Composlcln flbra elsLlca

-llbras
elsLlcas
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Cuando LraLamos de ldenLlflcar flbras colgenas en Le[ldos paLolglcos es dlflcll, or lo
general para enconLrar un camblo en un Le[ldo normal, buscamos arLerla, pulmn o plel.
hacemos Lrlcrmlcos lo hacemos hablLualmenLe en hlgados con clrrosls.
La eoslna Llne esLrucLuras bslcas como clLoplasma (que slempre es rosado), colgeno,
musculo y erlLroclLos, por lo LanLo Lodo lo que no se Llne con la eoslna ser Lenldo por la
hemaLoxlllna. Ln camblo la hemaLoxlllna Llne esLrucLuras cldas como nucleos
Los Lrlcrmlcos pueden ldenLlflcar selecLlvamenLe esLas esLrucLuras (colgeno, clLoplasma,
eLc.) y adems el nucleo.
luncln: 1lncln con dlferenclacln de cada una de las esLrucLuras, prlnclpalmenLe las de
musculo y flbras colgenas, porque desde el punLo de vlsLa paLolglco son las que presenLan
ms lmporLancla.
Cuando hacemos un proLocolo de Lrlcrmlcos en Le[ldos normales o de auLopsla, vamos a
enconLrar que hay una gran dlferencla enLre las flbras musculares y las flbras colgenas. Ll
problema esL en las muesLras paLolglcas, porque el paLlogo no reconoce flbra muscular
de colgenas ya que ambas se Llnen eoslnfllas lnLensamenLe, por lo LanLo como Lodo el
Le[ldo es eoslnofllo compleLamenLe Lenemos la duda sl es una enfermedad flbrosa o un
Lumor de flbras musculares.
Ln Lermlnos slmples cuando uno hace una blopsla de hlgado Lodas las paredes de los vasos
se van a ver rosado, pero uno sabe que son vasos y las flbras de colgeno van a ser
fcllmenLe reconoclble por la forma que Llenen y por su dlsposlcln.
La ldea es poder Lenlr Lodo. or lo LanLo podrlamos Lener muchos coloranLes para poder
Lenlr cada una de las esLrucLuras que se Llnen lguales. Ls una Lecnlca muy engorrosa y que
reune muchos coloranLes cldos: Ln1AC8CMlCA que puede llegar a obLener hasLa 3
colores
or lo LanLo la clave es que slo con coloranLes cldos podemos llegar a Lenlr Lodas esLas
esLrucLuras. Con mezcla de coloracln clda se pueden dlsLlngulr y dlferenclar Lodas las
esLrucLuras (clLoplasma, colgeno, eLc.)
Ln palabras slmples slgnlflca que Llne de 3 colores -
enLracrmlcos Llenen de 4 a 3 colores dlsLlnLos -
Ln el fondo Llnen esLrucLuras de forma dlferenclal -
Tiene que ver con las disoluciones coloidales y disoluciones verdaderas.
Cuando uno disuelve un colorante: un soluto (COLORANTE) con un solvente
adecuado para ese colorante uno puede tener dos resultados:
-
a) Que el colorante se disuelva completamente
b) Que el colorante se disuelva parcialmente ( PM muy grande)!SOL.
COLOIDALES
Mordentaje?! No se considera, lo que se considera es que como toda esta
reaccin ocurre a pH cido se recomienda fijar con cido pcrico porque el
pcrico ya tie previamente amarillo incluso despus de lavar con OH 70 ya que
se va a ir parte de la tincin, pero no de las fibras musculares, por lo tanto no
queda mordentado sino que queda ya teido, es por esto cuando agregamos el
pcrico en la tincin quedar mas intensamente teido.
-
uenLro de un Le[ldo puede Lenlr nucleos, clLoplasma, musculo, colgena, glbulos ro[os,
flbra elsLlca.
-
Pay esLrucLuras del Le[ldo que no sern evldencladas con P/L por e[emplo membranas
basales, flbras reLlculares.
