PRCTICA 5

ANESTSICOS LOCALES
INTRODUCCIN
Los anestsicos locales son frmacos que producen la prdida reversible de la sensibilidad al dolor
restringida al rea donde se administran. Existen diversas formas de poner de manifiesto este efecto, por
ejemplo: prdida del reflejo corneal en el conejo o gato, o por la abolicin de la respuesta a un estmulo
nocioceptivo en la piel de cobayo. Asimismo el mecanismo de accin de estos frmacos implica el
bloqueo de la conduccin nerviosa, lo que puede ser demostrado por la desaparicin de la respuesta
contrctil en una preparacin neuromuscular, por la medicin de la velocidad de conduccin o de la
amplitud del potencial de accin en nervio aislado. En esta prctica usaremos como modelo
experimental la prdida de la contraccin del msculo gastrocnemio de la rana por la aplicacin de
anestsicos locales en el nervio citico.
OBJETIVOS
Al trmino de la prctica el alumno deber:
1. Conocer el efecto de los anestsicos locales sobre la conduccin nerviosa y establecer si existe una
relacin dosis efecto.
2. Conocer la influencia de la frecuencia de estimulacin nerviosa sobre el efecto de la lidocana.
3. Inferir los probables usos teraputicos y/o efectos colaterales.
MATERIAL
Biolgico: 1 rana de ms de 100 g (por equipo).
Equipo:
-3 jeringas de 1mL con aguja
-estuche de diseccin fina
-cronmetro
-Equipo para Biopac
-electrodos para la estimulacin del nervio in situ.
-Tabla de diseccin para rana
-2 soportes universal
-2 varillas metlicas
-2 vasos de pp de 100 mL
-disectores de vidrio

-algodn
-balanza para rata
-hilo de camo
-estimulador de pulsos cuadrados
-2 pinzas dobles
-1 polea
-1 gotero

Soluciones:
-Pentobarbital 63 mg/mL
-Solucin Ringer
-Clorhidrato de lidocana a 1.78 mg/mL, 0.56 mg/mL y 0.17 mg/mL
Las soluciones deben prepararse con Ringer
Preparar 5 mL de cada una.
MTODO GENERAL

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Se sacrifica a la rana con una sobredosis de pentobarbital. (anestsico general) administrado, por va
intraperitoneal (IP), con base a una dosis de 80 mg/kg. Se decapita y desmedula, posteriormente se
amarra a la tabla de diseccin con el dorso hacia arriba, dejando libre una de las piernas. Con el bistur
se hace una incisin vertical, en la parte media, entre la parte inferior del lomo y la superior de la pierna
(Fig. 1). Con la ayuda de pinzas y tijeras de punta roma se separa la dermis de los msculos de esa zona
y se corta una parte del msculo buscando con cuidado y dejando al descubierto el nervio citico en una
longitud de 3 cm. De aqu en adelante se usar disectores de vidrio para manejar el nervio y evitar
maltratarlo. En la regin ms prxima a la columna vertebral, se coloca el hule aislante que envolver al
nervio y al electrodo de estimulacin (Fig.2). Se recomienda conectar el electrodo de estimulacin al
estimulador antes de colocarlo entre el nervio y el hule aislante. En la regin restante se coloca un
fragmento de algodn seco rodeando tambin al nervio. En la zona inferior de la pierna se expone el
msculo gastrocnemio, libre de tejido conectivo y de otros msculos, se amarra firmemente por su
tendn, se separa de la pierna con un corte por debajo del amarre; el hilo se hace pasar por la polea (que
previamente se fij a un soporte) y se ata al transductor de tensin, el cual debe estar conectado al
polgrafo (Fig.3). Finalmente la pata se fija a la mesa de diseccin manteniendo hmeda la preparacin
con goteo de Ringer. Se ajusta el estimulador de acuerdo al experimento correspondiente y se obtiene un
registro basal de la contraccin muscular durante 3 minutos.
TOMA DE DATOS
Tres equipos probarn el efecto de la concentracin, mientras los otros tres observarn el efecto de
distintas frecuencias de estimulacin a una sola concentracin de lidocaina. El grupo trabajar con los
datos de los seis experimentos.
Efecto de la concentracin.
1. Obtener un registro basal, este se obtiene usando estmulos cuadrados de 0.5 seg. de duracin y 1 volt
de amplitud aplicados a una frecuencia de 1 Hz. Registrar cada minuto durante un periodo de 3
minutos.
2. Despus de los 3 minutos de registro basal se detiene la estimulacin y con ayuda de la jeringa, sin
tocar el nervio, se administra en el algodn la concentracin que le corresponda de acuerdo al
cuadro de datos, en un volumen de 0.2 mL.
3. Se reinicia la estimulacin y se registra el efecto durante otro periodo de 3 minutos.
4. Finalmente, si ya no existe contraccin muscular, retire el electrodo del nervio y estimule
directamente al msculo, observe si hay contraccin. Para este punto tenga en cuenta que para estimular
al gastrocnemio tendr que aplicar un estimulo de mayor intensidad que para el nervio citico.
5. Calibrar la respuesta del transductor antes de desconectar el equipo.

