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FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

DEPARTAMENTO BIOMEDICO
UNIDAD BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR


CURSO FISIOLOGIA CELULAR II AO BIOTECNOLOGIA
GUIA TRABAJOS PRACTICOS ORGANIZACIN CELULAR

INTRODUCCION

Todas las clulas se caracterizan por poseer informacin gentica. Esta informacin se encuentra como
molculas de ADN. En los organismos procariontes, el ADN no est asociado a protenas y se encuentra
libre en el citoplasma localizndose preferentemente en un sector generalmente llamado zona nucleoide, la
cual no se encuentra limitado por membranas.

En clulas eucariontes, este ADN esta confinado principalmente al ncleo. En este organelo no slo se
localiza o almacena la informacin gentica, sino que all tambin existe una compleja maquinaria
enzimtica, que permite que la informacin contenida en los genes se replique y se exprese en productos
intermediarios, los que posteriormente participarn en otros procesos celulares determinando la
estructura y la regulacin de las actividades celulares. Un pequeo porcentaje del genoma se encuentra
constituyendo los cromosomas mitocondriales en este organoide.

El ncleo es una estructura celular aproximadamente esfrica de unos 7 m de dimetro en promedio; su
lmite est definido por la envoltura nuclear o carioteca, estructura compuesta por dos subunidades de
membranas separadas entre si por un espacio. En el interior del ncleo se encuentra el material gentico,
ADN, el cual se encuentra asociado a protenas llamadas histonas y formando parte de un agregado
macromolecular denominado cromatina propio de los organismos eucariontes.

La diferenciacin celular es el proceso por el que las clulas adquieren una forma y una funcin
determinada durante el desarrollo embrionario o la vida de un organismo pluricelular, especializndose en
un tipo celular. La morfologa de las clulas cambia notablemente durante la diferenciacin, pero el material
gentico o genoma, permanece inalterable, con algunas excepciones.

Las clulas de los mamferos se pueden clasificar en tres categoras: Las clulas de la lnea germinal, las
clulas somticas y las clulas madre. Cada una de las cerca de 100 mil millones de clulas del cuerpo
humano, por ejemplo, posee su propia copia del genoma, excepto ciertas clulas que han perdido su ncleo
celular durante su diferenciacin, como es el caso de los hemates, eritrocitos o glbulos rojos. La mayora
de las clulas son diploides, es decir, que poseen dos copias de cada cromosoma. Estas clulas se llaman
clulas somticas. La mayora de las clulas que forman los distintos tejidos del cuerpo humano son de esta
categora.

Todas las clulas de la lnea germinal estn destinadas a la formacin de gametos (vulos y
espermatozoides) y son las nicas capaces de transmitir su material gentico a las generaciones siguientes.
Las clulas germinales se diferencian de las clulas somticas, porque su dotacin cromosmica es
haploide, adems de que entre ellas son genticamente diferentes gracias al proceso de recombinacin
durante la meiosis. Estas forman parte de tejidos y rganos durante su formacin, pero se transforman en
clulas libres una vez diferenciadas con caractersticas morfofisiolgicas para movilizarse y producir la
fecundacin.

Las clulas madre tienen la capacidad de autorrenovarse mediante divisiones mitticas o bien de continuar
la va de diferenciacin para la que est programada y, por lo tanto, producir clulas de uno o ms tejidos
maduros, funcionales y plenamente diferenciados en funcin de su grado de multipotencialidad.