-
Pay coloranLes cldos o bslcos para esLas esLrucLuras -
ara nucleos prcLlcamenLe uno solo, y es la hemaLoxlllna (ferrlca alumlnlca, azul o
negra)
-
#456478569:
ClLoplasma en el P/L se Llne con eoslna
Musculo, con eoslna
Colgena, eoslna
Clbulos ro[os eoslna
LlsLlca, eoslna.
componenLe flbrllar
colgena/elsLlca/reLlcular
Cada Le[ldo, cuando Lengamos que evldenclar una esLrucLura en Lermlnos de arqulLecLura del
Le[ldo, la hemaLoxlllna se va a encargar de la Llncln del nucleo, y Lodo el resLo, la eoslna.
Se debe hacer una Llncln con un coloranLe cldo (eoslna) o con varlos coloranLes cldos que
permlLan ldenLlflcar y dlferenclar las esLrucLuras.
Como Lodas esLas esLrucLuras son predomlnanLemenLe bslcas, Llenen gran aflnldad por la
eoslna, la eoslna las Llne Lodas rosadas, el Lema es que los Lrlcrmlcos nos ayudan a causar
una dlferenclacln, prlnclpalmenLe el musculo de la colgena.
Ln Lermlnos dlagnsLlcos nos lnLeresa dlferenclar musculo de colgena, en Lumores, es
demaslado dlflcll hacer esa dlferenclacln, en Lumores como lelomlosarcoma, leloadenoma
slempre se debe deflnlr hasLa que nlvel alcanza el Lumor, dlferenclando que es musculo y que
es Le[ldo colgeno.
Adems le permlLlr ldenLlflcar Loda el rea del Le[ldo donde haya flbrosls, la colgena va a
esLar presenLe en gran canLldad en un Le[ldo flbroso.
Sl Lodos los coloranLes que Lenemos son cldos, cmo hacemos para que cada coloranLe
ell[a esLrucLuras deLermlnadas para Lenlr de manera selecLlva?
La clave de la comprensln del esLudlo de los Lrlcrmlcos son deLermlnados por slLuaclones
como M, masa, densldad, permeabllldad del Le[ldo, preparacln del coloranLe, eLc.
ueflnlcln muy slmple: dos o ms coloranLes anlnlcos, que se unen selecLlvamenLe a
dlsLlnLos componenLes del Le[ldo.
ulmn por e[emplo con van gleson, colgeno ro[o, musculo amarlllo, nucleos oscuros (cafe o
negro)
Al ver esLo, nucleos negros, slgnlflca
Colgena se le aLrlbuye al coloranLe plcro-ponceau (mezcla de 2 coloranLes cldos que Llnen
slmulLaneamenLe) segundo paso de la Llncln de van Cleson.
#;6<56= >? @=< 35?:9<
asos:
1.- Llncln con hemaLoxlllna ferrlca de welgerL (Llne los nucleos negros, reslsLe al medlo cldo
donde se produce la Lecnlca pues son coloranLes cldos en un medlo cldo, no requlere
dlferenclacln, son Lodas progreslvas). WelgerL a dlferencla de la hemaLoxlllna de Parrls, se
decolora en un medlo cldo.
2.- cldo plcrlco (M ba[o) y el ponceau (M alLo)
Ambos son coloranLes cldos, preparados en un medlo cldo, pero Llenen pesos moleculares
dlsLlnLos.
Las flbras de colgeno (en P/L) son eoslnfllas y esLn consLlLuldas por gllcoproLelnas muy
bslcas gllclna hldroxlprollna y prollna, por ende la hace afln a coloranLes cldos. Loslnfllas.
lundamenLo de los Lrlcrmlcos.
1lncln nuclear y Llncln dlferenclal de colgeno, clLoplasma y flbras musculares, 2
coloranLes anlnlcos de pm dlsLlnLo se unen a los grupos caLlnlcos de las proLelnas, pero
de forma dlferenclal.
CulmlcamenLe ocurre por aLraccln de cargas, enLre el coloranLe anlnlco y alguna
esLrucLura proLelca.
