10-08-2012

1
Facultad de Medicina
Escuela de Enfermera
Sede Temuco
Histoembriologa
ENFB2006 2012
Introduccin a la Histologa
Tcnicas Histolgicas
Dra. Paola A. Araneda Reynolds
paola.araneda@umayor.cl
Histoembriologa
08-08-2012
Temuco, Chile
10-08-2012
2
ESTE POWERPOINT ES
UNA GUA PARA EL
ESTUDIO.

EL ESTUDIANTE DEBE
COMPLEMENTAR CON
LECTURA DE
BIBLIOGRAFA
RECOMENDADA
Comprender e identificar las tcnicas de
procesamiento de los tejidos.
Establecer concepto de tejido sealando sus
caractersticas y propiedades.
RESULTADOS DE APRENDIZAJES
ESPERADOS
A. CONCEPTUALES
Examinar, identificar e interpretar una
preparacin histolgica a travs del
microscopio ptico comn.
10-08-2012
3
TEMARIO
Definicin de Histologa
Historia
Tcnicas histolgicas
Interpretacin
Microscopa
HISTOLOGA
Estudio en profundidad de la estructura y
funcin de componentes celulares.

Rama de la anatoma que estudia los
tejidos de animales y plantas haciendo una
descripcin de estructura celular, tejidos y
rganos asociada a su funcin.

Definicin
10-08-2012
4
Padre de la Histologa: Marie F. X. Bichat
SXVIII
Publicacin de libro 20 tejidos diferentes
Histologa acuado S. XIX (1806)
Historia
Bacha, W., L. Bacha. 2001. Atlas de histologa veterinaria.
1. Conocimiento de la estructura y funcin
normal a nivel microscpico de
organizacin.

2. Comprensin del proceso patolgico por
respuesta celular y tisular a las lesiones
relacionadas con procesos patolgicos.

3. Entender a los seres vivos en estado de
salud y enfermedad.

Importancia
10-08-2012
5
Unidades de Medida
Angstrm (A) 1A = 10.000.000 mm

Micrmetro (m) 1 m = 0.001 mm 1x 10
-6 m

Nanmetro (nm) 1 nm = 0.001 m 1 x 10
-9 m

Grupo de clulas similares, idnticas o
diferentes y sus productos extracelulares que
realizan una funcin especfica o un conjunto
de funciones relacionadas.


HISTLOGOS :
4 tipos de tejidos bsicos
TEJIDO
DEFINICIN
10-08-2012
6
T. Bsicos o simples : T. Epitelial
T. Conectivo - T.Adiposo*
T. Muscular
T. Nervioso
Clasificacin y caractersticas
de los Tejidos
Origen de los Tejidos
10-08-2012
7
Organizacin de los Tejidos
10-08-2012
8
TCNICAS HISTOLGICAS

OBJETIVO

Preparar los tejidos para estudiarlos
asemejando su estado natural y analizarlos por
medio de microscopio ptico.

Procesamiento de Tejidos en Histologa
10-08-2012
9
ubicacin del tejido identificacin de muestra
rpida y con destreza
instrumentacin adecuada
colocar en fijador
10 hrs

1. Obtencin de la Muestra
10-08-2012
10
10-08-2012
11
Detener la autlisis postmortem
Conservacin
Endurecimiento de tejidos
Intensificar la tincin
Reducir la presencia de agua en tejidos
Estabilizar componentes celulares
Propiedades antispticas
2. Fijacin
OBJETIVO
1. FIJADORES COAGULANTES
Generan cambios estructurales profundos
ej : metanol, etanol

2. FIJADORES ADITIVOS
Formalina 10%
Fijador de Bouin
Tipos de Fijadores
Tiempo necesario para fijacin prx. 24 hrs
10-08-2012
12
OBJETIVO

Eliminacin total del agua desde el tejido.

Bao gradual en alcohol
Diferentes grados de manera ascendente
Hasta llegar al 100%.

ej: alcohol etlico, acetona
Tiempo 8 hrs
3. Deshidratacin
10-08-2012
13
OBJETIVO

Eliminar el alcohol de los tejidos porque no
es compatible con parafina.