Por lo general todos los tipos celulares que componen un organismo multicelular presentan variaciones en la
duracin de su ciclo celular, en todos el mecanismo bsico es el mismo, pero no todas las clulas tienen la
capacidad de dividirse, y entre las que tienen esa capacidad, el tiempo que transcurre entre un ciclo y el
siguiente vara dependiendo del tipo celular. Existen poblaciones celulares altamente diferenciadas que
pierden totalmente la capacidad de dividirse y por lo tanto abandonan el ciclo celular de modo permanente
(neuronas, miocitos, gametos, glbulos rojos). Existen clulas que abandonan el ciclo celular por tiempos
variables, pero que no pierden la capacidad de dividirse, estas se dice que estn en G
0
. Con un determinado
estmulo, estas poblaciones celulares pueden reingresar al ciclo celular, duplicando su material gentico y
experimentando nuevamente mitosis (clulas hepticas y cartlago). Tambin existen poblaciones celulares
que estn en constante renovacin, permanentemente en ciclo celular, y que son el sostn para el
mantenimiento de los epitelios, de la renovacin de los eritrocitos y leucocitos, de la formacin permanente
de clulas que reemplazarn a las que no son funcionales o han envejecido, as como tambin de la
generacin de un ser humano a partir de un cigoto.
TEJIDO MUSCULAR: En los vertebrados se pueden distinguir tres tipos de msculos, segn su morfologa
y funcin. Algunos muestran un patrn regular de bandas alternantes claras y oscuras, que se extiende por
todo el ancho de la fibra, por lo que se les ha llamado msculos estriados. Este tipo de msculos se
relacionan con el esqueleto y el corazn, formando el msculo esqueltico y el msculo cardaco
respectivamente. El msculo liso, que carece de estriaciones transversales, aparece en las paredes
viscerales y a menudo es conocido como msculo visceral. Funcionalmente el msculo es voluntario o
involuntario. El msculo estriado es voluntario, el liso es involuntario, y el cardaco es involuntario estriado.
Es en el msculo estriado o esqueltico (Fig. 1), dnde se
puede apreciar con mayor facilidad la diferenciacin celular.
Est formado por haces de clulas muy largas (hasta de 30 cm)
cilndricas y multinucleadas, con dimetro que vara de 10 a 100
m., llamadas fibras musculares estriadas. Los miocitos o
fibras musculares son clulas alargadas, con su eje longitudinal
paralelo a la direccin del movimiento y estn altamente
especializados para cumplir su funcin de contraccin. Para ello
su citoplasma contiene protenas contrctiles, la actina y la
miosina, dispuestas en forma fibrilar y transforman la energa
qumica en mecnica mediante la degradacin del ATP. Las
fibras musculares estn organizadas en haces envueltos por una membrana externa de tejido conjuntivo,
llamada epimisio. De ste parten septos muy finos de tejido conjuntivo, que se dirigen hacia el interior del
msculo, dividindolo en fascculos, estos septos se llaman perimisio. Cada fibra muscular est rodeada por
una capa muy fina de fibras reticulares, formando el endomisio.
Los organelos citoplasmticos de los miocitos poseen una alta especializacin funcional, lo que ha conducido
al uso de la terminologa especial para denominar algunos de estos componentes:
Membrana plasmtica: sarcolema.
Citoplasma: sarcoplasma. La mayor parte est ocupado por miofribillas, diferenciaciones propias de las
clulas musculares, gran cantidad de mitocondrias, complejo de Golgi y un retculo liso muy
desarrollado.
Retculo endoplsmico liso: retculo sarcoplsmico.
La caracterstica ms notable de la fibra muscular esqueltica es la presencia de segmentos claros y
oscuros, que son la base de la estriacin transversal apreciable en una seccin longitudinal de la fibra. El
microscopio de luz polarizada demuestra unas bandas oscuras anisotrpicas, denominadas por ello bandas
A, y unas bandas claras isotrpicas, denominadas bandas I. En el centro de la banda I aparece una lnea
densa transversal, la lnea Z. En las mejores preparaciones se pueden observar una banda plida y estrecha,
que cruza transversalmente la banda A, es la llamada banda H, en cuyo interior y en posicin central surge
la lnea densa transversal llamada M. La longitud relativa de cada una de las bandas depende del estado de
contraccin de la fibra muscular. La longitud de la banda A es siempre constante, mientras que la banda I
es muy evidente en el msculo relajado, pero est muy acortada en un msculo contrado. El sarcmero es
la unidad contrctil de la fibra y se define como la porcin de miofibrilla incluida entre dos lneas Z
sucesivas. En el sarcmero, cuando la banda I se acorta, las lneas Z se acercan a los bordes de la banda A.
El tejido conjuntivo permite que la fuerza de contraccin generada por cada fibra individualmente acte
sobre el msculo entero, contribuyendo as a su contraccin y transmitiendo la contraccin del msculo a
tendones ligamentos, aponeurosis y huesos. Cada fibra muscular presenta cerca de su centro una
terminacin nerviosa llamada placa motora. La fibra muscular est delimitada por una membrana llamada
sarcolema y su citoplasma se presenta lleno principalmente de fibrillas paralelas, las miofibrillas, que son
estructuras cilndricas, con un dimetro de 1 a 2 mu, y se distribuyen longitudinalmente a la fibra muscular,
ocupando casi por completo su interior. Al microscopio se observan estriaciones transversales originadas
por la alternancia de bandas claras y oscuras. La estriacin es debida a repeticin de unidades llamadas
sarcmeros. Cada unidad est formada por la parte de la miofibrilla que queda entre dos lneas Z y
contiene una banda A.

TEJIDO NERVIOSO: La neurona (Fig. 2) tiene la capacidad de irritabilidad, que es la capacidad de una
clula para reaccionar ante estmulos y conductividad, que es la capacidad de transmitir dicho impulso hacia
otras partes de la clula. Es posible distinguir en ella: el soma o cuerpo celular de formas muy variadas y
prolongaciones.

