Alumno: Alberto Chvez Mendias Borrador de ensayo Tema: Staphylococcus spp
Importancia Los estafilococos son los mayores habitantes naturales de la piel, glndulas de la piel y membranas mucosas de humanos y muchos animales. Han sido aisladas de una gran variedad de ambientes y alimentos, son reconocidos como los agentes ms importantes causando un gran rango de infecciones humanas y veterinarias (10). El nombre del gnero Staphylococcus fue propuesto por el cirujano ingls Alexander Ogston en 1882, al observar en el microscopio pequeos cocos gran positivos en muestras purulentas de enfermos; el trmino proviene de las palabras griegas Staphyle, que significa racimo de uvas y kokkos que se refiere a un grano o semilla. (6) Rosenbach en 1884, fue probablemente la primera persona que creci el estafilococo en un cultivo puro y que estudio sus caractersticas en el laboratorio. Observ que los aislados formaban dos tipos de colonias, nicamente diferenciables por el color: naranjas y blancas. Propuso el nombre de Staphylococcus pyogenes aureus para la primera y Staphylococcus pyogenes albus para la segunda. (2) En 1940 despus del desarrollo de la penicilina (descubierta en 1929 por Alexander Fleming) pareca que el estafilococo estaba vencido, pero debido a su poder de adaptacin o capacidad para desarrollar resistencia, se convierte en una bacteria preocupante en la patologa infecciosa actual. En 1957, la 7 a edicin del Manual de Determinaciones Bacteriolgicas de Bergey seala la prueba de coagulasa como fundamental para separar a los estafilococos en dos grandes grupos: estafilococos coagulasa positivos (ECP) y los estafilococos coagulasa negativos (ECN). (9)
Taxonoma De acuerdo con la hoja de ruta del Manual de Bacteriologa Sistemtica de Bergey, los estafilococos estn en el filo Firmicutes y comprenden el gnero I en la familia V (Staphylococcaceae), orden I (BacillalesAL) en clase III (Bacilos).(4) Los miembros del gnero Staphylococcus y Micrococcus son catalasa positivos y hasta hace poco formaban parte de la familia Micrococacceae junto a los gneros Planococcus y Stomacoccus. Estudios genticos han demostrado que Staphylococcus y Micrococcus no estn relacionados. Tentativamente el gnero Staphylococcus se coloc dentro de la familia Bacillaceae junto a otros gneros, Bacillus, Gamella, Listeria, Planococcus, etc. (8)
Reino Monera Filo Firmicutes Clase Bacilli Orden Bacillales Familia Staphylococcaceaec Genero Staphylococcus Especie S.aureus, S.epidermidis, S.intermedius, S.hyicus, S.saprophyticus (1) Morfologa y cultivo Son clulas esfricas con un dimetro de 0.5 a 1 m y grampositivos. En las tinciones directas de las muestras clnicas, se encuentran aislados, en pares o formando pequeas cadenas. Cuando provienen de un cultivo en agar nutritivo, los cocos se disponen en agrupaciones que recuerdan un racimo de uvas. No forman esporas. No presentan flagelos y algunas cepas presentan una capa de polisacridos extracelulares. Esta capa se encuentra ocasionalmente en los estafilococos cultivados in vitro, aunque se presume que in vivo se halla con frecuencia.(9) Las colonias estafiloccicas suelen ser lisas, cremosas y tienen un perfil convexo poco sobreelevado y bordes netos. Las colonias de algunas cepas de S.aureus son por lo general grandes (4-6mm de dimetro), lisas, enteras, y de consistencia cremosa aunque ciertas cepas pueden ser de apariencia hmeda o viscosas. Algunas cepas pueden estar pigmentadas de amarillo o de amarillo naranja (de ah el nombre aureus que significa color oro), mientras que otras pueden producir colonias blanquecinas o grises.(4). El gnero no presenta exigencias nutritivas. En medio liquido luego de 24 horas de incubacin a 37 C, se desarrollan produciendo turbidez homognea con abundante deposito en el fondo del tubo y a menudo aparece un crecimiento en forma de anillo en la superficie del medio que se adhiere a las paredes del tubo. En medios slidos forman colonias redondas de 1 a 2 mm de dimetro, de contornos netos y superficie lisa, opaca o mucoide. (9) El color de las colonias puede variar desde blanco hasta el amarillo intenso, debido a la produccin de pigmentos carotenoides en la membrana celular. (6)
Caracteres metablicos Metabolitos En cuanto a su forma de obtener energa es tanto a travs de la fermentacin como de la respiracin. En cuanto a los requerimientos de cultivo, son no exigentes desde el punto de vista nutricional, creciendo en medios pobres y simples. En su relacin con el oxigeno son aerobios-anaerobios facultativos.(8) Tiene la capacidad de formar biofilm(6) Enzimas -Catalasa: podra funcionar inactivando algunos sistemas de ingestin de los PMN. -Coagulasas: tanto la coagulasa libre como el llamado clumping factor actan cubriendo a la clula de fibrina y por tanto hacindola ms resistente a la opsonizacion y fagocitosis. -Estafiloquinasas: degradan la fibrina y contribuyen a la invasin de tejidos vecinos. Hialuronidasa: hidroliza la matriz intracelular de mucopolisacridos de los tejidos y por tanto contribuye a la diseminacin a tejidos adyacentes. Lipasas: las cepas de S. aureus productoras de forunculosis crnica son potentes productoras de lipasas que ayudan al microorganismo a diseminarse por los tejidos cutneo y subcutneo. Fosfolipasa C: esta enzima est asociada con cepas recuperadas de pacientes con distrs respiratorio del adulto y coagulacin intravascular diseminada (eventos que ocurren durante la sepsis). Aparentemente los tejidos afectados por esta enzima se vuelven ms susceptibles al dao y destruccin por componentes bioactivos del complemento y sus productos durante su activacin. S. aureus produce adems, toda una serie de enzimas como las DNAsas, proteasas y fosfatasas que colaboran en el proceso infeccioso y en la produccin de lesiones (8,9).