Lo segundo a conslderar es que [unLo con ser coloranLes cldos, Llene que acLuar en un
medlo cldo para aumenLar la aflnldad, al acldlflcar cualquler medlo de cualquler coloranLe,
esLamos lonlzando las proLelnas, en el fondo es como ba[ar el punLo lsoelecLrlco por lo
menos en 1 punLo, las Lendemos a lonlzar prcLlcamenLe a Lodas, por ende la acldez del
medlo, favorece la aLraccln de algo. lonlza, slgnlflca que de[a los grupos funclonales
reacLlvos.
Los coloranLes se componen qulmlcamenLe de un cromforo y un auxocromo, el
cromforo esL dado por la esLrucLura cenLral del coloranLe (oxldo nlLroso de doble enlace
en esLe caso) que corresponde a un coloranLe azolco.
8lebrlch scarleL, es un coloranLe que se usa en los Lrlcrmlcos, M 337 Llene una
caracLerlsLlca un grupo nn (coloranLe azolco)
La esLrucLura cenLral es de un coloranLe ulazolco, no es azolco solo, Llene 2 azolcas
cldo (Lodos sus radlcales son cldos)
Crupo nC, nlLroso, coloranLes Llpo nlLroso. Ll auxocromo de esLe coloranLe es el CP,
porque el nlLroso es el cromforo, parLe de la esLrucLura del coloranLe, solo aqul quedarla
llberado el CP para reacclonar.
Auxocromos son 4 CP, sulfaLo, carboxllo, amlno, lo dems comblnaclones en la esLrucLura
son parLe de la molecula.
uesarrollo de los meLodos Lrlcrmlcos (8aker 1938)
1.- hay un M dlsLlnLo denLro de los coloranLes
2.- uede haber una compeLencla enLre coloranLes, enLre algun slLlo caLlnlco del Le[ldo.
3.- esLrucLura del clLoplasma, musculo y colgeno y su permeabllldad. (musculo es el menos permeable,
luego clLoplasma y, el colgeno es el ms permeable de Lodos).
4.- La velocldad de peneLracln, dependla del Lamano del coloranLe. (M es lmporLanLe para Lenlr
esLrucLuras compacLas y adems peneLrarlo ms rpldamenLe).
1rlcrmlcos de 2 o ms coloranLes eoslnlcos [unLo con 1A/MA
1rlcrmlco de Mason?
Segundo meLodo, Llene la parLlcularldad, de que Llne de dlsLlnLos colores y uLlllza un reacLlvo cldo
llamado 1A (cldo fosfoLungsLlco), Lamblen uLlllza la hemaLoxlllna ferrlca de welgerL, porque se basa en
el medlo cldo.
Luego uLlllzamos 1A C MA (fosfoLunglsLlco y fosfomollbdlco) que son heLeropollcldos.
1.- PemaLoxlllna ferrlca de welgerLL
2.- Crange C + 8lebrlch scarleL (coloranLe cldo) rlmero se hace la Llncln de colgeno y clLoplasma,
musculo. 1lempos varlables.
3.- MA/1A (dlferenclacln prlmer coloranLe y mordenLa[e del segundo) (dlferencla el colgeno
exLrayendo el exceso de naran[o de las colgenas + claro, prcLlcamenLe blanco) acLua como puenLe
para azul de anlllna, que sl va a Lenlr la colgeno.
4.- azul anlllna (coloranLe anfLero (es bslco, genera problemas por unlrse a colgeno que es bslco, lo
que genera el orange es Lenlr las esLrucLuras bslcas hasLa dlferenclar la colgeno, va a borrar" la
colgena y se agregar el prxlmo coloranLe bslco que es azul, es declr orange C ayuda a azul de
anlllna mordenLando" para los heLeropollcldos, que se unen a la esLrucLura del colgeno y se van
unlendo a Lraves de cargas al azul de anlllna). 1lne colgeno (la + permeable)
LsLa Lecnlca Llene buenos resulLados, segun el Le[ldo que se esco[a.
Ln van Cleson Lenemos 2 coloranLes cldos, y los 2 Lenlan dlferenclalmenLe dlsLlnLas esLrucLuras cldas
Ac se uLlllza una dlferenclacln forzada" por lnclulr un coloranLe bslco.