Las neuronas son clulas sintetizadoras de protenas, con un alto gasto de energa metablica, ya que se
caracterizan por secretar distintos tipos de productos a nivel de sus terminales axnicos. Por ello, el
ncleo, que se encuentra en el soma, es grande y rico en eucromatina, con el nuclolo prominente. El aparato
de Golgi se dispone en forma perinuclear y da origen a vesculas membranosas, con contenidos diversos, que
pueden desplazarse hacia las dendritas o hacia el axn. El citoesqueleto forma las neurofibrillas, que
corresponden a manojos de neurofilamentos (filamentos intermedios), vecinos a los abundantes
microtbulos (neurotbulos). Las dendritas nacen como prolongaciones numerosas y ramificadas desde el
cuerpo celular. A lo largo de las dendritas existen las espinas dendrticas, pequeas prolongaciones
citoplasmticas, que son sitios de sinapsis. El axn es de forma cilndrica y nace desde el cono axnico que
carece de ergastoplasma y ribosomas. El citoplasma del axn (axoplasma) contiene mitocondrias, vesculas,
neurofilamentos y microtbulos paralelos. Su principal funcin es la conduccin del impulso nervioso. Se
ramifica extensamente slo en su regin terminal (telodendrn) la que acta como la porcin efectora de la
neurona, ya que as cada terminal axnico puede hacer as sinapsis con varias neuronas o clulas efectoras.

Fig. 2








TEJIDOS VEGETALES. (Fig. 3 y 4): Cuanto ms elevada es la organizacin de un vegetal, mayor es el
nmero de clases de tejidos que componen su cuerpo. Desde el punto de vista ontognico, las clases de
tejidos de los Cormfitos pueden reunirse en dos grandes grupos:
1. Tejidos Embrionales o Meristemticos: El tejido meristemtico o meristemo, consta de clulas
capaces de mantener una activa divisin celular y es el responsable del crecimiento y desarrollo de las
plantas. Est constituido por clulas vivas, pequeas, con grandes ncleos, sin vacuolas y con una pared
celular fina, que permite su crecimiento y su divisin. Se localizan en las semillas, en los pices de las races
y los tallos, en las yemas y tambin en el interior del tallo o tronco.

2. Tejidos Adultos o Diferenciados: Normalmente no producen divisiones celulares. Sus clulas ya han
adquirido una completa diferenciacin, por lo que tienen un mayor tamao que las embrionales, son
relativamente pobres en plasma o incluso carecen de l, o estn muertos. Los tejidos adultos pueden
clasificarse de manera siguiente:
Tejidos protectores. El tejido epidrmico recubre las hojas y los tallos y races jvenes. Protege la parte
area de la planta de la desecacin y permite la absorcin de agua y de sales minerales a travs de la parte
subterrnea. Est formado por una nica capa de clulas vivas. El tejido suberoso o sber protege a la
planta contra la prdida de agua y contra las temperaturas extremas. Se encuentra en tallos y races
viejas.
Tejidos fundamentales. Son los parnquimas o tejidos parenquimticos. Tienen diversas funciones:
realizar la fotosntesis, parnquima cloroflico o clornquima, con clulas con gran cantidad de
cloroplastos y ubicados inmediatamente bajo la epidermis superior de las hojas. Parnquima de reserva,
es tpico de tallos, races y tejidos nutricios de semillas, capaces de almacenar sustancias como almidn,
grasas, etc. Es especialmente importante el parnquima reservante que acompaa al tejido conductor. Se
incluyen en este grupo, los parnquimas reservantes de agua (parnquima acufero), especialmente en
plantas crasas de desierto. Por ltimo podemos encontrar tejido capaz de acumular aire, parnquima
aerfero o neumatnquima, que deja grandes espacios intercelulares que facilitan el intercambio gaseoso
con la atmsfera.
Tejidos esquelticos o de sostn. La planta tiene que conservar su forma y mantener cierta solidez para
desarrollar sus actividades vitales. La mayora de las plantas deben su solidez y elasticidad a la posesin de
tejidos mecnicos: el Colnquima y el Esclernquima. El colnquima mantiene erguidos los tallos jvenes y
los pecolos de las hojas. El esclernquima se encuentra en las partes vegetales ya desarrolladas y es comn
que las clulas que lo componen sean muertas. Aparece en rganos protectores, como el cuesco del
melocotn.
Tejido glandular. La funcin del tejido glandular es la secrecin de sustancias. La clave de este tejido son
las clulas secretoras, capaces de producir algunas sustancias o concentrar y almacenar otras. Las
secreciones pueden ser expulsadas al exterior o al interior de la planta. Hay varios tipos de rganos
glandulares en las plantas: algunos son pelos, otros son tubos, etc. Los productos son muy diversos, entre
ellos, resinas, aceites con esencias, muclagos, gomas, nctares, etc. Los productos que segregan son
vertidos en el protoplasma en numerosas vacuolas o llegan a llenar casi por completo el lumen de la clula,
que a veces finalmente muere. Se pueden citar las siguientes secreciones: gomorresinas, resinas, esencias,
taninos, alcaloides, cristales de oxalato, ltex, etc.
Tejidos conductores. Son los que transportan sustancias por el interior de las plantas. Existen dos tipos
bsicos, el xilema y el floema El xilema o tejido leoso, conduce principalmente agua y sales (savia bruta)
de la raz a las hojas y las paredes de estas clulas son altamente lignificadas por lo que no se aplastan. El
floema o lber, transporta la savia elaborada (sustancias orgnicas como carbohidratos), que se produce
en las hojas, al resto de los rganos de la planta. Son clulas vivas largas de paredes sin lignina y dispuestas
en series longitudinales unidas entre s por medio de poros abiertos que resultan de la perforacin local.
Fig. 3





