16-03-2015

CUANTIFICACIN EN ANLISIS INSTRUMENTAL

DETECTOR

Seal analtica

Propiedad
fsico-qumica

Medida
2

Medida
3

1,2

15

mg/kg de K

10

y = 0,0477x - 0,0213
R = 0,9896

20

Curva de calibrado de K

25

16-03-2015

CUANTIFICACIN EN ANLISIS INSTRUMENTAL

CURVA DE CALIBRADO

Ej. 1: Para determinar el contenido de potasio en una muestra de pellet por

ICP-OES. Se realiz una curva de calibrado (5% HNO3) por triplicado (tabla
1). La muestra se diluy 10 veces y las emisiones determinadas fueron las
siguientes: 0,526; 0,498; 0,547.

Medida
1

0,8

0,6

0,4

0,2

-0,2

Determinar la ecuacin de la recta y la concentracin de K en la muestra

de pellet.

Estndar
K
mg/Kg

0,04

0,04

0,09

0,04

0,09

0,21

1,2

0,10

0,22

0,51

0,02

2,5

0,23

0,52

0,99

0,03

5,9

0,48

1,01

0,02

12,1

0,97

0,1

20,3

Emisin

16-03-2015

CUANTIFICACIN EN ANLISIS INSTRUMENTAL

CURVA DE CALIBRADO
Ej 1: Para determinar el contenido de potasio en una muestra de pellet por
ICP-OES. Se realiz una curva de calibrado (5% HNO3) por triplicado (tabla
1). La muestra se diluy 10 veces y las emisiones determinadas fueron las
siguientes: 0,526; 0,498; 0,547.
Determinar la ecuacin de la recta y la concentracin de K en la muestra
de pellet.

0,526 = 0,0477*X - 0,0213

X = 11,47 (mg/Kg) * FD =

Ecuacin de la curva: y = 0,0477*X - 0,0213

M1.1 = 0,526
114,7 mg/Kg

X = 10,89 (mg/Kg) * FD =

X = 11,91 (mg/Kg) * FD =

0,498 = 0,0477*X - 0,0213

0,547 = 0,0477*X - 0,0213

M1.2 = 0,498
108,9 mg/Kg
M1.3 = 0,547
119,1 mg/Kg
Promedio M1.1; M1.2 y M1.3 = 114, 23
Desviacin estndar = 5,11

Informe final del contenido de potasio en la muestra de pellet:

114 5 mg/Kg
3

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CUANTIFICACIN EN ANLISIS INSTRUMENTAL

ADICIN ESTNDAR O ADICIN PATRN

(CORRECCIN DE LA MATRIZ)

Ej. 2: Se detect que las aguas de la ciudad de Antofagasta contenan As por

sobre la norma establecida. Un laboratorio debidamente acreditado en el
alcance de determinacin de As en agua potable, realiz un muestreo y luego
realiz la determinacin de As por AAS con generacin de hidruros.
Considerando que la muestra puede interferir en la medida, el laboratorio
realiz la cuantificacin por adicin estndar

10

*10

ml de
muestra

20

10

--

ug/L de
As

100

100

100

100

Volumen
total
(aforo)

0,896

0,698

0,469

0,226

0,956

0,700

0,421

0,217

0,934

0,655

0,463

0,201

En la siguiente tabla, se encuentran los datos correspondientes:

10

40

Absorcin Absorcin Absorcin

1
2
3

10

1,200
1,000
0,800
0,600
0,400
0,200
0,000
0

Adicin estndar de As

y = 0,0177x + 0,2603
R = 0,9635

10
20
30
40
Concentracin de As aadido ug/L

50

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CUANTIFICACIN EN ANLISIS INSTRUMENTAL

Y=0

14,7 ug/L * 100 ml/10 ml = 147 ug/L As

La concentracin de As esta dado por:

X (ug/L) = 0,2603 / 0,0177 = 14,7 ug/L As (10 ml en un aforo
de 100 ml)

X = |b | / m (pendiente)

Absorcin

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CUANTIFICACIN EN ANLISIS INSTRUMENTAL

ESTNDAR ITERNO O PATRN INTERNO

(CORRECCIN DEL INSTRUMENTO)

40

40

20

20

10

10

20

20

20

20

20

20

20

20

20

7233

7465

15623

15476

9876

9765

4978

4879

589

524

6388

6371

6390

6367

6499

6401

6398

6377

6458

6320

1,132

1,172

2,445

2,431

1,519

1,526

0,778

0,765

0,091

0,083

Ej. 3: Para determinar el contenido de cido frmico por HPLC-UV en lquido

de pirlisis, se decidi aadir un estndar interno de cido actico
(previamente estudiado que No contiene la muestra). Para cuantificar la
muestra, se realiz una dilucin con factor 5, asegurndose que el estndar
interno se encontrara en la misma concentracin que en la curva de
calibrado.