La basofllla generada por 1A o/y MA, slendo que el colgeno es acldfllo en condlclones normales.
Ll Mason, es bueno uLlllzarlo en Le[ldos con flbras musculares por e[emplo, que Llenen colgeno y
flbrosls para poder ldenLlflcarlos .
Los cldos bloquean selecLlvamenLe los reslduos bslcos exlsLenLes en el Le[ldo a excepcln de los muy
fuerLemenLe caLlnlcos del colgeno, donde luego se acoplarn los radlcales anlnlcos de los derlvados
del LrlfenllmeLano (coloranLes del colgeno), es declr esLas susLanclas acLuan como un vlnculo enLre el
Le[ldo y el coloranLe acrecenLando la unln especlflca enLre ambos. LxlsLen numerosos mordlenLes de
dlsLlnLa naLuraleza, enLre los ms lmporLanLe: cldos: fosfoLungsLlco, mollbdlco, crmlco, plcrlco. Sales:
subllmado de oro, sulfaLo alumlnlco poLslco. CLros: LeLrxldo de osmlo, permanganaLo poLslco.
Ln resumen.
1rlcromlcos. 1lncln dlferenclal de coloranLes cldos en medlo cldo.
Mecanlsmo de accln: aflnldad de cargas
lmporLancla de que se use en el medlo cldo, lonlza me[or las proLelnas y las de[a reacLlvas, eso
favorece la dllucln de pP, eso en Lodos los medlos que usemos, al usar P/L, por e[emplo se uLlllza cldo
aceLlco.
1ecnlcas de Mason y van Cleson pueden ser las 2 mordenLadas en 8ouln.
LL mason no se lnlcla sln un mordenLa[e en 8ouln.
Sl en el van Cleson se uLlllza el plcroponceau, podemos haber fl[ado en 8ouln y es ldeal para esLa
coloracln.
Ll me[or meLodo de fl[acln para van Cleson, es 8Culn. ues es coloranLe adlclonalmenLe. Cueda el
Le[ldo basLanLe amarlllo y blen mordenLado.
llbras elsLlcas: Ceneralldades
ermlLen gran dlsLenslbllldadad de los Le[ldos
(pulmones, grandes vasos, plel, Lendones, carLllago)
Composlclon
roLelna llamada LlasLlna (cenLro de la flbra)
LlasLomuslna (ComponenLe gllcoproLelco que rodea la flbra)
Cllclna, prollna y desmoslna, lo que la hace acldflla.
nucleo cenLral Llpo bslco, elasLlna. (el prob es que la eoslna Llne la pared del musculo rosado y no
LeLnemos nlnguna poslbllldad de ver la flbra elsLlca). ara poder deLermlnar enLre oLras cosas
paLologlas comunes como hlperLensln pulmonar
Ln el cenLro esL la elasLlna, rodeada por elasLomuclna, en condlclones normales acldflla.
Ln el esLudlo de flbras elsLlcas se Lransforma su acldofllla a basofllla a Lraves de una ooxldacln.
CompuesLo por amlnocldos
P1 !pulmonar
LlasLomuclna !(C2) !basflla
Acldflla
usamos para esLe efecLo de acldofllla a basofllla
PemaLoxlllna ferrlca de verhoff
Crcelna umma Laen[er
PemaLoxlllna ferrlca de verhoeff !Llne de color negro, 1 solo paso
1.-
- Px
- lodo (oxldanLe) [Lugol}
- Cloruro ferrlco 10 [MordlenLe} (leCl2)
2.- dlferenclacln al 2 (leCl2) !exLraccln selecLlva, exceso coloranLes, puede ser reallzada por 3 Llpos
de agenLes
- cldos (CP cldo)
- MordlenLes (en esLe caso el mlsmo leCl2) nos va a permlLlr ver solo flbras elsLlcas, hay que
eleglr muy blen el Le[ldo.