Toxinas -Hemolisinas: son toxinas con accin nociva sobre las membranas celulares que llevan a la muerte y la lisis de las clulas. Tienen actividad de fosfolipasas. Se presentan en forma aislada en combinacin o no se presentan. -Toxina alfa: acta sobre una amplia variedad de membranas celulares, como por ejemplo: eritrocitos, leucocitos, plaquetas, fibroblastos y clulas Hela -Toxina beta: es una esfingomielinasa C que tiene la capacidad para producir la hemlisis caliente fra, lo cual significa que existe un incremento de la actividad hemoltica si luego de la incubacin de los eritrocitos sensibles con la toxina a 37C, stos se enfran durante un tiempo a 4C o a temperatura ambiente. La toxina es una enzima con especificidad de sustrato por la esfingomielina. -Toxina delta: actan sobre las membranas biolgicas por una accin similar a la de los detergentes. Es una toxina tensioactiva relativamente termoestable. Lesiona eritrocitos, macrfagos, linfocitos, neutrfilos y plaquetas. -Toxina gamma y leucocidina de Panton Valentine: son toxinas polipeptidicas formadas por dos componentes. El componente S (protenas de elucin lenta) y el componente F (protenas de elucin rpida), que actan sinrgicamente para daar la membrana de las clulas. -Toxinas con actividad de superantgenos: las enterotoxinas, las toxinas exofoliativas y las toxinas del choque toxico I poseen actividad de superantgenos. Estas toxinas se unen como molculas enteras al complejo mayor de histocompatibilidad de clase II y son capaces de inducir la actividad inespecfica de los macrfagos y de las clulas T, con liberacin de citoquinas, y aumentar la susceptibilidad a los lipopolisacridos bacterianos. -Enterotoxinas: raramente las producen cepas de origen animal. Son causantes de intoxicacin alimentaria en el hombre. Existen por lo menos seis. Son termoestables y resistentes a la hidrlisis de las enzimas gstricas y duodenales. -Toxinas exofoliativas A y B: producen la separacin intraepidermica con formacin de ampollas y exfoliacin posterior. Su accin en los animales no ha sido bien analizada. -Toxina 1 del sndrome del choque toxico: es una toxina termoestable y resistente a la protelisis (9).
Caracteres inmunolgicos Los estafilococos tienen cierta capacidad antignica al producir biofilms, esto se refiere a que existen comunidades bacterianas que se encuentran envueltas por una matriz extracelular y con capacidad para adherirse a superficies inertes o vivientes, lo cual constituye un modo de proteccin que permite la supervivencia de las bacterias en ambientes hostiles; por ejemplo, en los que faltan nutrimentos o existe alta osmolaridad, anaerobiosis y bajas concentraciones de antibiticos o componentes del sistema inmune del hospedero (6). Las toxinas de S.hyicus difieren entre s con respecto a sus propiedades antignicas, pero sobre todo secuencias de aminocidos demostraron claramente que estn juntas con toxinas exfoliativas ETA, ETB y ETD de S.aureus constituyendo familias de toxinas exfoliativas homologas del genero Staphylococcus (3).
Resistencia Es muy resistente a las condiciones ambientales normales. Es capaz de sobrevivir hasta tres meses en un cultivo a temperatura ambiente. Muere expuesto a temperaturas mayores de 60C por una hora. En cuanto a los agentes qumicos, es sensible a la mayora de los desinfectantes y antispticos, que lo matan en pocos minutos (8). La resistencia bacteriana frente a los antimicrobianos existe tanto en los ECP como en los ECN, aunque pueden presentar sensibilidad frente a -lactmicos, aminoglucosidos, rifampicina, lincosamidas y macrlidos. La resistencia a penicilina es universal y puede darse por la produccin de - lactamasas, o por alteracin de las protenas ligando de penicilinas. La resistencia frente a oxacilina se denomina meticilinorresistencia (MR). La presencia de MR est acompaada generalmente de resistencia frente a gentamicina, eritromicina, cloranfenicol y tetraciclinas (9).