M1.1

20

En la siguiente tabla, se encuentran los datos correspondientes:

mg/L de
mg/L
rea cido rea cido
Relacin rea
cido
cido
frmico
actico
c. frmico/c.
frmico
actico
actico

M1.2

3
2,5
2
1,5
1
0,5
0
0

40

Curva de calibrado del cido frmico con

estndar interno

y = 0,0597x + 0,1442
R = 0,9812

10

20
30
cido frmico mg/l

Resultado final = 84 2 mg/l cido frmico en lquido de pirlisis

50

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M1.2 = X (mg/L) =
1,132 = 0,0597 * X + 0,1442 = 16,54 mg/l cido frmico * 5 = 82,73 mg/l

M1.1 = X (mg/L) =
1,172 = 0,0597 * X + 0,1442 = 17,22 mg/l cido frmico * 5 = 86, 08 mg/l

La concentracin de cido frmico est dada por:

rea cido frmico / rea cido actico

ESPECTROSCOPA

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La espectroscopia es el estudio de la interaccin entre la

radiacin electromagntica y la materia, con aplicaciones en
diversas disciplinas.

Permite detectar la absorcin o emisin de radiacin

electromagntica a ciertas longitudes de onda, y relacionar
stas con los niveles de energa implicados en una transicin
cuntica.
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ESPECTROSCOPA

Principios de anlisis instrumental, Skoog, Douglas Arvid

16-03-2015

INFORMACIN OBTENIDA

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Grupos funcionales, subestructuras, conectividades,

estereoqumica, etc. a partir de datos de
desplazamiento qumico, reas de los picos y
constantes de acoplamiento observadas

Frmula molecular y subestructuras a partir de los

iones observados.

Grupos funcionales a partir de las absorciones

observadas.

Existencia de cromforos y/o conjugacin en la

molcula a partir de las absorciones observadas.

Estructura total de la molcula incluida la

estereoqumica de la misma a partir de las
posiciones relativas de los tomos.

ESPECTROSCOPA

TCNICA
ESPECTROSCPICA

Rayos X

Ultravioleta-Visible

Infrarrojo
Espectrometra de
masas (*)

Resonancia magntica
nuclear

Cromforo : Son grupos funcionales moleculares que hacen que los compuesto tengan color,
esto es, que absorban radiacin a una determinada longitud de onda.

10

10

ESPECTROSCOPA

Instrumentacin en espectroscopia
IR, Visible y UV
Los mtodos pticos espectroscpicos se basan en seis fenmenos:
1.-Absorcin
2.-Fluorescencia
3.-Fosforescencia
4.-Dispersin
5.-Emisin
6.-Quimioluminiscencia
En todos los casos la respuesta es proporcional a la concentracin del
analito.
Fluorescencia y Fosforescencia

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La Fluorescencia es un fenmeno fsico mediante el cual, ciertas substancias

absorben energa (a partir de luz ultravioleta) emitindola nuevamente en
forma de luz, esta vez del espectro del visible y de un color caracterstico
(una longitud de onda determinada).

11

11

ESPECTROSCOPA
Fluorescencia y Fosforescencia

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La fosforescencia tiene bsicamente el mismo principio que la fluorescencia,

pero la diferencia muy importante es que las sustancias fosforescentes son
capaces de almacenar la energa y siguen emitiendo luz por mucho ms
tiempo an cuando ya no estn siendo estimuladas. Esto es por que el
proceso en el que los electrones regresan a su estado basal es mucho ms
lento que en la fluorescencia.

Quimioluminiscencia
La emisin de luz es causada por los productos de una reacciones especfica
qumica.

