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REACCION DE GALLI MAININI PARA

EL DIAGNOSTICO PRECOZ DEL


EMBARAZO
Por el doctor Gilberlo Angel .MejIa
La reaccin de Galli Mainini efectuada en batracios machos para
el diagnstico precoz del embarazo, se deriva del conjunto de trabajos
realizados por Houssay y su escuela, quienes desde el ao de 1922
venan trabajando en forma intensa e ininterrumpida, sobre anatoma
histologa y fisiologa gonadales, observando las .relaciones entre
stas y las gonadotrofinas en diversos batracios. En el ao de 1929 ha-
llaron laliberacin de los espermatozoides en el testculo del Bufo are-
narum Hensel, por la estimulacin de las gonadotrofinas hipofisia,
rias y aunque numerosos trabajos sepublicaron al respecto en los aos
posteriores, slo en marzo de 1947 Carlos Galli Mainini public su
primer trabajo, realizado sobre 19 casos, marcando el primer eslabn
en esta reaccin que ha sustitudo a cuantas se han aplicado para el
diagnstico precoz del embarazo, por su exactitud y rapidez.
El fundamento de la reaccin reposa en la especificidad que tiene
la gonadotrofina corinica, presente en la orina de mujer embarazada,
sobre el testculo del sapo, haciendo liberar las clulas de Sertoli : stas
sufren una serie de' transformaciones, cuyo resultado es el desprendi-
miento delos espermatozoides quedando libres enlaluz delas ampollas
seminferas, desde donde inician su migracin al exterior.
El procedimiento para efectuar la reaccin consiste, ~n inyectar
10 cm3. de orina en el saco linftico lateral, dejar el animal en re-
poso 2 a 3 horas y luego tomar de la cloaca unas gotas de orina
que seexaminan al microscopio. En caso de positividad, seven los es-
permatozoides del sapo en medio de su orina y en caso negativo no
estn estos elementos presentes.
4# Revista de laFacultad de Medicina
M uest r as de. or i na.
La mujer con cuya orina se efectuar la reaccion, no necesita
sometersea ningn rgimenespecial ni tampocoserequierequesus-
pendaningn tipodemedicacinalacual estsometida, aunencasos
de teraputica hormonal conestrgenos, progesterona o gonadotrofi-
nas. Referentea stas ltimas si seconsideranlas dosis comunmente
empleadasy aunsuponiendoquetodalacantidadinyectadaseelimine
enlas24horas por vaurinaria, el contenidode10cm3. ser siempre
insuficientepara provocar respuestapositivaenel animal. La recolec-
cindelaorinapuedehacerseencualquier momento, aunquees pre-
feridalaorinadelaprimeramiccinmatinal. No es necesariofiltrar-
la, nonecesitaprecaucionesdeesterilidadel recipiente, supH notiene
influenciasobrelareacciny sobreladuracindelaactividadgenado-
trfica de la orina de mujer embarazada, se ha comprobado que
guardan la actividad suficiente para provocar reacciones positivas
an 10das despus deemitirlas conservadas atemperatura ambiente
sin preservativos de ninguna especie. Este punto fue estudiado por
Galli Mainini quienaplicel mtodocuantitativo paradeterminar dia-
riamente lapotenciagonadotrficaen orinas estacionadas a tempera-
tura ambienteentre 149y 18
9
comotambina4
9
. En ningunodelos
casosseempleprecaucinalgunaparaimpedir laproliferacinmicro-
biana o inhibelos procesos de fermentacin. Los resultados de-
mostraron, quean 10das despus deemitidalaorina, conservauna
actividad gonadotrfica igual, tanto en las que seconservana bajas
temperaturas como en las que se conservan a temperatura media.
Mayer, Govi y Flrez han trabajado con orinas conservadas a una
temperatura entre 229 y 269 durante 7 das y tambin encuentran
resultados positivos despus de estelapso; sacando la siguientecon-
c!usin: "Debemos destacar que los procesos de fermentacin en la
orina no afectaron lavida del batracio, quedando demostrado que la
actividad biolgica de la gonadotrofina corinica en orinas enveje-
cidas, mantenidas a la temperatura ambienteexpresada, persistepor
unlargotiempo (7 das determinado) siendofactibleseprolonguepor
varios das ms, pero quenosotros no hemos determinado". Por otra
parte Gandolfo Herrera y Sauri comprobaron, que el calentamiento
a359noafectasuactividad, peros cuandosesobrepasenlos709.
