Guia Completa de Practicas Biologia Libre

Gua de Practicas
www.http://biologiageneralestomatologia.ning.com/
UNIVERSIDAD
ANDINA DE
CUSCO
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA PROFESIONAL DE ESTOMATOLOGA
GUA DE PRACTICAS DE
BIOLOGA GENERAL Y DE LA
BOCA
JOS FRANCO
NAVIA
http://biologiageneralestomatologia.ning.com/
2010 - I1
Gua de Practicas
Gua de Practicas
INDICE DE PRACTICAS
PROLOGO
PAG. a
INFORMACIN GENERAL
PAG. aa
NORMAS DE LABORATORIO Y BIOSEGURIDAD PAG. 01
INSTRUMENTOS
LABORATORIO
EL AGUA Y MEDIDA DEL pH
PAG. 08
CARBOHIDRATOS Y LPIDOS
PAG. 13
PROTENAS Y ENZIMAS
PAG.
18
CIDOS NUCLEICOS
PAG.
23
MICROSCOPIA OPTICA
PAG.
28
CLULA PROCARIOTICA Y EUCARIOTICA
PAG.
35
CICLO CELULAR Y DIVISIN MITTICA
PAG.
44
PAG
52
PAG
60
APARATOS
DE PAG. 05
DIVISIN MEIOTICA
ESPERMATOGENESIS.
HERENCIA MENDELIANA (FACTOR Y GRUPO PAG.

SANGUNEO)
65
EXPERIMENTOS CON LA MOSCA DE LA FRUTA PAG.
71
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Gua de Practicas
PROLOGO
La presente gua de practicas est destinada a los

estudiantes de Ciencias de la Salud (Carrera
profesional de Estomatologa), edicin que fue
mejorada una ves ms sin llegar a ser perfecta, en la
que se incluyen tpicos experimentales bsicos que
se complementan al syllabus de la asignatura terica.
La biologa es una ciencia muy amplia que comprende
numerosas ramas y especialidades de acuerdo con el
inters del investigador que la cultiva, es por ello que
esta
gua
de
practica
intenta
complementar
experimentalmente los principales tpicos de la
especialidad priorizando lo bsico o elemental sin
llegar a examinar profundamente cada especialidad
que es basta y compleja. Por otra parte se trata de
vincular estos conocimientos con la aplicacin clnica
resaltando su importancia como ciencia bsica
fundamental
para el desarrollo de las ciencias
medicas, en las que encontramos a la estomatologa o
odontologa.
Por estas razones est gua de practicas del curso de
Biologa General y de la Boca, intenta teniendo en
cuntalos fines didcticos presentar una secuencia de
trabajos y demostraciones experimentales de la
asignatura, no solamente basndose en el contenido
del curso terico, ya que tambin fue necesario
adecuar los experimento de acuerdo a los recursos y
limitaciones de la institucin sin que esto debilite su
rigurosidad demostrativa.
Gran parte de los experimentos que proponemos
han sido estandarizados y desarrollados por el autor a
travs de numerosos trabajos de investigacin en los
cuales se utilizan materiales biolgicos existentes en
nuestra regin, lo que consideramos una ventaja para
su fcil realizacin y manejo en el laboratorio.
Es importante sealar ajunos de los criterios
adoptados
en
el
desenvolvimiento
de
los
experimentos como son: a) La biologa debe ensearse
siempre con un enfoque de investigacin en el que la
observacin, el planteamiento de hiptesis y la
experimentacin formen parte del mtodo mismo de
Gua de Practicas
INFORMACIN GENERAL
Las practicas de la asignatura de Biologa general y de la
Boca, estn programadas como complemento de la asignatura
terica impartida en la curricular bsica de la carrera profesional
de estomatologa. El laboratorio es curso experimental diseado
para la mencionada carrera el mismo que introduce a las tcnicas
bsicas de manejo de equipo de laboratorio y material biolgico;
adems, motiva al estudiante a la observacin y a la bsqueda de
respuestas a travs del mtodo cientfico.
El laboratorio de
Biologa General y de la Boca es complemento del curso de
teora; por consiguiente es obligatorio que el estudiante
desarrolle ambos en forma paralela.
Las prcticas estn conformadas por 14 experimentos
secuenciales correlacionados en orden didctico que tienen como
objetivos servir de complemento a los diferentes captulos
tericos.
En trminos generales el peso de las prcticas constituirn
un 30% que ser complementado con los 70% de la teora, para
la evaluacin se tomara en cuenta los siguientes aspectos:
a). Exmenes prcticos:
02
Parciales
b). Informes de Practicas:
14
Informes
c). Asistencia :
Obligatoria
d). Seminario de Practica :
Opcional
e). La nota final ser el promedio de todas las evaluaciones,
siendo la nota aprobatoria mnima de 14 puntos y la mxima de
20 puntos.
Los informes de cada prctica se entregaran en un cuaderno
anillado
Desarrollado ntegramente a mano alzada, no se aceptaran
trabajos en
Computadora.
Asistencia obligatoria con mandil blanco y materiales
requeridos.
Seminarios y trabajos grupales son opcionales
f). Se ha creado la pagina:
http://biologiagenralestomatologia.ning.com/ que navega en
INTERNET, en la cual se ha colgado una biblioteca digital,
imgenes, blogs, videos y material didctico, exclusivo para el
uso de los alumnos, el cual es utilizado permanentemente para
motivar e incentivar el mejor rendimiento acadmico.OBJETIV0S
DE LAS PRACTICAS:
1.- Complementar los conocimientos tericos, con
demostraciones experimentales que ratifican los diferentes
fenmenos biolgicos en los seres vivvos.
2.- Ensear las practicas con un enfoque de investigacin, en el
que la observacin, planteamiento de hiptesis y la
experimentacin forman parte del mtodo mismo de enseanza.
3.- Capacitar al alumno en el adecuado manejo de aparatos y
reactivos de laboratorio.
Gua de Practicas
AGRADECIMIENTOS:
El autor expresa su profundo

reconocimiento a todos y cada uno de
los estudiantes de las carreras
profesionales de Enfermera y
Estomatologa, de la Facultad de
Ciencias de la Salud, Universidad
Andina de Cusco, por el apoyo
incondicional desplegado durante los
VI semestres acadmicos, en los
cuales, el autor tubo la
responsabilidad de desarrollar las
Practicas de la presente asignatura.
De igual manera a las autoridades
Acadmicas: Distinguidos Decanos,
Jefes del Departamento Acadmico de
Ciencias Biomdicas, Coordinadores
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I Sesin de
Laboratorio:
Normas de
Laboratorio.
Materiales e
Instrumentos de
Laboratorio.
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NORMAS DE LABORATORIO
INGRESO AL LABORATORIO:
* Los alumnos (as) deben esperar fuera del laboratorio hasta que llegue el maestro o
instructor (a). Una vez dentro del laboratorio los alumnos debern solicitar permiso al
instructor (a) para salir de este.
* Si el maestro o instructor, no se presentan al laboratorio, las prcticas no podrn
realizarse. Es responsabilidad de los tcnicos administrativos (as) que los alumnos
permanezcan fuera del laboratorio hasta la llegada del instructor, as como la de
comunicar al Departamento, por escrito la razn de la suspensin de prcticas.
* Una vez que el instructor ingrese al laboratorio se cerrarn las puertas y no se
permitir el acceso de alumnos.
* Al inicio del curso el alumno (a) deber aportar el material que le sea solicitado. El
material requerido, de acuerdo a la prctica.
* Los alumnos (as) que no aporten el material que les sea solicitado para alguna de
las prcticas no podrn entrar al laboratorio.
* Si faltan ms del 50% de alumnos de un grupo, no se realizara la prctica, por lo
que el profesor dara por dictada la practica y sancionara a los alumnos, si no
justifican su actitud
MEDIDAS DE SEGURIDAD:
*Los alumnos (as) deben usar mandil BLANCO, LARGO y LIMPIO para entrar al
laboratorio. Deben ponerse la bata en la zona designada para ello.
* Los alumnos (as) no debern comer, beber, masticar chicle, fumar y en general
llevarse objetos a la boca dentro del laboratorio. As como tampoco debern usar
telfonos inalmbricos dentro del laboratorio.
*El aseo del laboratorio es de primordial importancia, por lo que los alumnos (as)
debern cooperar en el mantenimiento de la limpieza de su mesa de trabajo y del
material que as lo requiera. Debern limpiar con solucin desinfectante (fenol,
benzal, presep, etc.) el rea de trabajo ANTES de empezar y al TERMINAR la
prctica.
* La basura debe colocarse en los recipientes correspondientes. No deber ser
guardada en cajones y/o vertederos. As como no debern tirarse residuos o
desperdicios a los lavabos.
Deposite los residuos peligrosos biolgico-infecciosos generados durante la prctica
en los recipientes adecuados y en las reas designadas al inicio del curso en
cumplimiento con la normatividad vigente. Todo el material no contaminante como
algodn, pipetas, envolturas, etc. deber ser depositado en los recipientes
destinados para este .
* Los alumnos (as) debern abstenerse de colocar sobre las mesas de trabajo
cualquier material que no sea el requerido para la realizacin de la prctica (por
ejemplo: ropa, bolsas de mano, libros, etc,) Todos los objetos personales debern
ser guardados en las reas designadas.
Gua de Practicas
* En caso de romper o derramar material contaminado AVISE al personal tcnico o

al instructor.
* Los alumnos (as) no podrn permanecer dentro del laboratorio despus de que el
instructor haya salido.
* Los alumnos (as) deben lavarse las manos con agua y jabn al finalizar cada
prctica (y/o antes de salir del laboratorio).
EXAMEN PREVIO:
* Los alumnos (as) deben presentarse al laboratorio adecuadamente preparados.
Esto incluye con la prctica a realizarse impresa en papel, para lo cual debern
consultar con anterioridad la gua de practicas, preparndose en el fundamento
terico existente.
* El alumno (a) debe leer con detenimiento la tcnica a seguir, en caso de existir
dudas consultar con el instructor ANTES de iniciar la prctica.
DESARROLLO DE LA PRCTICA:
*Los alumnos (as) deben mantener el orden dentro de los laboratorios.
Al inicio de cada prctica se designar un alumno (a) como responsable de
seguridad para verificar que se cumplan las normas de este reglamento.
*El profesor y alumnos deben planear su trabajo de manera que la prctica se
complete puntualmente, y puedan salir del laboratorio 10 minutos antes de la
prxima clase o prctica, previendo el tiempo que utilizarn para recoger, ordenar el
material y limpiar su mesa.
*No se permite el desarrollo de actividades diferentes a la prctica durante la
estancia en el laboratorio, esto incluye estudiar otras materias o realizar trabajos.
*No se permiten visitas personales por parte de los alumnos (as).
AL FINALIZAR LA PRCTICA:
*Los alumnos (as) debern enjuagar el equipo utilizado y disponer de los residuos
generados de la manera apropiada.
*Los alumnos (as) debern colocar el material utilizado en la zona designada para
recoleccin de equipo..
REPORTES DE PRCTICA DE LABORATORIO:
*El reporte de la prctica deber ser entregado en la siguiente semana de su
realizacin.
*El reporte deber ser entregado antes del inicio de la siguiente prctica. El alumno
(a) tiene la obligacin de colocarlo en el flder designado para ello. Dicho flder ser
cerrado antes de iniciar la siguiente prctica.
*El profesor (a) anotar en el formato correspondiente la constancia de la recepcin
del reporte. Es responsabilidad del alumno (a) revisar dicha constancia en cada uno
de sus reportes. Por ningn motivo se recibirn reportes extemporneos
Gua de Practicas
*El reporte de prcticas se considera como un trabajo original generado por cada
alumno (a). El contenido de la prctica deber ser redactado ntegramente por el
alumno, cuando se utilicen citas textuales, deber indicarse la fuente.
ESTRUCTURA DEL INFORME DE PRACTICAS:
Los informes de practicas se desarrollaran ntegramente a mano alzada, no se
aceptara trabajos digitados en computadora, todas las graficas y dibujos se
desarrollara en el acto y se concluir en la casa. Toda prctica deber contener la
siguiente secuencia: Introduccin, Objetivos, Hiptesis, Materiales y Mtodos,
Resultados Conclusiones y Bibliografa consultada. El informe se entregara a la
siguiente prctica siendo esta personal.
SANCIONES:
El incumplimiento a estas normas ser sancionado por el profesor o instructor
(a).
La falta a tres practicas consecutivas por el alumno(a),inhabilitan
automticamente al alumno y por lo tanto no tiene derecho a continuar en la
asignatura, caso especial justificacin autorizada por el docente de teora, previa
evaluacin .
10
MATERIALES E INSTRUMENTOS DE LABORATORIO.

I. FUNDAMENTO
La biologa al estudiar la vida y las leyes que la rigen se desarrolla y amplia por el
esfuerzo constante del hombre por conocerse a si mismo y al medio que lo rodea por lo
cual ha sido indispensable auxiliarse de materiales y equipos que permitan disponer de un
laboratorio adecuadamente implementado, sin el cual hubiera sido imposible llegar a
identificar elementos orgnicos; conocer la morfologa, estructura y fisiologa de la materia
viva as como la estructura celular y los componentes qumicos que lo conforman.
II. OBJETIVOS
Identificar los materiales y equipos de laboratorio estableciendo las diferencias que
existen entre ellas.
Conocer la importancia y uso que estos tienen en la investigacin
ALGUNOS MATERIALES DE LABORATORIO
Materiales de Vidrio
Tubo de Ensayo: Se utiliza para mezclar sustancias, calentar, y ejecutar reacciones.
Beaker: Se usan para preparar, disolver o calentar directamente sobre rejillas o planchas
de calentamiento.
Kitazato: Es un matraz de pared gruesa con un una conexin lateral, mediante una
manguera que conecta a una trompa de vaci y su funcin es filtra sustancias pastosas y
slidos de tamao pequeo de partcula.
Matraz de fondo plano: Se utiliza para calentar liquido.
Matraz de fondo redondo: Se utiliza para poner volmenes exactos de solucion.
Embudo de decantacin: Se utiliza para la separacin de lquidos miscible e inmiscible
para extraer l liquido menos denso separando del menos denso.
Vidrio de Reloj: Se utiliza para cubrir recipientes, pesar, transferir slidos, evaporar
lquidos a temperatura ambiente.
Matraz Aforado: Sirve para preparar volmenes exactos de concentraciones.
Bureta: Son tubos de vidrios calibrados que suelen terminar en una llave y sirven para
medir volmenes de lquidos con mayor preescisin y exactitud.
Caja de Petri. En ella se cultivan microorganismos, como hongos o bacterias; tambin
puede usarse para seleccionar muestras de animales.
Frasco gotero. Con l se dosifican lquidos, como colorantes.
Frasco de boca y tapn esmerilados. Se usa para conservar y almacenar sustancias.
Portaobjetos. Son laminillas de cristal que pueden ser cncavas, en ellas se depositan
sustancias para su observacin.
Cubreobjetos. Cubren y protegen las preparaciones u objetos que se observarn al
microscopio e impiden que se desprendan o muevan al ser observados.
Mechero de alcohol. Se emplea como fuente de calor cuando se requiere calentamiento
lento. Al usarla debe cuidarse que la mecha est limpia y recortada para que el calor que
proporcione sea adecuado.
Mechero de gas o de Bunsen. Se emplea para el calentamiento rpido de sustancias.
Balanza. Con ella se conoce el peso de objetos.
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Microscopio. Hace visibles al ojo humano objetos diminutos. Es de suma importancia en

