcanzar el 50%.
(1) Se rechaza la hiptesis nula con el test de Kruskal-Wallis

En los resultados de los valores del porcentaje de inhibicin, con los bulbos de Allium cepa
se puede apreciar algunos valores negativos, estos significan aumento del desarrollo
respecto al blanco en lugar de decremento. Se puede evidenciar niveles bajos a moderados
de inhibicin en los todos los tratamientos con las muestras de agua de Las Tipas, la
quebrada del Monte y el Angosto de San Luis.
En lneas generales se puede ver (tabla 3) que se mantiene las tendencias observadas en los
bioensayos con semillas de lechuga, aunque stas seran sensibles a concentraciones ms
bajas de los contaminantes del agua.

La hormesis es un fenmeno de dosis-respuesta caracterizado por una estimulacin a dosis bajas e inhibicin a
dosis altas. (Calabrese, 2003)
1

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Tabla 3. Indicadores de toxicidad estimados para A. cepa como bioindicador, meses de

septiembre, octubre y noviembre.
SEPTIEMBRE
Sig.
NOEC (%) LOEC (%) CL50 (%) UT
CLASIFICACIN
Las Tipas
75
50
n/d
n/d
-----0,004
Qda. Sossa
25
50
66,0
1,52
0,000
Moderadamente Txico
Qda. Sagredo
n/d
n/d
n/d (*)
n/d (*)
-----0,190
Qda. El Monte
----50
n/d (*)
n/d
-----0,007
Qda. El Toro
(b)
25
71,92
1,4
0,000
Moderadamente Txico
Angosto de San Luis 0,279
n/d (*)
n/d (*)
-----OCTUBRE
Sig.
NOEC (%) LOEC (%) CL50 (%) UT
CLASIFICACIN
Las Tipas
(a)
-----n/d (*)
n/d (*)
-----0,000
Qda. Sossa
(b)
25
55,13
1,81
0,000
Moderadamente Txico
Qda. Sagredo
(b)
25
20,12
4,97
0,000
Muy Txico
Qda. El Monte
25
50
n/d (*)
n/d (*)
-----0,000
Qda. El Toro
(b)
25
57,82
1,73
0,000
Moderadamente Txico
Angosto de San Luis 0,230
n/d (*)
n/d (*)
-----NOVIEMBRE
Sig.
NOEC (%) LOEC (%) CL50 (%) UT
CLASIFICACIN
Las Tipas
----------n/d (*)
n/d (*)
-----0,000
Qda. Sossa
(b)
25
n/d (*)
n/d (*)
-----0,000
Qda. Sagredo
(b)
25
40,1
2,49
0,000
Txico
Qda. El Monte
25
50
n/d (*)
n/d (*)
-----0,000
Qda. El Toro
(b)
25
60,44
1,65
0,000
Moderadamente Txico
Angosto de San Luis 0,012
50
75
n/d (*)
n/d (*)
-----(*) No se puede hacer el anlisis PROBIT porque ningn valor sobrepaso el 50% de inhibicin
(a) La nica concentracin que no muestra efectos apreciables es la de 100%
(b) Todas las concentraciones ensayadas presentaron efecto inhibitorio del desarrollo radicular, pero sin
alcanzar el 50%.

Anlisis fisicoqumicos.
En cada una de las campaas de muestreo se midi in situ el pH, temperatura (T), oxgeno
disuelto (O.D.), conductividad y adicionalmente la medicin de slidos disueltos totales
(T.D.S.).
De acuerdo a los valores de los parmetros medidos en campo podemos decir que la
variacin de la calidad de los cuerpos de agua estudiados alcanza valores crticos durante
los meses de agosto a octubre, justo antes de la poca de lluvias.
Llama la atencin los bajos valores de oxgeno disuelto en el agua de las quebradas de
Sossa, Sagredo y El Toro, los que se mantuvieron por debajo de los lmites permisibles
durante todos los meses muestreados.
Los resultados de los anlisis realizados en el laboratorio muestran elevadas
concentraciones de fsforo reactivo total, en casi todas las muestras a excepcin de la de
Las Tipas y de El Monte, similar comportamiento se observa respecto al contenido de
nitrgeno amoniacal que tambin excede en todos los casos, a excepcin de Las Tipas, los
valores lmite establecidos en nuestra legislacin. Tambin sobresale el valor de los
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sulfuros presentes en todas las muestras excepto en Las Tipas, y el dato de O.D. igual a
cero en las quebradas Sossa y Sagredo.
Sin embargo, ninguno de los valores por s solo podra explicar el comportamiento
complejo de los resultados de los bioensayos, sino que ms bien debe entenderse como una
serie de procesos toxicocinticos que involucran reacciones de sinergia, en los que se
potencian los efectos individuales y antagonismos en los que ocurre lo contrario, el efecto
individual es cancelado por los efectos de los otros txicos presentes.
5. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES.
Se diagnostic el nivel de ecotoxicidad presente en los afluentes del ro
Guadalquivir, a travs del empleo de bioensayos estandarizados de toxicidad aguda.
De este diagnstico y del clculo del nivel de toxicidad se puede afirmar que existe
fitotoxicidad en varios de los cuerpos de agua estudiados, tal es el caso de las
quebradas Sossa, Sagredo y Toro.
Los niveles de toxicidad detectados variaron en un rango que va desde
moderadamente txico hasta muy txico de acuerdo a la clasificacin empleada
en este estudio. Zagatto y col. (1988)
Para las muestras tomadas de la quebrada de Sossa se observ el fenmeno
conocido como hormesis, si bien no se tiene una explicacin cabal a ste hecho, la
respuesta puede estar relacionada a la presencia de contaminantes fitotxicos cuyo
efecto se enmascarara por la elevada carga orgnica que tienen las aguas de esta
quebrada y que al disminuir sta, por la dilucin, los efectos inhibitorios son ms
evidentes.
Los resultados obtenidos para la quebrada de Sossa dan lugar a futuras
investigaciones, con el propsito de identificar los contaminantes presentes en el
agua as como la toxicidad asociada a estos componentes.
Se identific los sitios que presentan los niveles ms elevados de toxicidad y se
plantea futuras investigaciones, con fines de ampliar el nmero y variedad de
bioensayos incluyendo otros organismos de prueba, no solo vegetales para as poder
tener una visin ms completa de los mecanismos que hacen a los procesos txicos
en los cuerpos de agua.
Se ve la necesidad de implementar controles ecotoxicolgicos como medidas de
calidad ambiental para los cuerpos de agua suceptibles de ser contaminados, con
agentes qumicos txicos, metales pesados o hidrocarburos, pero cuidando de seguir
estrictamente los protocolos existentes.
Ser necesario buscar correlaciones estadsticas entre los valores de los parmetros
fisicoqumicos y los datos de toxicidad calculados, para poder entender a cabalidad
las relaciones existentes en las mezclas ambientales complejas, lo que abre otras
oportunidades de investigacin.
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Bibliografa
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Calabrese, E. J. (julio de 2003). The Maturing of Hormesis as a Credible Dose-Response
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Castillo M., G. (Ed.). (2004). Ensayos toxicolgicos y mtodos de evaluacin de calidad de
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