Ti empos m ni mo y mxi mo en [ a,s r eacci ones.
La observacinmicroscpicadelaorina del sapo, puedehacerse
encualquier momentoapartir delos30minutos deinyectados, quees
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el tiempomnimoenel quesehan obtenido resultados positivos. Se
acepta queenbuenas condicionesel 100por 100derespuestas posi-
tivas ocurrendentro delas tres primeras horas delainyeccin, posi-
tividadquepersisteenformacontinuadurante ms de24horas.
Especi f t i ci dad de l a r eacci n.
Deacuerdo a lanumerosaestadstica presentada por el autor, la
respuestadel sapomachoes especficasolamentepara las gonadotrofi-
nas deorigencorial, aunqueexperimentalmenteseha logradoobtener
respuestas positivas congonadotrofinasrica, hipofisiaria, equina, hi-
pofisiaria de vacuno, pero usando productos muy purificados y en
dosis elevadas. Se ha experimentado con hormona folculo estirnu-
"lantehipofisiariade mujer ovariectomizadao en menopausia, estr-
genos, benzoato de estradiol, etilbestrol, progesterona, propionato de
testosterona, desoxicorticosterona, pitressina, tiroxina, prolactina.
adrenocorticotrofina, adrenalina, suspensionescrudas dehgado, rin,
suprarrenales, bazo, corazn, msculo y estmago de sapo, cido
ascrbico, acetil.colina, acetato de cobre, yohinbina, azul demetileno,
sulfato de zinc, sin ninguna respuesta positiva. Hasta el presente,
no se ha observado ninguna reaccin falsamentepositiva. Sobre un
total de 2.064 reacciones verificadas en personas que con certeza
sepodaafirmar la ausenciade embarazo, la exactitud fue del 100
por 100y laestadsticaacumuladaenlos casosdeembarazosdepoco
tiempo suman 3.079 reacciones. El nmero de positivos confirmados
es de2.027y el porcentajederesultados corectosvaraentreel 98,16
por 100al 100por 100.
Pr ecoci dad de l a r eacci n.
La reaccindiagnsticaen el sapopareceser sumamenteprecoz
en relacinal tiempodeamenorrea. Sobre106casosestudiados todos
con amenorreamenor a 20 das y entre los queen80 la amenorrea
era inferior a 15das, seobtuvieron resultados positivos en los que
posteriormente se comprob el embarazo por el "estudioclnico. El
tiempomnimodeamenorreaerade4das y en21casoslaamenorrea
era de9 das.
Resul t ados compar at i vos con l a r eacci n de F r i edman;
Sobre 1.674reacciones efectuadas simultneamenteen la coneja
yel sapo, sehapodidocomprobar quelareaccinenel batraciomacho
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es de una mayor exactitud; en la mayora de los casos reacciones
correctas en el sapo, lo eran tambin en la coneja, pero las' discordan-
cias observadas estn a favor de la reaccin de Galli, posiblemente
debido a las condiciones previas de la coneja, como peso, edad, ais-
lamiento individual, etc., requisitos que pueden falsearla inadvertida-
mente. En la serie de Galli-Mainini figuran 368 reacciones practica-
das simultneamente en el sapo y en la coneja con 14 defunciones.
Del resto, es decir en 354 reacciones hay 27 no coincidentes, con 23
casos en que la respuesta del sapo fue correcta, en 2 lo fue la Fried-
man y en 2 no pudo establecerse cual de las reacciones era exacta.
Pinto y Suer Boero hallaron 9 resultados no concordantes. En 7
casos el resultado de la Friedman fue equivocadamente negativo y el
sapo correctamente positiva. Sala, J achesky y Colotta encontraron
3 reacciones no coincidentes en las cuales 2 eran respuestas correctas
positivas en el sapo. Merchante, encontr coincidencia de resultados
en 42 sobre 45 reacciones simultneas, analizando as la discordancia.