un laboratorio. Con l se han hecho avances notables en medicina, qumica, biologa, etc.
Agitador de vidrio. Estn hechos de varilla de vidrio y se utilizan para agitar o mover
sustancias, es decir, facilitan la homogenizacin
Bao Mara. Es un dispositivo que permite calentar sustancias en forma indirecta, es
decir, sustancias que no pueden ser expuestos a fuego directo.
Vasos de precipitados. Permite calentar sustancias y obtener precipitados de ellas.
Pipetas. Este material existe en dos presentaciones:
a. Pipetas aforadas.
b. Pipetas volumtricas.
Las primeras permiten medir diversos volmenes segn la capacidad de esta, las
segundas no estn graduadas y slo permiten medir un volumen nico.
Probeta. Este material permite medir volmenes las hay de vidrio y de plstico y de
diferentes capacidades.
Piceta. Es un recipiente que se utiliza para contener agua destilada, este utensilio facilita
la limpieza de electrodos .
Materiales de porcelana
Cpsula de porcelana: Sirve para calentar y evaporar lquidos, fundir cristalizar slidos.
Crisol: Sirve para calcinar sustancias, fundir slidos.
. Mortero: Sirve para triturar, pulverizar y mezclar slidos.
. Esptula: Sirve para trasegar slidos y tomar nuestras de slidos.
Materiales de metal
Soporte universal: Pieza bsica en el montaje de los sistemas y aparatos como pinzas y
anillos de metal.
Rejilla de Metal con Centro de Asbesto: Sirve para calentar indirectamente ya que la
llama del mechero se concentra en el anillo.
Trpode: Soporte de vaso de precipitado, matraces, etc.
Pinza para tubo de ensayo: Se utiliza para sujetar tubos de ensayos calientes.
Gradilla: Se utiliza para colocar los tubos de ensayo.
Soporte para Embudo: Sirve para la fijacin de instrumentos de vidrio
2.2 Algunas reglas a observar en el trabajo y laboratorio de biologa
RECOMENDACIONES PARA EL TRABAJO EN LABORATORIO
a. Orden
Al momento de iniciar el trabajo disponer todo en forma ordenada para evitar confusin y
perdida de tiempo. Cuando es necesario, se etiqueta el material. Devolverlo a su lugar
correspondiente despus de haberlo usado; dejar en orden y limpio la mesa de trabajo.
b. Limpieza
En todo momento el trabajo del trabajo es necesario mantener la limpieza, al final del
trabajo de la jornada debe limpiarse todo lo ensuciado, lavarlo convenientemente cuando
sea necesario. Tal vez en ciertas ocasiones sea preciso la esterilizacin . Evite que en el
lavadero se depositen desechos slidos que puedan obstruirlos.
c. Cuidado con los instrumentos y aparatos
La mayora de los instrumentos, aparatos y cualquier tipo de material de laboratorio son
muy costosos y por ello es necesario un especial cuidad en su
manejo y conservacin.
12
13
II Sesin de Laboratorio.
* Medida del pH.
14
MEDIDA DEL pH
FUNDAMENTO
El termino pH es la expresin de la concentracin de H + por medio de una funcin
logartmica. El termino pH puede definirse as:
pH = log 1 H+
El pH 7 representa la neutralidad, un valor inferior a 7 representa solucin cido y superior
a 7 solucin alcalina. La escala pH es logartmica, en una solucin de pH 6 hay 10 veces
hidrogeniones que en una cuyo pH es 7, y un pH 5 indica que esa relacin es de 100 a 1
respecto a la solucin de pH 7. La diferencia de concentracin de hidrogeniones entre el
pH 5 y 5,1 es mucho mayor que la existente entre 5,9 y 6,0. Los mtodos que se utilizan
ms actualmente es mediante el papel indicador y el aparato (Potencimetro).
OBJETIVOS
Familiarizarse con el uso de la cinta indicadora del pH
* Familiarizarse con el manejo del Potencimetro..
1. POTENCIOMETRO
En 1909, el qumico dans Sorensen defini el potencial hidrgeno ( pH ) como
el logaritmo negativo de la concentracin molar ( mas exactamente de la actividad
molar ) de los iones hidrgeno. Esto es:
pH = - log [H + ]
Desde entonces, el trmino pH ha sido universalmente utilizado por la facilidad de su uso,
evitando asi el manejo de cifras largas y complejas. Por ejemplo, una concentracin de
[H+] = 1x10-8 M ( 0.00000001) es simplemente un pH de 8 ya que : pH= - log[10 -8] = 8 La
relacin entre pH y concentracin de iones H se puede ver en la siguiente tabla, en la que
se incluyen valores tpicos de algunas sustancias conocidas:
DETERMINACIN DE pH
El electrodo de vidrio es relativamente inmune a las interferencias del color, turbidez,
material coloidal, cloro libre, oxidantes y reductores. La medicin se afecta cuando la
superficie de la membrana de vidrio esta sucia con grasa o material orgnico insoluble en
agua, que le impide hacer contacto con la muestra, por lo anterior se recomienda la
limpieza escrupulosa de los electrodos.
La temperatura tiene dos efectos de interferencia, el potencial de los electrodos y la
ionizacin de la muestra varan. El primer efecto puede compensarse haciendo un ajuste
en el botn de la " temperatura" que tienen todos los aparatos. El segundo efecto es
inherente de la muestra y solo se toma en consideracin, anotando la temperatura de la
muestra y su pH; para ms exactitud, se recomienda que la muestra est a 25 C, que es
la temperatura de referencia para la medicin del pH.
. PAPEL INDICADOR DE pH
Para la determinacin de pH el papel indicador con el papel indicador. Este mtodo se
basa en el cambio de color de ciertas sustancias en funcin de la variacin de la magnitud
del pH. El uso del papel indicador de pH es un valor cercano a lo real. Se emplea
generalmente papeles o cartulinas con los colores patrn para efectuar la comparacin.
Estos abarcan valores de pH de 1- 14.
15
Fig. 4 CINTA INDICADORA DEL pH
INDICADORES DE pH CASEROS
A continuacin se describe el procedimiento para obtener un indicador de pH, basado en
la diferente coloracin que adquieren algunos compuestos naturales (antocianinas,
curcumina) o sintticos (fenolftalena) en funcin del pH. Con este indicador casero se
puede determinar el carcter cido o bsico de muchas sustancias y realizar algunas
experiencias curiosas y sencillas, relacionadas con las reacciones cido-base.
Antocianinas
Las antocianinas (o antocianos) constituyen un grupo de pigmentos hidrosolubles (son
solubles en agua, en cido actico y en alcohol, pero no en aceites) responsables de la
coloracin roja, azul o violeta de muchas flores, frutas, hortalizas, etc. Se usan como
colorantes en la alimentacin (E-163), obtenindose, en este caso, slo a partir de
comestibles, tales como fresas, cerezas, ciruelas, col lombarda, cebollas rojas,
berenjenas, uvas, etc (BOE, 1996). Las antocianinas son muy sensibles a las variaciones
de pH. En general, adquieren un color rojo en medio cido y cambian de color a azul
oscuro cuando el pH se hace bsico, pasando por el color violeta. De hecho,
antiguamente se empleaban estas sustancias naturales como indicadores del pH (Accum,
1836).
En los extractos vegetales pueden encontrarse varios tipos de antocianinas juntas, las
cuales confieren a cada extracto particular diferentes cambios de color frente al pH.
Seguidamente se describe el procedimiento a seguir para obtener el indicador de pH
basado en las antocianinas obtenidas a partir de col lombarda (brssica olercea capitata
rubra) y el Lirio Inka Speroccyphyun herrera estudiado por el Dr. Oswaldo Baca Mendoza.
En la figura se muestra una col lombarda. Esta hortaliza es similar a la col normal
(orepollo) pero de color morado. Es ms fcil encontrarla en el mercado durante los
meses de invierno, aunque actualmente puede adquirirse durante casi todo el ao.
REPOLLO MORADO
16
Es conveniente observar los colores de estos extractos con la luz solar o con la luz de una
bombilla de filamento incandescente (normal o halgena), ya que la luz de las bombillas
de bajo consumo o la de los tubos fluorescentes puede alterar el tono del color. Para
obtener el extracto de col lombarda y determinar posteriormente el carcter cido o bsico
de algunas sustancias slo se necesitan un par de hojas de col lombarda y agua o alcohol
etlico, dependiendo de cmo se vaya a obtener el extracto; en esta experiencia y en las
sucesivas no es necesario usar alcohol etlico farmacutico, se puede usar el cosmtico,
que se vende en supermercados y es bastante ms barato.
Lgicamente, para observar los cambios de color del extracto se necesitan sustancias
bsicas, tales como amoniaco (NH3), sosa custica (hidrxido sdico, NaOH), leja
(hipoclorito sdico, NaClO), etc., y sustancias cidas, tales como agua fuerte (cido
clorhdrico, HCl), vinagre (cido actico, CH3-COOH), etc. Tambin conviene disponer 92
de varios vasos, un cuchillo, una cucharilla de acero inoxidable, papel de filtro de caf y
un embudo. Adems, si se obtiene el extracto con agua hirviendo se necesita un cazo y
un hornillo, mientras que si se obtiene el
extracto con alcohol etlico se necesitar una maza y un mortero. Conviene que los vasos
usados sean incoloros y transparentes con el fin de observar claramente los colores del
indicador.
El procedimiento a seguir es el siguiente. En primer lugar se trocea finamente un par de
hojas de col lombarda y se introducen en el cazo. Se agrega agua y se calienta al fuego.
Se mantiene en ebullicin durante unos 10 minutos y posteriormente se retira del fuego
para dejarla enfriar. A continuacin se filtra el lquido de las hojas usando un embudo con
papel de filtro. El lquido que se ha obtenido es el indicador de pH, que tendr un intenso
color violeta. Los restos de las hojas de col lombarda han perdido el color violeta y ahora
tienen una tonalidad verdosa; principalmente las hojas externas, que son las expuestas a
la luz y las que poseen ms clorofilas. El extracto obtenido mediante este procedimiento
es algo turbio debido a que el agua ha extrado de la col lombarda otras sustancias
adems de las antocianinas. Otra forma de obtener el extracto es machacar con un
mortero las hojas de col lombarda finamente troceadas con unos 100 ml de alcohol etlico,
en lugar de hervirlas con agua. Luego se filtra el extracto con el embudo y el papel de
filtro. De esta forma el extracto que se obtiene no tiene turbidez. Aunque el procedimiento
en el que se hierve la col con agua tiene la ventaja de que se puede cocer una col entera,
obtener una gran cantidad de extracto y luego podemos comernos la col; incluso puede
hervirse usando una olla a presin.
Conviene destacar que si se obtiene el extracto con agua hirviendo, al dejarlo unos das a
temperatura ambiente comenzar a descomponerse y perder el color debido a la accin
de microorganismos. Para conservarlo ms tiempo se puede congelar o bien agregarle
una octava parte de su volumen de alcohol etlico. Se puede impregnar tiras de papel de
filtro de caf con el extracto y dejarlo secar. Tambin se puede concentrar el extracto
hirviendo la disolucin o ponindola al bao Mara. Si concentramos el extracto hasta que
se vuelva slido podemos extraer con alcohol etlico el colorante y separarlo de aquellas
sustancias no solubles en alcohol que s estaban presentes en el agua. Esta disolucin
ser mucho ms estable, ya que a los microorganismos les cuesta ms desarrollarse en
ella. Adems se han eliminado sustancias que enturbian la disolucin. En cualquier caso,
con el paso del tiempo estos indicadores de pH se degradan y pierden su color.
Comprobacin del carcter cido o bsico de algunas sustancias
Para observar los cambios de color que se producen en los extractos obtenidos al variar
el pH, se coloca un poco de agua en tres vasos transparentes e incoloros. A continuacin
17
se agrega a cada uno de los vasos un poco del extracto que queramos estudiar. El vaso
central se usar como patrn, mientras que los dos vasos restantes se usarn para
determinar las variaciones de color al agregarles diversas sustancias, tanto cidas como
bsicas. En principio, no tiene por qu conocerse el carcter de las sustancias
empleadas. Conviene destacar que es ms fcil observar los colores colocando un folio
blanco debajo de los vasos.
ACIDO
NEUTRO
ALCALINO
FIGURA Algunos de los colores que adquiere el extracto de col lombarda al

cambiar el pH. El pH de la disolucin aumenta hacia la derecha.
18
III Sesin de
Laboratorio
Carbohidratos
Lpidos
19
CARBOHIDRATOS
Fundamento
Los carbohidratos son los compuestos orgnicos ms abundantes de la biosfera. La
mayora pueden ser representados con la frmula general C x(H2O)y por lo que son
literalmente, hidratos de carbono. Gran parte de sus funciones biolgicas dependen de
esta estructura qumica tan particular y verstil. Ellos son componentes fundamentales de
muchos alimentos y su degradacin durante el proceso de digestin genera la energa
necesaria para las funciones vitales del organismo. Cuando se encuentran combinados
con otras biomolculas, dan origen a molculas ms complejas cuyas funciones pueden
ser estructurales o de soporte celular y tisular, de comunicacin entre clulas, de
reconocimiento o de sealizacin. Qumicamente se definen como polihidroxialdehdos o
polihidroxiacetonas cclicas o sustancias que luego de hidrolizarse dan origen a los
mismos. Un carbohidrato que no puede ser hidrolizado en uno ms simple es llamado
monosacrido. Los monosacridos ms comunes son la glucosa, la fructosa, la galactosa
y la manosa. Un carbohidrato que puede ser hidrolizado en dos molculas de
monosacridos es llamado disacrido. Los ms importantes son la lactosa (presente en la
leche), la sacarosa (presente en el azcar comn) y la maltosa. Por su parte, aquellos
carbohidratos que pueden ser hidrolizados en varias molculas de monosacridos son
llamados polisacridos. Los ms comunes son el almidn y la celulosa, ste ltimo es
componente estructural de las plantas.
La determinacin de glucosa es de importancia mdica ya que niveles sanguneos
alterados pueden ser signo de una enfermedad metablica comn conocida como
diabetes mellitus.
Objetivo:
que el estudiante refuerce los conocimientos adquiridos acerca de los carbohidratos
mediante la demostracin experimental de algunas de sus propiedades.
MATERIALES
Tubos de ensayo
Gradilla
Pinzas
Mechero
Pipetas
Solucin de Lugol
Solucin de Fehling A y B (Opcional)
Solucin alcalina (sosa, potasa, bicarbonato, etc.)
ClH diluido
Solucin de Benedic
TCNICA
20
.
.
.
.
.
.
Poner en los tubos de ensayo 3ml de la solucin de glucosa, maltosa, lactosa fructosa
o sacarosa (segn indique el profesor).
Aadir 1ml de solucin de Fehling A (contiene CuSO 4) y 1ml de Fehling B (lleva NaOH
para alcalinizar el medio y permitir la reaccin)
Calentar los tubos a la llama del mechero hasta que hiervan.
La reaccin ser positiva si la muestra se vuelve de color rojo y ser negativa si queda
azul o cambia a un tono azul-verdoso.
Observar y anotar los resultados de los diferentes grupos de prcticas con las distintas
muestras de glcidos.
Mesclar una solucin de glucosa con reactivo de Benedit, anotar el cambio de
coloracin.
Glcido
Glucosa
Maltosa
Lactosa
Fructosa Sacarosa
Reductor
INVESTIGACIN DE POLISACRIDOS (ALMIDN)
FUNDAMENTO
El almidn es un polisacrido vegetal formado por dos componentes: la amilosa y la
amilopectina. La primera se colorea de azul en presencia de yodo debido no a una
reaccin qumica sino a la adsorcin o fijacin de yodo en la superficie de la molcula
de amilosa, lo cual slo ocurre en fro. Como reactivo se usa una solucin denominada
lugol que contiene yodo y yoduro potsico. Como los polisacridos no tienen poder
reductor, la reaccin de Fehling da negativa.
TCNICA
. Colocar en un tubo de ensayo 3ml de la solucin de almidn.
. Aadir 3 gotas de la solucin de lugol.
. Observar y anotar los resultados.
. Calentar suavemente, sin que llegue a hervir, hasta que pierda el color.
. Enfriar el tubo de ensayo al grifo y observar cmo, a los 2-3 minutos, reaparece el
color azul.
21
RECONOCIMIENTO DE LPIDOS
MATERIALES
-
Tubos de ensayo
Gradilla
Varillas de vidrio
Mechero
Vasos de precipitados
Pipetas
Solucin de NaOH al 20%

Solucin de Sudn III
Tinta china roja
Eter, cloroformo o acetona
Aceite de oliva
SAPONIFICACIN DE CIDOS GRASOS

Las grasas reaccionan en caliente con el hidrxido sdico o potsico
descomponindose en los dos elementos que las integran: glicerina y cidos grasos.
stos se combinan con los iones sodio o potasio del hidrxido para dar jabones, que
son en consecuencia las sales sdicas o potsicas de los cidos grasos. En los
seres vivos, la hidrlisis de los triglicridos se realiza mediante la accin de enzimas
especficos (lipasas) que dan lugar a la formacin de cidos grasos y glicerina.
.
.
.
TCNICA
Colocar en un tubo de ensayo 2ml de aceite y 2ml de NaOH al 20%.
Agitar enrgicamente y colocar el tubo al bao Mara de 20 a 30 minutos.
Pasado este tiempo, se pueden observar en el tubo 3 fases: una inferior clara
que contiene la solucin de sosa sobrante junto con la glicerina formada, otra
intermedia semislida que es el jabn formado y una superior lipdica de aceite
inalterado.
TINCIN
FUNDAMENTO
Los lpidos se colorean selectivamente de rojo-anaranjado con el colorante Sudn
III.
TCNICA
.
.
.
.
.
Disponer en una gradilla 2 tubos de ensayo colocando en ambos 2ml de aceite.

Aadir a uno de los tubos 4-5 gotas de solucin alcohlica de Sudn III.
Al otro tubo aadir 4-5 gotas de tinta roja.
Agitar ambos tubos y dejar reposar.
Observar los resultados: en el tubo con Sudn III todo el aceite tiene que
aparecer teido, mientras que en el tubo con tinta, sta se ir al fondo y el aceite
no estar teido.
22
SOLUBILIDAD
FUNDAMENTO
Los lpidos son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se
dividen en pequesimas gotas formando una emulsin de aspecto lechoso, que
es transitoria, pues desaparece en reposo por reagrupacin de las gotitas de
grasa en una capa que, por su menor densidad, se sita sobre el agua.
Por el contrario, las grasas son solubles en disolventes orgnicos, como el ter,
cloroformo, acetona, benceno, etc.
TCNICA
. Poner 2 ml de aceite en dos tubos de ensayo.
. Aadir a uno de ellos 2ml de agua y al otro 2ml de ter u otro disolvente
orgnico,
. Agitar fuertemente ambos tubos y dejar reposar.
. Observar los resultados: Se ver cmo el aceite se ha disuelto en el ter y, en
cambio no lo hace en el agua y el aceite subir debido a su menor densidad.
CUESTIONES
1.
2.
3.
4.
5.
Qu son los jabones?

Cmo se pueden obtener los jabones?
Por qu en la saponificacin la glicerina aparece en la fase acuosa?
Qu enzima logra en el aparato digestivo la hidrlisis de las grasas?
Indica lo que ocurre con la mezcla aceite-Sudn III y aceite-tinta y explica a qu
se debe la diferencia entre ambos resultados.
23
Gua de Practicas
IV sesin de
Laboratorio.
Proteinas
Enzimas
24
Gua de Practicas
PROTENAS
DEFINICIN Y CONCEPTO
Las protenas son cualquiera de los numerosos compuestos orgnicos constituidos

por aminocidos unidos por enlaces pesticidas que intervienen en diversas
funciones vitales esenciales, como el metabolismo, la contraccin muscular o la
respuesta inmunologa. Se descubrieron en 1938 y hoy se sabe que son los
componentes principales de las clulas y que suponen mas de 50% del peso seco
de los animales. El trmino protena deriva del griego proteico, que significa primero.
Las molculas proteicas van desde las largas fibras insolubles que forman el tejido
conectivo y el pelo, hasta los glbulos compactos solubles, capaces de atravesar la
membrana celular y desencadenar reacciones metablicas.
Tienen un peso molecular elevado y son especficas de cada especie y de cada uno
de sus rganos. Se estima que el ser humano tiene unas 30.000 protenas distintas,
de las que un 2% se ha descrito con detalle. Las protenas sirven sobre todo para
construir y mantener las clulas, aunque su descomposicin qumica tambin
proporciona energa, con un rendimiento de 4 kilocaloras por gramo, similar al de
los hidratos de carbono.
Adems de intervenir en el crecimiento y el mantenimiento celulares, son
responsables de la contraccin muscular. Las enzimas son protenas al igual que la
insulina y casi todas las dems hormonas, los anticuerpos del sistema inmunolgico
y la hemoglobina, que transporta oxigeno en la sangre. Los cromosomas, que
transmiten los caracteres hereditarios en forma de genes, estn compuestos por
cidos nucleicos y protenas.Las protenas son biomolculas formadas bsicamente
por carbono, hidrogeno, oxigeno y nitrgeno. Pueden adems contener azufre y en
algunos tipos de protenas, fsforo, hierro, magnesio y cobre entre otros elementos.
Pueden considerarse polmeros de unas pequeas molculas que reciben el nombre
de aminocidos y serian por lo tanto los monmeros unidad. Los aminocidos estn
unidos mediante enlaces peptdicos. La unin de un bajo numero de aminocidos da
lugar a un pptido; si el N= n de aminocidos. Lo que forma la molcula N si esta es
mayor de 10, es un polipptido; se denomina oligopptido, si N es superior a 50
aminocidos. Se habla ya de protena cuando N es mayor a 100 aminocidos.
OBJETIVOS
Determinar algunas propiedades de las protenas
Demostrar la desnaturalizacin de una protena.
Reconocer la actividad enzimtica frente a un sustrato.
25
Gua de Practicas
DESNATURALIZACIN DE PROTENAS
MATERIALES
-
Tubos de ensayo
Gradilla
Mechero
Vasos de precipitados
Pipetas
Solucin de HCl concentrado

Alcohol etlico
Solucin de SO4Cu al 1%
NaOH al 20%
Clara de huevo o leche
Solucin de albmina al1-2%
FUNDAMENTO
Las protenas debido al gran tamao de sus molculas forman con el
agua soluciones coloidales que pueden precipitar formndose cogulos al ser
calentadas a temperaturas superiores a 70C o al ser tratadas con soluciones
salinas, cidos, alcohol, etc.
La coagulacin de las protenas es un proceso irreversible y se debe a su
desnaturalizacin por los agentes indicados que al actuar sobre la protena la
desordenan por destruccin de sus estructuras secundaria y terciaria.
.
.
TCNICA
Colocar en tres tubos de ensayo una pequea cantidad de clara de huevo (puede
diluirse en un poco de agua para obtener una mezcla espesa) o 2-3ml de leche.
Calentar uno de los tubos al bao Mara, aadir a otro 2-3ml de HCl concentrado
y al otro aadir solucion de K (OH) concentrada
26
REACCIONES COLOREADAS ESPECFICAS (BIURET)

FUNDAMENTO
Entre las reacciones coloreadas especficas de las protenas, que sirven por
tanto para su identificacin, destaca la reaccin del Biuret. Esta reaccin la
producen los pptidos y las protenas, pero no los aminocidos ya que se debe
a la presencia del enlace peptdico CO-NH que se destruye al liberarse los
aminocidos.
El reactivo del Biuret lleva sulfato de Cobre(II) y sosa, y el Cu, en un medio
fuertemente alcalino, se coordina con los enlaces peptdicos formando un
complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la
concentracin de protenas.
TCNICA
.
.
.
.
.
Colocar en un tubo de ensayo 3ml de solucin de albmina al 1-2%.