Efecto de la frecuencia.
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1. El registro basal; ste se obtiene usando estmulos cuadrados de 0.5 seg. de duracin y 1 volt de
amplitud aplicados a la frecuencia que le corresponda de acuerdo al cuadro de datos. Registrar cada
minuto durante un periodo de 3 minutos
2. Despus de los 3 minutos de registro basal se detiene la estimulacin y con ayuda de la jeringa, sin
tocar el nervio, se administra en el algodn 0.2 mL de lidocana a la concentracin de 0.56 mg/mL.
3. Se reinicia la estimulacin y se registra el efecto durante otro periodo de 3 minutos.
4. Finalmente, si ya no existe contraccin muscular, estimule directamente el msculo y observe si hay
efecto. (Tomar en cuenta punto 4 del protocolo anterior).
5. Calibrar la respuesta del transductor antes de desconectar el equipo.
Resultados de la prctica
Una vez obtenido el registro se reporta la tensin en g de acuerdo a la calibracin previa.
CUADRO DE DATOS
EQUIPO # CONCENTRACION FRECUENCIA DE AMPLITUD DE LA
TENSIN
DE LIDOCAINA
ESTIMULACION
CONTRACCIN
g
mg/mL
Hz
(promedio ee)
(promedio ee)
1
0.17
1
2
0.56
1
3
1.78
1
4
0.56
0.5
5
0.56
1.5
6
0.56
3

De acuerdo a los resultados construir grficas de barras para el efecto de la concentracin y para el
efecto de la frecuencia.
El anlisis y la discusin de los resultados debern presentarse en el reporte y en la sesin de seminario.
Al final de la prctica, la rana se entregar al profesor encargado o al almacenista para su manejo de
acuerdo con las normas: NOM-062-ZOO1-999 (especificaciones tcnicas para la produccin cuidado y
uso de los animales de laboratorio) y NOM-087-ECOL-1995 (disposicin final de productos biolgico,
excretas y cadveres)
ANTECEDENTES CONCEPTUALES
-Excitabilidad, modalidades sensoriales.
TEMAS A CONSULTAR

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-Anestsicos locales

BIBLIOGRAFA
Marshall, B. E., Longcnedker, D. E. (1996). General anesthetics. pp 307-330. Catterall, W., Mackie, K.
(1996). Local Anesthetics. pp 331-347. In: The Pharmacological Basis of Therapeutics. de.
Hardman, J. G., Limbird, L. E., Molinoff, P. B., Ruddon, R. W. y Goodman Gilman, A.
International Edition. McGraw-Hill.
Miller, R.D. (1998). Anestsicos locales. pp 497-506. En: Farmacologa bsica & Clnica ed.:
Katzung, B. G., MD, PhD. Manual Moderno.

Tendn

Nervio citico

Figura 1.

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