Investigacin y Saberes 2013

Investigacin y Saberes, Vol. II No. 1 (2013): 13-17

Nota cientfica

CLULAS EN CULTIVO DE LACTOBACILLUS ACIDOPHILUS BAJO LA ACCIN UN CAMPO

ELECTROMAGNTICO DE FRECUENCIA EXTREMADAMENTE BAJA
Tania Mara Guzmn1, Matilde Anaya Villalpanda2, Yarindra Mesa2, Hilda Caridad Cobo Almaguer2
Tecnolgica Equinoccial, Km 4 va Chone y Ave. Italia. Santo Domingo. Ecuador. 2Instituto de
Investigaciones para la Industria Alimentaria (IIIA), km 3 Carretera al Guatao, Lisa, La Habana, Cuba.
3Centro de Electromagnetismo Aplicado. Universidad de Oriente. Santiago de Cuba.
gatm7012935@ute.edu.ec, taniamariaguzman@gmail.com
1Universidad

Enviado (08.02.2013)

Aceptado (23.03.2013)

RESUMEN
Para valorar el efecto del campo magntico (CM) sobre la viabilidad de Lactobacillus acidophilus, se expuso
un cultivo a un CM de frecuencia extremadamente baja (CMFEB), comparando respecto al correspondiente
control, sin tratamiento magntico. Para ello se realiz un diseo experimental D-ptimo con ayuda del
paquete estadstico Design Expert (versin 6.0.1). Como variable dependiente se analiza la viabilidad del
microorganismo. Se concluye que el CMFEB afect la viabilidad del microorganismo en los rangos de
induccin evaluados (0.1 mT a 0.1 T). El mayor estmulo en cuanto a viabilidad del L. acidophilus (10.71
ufc.mL-1) se logr de 0.5 a 1.2 mT.
Palabras clave: bacterias acido lcticas, probiticos, campos magnticos

ABSTRACT
To assess the effect of no homogeneous magnetic field (MF) on the viability of Lactobacillus acidophilus
culture, it was exposed to a extremely low frequency MF (ELFMF) comparing with untreated control. To do it
a D-optimal experimental design by Design Expert statistical package (version 6.0.1) was performed. The
viability was analyzed as dependent variable. We conclude that the applied ELFMF affected the viability of the
microorganism into the experimental induction range (0.1 mT a 0.1 T). The best viability results to L.
acidophilus (10.71 ufc.mL-1) were obtained with 0.5 a 1.2 mT.
Keywords: lactic acid bacteria, probiotics, magnetic fields

INTRODUCCIN
Un cultivo probitico contiene microorganismos vivos que mejoran de forma activa la salud de los
consumidores, perfeccionando el balance de la microflora en el intestino al ser ingeridos vivos y en
cantidad suficiente1. Los cultivos probiticos han adquirido gran importancia en los ltimos aos
debido a que a estos microorganismos se les atribuyen numerosos beneficios para la salud, como la
eficacia contra virus y diarrea asociada a los antibiticos, entre otros2. Estos microorganismos han
sido empleados ampliamente en la industria para elaborar conservas de vegetales, productos
lcteos y crnicos fermentados, ya que por su metabolismo producen cido lctico y diversos
compuestos aromticos que le confieren a los alimentos cualidades sensoriales agradables3.
Dentro de los probiticos, uno de los gneros bacterianos ms estudiados es el de los lactobacilos,
entre los que destaca el Lactobacillus acidophilus; especie muy utilizada en la industria alimentaria
para la elaboracin de leches fermentadas.
Las investigaciones actuales demuestran que el metabolismo de diversas bacterias cido lcticas se
afecta por la accin del campo magntico de frecuencia extremadamente baja (2-60 Hz)4,5. Varios
autores han observado que el CM puede acelerar su crecimiento y su actividad fermentativa6-9. Por
otra parte, microorganismos estresados por diferentes procesos (liofilizacin, pasterizacin,
centrifugacin), en presencia del CM, se pueden adaptar y activar ms rpidamente, adecuando su
metabolismo a un rpido crecimiento10-12. El CM estimula el crecimiento de diversos
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microorganismos y aunque los mecanismos de accin estn sin esclarecer completamente, se