Aadir 4-5 gotas de solucin de SO4Cu al 1%.
Aadir 3ml de solucin de NaOH al 20%.
Agitar para que se mezcle bien.
Observar los resultados.
CUESTIONARIO:
*Cmo se manifiesta la desnaturalizacin de la clara de huevo?
*Cul de los tres agentes utilizados tiene mayor poder de desnaturalizacin?
*Cmo podramos saber que una sustancia desconocida es una protena?
*Qu coloracin da la reaccin del Biuret?
*Una protena coagulada podra dar la reaccin del Biuret?
*Si se realiza la reaccin del Biuret sobre un aminocido como la Glicina es
positiva o negativa? Por qu?
ENZIMAS
FUNDAMENTO
En los seres vivos se estn desarrollando continuamente una serie de
reacciones qumicas que, si se realizaran en un laboratorio, slo podran
llevarse a cabo mediante altas temperaturas, descargas elctricas u otras
fuentes de energa que las clulas no podran resistir. Por ello, las reacciones
que tienen lugar en los organismos no pueden ser violentas, lo cual se consigue
gracias a la existencia de los biocatalizadores, entre los cuales el lugar ms
destacado lo ocupan los enzimas.
Para que una reaccin se lleve a cabo es necesario que la/s sustancia/s que
van a reaccionar (sustratos) reciban una determinada cantidad de energa que
las active, denominada energa de activacin. Los catalizadores son pues
aquellas sustancias que, al disminuir las necesidades de energa de activacin
de una reaccin, la facilitan y la aceleran. Los catalizadores no intervienen en la
reaccin que catalizan, de tal manera que, una vez terminada sta, quedan
libres y pueden volver a ser utilizados, no se consumen durante la reaccin.
Todos los enzimas conocidos son protenas de gran solubilidad en los medios
lquidos del organismo. Salvo raras excepciones son solubles en agua. Segn
su composicin se clasifican en dos grupos:
DEMOSTRACIN DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA
MATERIALES:
A). Tubos de ensayo
B). Pipetas Pasteur
C). Almidon de trigo
D). Agua destilada
E). Saliva humana
F). Lugol
G). Incubadora a 37C
PROCEDIMIENTO
Preparar en un tubo de ensayo una solucin de almidn en agua

destilada (Testigo).
Preparar otra solucin de almidn en saliva humana en otro tubo de

ensayo e incubar a 37C por 20 minutos.
* Colocar en ambos tubos unas gotas de lugol
*
Comparar los resultados.
Explicar las diferencias.
EXPERIMENTO COMPLEMENTARIO
ACTIVIDAD DE LA CATALASA EN HGADO DE POLLO:
*En un tubo de Ensayo que contiene 10 a 20 ml de Perxido de Hidrogeno
*Coloque un trozo de hgado de pollo cosido.
* En otro tubo similar introduzca en el perxido de hidrogeno un trozo de
*Hgado de pollo crudo
*Utilizando un termmetro controle la temperatura cada 2 minutos

*Explique los fenmenos.
V. Sesin de Laboratorio
cidos nucledos
ACIDOS NUCLEICOS
FUNDAMENTO
La moderna ciencia de la Gentica se origin cuando Gregor Mendel descubri
que las caractersticas hereditarias estaban determinadas por unidades
hereditarias que se transmitan de una generacin a la siguiente de manera
uniforme y predecible. Se inici en este momento (finales s.XIX) una carrera
cientfica cuyo objeto primordial era solucionar dos problemas, en principio muy
distintos, pero, como se vio ms tarde, muy relacionados entre s.
El primer problema fue el de identificar exactamente el material
gentico, su localizacin y su naturaleza qumica. El desarrollo de esta lnea de
investigacin ha dado lugar a una rama de la Gentica denominada Gentica
Molecular.
El segundo problema consista en descubrir el modo en que se
transmiten y se heredan de generacin en generacin las manifestaciones de ese
material hereditario, es decir, los caracteres biolgicos. Se cre as otra rama de la
Gentica llamada en honor de Mendel Gentica Mendeliana.
En cuanto al primer problema, un paso previo a iniciar la bsqueda e
identificacin del material gentico consiste en establecer los requisitos que debe
cumplir. Se establecen 4 requisitos generales que se espera que cumpla el
material gentico:
1.- Que se replique exactamente antes de la duplicacin celular.
2.- Que su estructura sea lo suficientemente estable para que los
cambios hereditarios (mutaciones) slo se produzcan raramente.
3.- Que pueda llevar cualquier tipo de informacin biolgica necesaria.
4.- Que transmita la informacin a la clula.
REPLICACIN DEL ADN
La necesidad de que el material gentico se autoduplique exactamente es la
primera exigencia que debe cumplir. Ya en el modelo de Watson y Crick se
planteaba la posibilidad de que las hebras de la doble hlice se separaran y cada
una sirviera de matriz para formar la cadena complementaria. Este proceso recibi
el nombre de replicacin. Tal y como se haba descrito hasta ese momento deba
ser semiconservativo, es decir, cada doble hlice de ADN resultante slo llevaba
una de las dos hebras del ADN original, mientras que la complementaria era de
nueva formacin. Esto se demostr concluyentemente con los experimentos de
Meselson y Stahl: cultivaron bacterias E.coli en un medio que contena como nica
fuente de nitrgeno cloruro amnico marcado con 15N hasta que lleg un momento
en que el ADN slo presentaba en sus bases nitrogenadas 15N. Posteriormente
cambiaron el medio de cultivo por otro con 14N normal. Las bacterias de la primera
generacin presentaban en su ADN 14N y 15N en igual cantidad.
El proceso de replicacin es similar tanto en los organismos procariotas

como en los eucariotas, pero es en los primeros donde ms se conocen los
detalles; en concreto la ms estudiada es la replicacin en E.coli.
Es un proceso complejo en el que intervienen ms de 50 protenas
distintas agrupadas en complejos multienzimticos. El enzima principal se
denomina ADN-polimerasa y para que acte es necesario que existan en el
medio iones Mg2+ y una mezcla de 4 desoxirribonucletidos-trifosfato (dATP,
dGTP, dCTP y dTTP). Es suficiente con que falte uno de los cuatro para que no
acte la ADN-polimerasa. Bsicamente este enzima realiza dos funciones:
1.- Recorre las hebras del molde y selecciona en cada momento el
desoxirribonucletido-trifosfato que tenga la base complementaria (G-C, A-T).
Una vez localizado, la ADN-polimerasa cataliza su hidrlisis separando un
grupo pirofosfato (P-P) y uniendo el resto (desoxirribonucletido-monofosfato) a
la cadena de ADN que se est formando mediante un enlace fosfodister. La
energa necesaria para esta unin se obtiene de la hidrlisis del grupo
pirofosfato. sta es la funcin polimerizadora de la ADN-polimerasa.
2.- La ADN-polimerasa es tambin autocorrectora ya que despus de
unir cada nucletido comprueba si se han producido errores antes de incorporar el
nucletido siguiente. Si detecta un error, elimina el ltimo nucletido colocado y lo
sustituye por el correcto.
Sin embargo la ADN-polimerasa debe resolver dos problemas
relacionados con su actividad cataltica:
1.- La ADN-polimerasa es capaz de ir leyendo las hebras que actan de
molde en sentido 3'--5' y va sintetizando la nueva cadena en sentido 5'--3'. Esta
ltima hebra recibe el nombre de hebra conductora. Sin embargo, la hebra molde
complementaria discurre en sentido antiparalelo, es decir, 5'--3' y la ADNpolimerasa es incapaz de leerla en ese sentido. Para solucionar este problema, la
ADN-polimerasa sintetiza pequeos fragmentos de ADN llamados fragmentos de
Okazaki que crecen en sentido 5'--3' igual que la hebra conductora y ms tarde se
unen para formar la hebra completa, que en este caso se llama hebra retardada
porque se sintetiza ms lentamente.
2.- Otro problema que plantea la actividad cataltica de la ADNpolimerasa es que es incapaz de iniciar por s sola la sntesis de una nueva
cadena de ADN y necesita un corto fragmento de ARN, llamado ARN-cebador,
que acte como iniciador de las rplicas y que se elimina posteriormente del ADN
formado.
En resumen, el proceso completo de la replicacin del ADN en E.coli es
el siguiente:
El paso previo para que pueda actuar la ADN-polimerasa es el
desenrrollamiento y apertura de la doble hlice de ADN. La separacin de las
cadenas comienza en puntos concretos llamados puntos de iniciacin. A partir de
ellos se van separando las dos hebras de ADN formando la llamada burbuja de
replicacin. Los dos extremos de la burbuja por donde continua la separacin
reciben el nombre de horquillas de replicacin.
La sntesis de las cadenas complementarias comienza con la sntesis

del ARN cebador que es una corta cadena de ARN con una secuencia
complementaria de una de las porciones de las hebras del ADN y frente a la cual
se coloca. En la hebra que tiene el sentido 3'--5' la ADN-polimerasa va colocando
nucletido tras nucletido a continuacin del ARN cebador. Esta hebra
complementaria que va creciendo en sentido 5'--3' es la hebra conductora. En la
hebra opuesta del ADN original no se puede realizar el mismo proceso porque
discurre en sentido 5'--3'. Por tanto, a continuacin del ARN cebador se coloca un
fragmento de Okazaki y, despus de ste, un nuevo ARN cebador seguido de otro
fragmento de Okazaki.
En este momento acta una ribonucleasa que elimina el ARN cebador
que est entre dos fragmentos de Okazaki. El hueco que queda es rellenado por la
ADN-polimerasa. El proceso continuara con la colocacin de un nuevo ARN
cebador, otro fragmento de Okazaki, eliminacin del ARN cebador y llenado del
hueco por la ADN-polimerasa. Y as sucesivamente. La hebra que se sintetiza de
esta manera es la retardada y crece en sentido 3'--5'.
La replicacin llevada a cabo por la ADN-polimerasa es un proceso muy
exacto, sobre todo por su actividad autocorrectora. Sin embargo, an as se
produce un error de apareamiento de bases por cada 10 7 pares de bases. En una
bacteria esto podra resultar suficiente debido a que su cromosoma slo posee
3103 pares de bases. Sin embargo en el ADN humano existen 310 9 pares de
bases y durante el desarrollo embrionario, a partir del zigoto el ADN humano se
duplica 1015 veces, por lo que la informacin gentica pronto se perdera.
Para aumentar ms todava la perfeccin de la replicacin del ADN
existe un complejo enzimtico que detecta el nucletido mal emparejado, lo
elimina y regenera la secuencia correcta. De este modo se logra alcanzar una
perfeccin de un error cada 10 10 pares de bases. Este proceso se conoce con el
nombre de correccin postreplicativa.
OBJETIVOS
Demostrar la presencia del ADN en la celula.
Demostrar la Presencia de RNA en la celula
RECONOCIMIENTO DE ADN Y RNA
MATERIALES:
A). Catafila de cebolla.
B). Portaobjetos.
C). Cubreobjetos.
D). Solucin de Feulgen
E). Solucin de HCl al 0.1N.
F). Camara oscura de Madera.
PROCEDIMIENTO:
1. Prepare clulas de catafilo de cebolla en un portaobjetos.
2. Fije las clulas en Carnoy por 15 minutos.
3. Hidrate con agua destilada.
4. Seque la lamina a la estufa a 60C por 1 minutos
5. Coloque 3 a 5 gotas de reactivo de feulgen

6. Introduzca en una cmara oscura por 20 minutos
7. Saque la lamina y observe al microscopio.
INTERPRETACION :
1. El ADN se colorea de color azul violeta .
2. El RNA se colorea de color rojo purpura.
3. Si no existe acidos nucleicos se colorea de color amarillo.
VI. Sesin de
Laboratorio
Microscopia ptica.
MICROSCOPIA PTICA
FUNDAMENTO:
El microscopio es un instrumento ptico que amplifica la imagen de un objeto
pequeo, siendo el instrumento ms utilizado en los laboratorios donde se
estudian microorganismos. Si bien las lentes de aumento han sido conocidas
desde muy temprano en la historia, slo se le utiliz en biologa con el
advenimiento del microscopio de luz moderno. Desde su invencin, el microscopio
ha sido una herramienta valiosa en el desarrollo de la teora cientfica. En general,
un microscopio est compuesto de dos elementos, los cuales constituyen un
sistema similar a un telescopio: a) lentes primarias amplificadoras
y b) lentes secundarias. Estos sistemas se denominan objetivo y ocular,
respectivamente, y estn montados en los extremos opuestos de un tubo cerrado,
de forma que el primero se encuentra en el punto focal del segundo. Entonces, la
luz que pasa por un objeto es focalizada por ambos sistemas de lentes, de manera
que cuando se mira a travs del ocular se ve una imagen virtual aumentada de la
imagen real (Figura 1).
Actualmente existen muchos tipos de microscopios, entre los que se cuentan el
microscopio ptico, el electrnico, el de sonda de barrido y el lser. No obstante, el
microscopio ms utilizado es el ptico, el cual se sirve de la luz visible para crear
una imagen aumentada del objeto.
OBJETIVOS: Al finalizar la prctica el estudiante conocer:
a) El manejo adecuado del microscopio ptico, observar laminillas e
identificar diferentes tipos de muestras biolgicas.
b) Estar en capacidad de ejecutar correctamente la limpieza del microscopio
ptico
EL MICROSCOPIO PTICO
Los microscopios pticos pueden clasificarse en simples y complejos,
diferencindose en su capacidad amplificadora y en la complejidad del sistema de
lentes asociado. La principal ventaja de un microscopio ptico es que permite
observar organismos vivos y tejidos. Su principal desventaja, es que su potencia
amplificadora est limitada por la longitud de onda de la luz visible.
MICROSCOPIO SIMPLE:
El microscopio ptico ms simple es la lente convexa doble, cuya distancia focal
es corta. Estas lentes pueden aumentar un objeto hasta 15 veces. Tambin se les
denomina microscopios de bajo poder. Existen al menos dos tipos de
microscopios de bajo poder: monoculares y binoculares (Figura 2). Los
microscopios monoculares tienen muy bajo poder amplificador, siendo utilizado
esencialmente por nios. Los microscopios binoculares, estreo microscopios o

lupas, en cambio, proveen un aumento mayor. Se
caracterizan, porque presentan dos objetivos, de modo que el objeto se puede ver
en forma estereoscpica o tridimensional.
MICROSCOPIO COMPUESTO:
Los microscopios complejos disponen de varias lentes con las que se consiguen
aumentos mayores,pudiendo inclusive aumentar un objeto ms de 2.000 veces.
Estos microscopios son, en general, los ms utilizados. En este caso, el objetivo
est compuesto de varias lentes que crean una imagen real
Aumentada del objeto examinado. El aumento total del microscopio depende de
las longitudes focales de los dos sistemas de lentes.
III. COMPONENTES DE UN MICROSCOPIO PTICO BINOCULAR
Como se observa, un microscopio ptico binocular consta de: base, pedestal,
cabeza. En la base se ubica la fuente de luz. En el pedestal se ubican macro y
micromtrico y la platina; sobre la platina se ubican las pinzas, y el foco coaxial,
mientras que bajo sta se ubica el diafragma. En la parte superior del pedestal se
ubica el revlver, pieza que porta los objetivos. En la cabeza se ubican los
oculares y el sistema regulador de la distancia focal.
Base: Corresponde a la parte inferior del instrumento, utilizada como soporte.
Pedestal o brazo: pieza que soporta al tubo que contiene el sistema de lentes y
que le conecta con la base.
Cabeza: pieza, generalmente mvil, sobre la que se ubican los oculares y el
sistema regulador de la distancia focal.
Fuente de luz: corresponde a una ampolleta u otra fuente luz activada por
corriente o pila.
Antiguamente se utilizaba un espejo que concentraba la luz ambiental.
Macromtrico: tornillo que permite el ajuste grosero de la muestra a observar.
Se complementa con el uso del micromtrico.
Micromtrico: tornillo que permite un ajuste fino de la muestra a observar.
Platina: pieza dispuesta horizontalmente y sobre la cual se ubican las pinzas y el
foco coaxial. Platina,
pinzas y foco coaxial permiten ubicar una muestra para ser observada. La muestra
debe estar dispuesta sobre un portaobjeto y protegida por un cubreobjeto). Bajo la
platina se encuentran el diafragma y el filtro.
Pinzas: Piezas prensiles que permiten sujetar la muestra, contenida en un
portaobjeto, contra la platina.
Foco coaxial: Sistema compuesto por dos ejes de desplazamiento horizontal,
los cuales, dispuestos perpendicularmente entre s, permiten ajustar una muestra
para ser observada al microscopio. Un eje desplaza la muestra en sentido lateral
(izquierda - derecha del observador) y el otro en sentido frontal
(alejando - acercando la muestra del observador). Ambos movimientos se realizan
en el plano que
define la platina.
Diafragma: Sistema que controla la cantidad de luz que llega al objeto. El

diafragma permite controlar intensidad de luz y el tamao del cono de luz
proyectado sobre la muestra.
Condensador: Conjunto de lentes que focalizan la luz sobre la muestra. La
lentes condensadoras ms tiles poseen poderes superiores a los 400x y ms. El
uso de condensador permite mejorar la
observacin de la muestra. Cuando est presente en el instrumento, el
condensador se ubica
generalmente bajo la platina .
Filtro: Algunos microscopios portan filtros o un sistema de stos, los que
corresponden a lentes de distinto color que permiten enfatizar la observacin de
determinadas partes de la muestra,
generalmente destacadas con tinciones.
Revlver: Mecanismo giratorio sobre el cual se disponen los objetivos. El
revlver permite cambiar el aumento con que se observa una muestra
determinada. Un revlver generalmente porta cuatro objetivos: 4x, 10x, 40x y un
objetivo de inmersin (100x).
Objetivos: Conjunto de lentes responsables de aumentar y resolver (distinguir
las distintas partes) de la muestra a observar.
Objetivo de inmersin: El objetivo de inmersin permite lograr una mejor
resolucin en un microscopio ptico mediante el uso de las propiedades de
refraccin de luz del aceite de inmersin. Requiere de la disposicin de una gota
de este aceite sobre la muestra, ya sea en el caso de preparaciones frescas o
preparaciones fijas; el objetivo de inmersin debe acercarse a la muestra de modo
que toque la gota de aceite. En la Figura 8 se compara la observacin de una
muestra con y sin el objetivo de inmersin.
Oculares : Conjunto de lentes especializadas en aumentar la imagen
previamente formada por el
objetivo. Puede desmontarse e intercambiarse por otros con distintos aumentos o
funciones: agujas para sealar, retculos para recuentos u otros.
Sistema regulador de la distancia focal: Sistema que permite ajustar la distancia
focal de los oculares con la distancia focal del observador.
PROPIEDADES
Poder de resolucin
Es la capacidad del instrumento de dar imgenes bien definidas de puntos
situados muy prximos entre s.
Lmite de resolucin
Es la distancia que puede existir entre dos puntos para que puedan ser definidos
como tales. Es importante recordar que el lmite de resolucin (mnima distancia)
es la inversa del poder de resolucin (mxima capacidad) de manera que cuanto
mayor es el poder de resolucin menor es el lmite de resolucin. Esto ltimo es el
resultado de deducciones matemticas que no es el caso tratar aqu y usted
debiera estudiarlo en aquellos cursos que involucren fsica. Si se usan sistemas de
gran apertura numrica e iluminacin con longitud de onda corta (luz ultravioleta
por ejemplo) se obtendr el mximo de detalles ya que se ha aumentado el poder

de resolucin.
Poder de definicin
Consiste en la capacidad del microscopio de dar imgenes claras de contornos
precisos. Reside en la
correccin de las aberraciones propias de las lentes.
Poder de penetracin
As como el poder de resolucin permite averiguar detalles colocados a la misma
altura, el poder de
penetracin permite averiguar hasta qu lmite estn estructuras situadas en
diferentes planos (i.e., niveles distintos con un mismo enfoque).
a)
b)
c)
d)
e)
f)
Recursos materiales (reactivos, equipo, muestras):