Fig. 4




EPIDERMIS
TEJIDO CONDUCTOR
PARENQUIMA
OBJETIVOS:
a. Observar, en estado fresco y fijadas y teidas, clulas que sirven como modelos en los trabajos de
fisiologa celular
b. Revisar las caractersticas ms relevantes de las distintas clulas observadas
c. Destacar algunas caractersticas que permitan manipular las diversas clulas
d. Desarrollar habilidades para ubicar y manejar las clulas observadas.
e. Profundizar en el conocimiento y manejo de la unidad fisiolgica celular.


CUESTIONARIO
1. Haga una clasificacin de los tipos de clulas segn sus caractersticas estructurales y funcionales.
2. Qu diferencias existen entre las clulas libres y las que constituyen tejidos?
3. De qu forma se pueden mantener vivas clulas fuera de su ambiente natural?
4. Qu tcnica permite la mantencin de clulas en forma indefinida? Discuta sus ventajas y
desventajas.
5. Qu caractersticas diferencian las clulas vegetales de las animales?
6. Haga una clasificacin de las clulas vegetales.


ACTIVIDADES

1. Observacin de eritrocitos en sangre fresca. Con una lanceta estril pinche la yema del dedo medio
de su mano. Cuidadosamente coloque una gota de sangre en un portaobjeto. Limpie su dedo con un algodn
mojado con alcohol. Agregue una gota de suero fisiolgico a la gota de sangre y cubra cuidadosamente con
un cubre objeto. Observe los diversos tipos de clulas. Qu forma presentan los eritrocitos? Cul es su
tamao? Dibuje y anote los nombres correspondientes.

2. Observacin de eritrocitos en sangre fijada y teida. Enfoque la preparacin entregada con objetivo
100x. Ubique los eritrocitos y observe su forma, estructura y determine su tamao. Compare con la
observacin en fresco. Dibuje y ponga los nombres correspondientes.

3. Observacin de espermatozoides en fresco. Con una pipeta tome una gota de la preparacin de
espermatozoides y pngala en el portaobjeto. Cubre cuidadosamente y observe con objetivo 100x. Haga un
esquema y coloque los nombres de las diferentes partes de la clula.

4. Observacin de espermatozoides teidos con Hematoxilina de Harris. Enfoque la preparacin con
objetivo 100x observe cuidadosamente la estructura de la clula. Dibuje con detalle lo observado
complementando con la observacin anterior. Ponga todos los nombres correspondientes.

5. Observacin de clulas musculares de tejido muscular estriado en un corte de lengua, teido con
Hematoxilina eosina. Enfoque la preparacin con objetivo 100x y recorra la muestra hasta encontrar las
fibras musculares en posicin longitudinal. Describa el aspecto que presentan las clulas y refiralo a las
estructuras del citoesqueleto. Cul es la propiedad ms importante de esta clula? Cmo se regula su
funcionamiento? Haga un esquema con los nombres correspondientes.

6. Observacin de neuronas en corteza cerebral. Enfoque la preparacin con objetivo 100x ubicando la
regin que le indique su profesor. Qu forma y tamao tiene la clula observada? Qu funcin tiene esa
clula?

7. Observacin de corte longitudinal de raicilla de cebolla teida con orcena actica. Enfoque la
preparacin con objetivo 100x y reconozca las diferentes clulas por su forma, tamao y tincin. Averige
las ubicaciones y funciones que cumplirn las clulas en un vegetal adulto.

8. Observe un corte transversal de hoja de vegetal teido con tincin vital (azul tripano- safranina.)
Enfoque la preparacin con objetivo 100x y reconozca las diferentes clulas por su forma, tamao y tincin.
Qu funcin cumplen las clulas identificadas? Qu tejidos constituyen?