explican esencialmente su efecto directo sobre los iones, en el transporte de sustancias a travs de
la membrana plasmtica, y en procesos donde intervienen macromolculas como el ADN y las
protenas, con repercusiones metablicas importantes10-13. Estos estudios tienen una importancia
medular para la industria, ya que la gran mayora de los metabolitos de inters industrial son
producidos por microorganismos, estn asociados al crecimiento, y por otra parte, la efectividad de
los probiticos como agentes nutracuticos se incrementa con la viabilidad del cultivo1. En tal
sentido, con este trabajo se evala el efecto del CMFEB en la viabilidad de Lactobacillus acidophilus.
MATERIALES Y MTODOS
Los tratamientos con CMFEB se efectuaron en un equipo experimental de fabricacin cubana, el
mismo produce un CM homogneo de (60 Hz) y una densidad entre 0.1 mT - 0.1 T. El cultivo
probitico liofilizado de L. acidophilus se activ segn el procedimiento establecido, realizndose
tratamiento con CMFEB en etapa de activacin de cultivo, durante la fase logartmica14. El
experimento se realiz a partir del diseo D-ptimo de superficie respuesta por el Design Expert
(versin 6.0.1). Los niveles de los factores se seleccionaron segn los valores experimentales
informados en la literatura4-7 (Tabla I). Se obtuvieron 12 variantes experimentales. Para ayudar en
la comprensin de los resultados, se realizaron controles de cada cultivo.
Tabla I. Esquema de variantes experimentales para el Design Expert.

Factor 1
A:
Densidad
10.50

Factor 2
B:
Tiempo
10.00

20.00

60.00

20.00

60.00

20.00

10.00

20.00

10.00

1.00

10.00

10.50

35.00

20.00

35.00

1.00

60.00

10

1.00

35.00

11

1.00

10.00

12

10.50

60.00

Corridas

La determinacin microbiolgica de la viabilidad de cada cultivo se realiz despus de un periodo

de incubacin de 4 horas, considerando el total de microorganismos viables mediante siembra en
placa segn las normas establecidas en el banco de cepas14. La viabilidad se expres como (Log ufc
mL-1).
RESULTADOS Y DISCUSIN
El comportamiento del cultivo microbiano se ajust a una ecuacin cuadrtica (R2 = 0.96). Destaca
en el modelo matemtico, que existen diferencias significativas (p 0,05) de la viabilidad con
respecto a la densidad de CM, pero no significativas (p 0.05) con relacin al tiempo de exposicin.
En la literatura se describe que el crecimiento de algunas especies microbianas bajo un CM se afecta
ms por la densidad de campo que por el tiempo de exposicin6,7,15. Se ha observado que al

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retirarse el campo, la respuesta se mantiene a lo largo de varias generaciones, debido a afectaciones

permanentes del metabolismo celular y en las propiedades del medio de cultivo7 (Tabla II).
Tabla II. Ecuacin de modelo y variables experimentales.
R2

Ecuacin del modelo

Valores de
probabilidad (p)
Densidad Tiempo
(A)