Microscopio ptico.
Laminillas con diferentes tipos celulares.
Laminillas de cromosomas ,clulas tejidos, etc
Papel y lquido para limpieza de lentes de microscopio.
Aceite de inmersin.
Imgenes representativas de las diferentes muestras de clulas tejidos ,etc
En juego de fotografas.
DESCRIPCIN DE LA PRACTICA
a).- El instructor demostrar los elementos ms importantes de un

microscopio ptico.
Se observaran diferentes laminillas bajo el microscopio con el siguiente
procedimiento:
a)
b)
c)
d)
e)
f)
g)
Coloque la laminilla sobre la platina, en el centro, deslizando los clips

sujetadores.
Verifique que el objetivo que est colocado para la visualizacin sea el de
menor aumento.
Coloque mediante el movimiento de la platina la muestra de estudio en el
centro.
Mediante el ajuste macromtrico, y bajo la visin directa de la platina,
acercar la platina al objetivo hasta alcanzar una distancia de 2 mm.
aproximadamente entre el cubreobjetos y el objetivo.
Posteriormente viendo a travs del ocular y usando el ajuste
micromtrico, enfocar la muestra a observar. Ajustar el diafragma para
mejorar la iluminacin.
Una vez observando las caractersticas de la muestra con el objetivo
menor, cambiar el objetivo por el siguiente de mayor aumento. Enfocar
la imagen con el ajuste micromtrico y observar la diferencia.
Barrer la muestra a travs de movimientos de arriba hacia abajo en
forma de ondas o bien horizontalmente, siguiendo las lneas de una S
imaginaria. Familiarcese con estos movimientos.
h)
Cambie nuevamente el objetivo hacia el de mayor aumento. Ajuste

nuevamente la imagen con el ajuste micromtrico y ajuste el diafragma
para mejor iluminacin.
ES IMPORTANTE EL SEGUIMIENTO DE ESTOS PASOS PORQUE DE
ESTO DEPENDE EL XITO DE LA OBSERVACIN AL MICROSCOPIO.
A.
B.
Los alumnos (as) observarn las laminillas que contienen cromosomas

teidos mediante la tcnica para identificacin de bandas G.
El instructor (a) demostrar imgenes representativas de cada una de
las tcnicas avanzadas de microscopa.
Conclusiones: Consignar en el reporte las conclusiones relativas a la

importancia del microscopio ptico en la investigacin biomdica
y prctica clnica.
a) El uso de las diferentes tcnicas de microscopa avanzada.
PROCEDIMIENTO PARA GUARDAR EL MICROSCOPIO
Terminada la observacin hay que cuidar de:
a. Dejar limpios los objetivos y oculares.
b. Dejar limpia la platina.
c. Dejar el microscopio en posicin de reposo que consiste en:
e. Objetivo de menor aumento en posicin de enfoque.
f. Diafragma abierto y condensador en el tope inferior.
Mecanismo de evaluacin:
a) Conducta, actitud y destreza en la prctica
b) Calidad de las notas de su cuaderno de prcticas
c) Calidad del reporte.
Fig. 1. MICROSCOPIO BIOLGICO PTICO.
Partes de un
microscopio ptico
[Escriba
o del
una cita del documento

resumen de un punto
interesante. Puede
situar el cuadro
texto en
cualquier
lugar del
documento.
Utilice la
ficha
de
VII. Sesin de
Laboratorio
*Celula Procariotica
* Celula Eucariotica
de
para
de texto
Herramientas
cuadro de texto
cambiar el
formato del cuadro
de la cita.]
CELULA PROCARIOTICA Y EUCARIOTICA

FUNDAMENTO
La materia viva puede entenderse como el resultado de la interaccin de
componentes, los cuales estn organizados de un modo particular, que la hace
reconocible. De acuerdo con la naturaleza, nmero de unidades constituyentes y
tamao de los componentes es posible reconocer distintos niveles de organizacin
de la materia viva.
El conjunto integrado de procesos generados a partir a partir de la organizacin de
los componentes, que se conoce como la "vida", se materializa en una unidad
fundamental, la clula. Es en la clula donde es posible reconocer, desde el punto
de vista morfolgico, la presencia de agregados supramoleculares y organelos, los
que pueden ser estudiados, ya sea aprovechando algunas de las propiedades de
las macromolculas que las componen, o bien mediante el uso de instrumentos
pticos cuyo poder de aumento y resolucin permite la visualizacin directa de las
estructuras celulares.
Dado que el ojo humano slo es capaz de resolver dos puntos separados por ms
de 0.1 mm (10 m) y como la mayora de las clulas son de tamao mucho menor,
es imprescindible hacer uso del poder de resolucin del microscopio ptico (0.2
m). Los diversos tipos de microscopios de luz se basan fundamentalmente en su
capacidad para detectar pequeas diferencias de ndice de refraccin de las
estructuras celulares. Los colorantes utilizados en citologa e histologa acentan
estas diferencias permitiendo un mayor contraste de las estructuras observadas.
Para estudiar la morfologa celular, es posible estudiar las clulas directamente, in
vivo, o bien, despus de un proceso que implica la muerte celular por medio de
fijacin.
OBJETIVOS
Observar las clulas procariticas
Observar las clulas eucariticas
Determinar las diferencias entre clula procaritica y
La clula eucaritica
CLULA PROCARIOTICA
OBJETIVOS
Conocer y evaluar algunas tcnicas que se utilizan comnmente para observar
clulas procarioticas al microscopio ptico.
REALIZACIN
1. Preparar los frotis bacterianos.
2. Teir con cristal violeta 1min.
3. Lavar con abundante agua el exceso de colorante.
4. Cubrir con Lugol 1min.
5. Lavar con agua el exceso de Lugol.
6. Decolorar con alcohol-acetona o simplemente con alcohol hasta que la
preparacin deje de perder color (30seg)
7. Lavar con abundante agua para eliminar el resto de disolvente.
8. Teir con safranina 1min.
9. Lavar con agua para eliminar el colorante de contraste.
10. Secar la preparacin.
11. Examinar al microscopio fijndose sobre todo en el color de cada
preparacin.
Los tiempos de exposicin a los colorantes son orientativos. Cada vez que se
prepara la batera de colorantes para realizar la tincin Gram presentan algunas
diferencias respecto a los preparados en otro momento, por lo que puede ser
necesario
ajustar
los
tiempos.
En un laboratorio de Microbiologa, cada vez que se preparan los colorantes, se
suelen hacer pruebas con cultivos patrn de los dos tipos (Gram+ y Gram-) para
ajustar as los tiempos y tener la certeza de que el resultado de todas las tinciones
que se hagan mientras duren esos colorantes son fiables.
Otra posibilidad es adquirir el equipo completo de colorantes ya preparados, pero
es mucho ms caro.
CLULA EUCARIOTICA VEGETAL
MATERIALES SUMINISTRADOS AL ALUMNO
Microscopio, colorante, portaobjetos y cubreobjetos, tallo de planta verde, hojas de
afeitar.
CLULAS BACTERIANAS TINCIN GRAM
CLULAS DE CIANOFITAS NOSTOC

DESARROLLO PRCTICO
Algunos mtodos para estudiar la morfologa de la clula.
Examen inmediato. Es la observacin directa al microscopio de luz de tejidos o
clulas sin la utilizacin previa de tratamientos y tcnicas.
Observacin de hojas de Elodea (Elodea sp)
Observe al microscopio hojas de Elodea. En ella reconozca los cloroplastos.
Aumente el nivel de luz y vea cmo los cloroplastos se mueven (Ciclosis). Haga
esquemas. Anote los aumentos. DIBUJE Y ROTULE!!!
. Observacin de una preparacin de epidermis de Tradescantia virgineana. Para

montar su muestra
desprenda la epidermis. La tcnica de desprendimiento se explicar durante la
actividad prctica. Haga esquemas. Anote los aumentos. DIBUJE Y ROTULE!!!
Un estoma corresponde a una abertura pequea en la epidermis de las hojas y
tallos, rodeada por
clulas oclusivas, a travs de la cual difunden los gases. La vacuola es un
organelo limitado por una
membrana (tonoplasto) llena de fluido, situado en el citoplasma de una clula
. Examen mediato. Los tejidos y clulas a observar son procesados previamente
a la observacin.
Observacin de un corte histolgico transversal de tejido vegetal (tallo).
Observe esta preparacin histolgica con los tres aumentos de su microscopio.
Haga un esquema con el
aumento mediano (DIBUJE Y ROTULE). Compare con el examen inmediato y
haga una breve discusin sobre lo observado.
CELULA ANIMAL OOCITO DE ORESTIAS
Clulas Vegetal
- Haga una preparacin fresca de una hoja de Tradescantia virgineana. Observe
las vacolas (Aquellas que estn teidas de un color rosado-violeta, por la
presencia de un pigmento llamado Antociano).
Agregue gotas de agua de mar (solucin hipertnica) en un borde del cubreobjetos
y mediante un trozo de papel filtro aplicado al borde opuesto, extraiga el agua
haciendo penetrar de este modo, el agua de mar a la preparacin.
Observe las clulas. Reemplace el agua de mar por agua destilada usando el
mismo procedimiento anteriormente indicado. Note los cambios en la clula y
explquelos. Esquematice.
CUESTIONARIO
Para responder el cuestionario consulte la literatura necesaria. Recuerde que en
los controles futuros debe conocer la respuesta a estas preguntas.
1. Por qu el agua, siendo una molcula polar, puede difundir libremente a travs
de la membrana plasmtica?
2. Qu funciones puede cumplir la membrana plasmtica?
3. Qu molculas se encuentran participando en la estructura de la membrana

plasmtica?
4. Cules son las diferenciaciones de la membrana que permiten comunicacin
con otras clulas y su entorno?
CLULA VEGETAL CATAFILO DE CEBOLLA
OBSERVACION DE CELULAS ANIMALES

SANGRE
MATERIALES
Microscopio
Portas y cubre-objetos
Soporte de preparaciones
Lanceta
Alcohol
Metanol
Cubeta
Giemsa
Sangre obtenida por un pinchazo en el pulpejo del dedo
TECNICA
1. Limpiar el pulpejo del dedo con una gota de alcohol, hacer una puncin
para conseguir una gota de sangre.
2. Depositar la gota de sangre, en un lado y en el centro de un porta bien

limpio.
3. Seguidamente, con el empleo de un porta de borde esmerilado se hace un
frotis o extensin de sangre.
4.
El porta con el que se hace la extensin debe deslizarse bien colocado y lo
ms perfectamente aplicado en su borde contra el otro porta sobre el que
se hace la extensin. Slo debe pasarse una vez, de forma continua e
ininterrumpida.
5. Es conveniente realizar dos o tres extensiones, con el fin de seleccionar

para la tincin la mejor lograda.
Las extensiones o frotis deben secarse al aire lo ms rpidamente posible.
La desecacin se facilita con movimiento en forma de abanico, nunca
soplando o por calor. La rpida desecacin evita la deformacin de los
glbulos sanguneos.
COLORACION
1. Depositar el porta con la extensin de sangre encima del soporte de
tinciones y ste sobre la cubeta.
2. Dejar caer sobre la extensin unas gotas de metanol y esperar que el
alcohol se evapore, con lo que se consigue el fijado.
3. Depositar cubriendo toda la extensin, unas gotas de Giemsa, evitar la
desecacin y dejar actuar el colorante unos cinco minutos.
4. Lavar la preparacin, hasta que arrastre todo el colorante.
5. Tomando el porta por los cantos secar aireando el porta, o bien al calor muy
lento de la llama del mechero.
OBSERVACION AL MICROSCOPIO
1. Con dbil aumento explorar la preparacin para localizar la zona en la que el
frotis es ms perfecto. Los lugares ms aptos son aquellos en los que la
extensin de los glbulos se ha conseguido en una sola capa, estn bien
teidos y no se han producido precipitados de los colorantes. Cuando se

observe una zona apta, pasar a aumentos ms fuertes.
2. En el campo del microscopio, se vern con un dominio predominante los
glbulos rojos, hemates o eritrocitos , teidos en color rojo. No tienen ncleo y
son ms delgados por el centro que por los bordes. Los glbulos blancos o
leucocitos de identifican fcilmente por la presencia de ncleo. Hay varias
clases de glbulos blancos:
o los linfocitos algo mayores que los glbulos rojos, con un ncleo muy
voluminoso que ocupa casi todo el glbulo, aparece fuertemente teido en
color violeta oscuro.
o los monocitos son los leucocitos mayores, poco frecuentes normalmente,
hay que desplazarse por la preparacin para encontrar alguno. Tienen un
ncleo muy grande y redondeado que aparece teido en color violeta.(Es
bueno que recuerdes su funcin que es la de fagocitosis).
o los polinucleares presentan el ncleo como fragmentado o con aspecto
arrosariado.
o los eosinfilos, con granulaciones abundantes de color rojizo y el ncleo
teido de color azul marino. Estos glbulos aumentan su nmero en caso
de parasitosis o procesos alrgicos.
o los basfilos presentan un ncleo teido de rojo y las granulaciones del
citoplasma de color muy oscuro.
Las plaquetas aparecen como pequeos fragmentos teidas de color violeta.
Estas clulas intervienen en el proceso de coagulacin sangunea.
3. Si la extensin ha salido bien, merece la pena conservarla. Para ello, aadir
una gota de euparal, dpx, u otro producto similar y colocar un cubre-objeto.
4. El nmero promedio de glbulos rojos en el hombre es de 5.000.000 por mm 3
de sangre. La cifra media de glbulos blancos es de 7.000 a 8.000 por mm 3.
Hay por tanto un glbulo blanco por cada 600 700 glbulos rojos. Por lo tanto
para ver todos los tipos de glbulos blancos debes buscarlos en distintos
campos de la preparacin. El nmero de plaquetas es de unas 250,000 por
mm3
VIII. Sesin de
Laboratorio
*Divisin Celular
Mitosis
DIVISIN CELULAR : MITOSIS

FUNDAMENTO:
La divisin celular es un proceso por el cual a partir de una clula madre se
producen dos clulas hijas que gentica, estructural y funcionalmente son iguales
entre s e iguales a la propia clula madre. Ello se debe a que han recibido,
excepto en el caso de procesos anormales, la misma informacin gentica de la
clula madre y, por lo general en la mayora de los organismos la misma cantidad
de citoplasma y orgnulos.
Este fenmeno se produce tanto en procariotas como en eucariotas. En los
procariotas y eucariotas unicelulares o de vida libre la divisin celular es el
proceso por el cual se propaga la informacin gentica y aumenta el nmero de
individuos de la poblacin, mientras que en los organismos pluricelulares la
divisin celular es esencial para el desarrollo del organismo a partir del zigoto y
para la reparacin de las clulas que han muerto por desgaste o por lesiones
ocurridas en los tejidos.
Existen diferencias entre la divisin celular de procariotas y eucariotas derivadas
de la distinta estructura y de la diferente cantidad de ADN que poseen estos tipos
de clulas. En las clulas eucariotas el proceso de divisin es ms complejo
debido a la existencia de un ncleo en el que se almacena la cromatina
condensada en forma de cromosomas que, en algunos casos, pueden ser muy
numerosos.
El mecanismo utilizado para la divisin celular se denomina mitosis, aunque es el
mecanismo que afecta al material gentico. Normalmente este mecanismo se
contina con la divisin del citoplasma denominada citocinesis.
El objeto de la presente prctica es identificar las clulas que se encuentran en
mitosis y las distintas fases de sta mediante la tincin y observacin de
meristemos de raz de cebolla. Una vez identificadas las fases de la mitosis, se
puede calcular el ndice mittico y la distribucin porcentual de cada una de las
fases mitticas de meristemos de raz de cebolla crecidos en diferentes
condiciones. Con estos datos realizaremos un informe a modo de trabajo de
investigacin explicando la metodologa utilizada, los objetivos, resultados y
comentarios al respecto.
CICLO CELULAR
El ciclo celular es una secuencia regular y repetitiva de crecimiento y divisin
celulares que sufren todas las clulas. La duracin de este ciclo es variable y
depende del tipo celular, del organismo y de factores externos como la
temperatura, factores de crecimiento, nutrientes y toxinas.
El ciclo celular consta de cinco fases: G1, S, G2, mitosis y citocinesis (Figura 5.1).
Las tres primeras fases se agrupan en lo que se denomina interfase durante la
cual la clula se prepara para realizar la divisin celular formada por las dos
ltimas fases.
La funcin de las fases de la interfase quedan resumidas de la siguiente forma:
Fase G1.- Durante esta fase se desarrolla una alta actividad bioqumica
cumpliendo con las distintas funciones que la clula presente en el organismo.
Normalmente, en un organismo pluricelular, las clulas, que no se dividen
normalmente salvo en presencia de ciertos factores de crecimiento, se enquistan
en una subfase denominada G0. La fase G0 indica nicamente que las clulas no
se encuentran en un ciclo contnuo de crecimiento y duplicacin. En un organismo
diploide, la cantidad de ADN en el ncleo es de 2n.
Fase S.- Cuando las clulas se encuentran en un ciclo contnuo de crecimiento y
divisin celular o reciben una seal extracelular adecuada, pasan a duplicar la
cantidad de ADN y sintetizar una serie de protenas encargadas de la
compactacin del ADN. Por lo tanto, al final de la fase S, una clula de un
organismo diploide ha pasado a tener una dotacin doble de ADN. No se puede
decir que sea tetraploide (4n) sino que sigue siendo diploide pero con cada uno de
los cromosomas duplicados, las indicaremos como 4c.
Fase G2.- Las clulas han terminado la sntesis de ADN (4c) y se preparan para
sufrir el complejo proceso de la divisin celular. En esta fase se sintetizan las
protenas necesarias para llevar a cabo la mitosis y se concluye la duplicacin y
separacin del centriolo en clulas animales.
ESQUEMA DEL CICLO CELULAR