- CxldanLes
Luego de de[ar la flbra elsLlca negra, hay que hacer un conLrasLe
3.- ConLrasLe !lcroponceau (mm amarlllo) colgenas y glbulos ro[os , ro[o
Molecula de LlasLlna !aumenLa puenLes dlsulfuro !Cxldando (permenganaLo de poLaslo o ?oduro
rompe ambos) !forma un grupo basfllo sulfaLado y esLa esLrucLura que es acldflla, sl la oxldamos
con permanganaLo o ?odo, rompemos el enlace y generamos un radlcal de Llpo sulfrlco de Llo basfllo
y aparce la hemaLoxlllna de verhoeff encuenLra Lodo muy cldo y Llne negra la flbra.
Ll agua y el mordlenLe usado y dlluldo, sacan rpldamenLe la laca ferrlca al no ser muy esLable
La hemaLoxlllna ferrlca de verhoeff no solo Llne la flbra elsLlca, en presencla de oLras esLrucLuras
Lamblen Llne, por e[emplo Lamblen Llne la anlllna.
1lne elsLlca y nucleos de negro
8equlere dlferenclacln conLrolada por mlcroscoplo.
A medlda que se va a dlferenclando, comlenzan a verse las flbras.
Como recomendacln, es que cuando se va a ver flbras elsLLlcas en arLerlas de un Le[ldo como pulmn,
es que se anallcen las arLerlas de medlano callbre como referencla.
uLllldad:
- PlperLensln pulonar
- ALrofla elsLlca en enflsema
- ueLecLor de anglogenesls Lumoral
Crcelna unna Lanzer
Ls un coloranLe naLural, no slempre es muy reproduclble el mane[o de Le[ldo. no slempre los loLes son
de la mlsma calaldad, es muy engorrosa.
Las arLerlas se ven muy poco conLrasLadas.
Se usa muy poco.
regunLa, aumenLar el pP er[udlca, o me[ora
nuesLra Llncln?
Ln Lrlcromlcas el medlo es acldo, en clerLos
Con pH cido se logra mejor coloracin, si
subo el pH se pierde afinidad
Se pierde afinidad solo por algunos
grupos , ls menos reacitivos
Nosotros mejoramos la afinidad cuando
bajamos el pH,
regunLa: que es una flbra colgeno?
Glicoprotenas bsicas con alta
proporcin de glicina, hidroxyprolina y
prolina
in vivo, color blanquecino
azul de anilina es un colorante bsico, por lo tanto, no tiene ninguna afinidad con las
estructuras bsicas como el colgeno, entonces lo que se usa aqu es esta mezcla que es
cida, que se une a la fibra de colgeno de manera que al ser polos opuestos, se atraen y
cambia el extremo de su polaridad a negativo, porque junto con acidificar el medio va a permitir
que en todas sus terminaciones aninicas se unan fcilmente a la anilina, acta como "puente",
es decir, se va a poner encima de todo lo que se tio lo vamos a baar en este PTA PMA y
va a cambiar el pH de la solucin en la que est y despus teimos con azul de anilina.
Entonces se dice que seria como un "mordiente" del colorante que sigue, pero nosotros
decimos que no es mordiente; acta como diferenciador de las mezclas, como bien entre medio
una vez que hemos teido, pasamos a esto y actuaria como diferenciando eliminando el
exceso de colorante, y permitiendo la llegada posterior del azul de anilina que va a teir todo el
colgeno.
Se discute sobre si es un diferenciador porque efectivamente hay diferenciadores de tipo acido,
pero no sabemos qu es lo que diferencia realmente.
la coloracion de las fibras colgenas varia segn el colorante utilizado, mientras que algunos de
los mas normalmente usamos son el fastgreen, fucsina acida, que llega a teir un conjunto de
fibras colgenas, otro reaccionan solo con algunos tipos de fibras
Cul es la diferencia entre una laca
aluminica y una frrica? El metal que
se usa como mordiente:
Las que tienen fierro entre el
mordiente sern de color negro
Las que tiene aluminio mezclado con
sulfato van a ser azules
LAS HEMATOXILINA SON SLO DE
ESTOS DOS COLORES
C|ase l2 -02 (co|agenas: t|com|cas) y .e|ast|cas
lunes, 19 de mayo de 2014 3:37 p.m.