0.96/0.76

V =10.71- 0.87*A -0.032*B -3.40* A2 - 0.22* B2 -0.073*AB

0.0002

(B)
0.778

En este caso (Fig. 1) inicialmente a la densidad de 0.1mT el cultivo mantiene la misma viabilidad del
control; sin embargo, al aumentar el campo se manifiesta una mayor viabilidad del cultivo, que
alcanza valores mximos de 10 ciclos Log en un rango de densidad de 0.5 a 1.2 mT. Se observa que
a partir de los 1.3 mT, la viabilidad decrece con la intensidad del campo, obtenindose un valor
mnimo de viabilidad (6.1 ciclo Log) a los 2.0 mT. La viabilidad mxima alcanzada por L. acidophilus
(10.6) fue alrededor de los 1.0 y 1.1mT, y al compararlo con el control, se aprecia que el cultivo se
estimula, 2 ciclos logartmicos por encima en ese rango.
Se ha observado que dependiendo de la frecuencia, el crecimiento microbiano puede ser estimulado
o inhibido por el campo electromagntico por cambios directos en sus funciones y estructuras
celulares15. Sin embargo, todava se desconocen los mecanismos por los cuales el CMFEB estimula o
inhibe los microrganismos13,16,17. En varios artculos se sugieren mecanismos que dependen mucho
de la naturaleza del medio acuoso donde se desarrollan, siendo que las ondas transversales de los
CM varan su velocidad, dependiendo del medio4-8. En tal sentido varios autores sealan que de 4 y

8 Hz, se pueden encontrar diversos efectos biolgicos tanto de estimulacin como de

inhibicin16-19.
Tambin se ha verificado que en diversos rangos, las variables respuestas asociadas al metabolismo
pueden aumentar o disminuir en funcin de la densidad del CM, hasta un punto denominado
ventana a partir del cual se produce un efecto contrario al inicial, o no se produce efecto4-7, 20. Este
resultado ha sido observado de forma repetida en varias investigaciones y est demostrado que
cualquier variacin en las condiciones experimentales (microorganismo, sustrato, tipo de campo,
polaridad, conductividad elctrica del fluido) puede mover la ventana de un lado a otro del rango
de estimulacin, o experimentar saltos muy alejados del inicial6-18,12,20. En ese sentido el
microorganismo ms estudiado es E. coli, que en un medio concentrado muestra una tpica ventana
a los 40 G con un pico de crecimiento de 12 ciclos Log, mientras que en otro medio pero ms
diluido, la ventana se desplaza hacia atrs, hasta 1 G con un pico de 14 ciclos Log 20,21.
Considerando los resultados obtenidos en la figura 1 y en correspondencia con lo antes planteado;
en las condiciones experimentales trabajadas, la ventana para el cultivo de L. acidophilus es 1 mT
(10 G), pero sera preciso esclarecer los efectos del CM a una densidad menor que 1 G, ya que la
ventana podra estar desplazada a valores menores, no evaluados en este estudio.
CONCLUSIONES
Se puede incrementar significativamente (p 0.05) la viabilidad (2 ciclo Log) del cultivo de L.
acidophilus en un rango de densidad de CM (0.5 a 1.2 mT) aplicando el tratamiento durante tiempo
mnimo de 10 min. Bajo condiciones controladas, el CMFEB puede contribuir al proceso de
activacin de cultivos liofilizados, mejorando su estado para el proceso productivo. Estudios
futuros pueden establecer rangos ms precisos de trabajo donde se verifique una mayor respuesta
al crecimiento, sin afectar la integridad celular.