La regulacin del ciclo celular es muy importante en organismos pluricelulares ya
que un descontrol de la velocidad del ciclo podra descompensar y alterar el
equilibrio funcional del organismo dando lugar a consecuencias tan negativas
como el cncer.
MITOSIS
1.1.Profase
La cromatina comienza a condensarse y espiralizarse formando los
cromosomas. Durante toda la profase los cromosomas van acortndose debido a
este proceso progresivo de espiralizacin. Los cromosomas desde el principio

aparecen formados por dos cromtidas hermanas que son, gentica y
morfolgicamente idnticas. Ambas cromtidas se mantienen unidas por el
centrmero. Mientras la membrana nuclear est intacta y el o los nucleolos sean
visibles, se dice que la clula est en profase.
Al final del periodo profsico el nucleolo o nucleolos se desorganizan y la
membrana nuclear se desintegra. Los cromosomas quedan libres en el espacio
celular. Mientras tanto, en el citoplasma, los centriolos se han duplicado y cada
diplosoma (par de centriolos), ha emigrado a un polo de la clula. Entre ambos se
forma y se extiende el huso acromtico o mittico, constituido por filamentos
(fibras del ster), en los que se insertan los cromosomas por el centrmero y
comienzan a emigrar hacia la placa encuatorial. Este perodo desde que
desaparece la membrana nuclear hasta que los cromosomas se localizan en el
plano ecuatorial se denomina prometafase.
1.2.Metafase
Los cromosomas han alcanzado su mximo grado de espiralizacin. Se disponen
en crculo en la placa ecuatorial con los centrmeros perfectamente orientados,
con cada cromtida hacia un polo celular. Esta orientacin asegura la correcta
separacin en la fase siguiente.
La accin de determinados tratamientos como la colchicina, la colcemida, la
mescalina, la hidroxiquinolena, el bromonaftaleno, el paradiclorobenceno etc..o
agua con hielo, inhiben la formacin de los microtbulos y por tanto la migracin
hacia los polos en anafase. Estos tratamientos se utilizan en citogentica
experimental para acumular clulas en metafase, que resultan apropiadas para el
anlisis cariotpico.
1.3.Anafase
En esta fase las cromtidas de cada cromosoma se separan y emigran hacia los
polos, de manera que a cada uno van 2n cromtidas. Este movimiento se realiza
gracias al huso acromtico. Como ambas cromtidas son idnticas, porque se
formaron por duplicacin de la fase S de la interfase, los polos celulares reciben,
exactamente el mismo material gentico. La anafase concluye cuando todos los
cromosomas han alcanzado los polos.
1.4.Telofase
Las cromtidas han terminado su migracin hacia los polos. La membrana nuclear
se reconstruye alrededor de las cromtidas, los nucleolos vuelven a formarse y las
cromtidas se desespiralizan volviendo a formar la cromatina. Se han formado 2
ncleos hijos.
ETAPAS DE LA MITOS
4 Mitosis2.Citocinesis
La citocinesis es el proceso por el cual el citoplasma de la clula madre queda
distribuido entre las 2 clulas hijas y estas se independizan por la formacin de la
membrana celular. La separacin de las 2 clulas hijas es diferente en clulas
animales y vegetales.
En las clulas animales se produce la plasmocinesis, en la que a partir de la
periferia de la clula el citoplasma se va estrangulando hasta que las clulas hijas
se ponen en contacto.
En las clulas vegetales se forman vesculas membranosas en la zona
comprendida entre los ncleos hijos. Estas vesculas se fusionan unas con otras
dando origen a la membrana plasmtica, quedando entre las membranas el
contenido de las vesculas que constituir la pared celular.
Lamina 5.- Celulas de meristemo radicular de cebolla en interfase
Profase mittica
Anafase mittica
Metafase mittica
Telofase mittica
Clulas de meristemo radicular de cebolla en interface
TRABAJO PRCTICO
Observacin de distintas fases de la mitosis en pices radiculares de cebolla.
1. Obtencin del material.

Se cortan races jvenes de cebolla, aproximadamente unos 20 mm,
comprobando que conservan el pice radicular, que se distinguir por el cambio
de color.
2.Fijacin.
Se prepara la mezcla fijadora. Existen diversos fijadores:
-3 Etanol:1 Actico (Carnoy).
-3 Metanol:1Actico
-7 Metanol:3 Actico
-3 Metanol:1 Propinico
-4 Etanol:1 Actico:1 Cloroformo
Segn el fijador utilizado el tiempo y temperatura de la fijacin vara. Las raicillas
de cebolla se han fijado en 3 Metanol:1 Actico a 4C.
3.Conservacin
Se lava el material varias veces con la mezcla fijadora y se conserva a 4C.
4.Preparacin
Las raicillas de cebolla que se hallan en mezcla fijadora se hidrolizan en HCl 1N
durante 10 minutos a 60C.
Transcurridos los 10 minutos de la hidrlisis, se lavan las raicillas en agua
destilada y se colocan las raicillas sobre una gota de orcena actica o de orcena
lactopropinica para su tincin, durante 10 a 15 minutos. A continuacin se realiza
la preparacin. Primeramente, se toma una raicilla y se coloca sobre un vidrio
portaobjetos y se corta el pice radicular con un bistur. Para realizar esta
operacin se utiliza la lupa. Este pice radicular se corta a su vez en 4 fragmentos,
se hace un corte longitudinal y otro transversal. Se separan los cuatro trozos y a
continuacin se aade una gota del colorante. Seguidamente se coloca un
cubreobjetos sobre el material que deseamos observar. Con la ayuda de un
bastoncillo de madera se golpea y extiende el material. A continuacin se presiona
con el dedo pulgar y se retira el exceso de colorante con un papel de filtro.
5.Observacin.
Se observa al microscopio empezando con el objetivo de menor aumento. No es
necesario utilizar el objetivo de inmersin. Se deben distinguir y dibujar, tal y como
se ven, todas las fase s de la mitosis.
Cuestionario de practicas
1.Dibuje cada una de las distintas fases de la mitosis, adems de la interfase.
2.Por qu se encuentra mayor nmero de clulas en interfase que en divisin en
las preparaciones de raz de cebolla?
3.La cebolla Allium cepa es una especie vegetal con 2n=16 cromosomas
Cuntas cromtidas recibe cada polo en anafase?
4.Cuntas cromtidas tiene uno de los cromosomas de cebolla en telofase?
5.Un individuo diploide y homocigtico AA, Cuntas copias del alelo A tiene en el
periodo G1 de la interfase y cuntas en metafase?
6.Un individuo diploide y heterocigtico Aa, Cuntas copias del alelo A tiene en el
periodo G1 de la interfase y cuntas en metafase?
6.Existe alguna diferencia entre endomitosis y endorreduplicacin?
7.Por qu se bloquea la continuacin de la mitosis en metafase en especies que
presentan haplocromosomas?.
IX. Sesin de
Laboratorio
Meiosis
MEIOSIS
Fundamento:
La meiosis es un proceso celular, ligado a la reproduccin sexual, por el cual, la
clula madre de naturaleza diploide, da origen a los gametos de naturaleza
haploide, de tal manera que en la fecundacin se reestablece el nmero diploide
de cromosomas. As, mientras la mitosis es un proceso de divisin celular con
formacin de dos ncleos hijos con el mismo nmero de cromosomas que la
clula original, en la meiosis en cambio hay dos divisiones celulares con reduccin
del nmero de cromosomas a la mitad.
Fases de la meiosis
La meiosis es un proceso citolgico que comprende dos divisiones celulares. En la
primera divisin meitica ocurre una serie de intercambios de material gentico
entre los cromosomas homlogos. Este fenmeno es un proceso complejo que
comprende una larga profase en la que, para su mejor estudio y comprensin, se
distinguen los estados: Leptoteno, Cigoteno, Paquiteno, Diploteno y Diacinesis.
Profase I
Leptoteno. El comienzo de la profase I de la clula se caracteriza porque los
cromosomas que se encuentran completamente desenrollados en el ncleo,
debido a los procesos de sntesis de los momentos premeiticos, comienzan a
estructurarse segn un doble modelo de espiralizacin, que conduce en definitiva
a un aumento del volumen nuclear.
Cigoteno. La clula diploide presenta en estos momentos 2n cromosomas
homlogos completamente espiralizados (contrados), los cuales se aparean cada
uno con su homlogo. Es una sinapsis perfecta, crommero a crommero,
formando por tanto n bivalentes.
Paquiteno. En este estado se terminaliza el apareamiento de los cromosomas
homlogos n-bivalentes se visualizan engrosados, y cada uno de los cromosomas
compuestos de dos cromtidas, hace que el bivalente se presente como una
ttrada.
Diploteno. Las dobles parejas de cromtidas homlogas comienzan a separarse,
permaneciendo unidas por ciertos puntos que son los quiasmas, los cuales
constituyen la visualizacin citolgica del mecanismo de intercambio de material
gentico denominado sobrecruzamiento (crossing-over).
Diacinesis. En este estado las ttradas aparecen muy condensadas con bucles
unidos por los quiasmas; al mismo tiempo que se terminalizan hacia los extremos
de la ttrada
Metafase I
A lo largo de la profase I, los centriolos duplicados se orientan dos a dos, hacia
cada uno de los polos de la clula, visualizndose ya en la metafase I el aparato
mittico, al mismo tiempo que las ttradas se disponen en la placa ecuatorial del
aparato mittico.
Anafase I
En este estado ocurre la rotura y desaparicin de la membrana nuclear y la
migracin de n cromosomas a cada polo. Es importante sealar en primer lugar
que la reparticin de n cromosomas homlogos a cada polo ocurre al azar, y en
segundo lugar que a diferencia con la mitosis, en esta primera divisin meitica no
hay divisin longitudinal del centrmero, y por lo tanto separacin de las
cromtidas, sino que stas permanecen unidas por sus respectivos centrmeros.
Por lo tanto, esta divisin meitica I es una divisin reduccional
Telofase I
Ocurre la individualizacin de las dos clulas de la divisin meitica I, con la
aparicin de la membrana plasmtica que las separa, y la reaparicin de la
membrana nuclear.
Figura 6. Clulas del testculo del saltamontes Chorthippus jucundus teidas

con orcena lacto-propinica. A.- Ncleo de una espermatogonia en interfase. El
cromosoma sexual ha sido sealado con una X. B.- Metafase espermatogonial. C.Ncleo prepaquitnico. Posiblemente corresponde a un ncleo en leptotene. D.Paquitene medio. E.- Paquitene tardo. F.- Diplotene. Se ha sealado la posicin
de los quiasmas (cabezas de flecha) en un
bivalente monoquiasmtico (M7), en uno con dos quiasmas (M4) y en un tercero
que presenta cuatro (L1
Divisin meitica II
Entre la telofase I y el comienzo de la segunda divisin meitica, a diferencia con
la mitosis, no hay un perodo de sntesis y duplicacin del ADN, por lo dems la
divisin meitica II, tiene lugar como la mitosis normal en cada una de las clulas
haploides (meiocitos de segundo orden), resultantes de la divisin meitica I.
Profase II
En este estado los centriolos aparecen duplicados y migran dos a dos hacia los
polos, constituyendo el huso mittico.
Metafase II
Los n cromosomas de cada una de las clulas hijas, se disponen en la placa
ecuatorial del huso, al mismo tiempo que desaparece la membrana nuclear
Anafase II
Ocurre la divisin longitudinal del centrmero y reparticin al azar de n cromtidas
a cada uno de los polos, de modo que las cromtidas hermanas (que no sern
idnticas por el sobrecruzamiento) van siempre a lados opuestos.
Telofase II
En esta fase tiene lugar la individualizacin de las cuatro clulas hijas, con
aparicin de las membranas plasmticas y nuclear. Ahora bien, a diferencia con la
mitosis, las dos clulas resultantes de cada meiocito de segundo orden son
diferentes, porque sus cromtidas han intercambiado material gentico
previamente en la profase I. A continuacin, ocurre la desespiralizacin de las
cromtidas y el periodo de sntesis y duplicacin del ADN. No obstante, se
presentan numerosas excepciones a este esquema general de la meiosis, segn
sean los ciclos haplontes, diplontes o diplohaplontes de las especies, o en una
misma especie en la espermatognesis y ovognesis.
Espermatocitos de Chorthippus jucundus teidos con orcena lacto-propinica.

A.- Diplotene
tardo-diacinesis. B.- Metafase-I. C.- Anafase-I. El cromosoma sexual X migra
completo al polo superior de esta
clula. D.- Telofase-I. E.- Intercinesis/Profase-II. La clula de la parte superior de
la fotografa posee el
cromosoma X, mientras que la de la parte inferior carece de l.
Clulas del testculo de Chorthippus jucundus teidas con orcena lactopropinica. A.- Metafase-II. Se
observa la disposicin radial de los cromosomas. B.- Anafase-II. Las cromtidas
estn comenzando a separarse. C.Anafase-II. D.- Telofase-II. E.- Espermtidas tempranas. La situada en la parte
superior de la fotografa posee el
cromosoma sexual (X), mientras que la de la parte inferior carece de l. F,G,HEspermtidas en diferentes
estados de maduracin: redondeada, lanceolada, alargada
1.- TECNICA DE PREPARACION MEIOTICA EN TESTICULOS DE

SALTAMONTES
Seleccionamos testculos de ortpteros fijados en etanol y cido actico 3:1 al
menos con una semana de antelacin y los colocamos en agua destilada para su
hidratacin durante 10 minutos. A partir de este momento conviene realizar todo el
proceso en el mismo recipiente, preferiblemente plstico y no vidrio. No utilizar
ningn elemento metlico.
Hidrolizar los testculos en HCl 5N durante 30 min. Transcurrido este tiempo se
lavan abundantemente en agua destilada. Posteriormente se introducen en
colorante de orceina acetica durante 10 minutos a temperatura ambiente. Este
proceso es preferible realizarlo en oscuridad. Se lavan los testculos, que tendrn
un color rojo, en agua sulfurosa y posteriormente en agua del grifo, donde se
almacenarn hasta la confeccin de los aplastados.
Separamos un par de tbulos seminferos del testculo y los colocamos sobre un
portaobjetos. Sobre ellos se coloca inmediatamente una gota de cido actico al
50% en agua destilada y se deja un par de minutos (Cuidado, no dejar secar el
material!).
Se coloca sobre el tbulo un cubreobjetos y utilizando la punta de un lpiz y con
presin muy suave se dispersa el material.
Con un trozo de papel de filtro se elimina el actico que ha rebosado por los
laterales del cubreobjetos y, con cuidado de no moverlo, se realiza el aplastado
presionando fuertemente con el dedo pulgar sobre una superficie completamente
plana.
Observar los aplastados en el microscopio tratando de determinar las diferentes
etapas del proceso meitico, as como las espermtidas en los diferentes estados
de la espermiognesis.
TCNICA DEL GOTEO Y COLORACIN GIEMSA
ab.c.d.e.f.g).-
Con ayuda del microscopio estereoscopio, aislar los testculos de

saltamontes.
Fijar los testculos en solucin carnoy por 5 a 10 minutos.
Disgregar los testculos ,con aguda de estiletes y suspender en solucin de
Tripsina.
Incubar por 15 minutos .
Colocar la suspensin celular en tubos y centrifugar a 1000 r.p.m. por 5
minutos
Decantar la tripsina y resuspender en carnoy
Centrifugar a 1000 r.p.m. por 5 minutos.
h.i.j.-
Eliminar el carnoy. y agregar al paquete celular 2 0 5 ml de fijador, agitar

con la pipeta ,hasta homogenizar la suspensin celular.
Dejar caer una gota de suspensin en una lamina y secar al aire .
Colorear con Giemsa al 2% por 10 minutos
CUESTIONARIO
1-Dibuje cada una de la fases de la meiosis