Un resultado negativo incorrecto en el sapo en el que la observacin
no se prololg ms de tres horas. Un resultado positivo correcto en
el sapo y un resultado negativo incorrecto en el sapo, que posterior-
mente repetido di respuesta positiva, comprobndose ms tarde lapre-
sencia de un embarazo ectpico. "En S O reacciones simultneas afee-
tuadas por Hutz, hubo un caso discordante en que la Friedman era
errneamente negativa. Repetida la reaccin de Friedman fue nue-
vamente negativa y el sapo positivo. Slo 1S das ms tarde, la ter-
cera reaccin de Friedman di resultado positivo cuando la de GaIli
lo haba sido ms precozmente.
En el embar aeo ect pi co.
De gran utildad porque adems de la rapidez en la respuesta que
puede acelerarse manteniendo al animal en condiciones ptimas y a
una temperatura constante de 30
9
, con 'ia inyeccin de orina obtenidr .
en cualquier momento del da y en concentraciones variables, se han
obtenido resultados muy halagadores, pues de S S casos observados,
S O dieron resultados correctos.
En l a mol a hi dat i f or me.
-
Los resultados obtenidos hasta el presente son dispares, el nmero
de reacciones es escaso por lo que merece ms estudio a fin de llegar
a conclusiones definitivas. Galli encuentra dos casos correctos y Pou
de Santiago 8, Pinto y Suer Boero estudian la precocidad de la nega,
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tivizacin despus de la expulsin en dos casos, haciendo sospechar
a los autores que en esta afeccin la reaccin de Galli se negativiza
ms precozmente que ias de Friedman y Ascheim Zondek. Personal-
mente comprobamos un caso en que se sospechaba clnicamente una
molahidatiforme. La reaccincuantitativa presentaba unaconcentracin
superior a 320.000 unidades internacionales por litro, llamndonos la
atencin, la rpida respuesta de! sapo y su excesiva positividad. Ms
tarde comprobamos tanto al examen macroscpico como histolgico
el diagnstico sospechado de Mola Hidatiforme. En este caso parti-
cular obtuvimos una recacin cualitativamente positiva, con la inyec-
cin al sapo de 7 ce. de lquido cefalo.raqudeo extrados a la pa-
ciente antes de la interevencin.
En el car i o- epi t el i oma.
, Hasta el presente pocas estadsticas encontramos. Blanchard y
Bretto observaron en 1947 un caso concordante con la reaccin de
Friedman y hasta el momento la estadstica de Galli est en estudio.
Al presentar la reaccin cuantitiva paralelismo con la de Friedman
en los pocos casos que hemos t
1
nidola oportunidad de apreciar, cree-
mos que en e! futuro sea de gran utilidad, esperando mayor oportu-
nidad de su estudio para lograr alguna conclusin.
En l a amenaza de abor t o.
Galli obtuvo casos positivos de los que en S secomprob el em-
barazo por el estudio histolgico del material expulsado y en dos por
la evolucin posterior del embarazo.
En el abor t o i ncompl et o.
Figueroa Casas, Pinto y Pou deSantiago, citan 7 casos con lato-
talidad deresultados correctos.
En el abor t o compl et o.
Galli Mainini obtuvo 4 respuestas positivas en 4 observaciones
una de ellas a las 24 horas de producirse y 3 a las 48 horas. Hutz
en dos casos de oborto provocado obtuvo resultados negativos a las
5 y 6 horas despus de la expulsin y en un tercer caso la respuesta
erapositiva alas 8 horas pero negativa alas 10horas deproducirse el
aborto. Hasta e! momento apesar de lacorta estadstica publicada por
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los diversos autores, parecequelareaccindeGalli es devalor como
diagnsticoy pronsticoenlas diversas fases del aborto, como10 de-
muestran los resultados obtenidos.
En embar azo con f et o muer t o y r et eni do ..
Enuncasorelatadopor Hutz lapacientecon7mesesdeembara-
zodej depercibir movimientosfetales durante 10das y laausculta-
cin era negativa. La reaccinde Galli di resultado negativo y 5
das ms tarde lagestantecomunicsu seguridaddesentir nuevamen-
temovimientosfetales. La reaccinrepetida enestemomentodi re-
sultado negativo, comprobndose posteriormente la exactitud de la
reaccinpor laexpulsindeun fetomuerto consignos desu muerte
tiempoatrs.
En l a ecl ampsi a.
En 6 casos los resultados han sido positivos. En esta entidad' a
veces se observa la precocidad e intensidad de la reaccin. Pou de
Santiago relata un casoen quelapositividadera degran intensidad
sloalos30minutosycon1cm3. deorinainyectada.