12

12

3
4

Componentes bsicos de los instrumentos

espectroscpicos

ESPECTROSCOPA

1. Fuente
2. Selector
3. Muestra
4. Detector
5. Transductor
6. Registro

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13

13

ESPECTROSCOPA

Componentes bsicos de los instrumentos

espectroscpicos
Fuentes

UV : lmpara de cuarzo- hidrgeno

lmpara de cuarzo - deuterio

200 - 350 nm

VIS : filamento de tungsteno

350 - 750 nm

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14

14

ESPECTROSCOPA

3
4

Componentes bsicos de los instrumentos

espectroscpicos

1. Fuente
2. Selector
3. Muestra
4. Detector
5. Transductor
6. Registro

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15

15

ESPECTROSCOPA

Long. de onda

Caractersticas espectrales de un sistema

selector de longitud de onda

Anchode
banda

Seleccin de la longitud de onda

Un selector de longitud de onda

deja pasar una banda estrecha de

radiacin caracterizada por una

longitud de onda nominal, un

ancho de banda efectivo y una

mxima potencia de radiacin. El

ancho de banda efectivo se define

como el ancho de la banda a la

mitad de la mxima potencia de

radiacin

Intensidad

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16

16

ESPECTROSCOPA

rendija

filtro, prisma o rejilla

Selector :

Filtro

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Rejilla

Prisma de difraccin
17

17

Componentes bsicos de los instrumentos

espectroscpicos

ESPECTROSCOPA

1. Fuente
2. Selector
3. Muestra
4. Detector
5. Transductor
6. Registro

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18

18

ESPECTROSCOPA

rea de la muestra : celdas

UV : cuarzo, slice

VIS : vidrio, cuarzo, slice

IR : cloruro de sodio, bromuro
de potasio, yoduro de cesio

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19

19

ESPECTROSCOPA

Celda para gases en IR :

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20

20

3
4

Componentes bsicos de los instrumentos

espectroscpicos

ESPECTROSCOPA

1. Fuente
2. Selector
3. Muestra
4. Detector
5. Transductor
6. Registro

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21

21

ESPECTROSCOPA
Detectores :

Al final la luz seleccionada tiene que ser detectada y cuantificada.

*Esto se consigue con el empleo de detectores cuyo cometido es convertir
la respuesta del instrumento en una seal medible.
*Dependiendo del tipo de luz con el que se trabaja existen distintos tipos
de detectores:

De fotones (fotoelctricos)
celda fotovoltaica (VIS)
fototubo (UV-VIS)
fotodiodos de silicio

De calor (trmicos)
termopar
termocupla
neumtico

deben responder a un amplio rango de longitudes de onda

deben dar respuesta rpida

deben ser sensibles a bajos niveles de radiacin

deben producir seal elctrica fcilmente amplificable

deben tener bajo nivel de ruido

la seal debe ser proporcional a la potencia radiante

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3
4

Componentes bsicos de los instrumentos

espectroscpicos

ESPECTROSCOPA

1. Fuente
2. Selector
3. Muestra
4. Detector
5. Transductor
6. Registro

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23

ESPECTROSCOPA
Transductor

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La seal elctrica generada por el transductor es enviada a un procesador de

seal donde se muestra de la forma ms conveniente para el analista. El

procesador de seal tambin puede ser usado para calibrar la respuesta del

detector, para amplificar la seal del detector, para eliminar el ruido por

filtracin o por transformacin matemtica de la seal.

24

24

3
4

Componentes bsicos de los instrumentos

espectroscpicos

ESPECTROSCOPA

1. Fuente
2. Selector
3. Muestra
4. Detector
5. Transductor
6. Registro

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25

ESPECTROSCOPA

Procesador de seal y lectura

Es el ltimo componente bsico de instrumentacin

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Todo espectrofotmetro ha de disponer de:

1. Sistema de amplificacin propia que produzca una seal medible.
2. Un sistema procesador de la seal, que permita eliminar, promediar
datos, proporcionar salida de lectura, dirigir la salida de la seal..etc
Una salida de la seal: digital,registrador..etc.
Tener cierta capacidad de procesar nmeros /FTIR.
3.
4.

Ttulo:
Principios de anlisis instrumental
Autor:
Skoog, Douglas Arvid
Disponibles: 34

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