2-Qu es un bivalente? En qu fase o fases se observa?.
3-Qu diferencia existe entre una anafase I y una anafase II?
4-La cebada tiene 2n = 14 cromosomas, cuntos cromosomas tiene una clula
de cebada en una metafase de una mitosis, en una metafase I y II de una
meiosis?
5-Si tiene una preparacin en la que observa clulas anafsicas en las que se
separan cromtidas cmo sabr si se trata de una anafase de una mitosis o de
una anafase II de una meiosis?
Diplonema de saltamontes
X. Sesin de
Laboratorio
* Espermatogenesis.
ESPERMATOGENESIS
Fundamento:
Existe un proceso celular destinado a producir clulas idnticas genticamente: la
mitosis. Por el contrario,la mayora de los organismos vivos utilizan parte de su
vida o tejidos especializados para producir clulas esencialmente diferentes de las
progenitoras en cuanto a las
combinaciones posibles de su material hereditario.
Este mecanismo celular est enclavado en un proceso especial de divisin
celular: la meiosis.
En organismos superiores la meiosis tiene lugar en los rganos sexuales tanto
masculinos como femeninos, dentro de un proceso general que se denomina
respectivamente espermatognesis y ovognesis. Tanto uno como otro no slo
producen clulas diferentes genticamente, sino que reducen el nmero de
cromosomas de las clulas a la mitad y las modifica para poder ser fecundadas o
fecundar dependiendo del sexo donde se realice.
ESPERMATOGNESIS
Ham, discpulo de Leuwenhoek, observa por primera vez en 1677 en el semen
humano la presencia de unos "animculos" mviles que muchos cientficos de la
poca consideraron como parsitos o simbiontes. En 1780 Spallanzani comprueba
que si del semen eran eliminados estos cuerpos mviles, ste perda su capacidad
fertilizante. Pero fue en la segunda mitad del siglo XIX cuando se concluy que
estos "animculos" eran los gametos masculinos, y se les denomin
espermatozoides.
De esta forma se estableci que los espermatozoides se originaban en los
testculos y que posean ncleo y citoplasma: eran clulas.
Desde este momento y hasta nuestros das la morfologa de los espermatozoides
y de las clulas que les dan origen ha sido ampliamente estudiada. En una
primera etapa de la citologa clsica, empleando cortes en parafina, no slo se
describen gran cantidad de formas distintas de espermatozoides, sino que tambin
se pone gran inters en el estudio de los tejidos en los que se originan.
Posteriormente, con el avance de la tcnica y la aparicin del microscopio
electrnico, se determina la ultraestructura de los espermatozoides y de las
clulas intermedias en su formacin.
La introduccin de nuevas tcnicas de estudio como pueden ser las citoqumicas
para microscopa ptica y electrnica, la aplicacin de microscopa de barrido, el
empleo de anticuerpos marcados a nivel morfolgico y ultraestructural, la
microscopa confocal o metodologas puramente bioqumicas han ayudado a un
mejor conocimiento del proceso de formacin de los gametos masculinos, la
espermatognesis.
Desde antiguo recibi gran atencin el proceso de cmo se formaban estas

clulas,
ya que a partir de una clula prcticamente indiferenciada, la espermatogonia, se
produce una complicada y a veces dramtica serie de cambios morfofuncionales
que desembocan en la formacin del espermatozoide: la espermatognesis.
Podramos definir la espermatognesis como el conjunto de cambios que ocurren
en una clula prcticamente indiferenciada, espermatogonia, y que tienen como
final la formacin de una clula altamente especializada, con un nmero n de
cromosomas recombinados, una carga c de ADN y que es capaz de fecundar: el
espermatozoide.
Teniendo en cuenta los cambios que se producen en la espermatogonia, y por
tanto los nuevos tipos celulares y los procesos en los que participan, podemos
dividir a la espermatognesis como proceso en las siguientes etapas:
a) Proliferacin.
b) Crecimiento y meiosis: recombinacin, divisin y reduccin.
c) Espermiognesis
A) ESPERMATOGONIAS B) Y C) ESPERMATOCITOS
D)ESPERMATIDES
a) Proliferacin. Este perodo comprende el desarrollo de las espermatogonias,

las cuales se dividen no slo aumentando la poblacin celular sino manteniendo la
poblacin troncal existente. Las divisiones de poblacin espermatogonial llegan en
algunas especies hasta ocho. As, partiendo de una espermatogonia inicial, van
surgiendo por divisiones sucesivas grupos de ellas que, normalmente, se
encuentran interconectadas por sus citoplasmas. El nmero final de gonias
presentes en un cisto, indicar por lo tanto las veces que se han dividido a partir
de la espermatogonia primordial. De esta forma un cisto con doscientas cincuenta
y seis gonias revela la existencia previa de ocho divisiones mitticas.
En esta fase de divisiones rpidas y continuas es fcil observar el cariotipo de la
especie.
b) Crecimiento y meiosis. La meiosis se caracteriza por presentar dos divisiones
sucesivas del material hereditario (Divisin I y Divisin II) precedidas por un nico
perodo S (de sntesis de ADN). La profase de la primera divisin meitica es
extremadamente larga pudiendo durar desde das (en machos) hasta aos
(generalmente en hembras). Para su estudio, se ha dividido en base a la
morfologa del ncleo celular en varias etapas:
. Durante la prometafase los bivalentes experimentan movimientos de congresin
hasta alinearse finalmente en placa en la metafase. En la primera anafase
meitica los cromosomas homlogos, que previamente se han recombinado,
migran completos a polos opuestos. Tras una interfase muy corta y a veces
inexistente denominada intercinesis, se efecta la segunda divisin meitica.
sta es esencialmente igual que una divisin mittica convencional con la
excepcin de que cada clula solamente posee un complemento cromosmico de
la especie ya recombinado. El resultado final es la formacin, por cada una de las
clulas que entr en la profase I, de cuatro clulas con n cromosomas y una
carga "c" de ADN: las espermtidas.
c) Espermiognesis. Se conoce con este nombre a toda la serie de cambios
tanto citoplsmicos como nucleares que sufren las espermtidas hasta convertirse
en espermatozoides. Estos cambios morfofuncionales son muy variables y
dependen de la especie estudiada. No obstante, y como rasgos generales,
podemos decir que se centran en la compactacin de la cromatina en el ncleo, la
prdida de casi la totalidad del citoplasma, la gnesis de una vescula acrosmica
y la adquisicin de un aparato locomotor por parte de la clula.
DESARROLLO DE LA PRCTICA
En esta prctica se utilizarn dos tipos diferentes de material de trabajo as como
dos metodologas completamente distintas. Por una parte se analizarn las
diferentes fases de la espermiognesis en preparaciones obtenidas mediante la
tcnica de aplastado a partir de testculos de ortpteros fijados en etanol y cido
actico en proporcin 3:1. Por otra, estudiaremos la organizacin de las clulas
que cursan la espermatognesis y el tbulo seminfero en cortes de testculo de
saltamontes fijado con Bouin e incluido en parafina.
Seleccionamos testculos de ortpteros fijados en etanol y cido actico 3:1 al
menos con una semana de antelacin y los colocamos en agua destilada para su
hidratacin durante 10 minutos. A partir de este momento conviene realizar todo el
proceso en el mismo recipiente, preferiblemente plstico y no vidrio. No utilizar

ningn elemento metlico.
Hidrolizar los testculos en HCl 5N durante 30 min. Transcurrido este tiempo se
lavan abundantemente en agua destilada. Posteriormente se introducen en
reactivo de Schiff durante 30 minutos a temperatura ambiente. Este proceso es
preferible realizarlo en oscuridad. Se lavan los testculos, que tendrn un color
fucsia, en agua sulfurosa y posteriormente en agua del grifo, donde se
almacenarn hasta la confeccin de los aplastados.
Separamos un par de tbulos seminferos del testculo y los colocamos sobre un
portaobjetos. Sobre ellos se coloca inmediatamente una gota de cido actico al
50% en agua destilada y se deja un par de minutos (Cuidado, no dejar secar el
material!).
Se coloca sobre el tbulo un cubreobjetos y utilizando la punta de un lpiz y con
presin muy suave se dispersa el material.
Con un trozo de papel de filtro se elimina el actico que ha rebosado por los
laterales del cubreobjetos y, con cuidado de no moverlo, se realiza el aplastado
presionando fuertemente con el dedo pulgar sobre una superficie completamente
plana.
Observar los aplastados en el microscopio tratando de determinar las diferentes
etapas del proceso meitico, as como las espermtidas en los diferentes estados
de la espermiognesis.
El anlisis de cortes de parafina supone la realizacin de tres procesos: la
inclusin del material en un medio slido, el corte y desparafinado del mismo y la
tincin de los cortes (ver el anexo).
Las secciones de testculo se observarn en el microscopio determinando la
disposicin de los tbulos seminferos en el conjunto, as como las zonas apicales
y basales de los tbulos.
Rafaga de espermatozoides de saltamontes
e
XI. Sesin d
Laboratorio.
liana
e
d
n
e
m
a
i
c
Heren
sanguneo
po
Factor y Gru
HERENCIA MENDELIANA : FACTOR Y GRUPO

SANGUNEO.
Fundamento:
El fundamento de esta prctica se encuentra en los glbulos rojos. Los glbulos
rojos o hemates son clulas sanguineas, por lo tanto todos los tenemos. Sin
embargo, en la membrana de los glbulos rojos pueden existir unas protenas
especiales: son las glucoprotenas A y B. As, un glbulo rojo puede tener protena
A, protena B, tener ambas o no tener ninguna. De manera que un individuo tendr
grupo sanguneo A si sus glbulos rojos tienen la glucoprotena A en su
membrana, siguiendo el mismo criterio para el resto de los grupos (si no existe
protena, entonces ser de grupo sanguineo O). Estas protenas corresponderan
a lo que denominan antgenos.
Ahora bien, en el plasma sanguineo tenemos anticuerpos. Evidentemente, un
individuo del grupo A no podr tener anticuerpos anti-A, pues sto no sera viable
(la sangre coagulara). As :
los individuos A tendrn anticuerpos anti-B

los individuos B tendrn anticuerpos anti-A
los individuos AB no tendrn anticuerpos de este tipo
los individuos O tienen los dos tipos de anticuerpos.
Grupo sanguineo
AB
Glbulos rojos
En la membrana
En el plasma
Antgeno A
Anti-B
Antgeno B
Anti-A
Antgenos A y No antgenos
B
No anticuerpos
Anti-A y
Anti-B
De la misma manera, el factor Rh es otra protena que existe en los glbulos rojos
de algunas personas. Su nombre viene del mono en el que fue descubierta, el
macacco rhesus. El factor Rh positivo es un factor hereditario dominante.
Este asunto tiene especial importancia en donaciones de sangre. Como hemos
visto, un individuo A tiene en su plasma anticuerpos anti-B, as que no podr
recibir sangre de un individuo B, pues estos anticuerpos provocaran la
coagulacin de la sangre del donante en los vasos sanguineos de la persona
receptora.
En la siguiente tabla vemos las compatibilidades a la hora de donar y recibir
sangre.
Como vemos, el grupo AB puede recibir de cualquier otro grupo y de s mismo, as
que se llama "receptor universal". El grupo O ,sin embargo, puede donar a
cualquier grupo, as que se conoce como "donante universal"
RECEPTOR
D
grupo A grupo B grupo AB grupo O
O grupo A
SI
NO
SI
NO
N
NO
SI
SI
NO
A grupo B
N grupo AB
NO
NO
SI
NO
T
SI
SI
SI
SI
E grupo O
OBJETIVOS
1. Que cada alumno y alumna del grupo conozca su grupo sanguineo y el
factor rh.
2. Presenciar la tcnica que se utiliza para determinar el grupo sanguineo.
(Esta determinacin debe ser realizada por el profesor o profesora)
3. Interpretar dicha tcnica
MATERIALES
Solucin anti-A
Solucin anti-B
Solucin anti-D(anti Rh)
Material punzante estril

Algodn
Agua oxigenada
Tarjetas de identificacin
Una gota de sangre
TECNICA
1. Colocar en la tarjeta una gota se suero anti-A, una de anti-B, una mezcla de
anti-A y anti-B, y una gota de anti-D, cada una en su casilla
correspondiente, como se indica en la FIGURA 1.
FIGURA 1
2. Pinchar la yema del dedo, previa desinfeccin con alcohol o agua
oxigenada. Depositar una gotita de sangre en cada casilla y mezclar con los
sueros. FIGURA 2.
FIGURA 2
3. Observar los resultados. El grupo sanguineo del individuo corresponder
con el de la casilla en la que la sangre haya coagulado. Si el individuo es
del grupo AB, la sangre coagular en las tres primeras casillas. Adems, si
la sangre coagula en la casilla "anti-D", el individuo ser Rh positivo, de lo
contrario
ser
Rh
negativo.
Personalmente, prefiero hacer la determinacin del factor Rh en un porta,
en el que puedo observar mejor la coagulacin sanguinea. FIGURA 3.
FIGURA 3
En las tarjetas de la
FIGURA 4, se puede observar
el aspecto que presentan dos
casos opuestos. En la tarjeta
superior se observa que no
existe coagulacin en ninguna
casilla. Las tres primeras
corresponden a los sueros del
grupo sanguineo, por lo que
interpretamos que esta
persona pertenece al grupo
O, la cuarta es la del factor
Rh, y al no existir coagulacin
interpretamos que es Rh
negativo.
En la tarjeta inferior, vemos
coagulacion en todas las
casillas, por lo que de una
forma similar interpretamos
que el alumno es del grupo
sanguineo AB y Rh positivo.
(Nota: El grupo sanguineo AB
es poco frecuente, y en el
anlisis a 45 alumnos y
alumnas, solamente sali en
una alumno)
FIGURA 4
Grupo sanguineo
AB
Glbulos rojos
En la membrana
Antgeno A
Antgeno B
Antgenos A y No antgenos
B
Anti-A y
Anti-B
De la misma manera, el factor Rh es otra protena que existe en los glbulos rojos
de algunas personas. Su nombre viene del mono en el que fue descubierta, el
macacco rhesus. El factor Rh positivo es un factor hereditario dominante.
En el plasma
Anti-B
Anti-A
No anticuerpos
Este asunto tiene especial importancia en donaciones de sangre. Como hemos

visto, un individuo A tiene en su plasma anticuerpos anti-B, as que no podr
recibir sangre de un individuo B, pues estos anticuerpos provocaran la
coagulacin de la sangre del donante en los vasos sanguineos de la persona
receptora.
En la siguiente tabla vemos las compatibilidades a la hora de donar y recibir
sangre.
Como vemos, el grupo AB puede recibir de cualquier otro grupo y de s mismo, as
que se llama "receptor universal". El grupo O ,sin embargo, puede donar a
cualquier grupo, as que se conoce como "donante universal"
RECEPTOR
D
grupo A grupo B grupo AB grupo O
O grupo A
SI
NO
SI
NO
N
NO
SI
SI
NO
A grupo B
N grupo AB
NO
NO
SI
NO
T
SI
SI
SI
SI
E grupo O
XII. Sesin de
Laboratorio
Experimentos con la
mosca de la fruta.
EXPERIMENTOS CON LA MOSCA DE LA FRUTA

Fundamento:
La mosca del vinagre, Drosophila melanogaster, es un organismo eucaritico de
experimentacin en Gentica. Tiene las siguientes ventajas: 1) un ciclo vital
relativamente corto a temperatura ambiente, entre 10-14 das; 2) es fcil de criar
en botellas o tubos de vidrio con un medio de cultivo barato y sencillo de preparar;
3) una gran productividad, una pareja produce varios cientos de descendientes; 4)
un nmero cromosmico bajo, 4 pares de cromosomas; y 5) un gran nmero de
caracteres heredables que afectan la morfologa del adulto.
Los objetivos de este prctico es introducir al estudiantes en aspectos de la
biologa y gentica en D. melanogaster. Se realizarn cruzamientos genticos
para estudiar el modo de herencia,ubicacin y mapeo de un locus incgnita en D.
melanogaster. El practico permitir elaborar un informe final en base a las
observaciones y el anlisis de los datos de los cruzamientos realizados
en clase y discutidos por el grupo participante. Dada la dinmica de los prcticos
de Drosophila, se recomienda LEER el protocolo antes de asistir a clase. Se
trabajar en grupos de tres a cuatro estudiantes.
OBJETIVOS
En este prctico se observar distintos aspectos del
_ objetivos generales del prctico
_ ciclo de vida,
_ reconocimiento de los sexos,
_ comportamiento sexual,
_ observacin de mutantes que afectan el fenotipo del adulto, y
_ tcnica de anestesia, manejo y observacin de las moscas.
Ciclo de Vida
D. melanogaster (Clase: Insecta; Orden: Diptera) es un insecto holometbolo, su
ciclo vital consta de cuatro estadios: huevo, larva, pupa y adulto (o imago)
(FIGURA 1).
Las hembras comienzan a depositar los huevos alrededor del tercer da de vida
del imago y contina hasta su muerte. Los huevos son puestos en la superficie del
alimento (o medio de cultivo). A simple vista los huevos se ven como un objeto
pequeo, blanco y oblongo, con un par
de filamentos anteriores. El desarrollo del huevo comienza con la fecundacin y
consta principalmente de la formacin de los tejidos larvales. Despus de un da o
dos, las larvas emergen de los huevos y comienzan a introducirse en el medio de
cultivo. Como la cutcula de los insectos no es elstica, la larva muda

peridicamente. Existen tres estados larvales, separados por las mudas
correspondientes. Durante el tercer estadio larval, la larva se alimenta hasta estar
pronta a pupar, en ese momento, se dirige fuera del medio de cultivo hacia un
lugar seco donde se detiene.
.Durante el estadio pupal ocurre una reorganizacin de tejidos (metamorfosis) y a
los 4 das emerge el adulto de la cubierta pupal. En buenas condiciones de cultivo
y a 25C transcurren alrededor de 10 das desde la puesta de los huevos hasta la
emergencia del imago; el adulto puede
sobrevivir y permanecer frtil por un mes. Si la temperatura permanece entre 22C
y 27C, se producir una nueva generacin de moscas en aproximadamente 2
semanas (por ello el practico se realiza cada 15 das, para sincronizar con el ciclo
de vida).
Medio de cultivo
Las moscas se pueden cultivar en un medio compuesto por agar-levadura-harina
de maz-glucosa. A la papilla se le agrega un conservante conocido como nipagin.
Este medio se dosifica en tubos o botellas de vidrio o plstico.
Los tubos son identificados con el tipo de cruzamiento, fecha ynombre del grupo.
Procedimiento para anestesiar las moscas
Para adormecer las moscas utilizaremos los vapores de trietilamina (=TE). Se
proceder as:
1) Dosifique entre 10 y 15 gotas de trietilamina (TE) en una piseta con algodn
dentro. Note que los vapores que saldrn estarn impregnados de fuerte olor.
2) Transfiera las moscas a un tubo de plstico (Falcon) anestesiador (=TA),, tape
el mismo con un tapn de polifom y dosifique vapores de TE dentro de dicho tubo
por el orificio del tapn.
3) Una vez que TODAS las moscas estn inmovilizadas, depostelas
inmediatamente sobre una tablilla. Las moscas permanecern anestesiadas por
45. La exposicin prolongada a TE puede matar las moscas y se presentarn con
alas y patas extendidas en ngulo recto del cuerpo y
Mutante incgnita en D. melanogaster 2006
4 algunos caracteres fenotpicos, como los ojos, se oscurecern y deformarn, en
tal caso descarte las moscas muertas.
4) En caso de utilizar las moscas anestesiadas para realizar un cultivo o
cruzamiento, disponga el frasco de cultivo en forma horizontal hasta que las
moscas se despierten.
Identificacin de los sexos
Se pueden utilizar varios criterios para distinguir los sexos en los adultos ( FIGURA
2)
1. Tamao del adulto. La hembra es generalmente ms grande que el macho.
2. Forma del abdomen. El abdomen de la hembra se curva y termina en punta; el
abdomen del macho es redondeado y ms corto.
3. Marcas en el abdomen. Bandas claras y oscuras alternan en la porcin posterior
de la hembra; mientras que en el macho estn fusionados y forman una banda
oscura.
4. Apariencia del peine sexual. En los machos existe un pequeo penacho de

setas en el segmento basal del tarso en el primer par de patas llamado peine
sexual, es el nico carcter sexual secundario que diferencia los machos jvenes
de las hembras. El "peine sexual" tambin sirve para sexar individuos en pupas.
5. Genitalia externa del abdomen. La genitalia es un carcter sexual primario y
caracterstico de cada sexo. En las hembras se encuentra el ovipositor en la punta
del abdomen. En el macho existen ganchos pigmentados, ordenados en forma
circular y localizados en el extremo caudal.
6. rganos sexuales durante el estadio larval. Los sexos en larvas se diferencian
por el tamao de los testculos (ms grandes) que los ovarios ubicados en el tercio
posterior de la larva y distinguidos a travs del tegumento en larvas de tercer
estadio. En moscas recin emergidas de la carcasa pupal, el color es grisceo, las
bandas dorsales del abdomen se oscurecern ms tarde, las alas pueden no estar
extendidas y aparecern como una estructura oscura y hmeda, las alas luego se
secan y despliegan. El proceso se acelera bajo el calor de la luz del microscopio.
Podrn ver las alas desplegadas en un perodo de 5-10 minutos. Utilice un pincel o
esptula para mover las moscas.
Comportamiento sexual
Todos los insectos muestran una compleja repuesta a estmulo sexual; Drosophila
no es la excepcin.
El apareamiento comienza con el golpeteo del macho sobre el abdomen de la
hembra, con su pata
anterior, cono conocido como la primera respuesta del cortejo del macho hacia la
hembra. Este es el modo de identificar su propia especie. Se aproxima a la
hembra desde adelante y realiza crculos
alrededor de ella efectuando medias vueltas. Extiende un ala que hace vibrar por
unos segundos. Si la hembra es receptiva resulta la cpula. Los espermatozoides
del macho son depositados en el tero de la hembra y retenidos all en el
receptculo seminal y la espermateca. Puede existir ms de un apareamiento.
Cmo podemos observar el cortejo de Drosophila melanogaster?
Para observar el comportamiento de cortejo, se debe emplear hembras vrgenes
ya que el macho puede aparearse muchas veces. Para ello se les proporcionarn
hembras vrgenes y machos jvenes. Observe las diferentes etapas del cortejo y
la copula.
Procedimiento para observar las moscas al microscopio
Mutante incgnita en D. melanogaster - 2006
5
Ajuste el microscopio MENOR aumento, haga FOCO. Si es necesario, aumente la
magnificacin.
Coloque las moscas anestesiadas en fila horizontal sobre la tablilla blanca.
No coloque la luz muy cerca de las moscas, el calor excesivo las deshidratar y
acabar
matndolas.
Identifique la morfologa de las moscas y el reconocimiento de los sexos con la
ayuda de la FIGURA 2 Y 3.
Cabeza
La cabeza est compuesta de seis segmentos fusionados.
1. Antenas, cada una consiste de tres segmentos