Bao gradual en xilol

ej: xilol, benzol, cloroformo, tolueno
1:1, 1:2, 2:2
Tiempo 4 hrs
4. Aclaracin
10-08-2012
14
OBJETIVO

Impregnar los tejidos con parafina sustituyendo
al xilol para luego proceder a la inclusin.

Parafina purificada a 5153C en moldes
5658C

Tiempo 6 hrs
Autotcnico : mquina automtica de 12 envases
Reloj - brazo
5. Impregnacin
Autotcnico
10-08-2012
15
OBJETIVO

Colocar el tejido en moldes de parafina.

ej: Parafina purificada, paraplast
5658C
corte en forma pirmide truncada
6. Inclusin
10-08-2012
16
OBJETIVO

Obtener fragmentos delgados de tejidos
Se realiza con bloque en fro

corte en forma pirmide truncada
Micrtomo : cintas finas 5 7 m
Bao de agua 45 C

7. Corte
10-08-2012
17
10-08-2012
18
Criostato
10-08-2012
19
OBJETIVO

Diferenciar componentes celulares resaltando
sus cualidades.

OJO : Los colorantes son sales solubles en agua.

Pasos:
Agentes desparafinantes (xilol I y Xilol II)
Hidratacin (100% - 70%)
Agua
Tiempo 40 min

8. Tincin
10-08-2012
20
10-08-2012
21
OBJETIVO

Adhesin del tejido en el portaobjeto.

ej:
blsamo de Canad
albmina de Mayer + timol
Entelln

Estufa secado 20 minutos


9. Montaje
10-08-2012
22
http://www.youtube.com/watch?v=OavP
Z6hx5oA&feature=related

http://youtu.be/KyO3TT2NaKk

http://youtu.be/EMXpQzwOc_Q

TINCIONES
10-08-2012
23
1. COLORANTES BSICOS

Componente celular cidos bsicos
BASOFILOS

2. COLORANTES CIDOS
Componente celular bsicos cidos
ACIDFILOS

Neutralizacin

Tipos de Colorantes
Ejemplo
Bacha, W., L. Bacha. 2001. Atlas de histologa veterinaria.
10-08-2012
24
a) TINCIN DE HEMATOXILINA-EOSINA

USO : diferenciar elementos celulares

H : color azul o prpura a componentes
cidos de clulas
ej: cromatina, secreciones

E : color rosa plido a rojo a componentes
bsicos de clulas
ej : citoplasma.


Tinciones de uso frecuente
10-08-2012
25
b) TINCIN DE WRIGHT-GIEMSA; MG; G

USO : diferenciar clulas sanguneas

rosa : eritrocitos, grnulos de eosinfilos
prpura : ncleos de leucocitos, grnulos
basfilos.
azul : citoplasma de monocitos y linfocitos.

Wittwer, F. UACH.
Wittwer, F. UACH.
10-08-2012
26
c) TINCIN DE ORCENA

USO : diferenciar fibras elsticas

marrn rojizo : fibras elsticas
Sobotta, J. 1999. Histologa.
10-08-2012
27
Bacha, W., L. Bacha. 2001. Atlas de histologa veterinaria.
d) TINCIN TRICRMICA DE MALLORY

USO : diferenciar elementos del tejido conectivo

azul oscuro : fibras de colgeno
rojo : fibras musculares, glias
naranja : fibras de elastina

www.iqb.es
10-08-2012
28
e) TINCIN DE VAN GIESON

USO : diferenciar fibras de colgeno

rojo : fibras de colgeno

Sobotta, J. 1999. Histologa.
Artefactos
Bacha, W., L. Bacha. 2001. Atlas de histologa veterinaria.
10-08-2012
29
Bacha, W., L. Bacha. 2001. Atlas de histologa veterinaria.
Bacha, W., L. Bacha. 2001. Atlas de histologa veterinaria.
10-08-2012
30
Tcnicas Avanzadas
1. HISTOQUMICA

2. INMUNOCITOQUMICA

3. AUTORRADIOGRAFA
10-08-2012
31
Importancia
10-08-2012
32
GRACIAS POR SU ATENCIN!!
CONSULTAS?
10-08-2012
33
Facultad de Medicina
Escuela de Enfermera
Sede Temuco
Histoembriologa
ENFB2006 2012