En e~ per odo de l act anci a.
Los casos recopilados por Ga1li, Pou de Santiago y Figueroa.
Casos en mujeres amenorreicas y en lactanciahan sido coincidente-
mentenegativos conausenciadeembarazoe,igualmentehan sidoeon-.
cordanternentepositivos, enamenorreas y lactanciaenlos queposte-
riormente la evolucin del embarazo fue confirmada.
RC J,cci n cuant i t at i va.
Dada la importancia clnica de determinar cuantitativamente la
cantidad degonadotrofinas corinicaseliminadas, enunidades interna-
cionales, Galli Mainini hatratado deestablecerestemtodoensureac-
cin el que tericamente podra hacerse apreciando el tiempo que
transcurre entre la inyeccinde una determinada cantidad de orina
y su respuesta en el sapo, apreciando numricamente, lacantidadde
espermatozoidesqueseencuentranenel campomicroscpicountiempo
fijo despus de inyectar determinada cantidad de orina o finalmente
valorar lacantidadmnimadeorinanecesariapara producir respues-
ta positivaenuna Seriedesapos, concantidades decrecientesdema-
terial, mtodoquesinser perfecto, comoafirmaGaIli, ofrecemayores
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garantas que los anteriores. Valorando la dosis mmima de gonado,
trofina corinica en unidades internacionales capaz de producir res-
puesta positiva, encontr que esta dosis en su serie es de 40 U. I.
aproximadamente por cm3. En 72 determinaciones cuantitativas, los
resultados demuestran que la mayor concentracin gonadotrfica se
encuentra en orinas donde el embarazo est entre el 1 y 334 meses
encontrando en 4 casos una concentracin hasta de 320.000 U.l. por
litro con embarazos clnicamente normales.
La determinacin cuantitativa contina en estudio ya que dada la
gran sensibilidad del sapo a la gonadotrofina corinica, no se han
podido sacar conclusiones definitivas. Personalmente y en los casos
que hemos tenido la oportunidad de observar, creemos que es de gran
valor, en el control de embarazos donde hay antecedentes de mola hida-
tiforme y en la sospecha clnica del corioepitelioma donde el aumento
progresivo en unidades gonadotrficas es de un valor indiscutible.
Concl usi ones.
Segn los datos recopilados por el autor de la reaccion, Carlos
Galli Mainini y los que se han ocupado de su estudio, se demuestra
que sus caractersticas la hacen superior por su especificidad y dems
caractersticas, a H1S reacciones hasta hoy conocidas.
El animal usado en el Valle del Cauca es el sapo macho cient-
ficamente denominado BUFO MARINUS segn la clasificacin hecha
por Emmett R. Dunn Haverford College-Pensilvania, U.S.A.
La reaccin de Galli es de gran precocidad diagnstica, observn-
dose resultados correctamente positivos que han tenido su confirma-
cin ulterior, en amenorreas.de slo 4 das.
La especificidad es completa, ya que orinas de mujeres no embara-
zadas, normales, ovariotornizadas, en menopausia, prepbereso con
las ms diferentes afecciones, nunca han dado respuestas positivas co-
mo tampoco en orinas de nios y hombres adultos.
La exactitud de los resultados est comprobada por numerosas
estadsticas, que segn los autores muestra de un 98,16 por 100 a
100 por 100 de resultados correctamente negativos y 100 por 100
de positivos correctos.
Esta reaccin es la ms rpida en su respuesta de las existentes
hasta hoy da. Algunas respuestas positivas se obtienen dentro de la
primera hora de la inyeccin, el 80 por 100 a la segunda hora y casi
la totalidad dentro de las tres horas, aunque es factible ver, reaccio-
nes positivas hasta las 24 horas caso sumamente raro, cuando se tienen
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los animales a temperatura conveniente. A los 8 das de inyectado el
animal se ha negativizado totalmente.
Al ser elemento de juicio para su positividad la presencia de es-
permatozoides del sapo, no hay posibilidad de error por falsa aprecia.
cin subjetiva.
La reaccin cuantitativa aplicada en la mola hidatiforme y corioe-
pitelioma, contina en estudio pero los casos observados, hasta el pre-
sente prometen ser tan halagadores como los estudiados hasta el pre-
sente en el embarazo normal y donde se aplica la reaccin cualitativa,
Cali, agosto 19 de 1949.
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