2. Aristas. ramificadas y surgiendo cerca de la base del segmento distal de cada
antena.
3. Proboscis. lengua.
4. Ojos compuestos, constituidos por un gran nmero de facetas separadas
(omatidia).
5. Ocelos, ojos simples en nmero de tres ubicados entre los ojos compuestos
sobre la superficie dorsal de la cabeza.
6. Setas. Vibrillas, orbitales, ocelares, verticales, postverticales.
Torax
El trax est compuesto de tres segmentos fusionados.
1. Protrax, consiste de hmeros pares, y el primer par de patas (cada pata
consiste de coxa,trocnter, fmur, tibia y 5 articulaciones tarsales; recuerde que el
"peine sexual" est presente solamente en el segmento proximal del tarso en los
machos).
2. Mesotrax, consiste del mesonoto ubicado dorsalmente y el escutelo, la
mesopleura ubicada lateralmente, la pteropleura y la esternopleura; las alas
(observe la posicin general de las venas longitudinales y de los nudos); y el
segundo par de patas.
3. Metatrax, consiste en el mesonoto, hipopleura y los balancines (alas
posteriores modificadas) y el tercer par de patas.
4. Espirculos torcicos, en nmero de dos.
5. Setas: dorsocentrales, notopleurales, presuturales, supra-alares, postalares,
escutelares.
Abdomen
El abdomen consiste de siete u ocho segmentos visibles en la hembra y cinco
seis en el macho.
1. Tergitos, escleritos dorsales (placas tegumentales) una por segmento.
2. Esternitos, escleritos ventrales, uno por segmento (numero diferente entre los
sexos)
3. Espirculos abdominales, siete en cada lado del abdomen.
4. Regin genital, arco genital en machos.
LOS CARACTERES HEREDITARIOS
Antes de observar los mutantes, uno necesita familiarizarse con el aspecto del tipo
salvaje de Drosophila, es decir, el ms frecuentemente encontrado en poblaciones
naturales. Se conocen miles de mutaciones en Drosophila pero se enumerarn
solo aqullas relevantes a esta prctica.
Ojos Tipo salvaje: rojos, de forma oval y con muchas facetas.
Mutantes: cambios en el color, forma y nmero de facetas.
Alas Tipo salvaje: bordes lisos, venacin uniforme, se extienden ms all del
abdomen.
Mutantes: cambios en tamao y forma; ausencia de venas especficas; cambios
en la posicin de las alas en la posicin de descanso.
Setas Tipo salvaje: Largas y suaves (ntese la distribucin en la cabeza y el
trax).
Mutantes: ms cortas, gruesas deformadas, pueden cambiar su distribucin.
Mutante incgnita en D. melanogaster - 2006
6
Color del cuerpo Tipo salvaje: bsicamente gris, con un patrn de reas claras y
oscuras. Mutantes: negro (variando los grados), amarillo, el color mutante puede
ser determinado mas
claramente observando el color de las venas de las alas, cetas del cuerpo y las
patas.
EL GENOMA DE DROSOPHILA
D. melanogaster tiene cuatro pares de cromosomas:
los cromosomas sexuales X/Y y los autosomas 2, 3 y 4.
El cuarto cromosoma (odot) es el ms pequeo.
El par sexual en hembras es XX, y en machos XY.
Individuos X0 son machos, pero estriles aunque su
aspecto sea normal, mientras que individuos XXY
producen hembras normales y frtiles
El tamao del genoma de Drosophila es alrededor de 165 millones de bases y
estimado unos 14.000 genes (por comparacin, el genoma humano tiene 3.300
mb y unos 70.000 genes). El genoma ha sido completamente secuenciado y esta
en curso la secuenciacin y anotacin del genoma de otras 11 especies de
Drosophila.
La posicin relativa de muchos genes de D. melanogaster a lo largo de los
cromosomas ha sido identificada y mapeada basndose en la frecuencia de
recombinacin con los genes vecinos. Esta ubicacin se denomina mapa de
ligamiento o mapa gentico.
CROMOSOMAS POLITENICOS
XIII. Sesin de
Laboratorio
Cromatina sexual
Cariotipo Humano
CROMATINA SEXUAL Y CARIOTIPO HUMANO

FUNDAMENTO
Pasaron muchos aos antes de que pudiera establecerse una diferencia entre las
clulas masculinas y las femeninas durante la interfase. Pero gracias a los
trabajos experimentales en neurofisiologa, de Barr y Bertram (1949), se observ
por primera vez una diferencia morfolgica entre las clulas de las gatas y los
gatos. Las primeras, presentan un pequeo corpsculo de una a dos micras de
dimetro, adherido a la membrana nuclear, que no aparece en las clulas
masculinas normales y que durante mucho tiempo se denomin corpsculo de
Barr. Por las relaciones que guarda con la presencia de los cromosomas X, a este
cromocentro se le llama actualmente cromatina X. Muy rpidamente, las
observaciones realizadas por Barr se replicaron en otros tejidos por diferentes
investigadores, lo que condujo al mejoramiento de los mtodos de estudio de esta
cromatina en individuos sanos y enfermos. De estos ltimos, se realizaron
estudios en individuos que presentaban alteraciones o fallas en la diferenciacin
sexual con sndromes como el Turner y klinelfelter
El desarrollo de estos mtodos permiti adems, estudiar una gran diversidad de
clulas para la observacin de la ahora llamada cromatina sexual, tal es el caso de
los neutrfilos, las neuronas, la mucosa vaginal y como en el caso de esta prctica
clulas de la mucosa bucal.
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL
Observar la cromatina sexual en clulas humanas masculinas y femeninas
OBJETIVOS ESPECFICOS
Reconocer el cuerpo de Barr en clulas de la mucosa bucal.
Comprender la importancia de la cromatina sexual en aquellos sndromes que
cursan con problemas de diferenciacin sexual.
MATERIALES
Esptula metlica o de madera con extremo redondeado
Solucin fijadora: 3 partes de etanol al 95% + 1 parte de cido actico glacial.
Cubetas de coloracin
Aceto-orcena
Papel filtro
Lminas y laminillas.
Gasa
PROCEDIMIENTO
1. Limpie la mucosa de la cavidad oral con un pedazo de gasa. El paciente debe
mantener la boca abierta y disponer la lengua en el lado opuesto al que va a ser
frotado.
2. Para el frotis de la mucosa se utiliza la esptula. Este debe hacerse con presin
moderada, asegurndose de obtener una capa de material blanquecino.
3. El material de la esptula se extiende delgada y suavemente sobre una lmina y
sta se sumerge inmediatamente en la solucin fijadora. Pueden obtenerse tres
lminas de cada lado de la boca.
4. Las lminas pueden permanecer en el fijador entre un minuto y una semana.
5. Las lminas se colocan en una cubeta de coloracin y el colorante acetoorcena se aplica por 10 minutos. S solo cuenta con orcena en el laboratorio,
entonces adicione a 1gramo de esta 45 mL de cido actico concentrado; caliente
hasta ebullicin, deje enfriar y filtre para obtener la aceto-orcena.
6. Se dispone una laminilla sobre la lmina y el colorante en exceso se remueve
aplicando papel de filtro y ejerciendo firme presin.
7. Observe inmediatamente con el objetivo de menor aumento, para buscar reas
donde las clulas estn bien extendidas.
8. Observe con el objetivo de mayor aumento (o inmersin) e identifique las
estructuras ligeramente alargadas o plano-convexas, adyacentes a membrana
nuclear de coloracin oscura en comparacin con el resto del ncleo.
CUESTIONARIO
Consulta, que otras patologas diferentes a los sndromes de Turner y klinelfelter,
estn relacionados con la cromatina sexual.
Cual es el patrn de herencia de las patologas consultadas?.
Investiga acerca de los genes holndricos y su importancia Biomdica.
Que otros mtodos diferentes al utilizado en esta prctica, se pueden utilizar
para identificar cromatina sexual?.
Investiga sobre las aplicaciones que en medicina legal tiene la determinacin de
cromatina sexual.
CUERPO DE BAR
Cariotipo
Las caractersticas ms importantes que identifican los cromosomas durante la
mitosis son su nmero, tamao relativo, estructura, comportamiento y
organizacin interna.
Cariotipo es el complemento o conjunto cromosmico tpico del individuo o de la
especie en el que se describe el nmero, forma y tamao de los mismos. El
cariotipo se perpeta normalmente en la progenie (Battaglia, 1953). Es decir, en
trminos generales, se admite la constancia en forma, tamao y nmero de los
cromosomas, en todas las clulas que componen el ncleo de un individuo y en
los individuos de cada especie.
En el cariotipo se ordenan los pares de homlogos en series, de acuerdo a su
longitud, en forma creciente.
La representacin esquemtica del cariotipo se conoce con el nombre de
Idiograma.
El anlisis de la morfologa cromosmica se lleva a cabo en el estado de

metafase que es el momento en el que los cromosomas presentan el mayor
grado de espiralizacin, y compactacin. Es en este estado tambin cuando
muestra las mejores condiciones de tincin con tintes que presentan afinidad
por los cidos nucleicos; razn que favorece an ms el estudio citogentico de
una determinada especie en esta fase del ciclo de divisin celular.
Para confeccionar un cariotipo se deben tener en cuenta:
1.-Nmero bsico de cromosomas.
2.-Morfologa cromosmica
1.-Nmero bsico de cromosomas
En principio, todos los individuos de una especie tienen el mismo nmero de
cromosomas. Dos especies distintas pueden tener el mismo nmero de
cromosomas.
2.-Morfologa de los cromosomas
En la morfologa de los cromosomas distinguimos:
2.1.-Posicin del centrmero
2.2.-Localizacin de satlites y constricciones secundarias
2.3.-Distribucin de regiones hetero y eucromticas
2.1.-Posicin del centrmero
La morfologa depende de la posicin del centrmero. Segn sea la posicin
del centrmero: Posicin media, submedia, subterminal o terminal los
cromosomas se clasificarn en:
a)metacntricos o isobraquiales (centrmero equidistante de los extremos,
brazos de igual longitud).
b)submetacntricos o heterobraquiales (centrmero muy prximo al centro)
acrocntricos o cefalobraquiales (centrmero muy prximo a un extremo)
d)telocntricos (centrmero terminal, no se puede hablar propiamente de
constriccin, ni de brazos, slo existe un brazo)
La posicin del centrmero o constriccin primaria se calcula teniendo en
cuenta los siguientes parmetros:
c= largo total del cromosoma
l= largo del brazo mayor
s= largo del brazo menor
y la posicin ser igual a: c = l + s d = c s
El ndice centromrico es:
i = (s x 100)/ c
c)
PRACTICA
.
.
.
.
.
.
La lmina 1 representa un cariotipo humano.

Recorta cada uno de los cromosomas.
Agrpalos de acuerdo con su tamao, forma y bandas de tincin.
Identifica cada pareja de homlogos ayudndote del cariotipo
ordenado de la lmina 2.
Pega cada pareja en la plantilla vaca de la ficha del alumno.
LAMINA PARA RECORTAR
PRACTICA
.
.
.
.
.
La lmina 1 representa un cariotipo humano.

Recorta cada uno de los cromosomas.
Agrpalos de acuerdo con su tamao, forma y bandas de tincin.
Identifica cada pareja de homlogos ayudndote del cariotipo
ordenado de la lmina 2.
Pega cada pareja en la plantilla vaca de la ficha del alumno.
ESTUDIO DEL CARIOTIPO HUMANO

FICHA DEL ALUMNO___________________________________________
CURSO______
1. Cuntos pares de cromosomas tiene la especie humana?

2. Cul es el sexo del individuo cuyo cariotipo has investigado? Razona la
respuesta.
3. A qu se denominan autosomas?
4. Tiene algo que ver el nmero de cromosomas de una especie con su
tamao? Pon ejemplos.
5. Qu es una anomala cromosmica?
BIBLIOGRAFIA
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Edith. Austral Univ. Catlica de Chile.
-Araujo D. 2006. Guia de Laboratorio Biologia II. Facultad de
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Uruguay. Ediciones Siglo XXI. Montevideo.
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Universidad Antenor Orrego. Facultad de
Ciencias Biologicas. Trujillo Per.
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de Laboratorio. Universidad de Chile.
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De Buenos Aires. Publicacion de CONYCET.
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Edith. El Ateneo. Buenos Aires. 956 pp.
-Bachmann K. 2003. Biologa para mdicos. Edith. Reverte
Espaa. 520 pp.
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Plasmtica. Edit. OMEGA.
- Berkaloff. A., 2000. Biologa y Fisiologa celular. Il. Aparato
De Golgi,lisosomas,mitocondrias celulas
Y virus Edit. OMEGA.
-Berkaloff. A., 2000. Biologa y Fisiologa celular. Ill. CloroplasTos ,peroxisomas ,divisin celular Edit.
OMEGA.
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- Sousa J.
1999.
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De laboratorio. San salvador. 350p
-- Ananias F. 2006. Tcnicas de obtencao de cromosomas

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-Spinet B. & F.
Sole 2005. Guia de Investigaciones de laboratorio
(Biologa). Univ. De la Plata. Argentina.
-Franco J. 2004. Manual practico de Histologa Vegetal. Fac.
Biol. UNSAAC. 98 pp.
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Biologa. Investigaciones de Laboratorio y

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Y Campo. Edith. Limusa. Mexico.

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Ideas. Edith Omega Espaa.
-Torres A. 2001. Manual de Laboratorio para Biologa
General. Man. N 401. Ser. Biologa.
UTHEA. Mexico.
-Landete M.
2003. Didctica experimental de la Biologa.

Edith. Univiversitaria. La habana, Cuba
- Cuevas C. 2006. Gua de practicas de Biologa celular y

Molecular. Univ. Austral de Chile. Valdivia
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-Talledo D.
1993. Introduccin al anlisis cromosmico en
en vegetales. Univ. Ricardo palma.
- Manya W. 2005 Guia de practicas de Biologa general.
Fac. Biol. UNMSM. Multicopiado. Lima.
-Tresierra A. 2001. Practicas de Biologa. Univ. Nac. Trujillo.
Multicopiado.
-Drets M. 2005. Manual de Citogentica Humana. Fac. de
Medicina. Univ. La Republica. Montevideo
Uruguay 468 pp.
-Montero R. 1999. Guia de Laboratorio de Zoologa. Univ. De
Tucuman. Argentina 350pp.
-Gallardo M. 2001. Guia de Trabajos practicos de Biologa
Molecular. Univ. Austral de Chile. Concepcin.
RELACION DE PAGINAS WEBS RELACIONADAS CON LA BIOLOGIA