Epizotiologa
Especie Hospedero Enfermedad S.aureus Bovino Ovino Caprino Cerdos Equinos
Caninos,felinos Aves Mastitis, impetigo. Mastitis, foliculitis, dermatitis. Mastitis, dermatitis Botrimicosis Mastitis, botriomicosis del cordn espermtico Lesiones supurativas Artritis y septicemia en pavos S.intermedius Caninos
Patologa La lesin caracterstica producida por S. aureus es el absceso, este se puede presentar a nivel de la piel como fornculo. Esta lesin es blanda, eritematosa y caliente. A las 24-48 horas desarrolla una pstula central blanca. Dentro, el material purulento es cremoso, amarillento, y frecuentemente tiene un centro constituido generalmente por un folculo piloso que es el sitio donde la infeccin se inici. Este tipo de infeccin tambin puede aparecer alrededor de cuerpos extraos y entonces el inculo necesario para producir infeccin es ms bajo y la llegada de antibiticos es menor (8).
Diagnstico Muestras: Segn la patologa, las muestras pueden ser: frotis superficiales, pus, sangre, material aspirado de trquea, lquido cefalorraqudeo, orina, leche. Pruebas para la caracterizacin del gnero: una vez establecida la morfologa, es decir, la agrupacin celular que presentan microscpicamente los cocos grampositivos desarrollados en medio de cultivo, se determina: 1) La enzima catalasa que separa a los cocos que pueden estar presentes en una muestra clnica 2) Los criteros para diferencias los generos positivos a la catalasa Los criterios bsicos parea la identificacin de los ECN se basan en la incapacidad de producir coagulasa, la morfologa de la colonia, la pigmentacin la determinacin de resistencia a novobiocina, la prueba oxidasa, la produccin de fosfatasa, ureasa, -galactosidasa y la produccin de acido a partir de azucares (9). Prueba de la catalasa Objetivo: separar Staphylococcus y Micrococcus (catalasa positivos) de los gneros Streptococcus y Enterococcus (catalasa negativos). Fundamento: la enzima catalasa descompone el perxido de hidrgeno (H2O2) en agua y oxgeno bajo la frmula 2 H2O2----2 H2O + O2. De esta manera las bacterias se protegen del efecto txico del H2O2, que es un producto final del metabolismo aerobio de los azcares. Prueba de la coagulasa Objetivo: permite separar S. aureus, que posee coagulasa, de las otras especies de estafilococos que genricamente se las denomina estafilococos coagulasa negativos (ScoN). Fundamento: S. aureus posee dos tipos de coagulasa: a) Una endocoagulasa o coagulasa ligada o clumping factor, que est unida a la pared celular. Esta acta directamente sobre el fibringeno provocando la formacin de cogulos o grumos cuando se mezcla una suspensin bacteriana con plasma citratado (test en lmina). b) Una exocoagulasa o coagulasa libre que acta mediante la activacin de un factor srico (CRF), formndose un complejo coagulasa-CRF, el cual reacciona con el fibringeno producindose un cogulo de fibrina (test en tubo).Mientras el test en tubo es definitivo, el test en lmina nos sirve como una rpida y econmica tcnica de tamizaje (screening). Entre un 10 a 15% de las cepas de S. aureus se mostrarn negativas en el test en lmina, por lo cual en esos casos se hace necesario realizar un test en tubo (8).
Tratamiento Una limpieza prolija de la herida con jabn germicida y la aplicacin de un antisptico (solucin yodada, hexacloreofenol al 3%) previene la infeccin de estafilococos. Los abscesos cerrados y las lesiones supuradas se tratan mediante drenaje y teraputica antisptica o antimicrobiana. Si el estafilococo no es productos de - lactamasa, la penicilina G es el antibitico de eleccin, aunque el porcentaje de cepas sensibles es muy bajo. Las piodermias graves y extensas, as como los procesos profundos como las osteomielitis, requieren un tratamiento sistmico prolongado con penicilinas resistentes a -lactamasas (meticilina, nafcilina, cloxacilina, dicloxacilina, oxacilina), eritromicina, cefalosporinas, tetraciclinas y vancomicina. (9)
Profilaxis
Para prevenir las infecciones intramamarias por S. aureus, es necesario limitar la propagacin de este microorganismo de vaca a vaca y reducir al mnimo el nmero de vacas infectadas en la granja. Para evitar la propagacin de S. aureus, hace falta llevar a cabo un programa estricto de higiene, incluida la buena higiene en el ordeo (por ejemplo: guantes de ordeo, cambio continuo de piezas de goma, revisin de la mquina del ordeo, post-dipping con un desinfectante autorizado, preparacin y cuidado de la piel, desinfeccin de la unidad de ordeo), la prevencin de lesiones en los pezones y los tejidos adyacentes, y la reduccin de las moscas en los meses de verano. Las vacas infectadas deben mantenerse separadas del resto de animales sanos y recientemente ordeados (con el fin de evitar la contaminacin a travs del ordeo). Las vacas con alteraciones evidentes del tejido mamario y poca posibilidad de curacin deben ser separadas de las dems y descartadas a medio plazo (5).
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