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BIBLIOGRAFA
[1] Saavedra, J. M. (2001). Clinical applications of probiotic agents, Am J Clin Nut.; 73:1147-1151.
[2] Campos, J. A. (2002). Cultivos probiticos y protectores, propiedades funcionales (nutracuticas) de
valor agregado en los derivados lcteos. Lcteos y crnicos mexicanos, (Jun/Jul): 26-37.
[3] Vinderola, C.; Prosello, G. W.; Ghiberto, D. (2000). Viability of probiotic: Bifidobacterium,
Lactobacillus acidophilus and Lactobacillus casei and nonprobiotic microflora in Argentinian cheese.
Journal of Dairy Science; 83:1905-1911.
[4] Namba, K.; Mohri, K. S. (2000). Effect of electromagnetic field on lactic acid bacteria proliferation.
Nippon Shokubutsu Kojo Gakkai Taikai Gakujutsu Koen Yoshishu; 2000: 68-69.
[5] Strak, L.; Vetter, V.; Fojt, L. (2005). Effects of 50 Hz magnetic fields on the viability of different
bacterial strains. Bioel chem; 24 (3): 293-300.
[6] Beglarian, R. A. (1990). The use of magnetic field in the dairy industry. Brief Communications of the
XXIII International Dairy Congress, Montreal; 8-12 (2):329 -619.
[7] Lszl, J.; Kutasi, J. (2009). Static magnetic field exposure fails to affect the viability of different
bacteria strains; Bioelectromagnetic; May: 19-22.
[8] Guzmn, T. M.; Anaya, M.; Abreu, J.; Duquesne, F.; Guerra, G.; Valds, O. (2009). Influencia del campo
magntico en la calidad microbiolgica del queso fresco telita; Tecnologa de Alimentos; 20 (2): 6772.
[9] lvarez DC, Prez VH, Justo OR, Alegre RM. (2006). Effect of the extremely low frequency magnetic
field on nisin production by Lactococcus lactis subsp. lactis using cheese whey permeate. Process
Biochem, 41:19671973.
[10] Pichko, V. B; Povalyaeva, I.V. (1996). Electromagnetic stimulation of microorganism productivity:
possible mechanisms. Applied Biochemistry and Microbiology; 32 (4): 425-428.
[11] Ahmed, Istiaque, et al. (2013). Evaluation of the effects of Extremely Low Frequency (ELF) Pulsed
Electromagnetic Fields (PEMF) on survival of the bacterium Staphylococcus aureus. EPJ Nonlinear
Biomedical Physics 1(1): 1-17.

16

Investigacin y Saberes 2013

[12] Vazhenin, E. I., G. I. Kasyanov, and A. V. Grachev. (2013). Prospects of Using Technologies with
Application of Electromagnetic Fields of Extremely Low Frequency In The Food
Industry. Polythematic Online Scientific Journal of Kuban State Agrarian University 85(01): 2013.
[13] Torgomyan, H., & Trchounian, A. (2013). Bactericidal effects of low-intensity extremely high
frequency electromagnetic field: An overview with phenomenon, mechanisms, targets and
consequences. Critical Reviews in Microbiology, 39(1):102-111.
[14] NRIAL 065:08. (2008). Norma ramal Cubana de la Industria Alimentaria. Iniciadores lcticos.
Mtodos de ensayo.
[15] Ishisaka, R. (2000). Effects of magnetic fields on the various functions of subcellular organelles and
cells. Pathophysiology; 7 (2): 149-152.
[16] Deutmeyer A, Raman R, Murphy P, Pandey S (2011). Effect of magnetic field on the fermentation
kinetics of Saccharomyces cerevisiae. Advances in Bioscience and Biotechnology, 2: 207-213
[17] Torgomyan, H., Hovnanyan, K., & Trchounian, A. (2011) Low Intensity Electromagnetic Irradiation
with 70.6 and 73 GHz Frequencies affects Escherichia coli growth and changes water properties. Cell
Biochem Biophys 60:275281.
[18] Del Re, B et al. (2003). Extremely low frequency magnetic fields affect transposition activity in
Escherichia coli. Radiat Environ Biophys 42: 113118.
[19] Ohanyan, V; et al. (2008). Electromagnetic Radiation on growth parameters for Enterococcus hirae
Bacteria. Biofizika, , 53( 5): 822825.
[20] Torgomyan, H., Hovnanyan, K., & Trchounian, A. (2013). Escherichia coli growth changes by the
mediated effects after low-intensity electromagnetic irradiation of extremely high frequencies. Cell
biochemistry and biophysics, (65):445454.
[21] Ishizaki, Y, et al. (2001). Twelve hours exposure to inhomogeneous high magnetic field after
logarithmic growth phase is sufficient for drastic suppression of Escherichia coli death. Bio
electrochemistry, 54(2): 101-105

17