COMPILACION: J FRANCO
http://gened.emc.maricopa.edu/bio/bio181/BIOBK/BioBookTOC.html
Curso general sobre biologa
http://www.whfreeman.com/lodish/
Pgina del libro Molecular cell biology, con buenas imgenes, esquemas y videos
http://www.cbs.dtu.dk/dave/roanoke/biology101_unit1.html - 28_Jan_98
Completo curso de biologa celular, con numerosos esquemas, fotografas y enlaces
http://cellbio.utmb.edu/cellbio/cellsch.htm
Curso interactivo sobre biologa celular con numerosos esquemas y microfotografas
http://www.cytochemistry.net/Cell-biology/
Atlas de microanatoma y biologa celular (muy buenas fotos y esquemas)
http://www.mblab.gla.ac.uk/~julian/Dict.html
Completo diccionario en lnea de biologa celular
http://www.my-edu2.com/eduframe.htm
Coleccin de enlaces relacionados con la biologa
http://www.ultranet.com/~jkimball/BiologyPages/T/TOC.html
Curso de biologa celular
http://www.unl.edu/CMRAcfem/glossary.htm - lens
Glosario de trminos relacionados con la microscopa, con algunos esquemas y
enlaces
http://ntri.tamuk.edu/cell/
Curso sobre biologa celular, con numerosos esquemas y microfotografas
http://www.kean.edu/~biology/lab_help.html
Curso general sobre biologa
http://www.life.uiuc.edu/help/courses.html
Cursos sobre biologa
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Coleccin de enlaces sobre biologa
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Curso de biologa incluyendo biologa celular, bioqumica, desarrollo, etc
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Hipertexto de biologa celular
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Curso en lnea de biologa celular
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Interesante pgina que acumula gran cantidad de animaciones sobre procesos
biolgicos bsicos
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Coleccin de documentales y animaciones (algunos de casi una hora de duracin)
sobre importantes procesos en Biologa Celular, Bioqumica, Microscopa, etc.
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Pgina sobre una visita virtual a la clula, con muy buenos dibujos y animaciones.
Incluye adems un libro virtual sobre qumica orgnica y biologa celular. Puede
descargarse completa en un archivo comprimido e instalarla en el propio ordenador.
http://www.ulb.ac.be/sciences/biodic/index.html
Galera de imgenes ultraestructurales
http://www.javeriana.edu.co/Facultades/Ciencias/jairo/celular/cell2.htm
Completo curso en espaol sobre biologa celular
http://www.bioanim.com/
Interesante pgina la que se pueden encontrar numerosos modelos interactivos en 3D
sobre biologa celular e histologa
http://www2.uah.es/biologia_celular/LaCelula/Celula.html
Pgina dedicada al estudio de los componentes celulares
http://www.life.uiuc.edu/plantbio/cell/
Visita virtual a una clula vegetal, recorriendo todos sus orgnulos
http://www-sci.lib.uci.edu/~martindale/MedicalAnatomy.html
Completa coleccin de enlaces con todo lo relacionado con histologa, anatoma,
tcnicas, etc
http://www.kumc.edu/instruction/medicine/anatomy/histoweb/
Pgina atlas de histologa con imgenes comentadas de diversos tejidos y rganos al
microscopio ptico
http://biodidac.bio.uottawa.ca/info/browse.htm
Coleccin de imgenes macro y microscpicas y esquemas de animales y vegetales
http://teaching.anhb.uwa.edu.au/mb140/
Completa pgina atlas de histologa con descripciones de las imgenes, acompaada
de preguntas de examen. Tambin incorpora un microscopio virtual para practicar el
manejo y un resumido curso de estereologa
http://www.uni-mainz.de/FB/Medizin/Anatomie/workshop/EM/EMAtlas.html
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Incluye imgenes y videos del Visible Human, as como un completo glosario. Algunas
de las subpginas estn en alemn.
http://www3.usal.es/histologia/histologia.htm
Completo programa para la enseanza de la histologa y organografa, a base de
dibujos y microfotografas
http://www.mc.vanderbilt.edu/histo/
Pgina con texto e imgenes comentadas al microscopio ptico y electrnico de
diversos tejidos y rganos
http://medocs.ucdavis.edu/CHA/402/course.htm
Atlas histolgico con variadas microfotografas comentadas. Contiene laboratorios c
imgenes interactivas al microscopio electrnico
http://www.unomaha.edu/~swick/index.html
Pgina para la enseanza de la histologa y organografa con texto e imgenes
comentadas
http://www.med.uiuc.edu/histo/atlas/index.htm
Completa pgina interactiva de enseanza de la histologa con numerosas imgenes
comentadas al microscopio ptico y electrnico, sobre las que se puede hacer zoom y
obtener informacin de cada zona, interactivamente con el ratn
http://www.meddean.luc.edu/lumen/index.html
Pgina para la enseanza de la histologa, mediante imgenes al microscopio ptico y
electrnico, con sus correspondientes comentarios
http://online-media.uni-marburg.de/histologie/introhis/HIS/his.htm
Muy buenas imgenes al microscopio electrnico de citologa e histologa humana.
Otras al ptico, a manera de atlas, con breves explicaciones de cada una
http://www.medinfo.ufl.edu/year1/histo/glossary.html - reticular_fiber
Completo glosario de trminos de histologa, con imgenes al microscopio ptico
http://www.uq.edu.au/nanoworld/images_1.html
Catlogo de numerosas imgenes, tanto de zoologa como de botnica, al microscopio
electrnico de transmisin y barrido, con sus comentarios
http://www.udel.edu/Biology/Wags/histopage/histopage.htm
Atlas de imgenes histolgicas al microscopio ptico y electrnico (numerosas),
adems de esquemas en dos y tres dimensiones de cada tejido y rgano
http://www.medinfo.ufl.edu/year1/histo/
Tutorial de histologa con texto e imgenes, expuesto en forma de preguntas de
examen
http://www.medsch.wisc.edu/anatomy/histo/htm/toc.htm
Atlas con imgenes de los diversos tejidos y rganos al microscopio ptico,

comentadas e ilustradas
http://www.bu.edu/histology/m/index.htm
Atlas de histologa con numerosas imgenes interactivas y esquemas de los diferentes
aparatos y sistemas
http://www.vh.org/Providers/Textbooks/MicroscopicAnatomy/MicroscopicAnatomy.html
Completo atlas de histologa y organografa, acompaado de una parte donde se
comentan las principales tcnicas de preparacin de muestras y tincin
http://casweb.cas.ou.edu/pbell//Histology/Outline/contents.html
Atlas de histologa y organografa, con muy buenas imgenes al M.O. incluyendo
manuales de tincin y manejo del microscopio
http://www.anatomohistologia.uns.edu.ar/index.asp
Pgina en espaol sobre histologa, microscopa y tcnicas, descritas en una serie de
mdulos, con numerosas imgenes.
http://www.e-histologia.unileon.es/1inicio/home/Inicio800x600.html
Pgina en espaol sobre histologa y organografa mciroscpica animal. Con
numerosas imgenes interactivas muy didcticas. Incluye adems un apartado de
tcnicas y una interesante autoevaluacin, para comprobar los conocimientos
adquiridos
http://www.uniovi.es/~morfologia/Atlas/es/download.htm
Pgina de la Universidad de Oviedo, desde donde se puede descargar (HTTP)
Instalador Windows (40MB) un atlas interactivo de histologa. Seguidamente se intala
en el ordenador y se puede consultar cuando se desee
http://escuela.med.puc.cl/paginas/Cursos/segundo/histologia/HistologiaWeb/indiceGen
eral.html
Completa pgina sobre histologa, con abundante texto e imgenes de buena calidad
http://www.sct.ub.es:801/Galeria/Galeria.htm
Galera de imgenes de microscopa electrnica y confocal, con algunas animaciones
de ste ltimo
http://www.botany.uwc.ac.za/sci_ed/pupil/angiosperms/index.htm
Anatoma e histologa vegetal, con dibujos, microfotografas y preguntas
http://atlasveg.ib.usp.br/
Atlas interactivo de histologa vegetal
http://koning.ecsu.ctstateu.edu/Plant_Biology/schedule.html
Curso sobre anatoma y fisiologa vegetal
http://www.biologie.uni-hamburg.de/b-online/e00/contents.htm
Microscopa, citologa, histologa y bioqumica vegetal, con numerosas imgenes al
ME y modelos moleculares en 3D, que pueden girarse en el espacio
http://images.botany.org/
Coleccin de microfotografas comentadas sobre histologa vegetal
http://www.life.umd.edu/classroom/bsci124/main.html
Citologa y fisiologa vegetal
http://149.152.32.5/Plant_Physiology/schedule.html
Cursos sobre anatoma y fisiologa vegetal
http://128.171.207.10/faculty/webb/BOT410/anatweb/pages/default.htm
Una de las mejores pginas sobre histologa vegetal, incluyendo adems tutoriales
para manejo de microscopio y algunas aplicaciones informticas
http://www.esb.utexas.edu/mauseth/weblab/
Coleccin de microfotografas sobre histologa vegetal
http://www.wisc.edu/botit/img/bot/130/
Amplio directorio de micro y macrofotografas
http://www.unex.es/botanica/presenta.htm
Curso sobre botnica, incluyendo histologa, con numerosos esquemas y dibujos
animados
http://bugs.bio.usyd.edu.au/2003A+Pmodules/
Atlas de histologa vegetal
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Curso sobre histologa vegetal, con numerosos esquemas y microfotografas
http://www.cas.muohio.edu/~meicenrd/tcourses.htm
Acceso a varios cursos sobre botnica e histologa vegetal
http://157.88.160.17/web/materiales/web/histologia/inicio_real.htm
Atlas histolgico interactivo, en espaol, con abundante texto y numerosas imgenes
http://www.biologia.edu.ar/plantas/indplantas.htm
Curso sobre citologa, histologa, organografa y fisiologa vegetal, con texto
explicativo, esquemas, imgenes y algunas animaciones. En la misma pgina pueden
encontrarse varios cursos sobre otros temas biolgicos
http://www.dipbot.unict.it/tavole/index.html
Atlas interactivo con gran cantidad de imgenes e informacin complementaria. En
italiano
http://botit.botany.wisc.edu/images/130/
Completo atlas de histologa vegetal
http://www.inea.uva.es/web/materiales/web/histologia/inicio_real.htm
Completa pgina sobre citologa, histologa y organografa vegetal con muy buenas
imgenes
http://www.biologia.edu.ar/botanica/index.html
Completo curso sobre histologa y organografa vegetal
http://anubis.ru.ac.za/virtualplant/ANATOMY/B1PR2000.htm
Completo curso sobre citologa, histologa y organografa vegetal. Cuenta con
sesiones prcticas con imgenes comentadas de preparaciones microscpicas
http://botweb.uwsp.edu/anatomy/
Atlas fotogrfico de anatoma vegetal. Incluye numerosas macro y microfotografas
http://www.euita.upv.es/varios/biologia/programa.htm
Extensa coleccin de apuntes de histologa vegetal, con numerosos esquemas
ilustrados
INSTRUMENTOS Y TCNICAS
http://www.itg.uiuc.edu/technology/atlas/
Microscopa confocal y de fluorescencia
http://www.leica-microsystems.com/llt_index.html
Pgina de la casa Leica, sobre fundamentos de este microscopio y modelos
http://www.denniskunkel.com/
Curiosas microfotografas con microscopa de barrido y posibilidad de manejar
virtualmente uno de estos microscopios
http://www.nottingham.ac.uk/pathology/default.html
Completa coleccin de tcnicas de tincin, con sus correspondientes protocolos
http://www.cs.ubc.ca/spider/ladic/intro.html
Pgina de introduccin al funcionamiento del microscopio confocal, preparacin de
muestras y procesado de las imgenes
http://bris.ac.uk/pathandmicro/cpl/lablinks.html
Manual de tcnicas de preparacin de muestras y tincin
http://wwwcivm.mc.duke.edu/civmGallery/L1Gallery.html
Fundamentos de la microscopa de resonancia magntica y completa galera de
imgenes animadas
http://micro.magnet.fsu.edu/primer/index.html
Una de las mejores pginas sobre microscopa, con amplios textos sobre los diversos
tipos de microscopios y su funcionamiento. Numerosos tutoriales en java sobre el
manejo de distintos microscopios. Se puede descargar un completo manual sobre
microscopa en formato Acrobat.
http://www.mos.org/sln/sem/
Descripcin y funcionamiento del microscopio electrnico de barrido y galera de

imgenes
http://www.mse.iastate.edu/microscopy/home.html
Fundamentos del microscopio electrnico de barrido, descripcin del funcionamiento
con numerosos esquemas. Galera de imgenes
http://em-outreach.sdsc.edu/web-course/toc.html
Completo tratado sobre microscopa electrnica: fundamentos, microscopios,
preparacin de muestras y procesado digital de las imgenes
http://www.btrip.mednet.ucla.edu/bri/homepage.htm
Fundamentos tericos de microscopa ptica, fluorescencia y confocal
http://www.unl.edu/CMRAcfem/em.htm
Descripcin y fundamento de los microscopios electrnicos de transmisin y barrido
http://www.library.cornell.edu/preservation/tutorial-spanish/contents.html
Completo tutorial de digitalizacin de imgenes, donde se explican los trminos
bsicos
http://www.scioncorp.com/frames/fr_download_now.htm http://rsb.info.nih.gov/ij/
Direcciones desde donde pueden descargarse dos programas de anlisis de imagen
(Scion Image e ImageJ) respectivamente
http://www-medlib.med.utah.edu/WebPath/HISTHTML/HISTO.html
Se describen numerosos protocolos de tincin y otras tcnicas histolgicas
http://swehsc.pharmacy.arizona.edu/exppath/index.html
Pgina con numerosos enlaces relacionados con microscopa y tcnicas
http://olan.marseille.inserm.fr/confocal/plus-conf.html#principe
Principios sobre la microscopa confocal y la fluorescencia
http://www.udel.edu/Biology/Wags/b617/b617.htm
Completa pgina sobre tcnicas relacionadas con la microscopa electrnica y
digitalizacin de imgenes
http://www10.uniovi.es/spi/tutoriales.htm
Tutoriales sobre el fundamento de la microscopa confocal y de fluorescencia y el
procesado digital de imgenes
http://www.uniovi.es/bos/Asignaturas/TecnicasImagen/index.html
Incluye abundante informacin sobre tcnicas histolgicas, de microscopa y anlisis
de imagen, adems de numerosos enlaces con otras interesantes pginas
http://nobelprize.org/physics/educational/microscopes/1.html
Presenta los fundamentos de los diferentes microscopios, adems de la posibilidad de
utilizarlos de forma virtual, explorando diferentes muestras con gran realismo
http://www.gonda.ucla.edu/bri_core/homepage.htm
Principios de microscopa ptica, electrnica, de fluorescencia y confocal.
http://photonics.cnb.uam.es/Photonic_sp/Review/formacion.htm
Completa pgina en espaol con informacin sobre fundamentos de anlisis de
imagen y fundamentos de diversas tcnicas de microscopa avanzada.
http://www.sct.ub.es:801/Galeria/Galeria.htm
Galera de imgenes de gran calidad, obtenidas con microscopios confocal y
electrnicos.
ANEXO
PREPARACION DE REACTIVOS
1. Acido-Alcohol: (decolorante para tincin Ziehl-Neelsen)

o cido clorhdrico concentrado ..........................................................3 ml
o Etanol 95% ....................................................................................97 ml
2. Azul de metileno: Colorante de contraste para tincin de flagelos.
o Azul de metileno................................................................................1 g
o Agua destilada...............................................................................100 ml
3. Azul de metileno de Loeffler: Tinciones simples.
o Solucin de hidrxido potsico al 1%.................................................1 ml
o Azul de metileno, sol. saturada en etanol al 95%...............................30 ml
o Agua destilada...............................................................................100 ml
4. Colorante para esporas:
o Solucin acuosa saturada de verde malaquita
5. Colorante para flagelos de Leifson:
o Solucin A
Fucsina bsica .........................................................................1,2 g
Etanol 95%.............................................................................100 ml
o Solucin B
cido tnico................................................................................3 g
Agua destilada.........................................................................100
ml
o Solucin C
Cloruro sdico..........................................................................1,5 g
Agua destilada.........................................................................100
ml
Para preparar la solucin de uso, se mezclan cantidades iguales de
las soluciones A, B y C y se guarda en frasco cerrado
hermticamente en la nevera donde es estable durante varias
semanas.
6. Cristal violeta: Para tincin Gram y tincin simple.
o Cristal violeta (violeta de genciana)....................................................0,5 g
o Agua destilada.................................................................................100 ml
7. Eosina: Para observacin de clulas sanguneas.
o Eosina...............................................................................................0,3 g
o cido actico glacial......................................................................0,025 ml
o Agua destilada...................................................................................100
ml
8. Fucsina diluida: Para tincin Gram y tincin simple.
o Fucsina fenicada de Ziehl-Neelsen......................................................10 ml
9. Fucsina fenicada de Ziehl-Neelsen: Para tincin cido-alcohol resistente.
o Fucsina bsica......................................................................................1 g
o Etanol 95%........................................................................................10 ml
o Fenol 5% en solucin acuosa............................................................100 ml
10.Hematoxilina: Para observacin de clulas sanguneas.
o Hematoxilina.........................................................................................2 g
o Agua destilada......................................................................................1 l
11.Lactofenol: Para preparaciones microscpicas en fresco de mohos.
o cido lctico.....................................................................................100 ml
o Fenol................................................................................................100 g
o Glicerol.............................................................................................200 ml
o Agua.................................................................................................100 ml
12.Lactofenol al Azul Algodn: Para preparaciones en fresco y tinciones de
mohos.
o Solucin de azul algodn
Sol. saturada de azul algodn (azul anilina soluble)......................10
ml
Glicerol.....................................................................................10 ml
Agua.........................................................................................80 ml
Mezclar esta solucin con lactofenol a partes iguales

13.Lugol: Solucin de yodo para tincin Gram.
o Yodo...................................................................................................1 g
o Yoduro potsico..................................................................................2 g
14.Orcena A: Tincin de cromosomas.
o Orcena................................................................................................2 g
o cido actico.....................................................................................45,8
ml
o cido clorhdrico 1 mol/l......................................................................8,3
ml
o Agua..................................................................................................45,8
ml
15.Orcena B: Tincin de cromosomas.
o Orcena................................................................................................2 g
o cido actico.....................................................................................55 ml
o Agua..................................................................................................55 ml
16.Safranina: Colorante de contraste para tincin Gram (preferible a la fucsina) y
esporas.
o Safranina.........................................................................................0,25 g
o Agua destilada..................................................................................100 m
17.Sudn III: Tincin especfica de grasas.
o Alcohol etlico...................................................................................100 ml
o Sudn III...................................................................................hasta
saturacin
18.Verde de metilo actico: Igual composicin que la eosina (num. 7)

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Gua de Practicas

NORMAS DE LABORATORIO Y BIOSEGURIDAD PAG. 01

EL AGUA Y MEDIDA DEL pH

CLULA PROCARIOTICA Y EUCARIOTICA

CICLO CELULAR Y DIVISIN MITTICA

HERENCIA MENDELIANA (FACTOR Y GRUPO PAG.

EXPERIMENTOS CON LA MOSCA DE LA FRUTA PAG.

La presente gua de practicas est destinada a los

El autor expresa su profundo

* En caso de romper o derramar material contaminado AVISE al personal tcnico o

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Fig. 4 CINTA INDICADORA DEL pH

FIGURA Algunos de los colores que adquiere el extracto de col lombarda al

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Las protenas son cualquiera de los numerosos compuestos orgnicos constituidos

Solucin de HCl concentrado

REACCIONES COLOREADAS ESPECFICAS (BIURET)

Colocar en un tubo de ensayo 3ml de solucin de albmina al 1-2%.

Preparar en un tubo de ensayo una solucin de almidn en agua

Preparar otra solucin de almidn en saliva humana en otro tubo de

Comparar los resultados.

Explicar las diferencias.

*Utilizando un termmetro controle la temperatura cada 2 minutos

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La sntesis de las cadenas complementarias comienza con la sntesis

5. Coloque 3 a 5 gotas de reactivo de feulgen

esencialmente por nios. Los microscopios binoculares, estreo microscopios o

Diafragma: Sistema que controla la cantidad de luz que llega al objeto. El

por ejemplo) se obtendr el mximo de detalles ya que se ha aumentado el poder

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Fig. 1. MICROSCOPIO BIOLGICO PTICO.

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CELULA PROCARIOTICA Y EUCARIOTICA

CLULAS BACTERIANAS TINCIN GRAM

CLULAS DE CIANOFITAS NOSTOC

. Observacin de una preparacin de epidermis de Tradescantia virgineana. Para

CELULA ANIMAL OOCITO DE ORESTIAS

3. Qu molculas se encuentran participando en la estructura de la membrana

CLULA VEGETAL CATAFILO DE CEBOLLA

OBSERVACION DE CELULAS ANIMALES

2. Depositar la gota de sangre, en un lado y en el centro de un porta bien

5. Es conveniente realizar dos o tres extensiones, con el fin de seleccionar

teidos y no se han producido precipitados de los colorantes. Cuando se

DIVISIN CELULAR : MITOSIS

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este proceso progresivo de espiralizacin. Los cromosomas desde el principio

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Clulas de meristemo radicular de cebolla en interface

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Con ayuda del microscopio estereoscopio, aislar los testculos de

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1-Dibuje cada una de la fases de la meiosis