1.

- La membrana exterior en contacto con el citosol es permeable a iones, a distintos

metabolitos y diferentes clases de polipptidos. La alta permeabilidad de la misma, es debido a
que contiene embebidas protenas que forman poros llamados Porinas o VDAC (canal aninico
dependiente de voltaje), que al formar canales a travs de la membrana permiten el paso de
molculas de un dimetro aproximado de 2 nanmetros (nm).
Por otra parte, la membrana interna, a diferencia de la exterior la membrana interna
mitocondrial es una barrea impermeable a los iones (.e.g H+ protones) y pequeas molculas
(metabolitos) que debe usar transportadores especficos (carriers en ingls) para atravesarlaLa
membrana interna presenta adems pliegues dirigidos hacia el interior de la mitocondria
llamados crestas mitocondriales, que expanden el rea superficial de esa membrana,
aumentando con ello la capacidad de producir ATP.
En la membrana mitocondrial interna se sitan cuatro complejos multimericos proteicos
(constituidos de mltiplas subunidades polipeptdicas) que constituyen la cadena de
transporte electrnico mitocondrial o cadena respiratoria mitocondrial que trasportan los
electrones desde los donadores electrnicos FADH2 y NADH (producidos durante la gliclisis y
el ciclo de Krebs) al oxigeno molecular (O2): Complejo I [NADH deshidrogenasa o NADH-
coenzima Q oxidoreductasa]; II [Succinato-coenzima Q deshidrogenasa o Succinato Q-
oxidoreductasa] , III (Q-citocromo c oxidoreductasa o complejo citocromo bc1) ; IV (Citocromo
c oxidasa)
Caractersticas:
El ADN mitocondrial se reproduce por s mismo semi-autnomamente cuando la clula
eucariota se divide.
Este ADN, al igual que los ADN bacterianos, es una molcula bicatenaria, circular,
cerrada, sin extremos. En los seres humanos tiene un tamao de 16.569 pares de
bases, conteniendo un pequeo nmero de genes, distribuidos entre la cadena H y la
cadena L. Cada mitocondria contiene entre 2 y 10 copias de la molcula de ADN. En l
estn codificados dos ARN ribosmicos, 22 ARN de transferencia y 13 protenas que
participan en la fosforilacin oxidativa.
Otra caracterstica importante del ADN mitocondrial es que no se recombina. Ello
implica que los nicos cambios que haya podido haber en el ADN mitocondrial se
deben exclusivamente a mutaciones a lo largo de multitud de generaciones. Los
clculos estadsticos que se han realizado informan que, en los mamferos y en
concreto en el hombre, cada 10.000 aos aproximadamente surge una mutacin en
una de las bases del ADN mitocondrial (esto no es del todo cierto, aunque s lo es para
el fragmento que ms mutaciones sufre, que consta de unos 500 pares de bases
Heredabilidad:
Tradicionalmente se ha considerado que el ADN mitocondrial humano se hereda slo
por va materna. Segn esta concepcin, cuando un espermatozoide fecunda un vulo
penetra el ncleo con su ADN pero deja afuera su cola y citoplasma, donde estn las
mitocondrias. Por lo tanto, en el desarrollo del cigoto slo intervendran las
mitocondrias contenidas en el vulo. Sin embargo, se ha demostrado que las
mitocondrias del espermatozoide pueden ingresar al vulo. Segn algunos autores el
ADN mitocondrial del padre puede perdurar en algunos tejidos, como los msculos.
Segn otros, no llega a heredarse al ser marcado por ubiquitinacin y degradado
2.-Las mitocondriopatas son muchas y muy diferentes enfermedades con un origen comn.
Todas ellas estn causadas por la alteracin de una parte de las clulas, las mitocondrias. Estos
orgnulos, u organelos, estn en su interior -de la misma forma que los rganos en el cuerpo
humano- y tienen un papel muy importante en los organismos vivos. Las mitocondrias son la
"fbrica" de energa de las clulas y las encargadas de su respiracin.
Debido a la importancia de las funciones que ejercen, estn implicadas en mltiples
enfermedades y procesos biolgicos, como el envejecimiento. Por ello, es bsico conocer
cmo funcionan y qu implicaciones tienen en diversas patologas. Ni las mitocondrias ni el
dao mitocondrial deberan ser ajenos al conocimiento de la poblacin general, ya que la
afectacin de stas se ha relacionado con enfermedades tan conocidas como el Alzheimer y el
Parkinson, u otras minoritarias como la Corea de Huntinton.
Enfermedades heterogneas
Los tipos de mitocondriopatas son muchos y muy heterogneos. La biloga e investigadora
Constanza Morn, del Instituto de Investigaciones Biomdicas August Pi i Sunyer (IDIBAPS), en
Barcelona, asegura que la explicacin cientfica es la siguiente: las mitocondrias son capaces de
reproducirse en el interior de la clula de forma independiente, con su propio genoma, el ADN
mitocondrial (ADNmt). Su gran capacidad para mutar se relaciona con la complejidad de las
alteraciones en las enfermedades causadas por mitocondrias.
Cada clula del cuerpo tiene cientos de molculas de ADNmt. Al dividirse la clula para formar
clulas hijas, este ADN alterado se distribuye al azar. El resultado es la aparicin de numerosas
y muy distintas enfermedades, que pueden estar causadas por anomalas en las mitocondrias.
Aunque cada tejido destaca por diferentes capacidades para eliminar los orgnulos
defectuosos, algunos quedan daados por distintas razones, como el estrs oxidativo y la
acumulacin de calcio.
No obstante, la diversidad de mitocondriopatas no slo se debe a la gran capacidad de mutar
del ADNmt, sino tambin a las mutaciones del ADN nuclear (el de la propia clula, que se
encuentra en el centro) y a las alteraciones en el funcionamiento de esta cadena respiratoria,
segn explican Tamara Rubio Gonzlez y Manuel Verdecia Jarque, del Hospital Infantil Sur, de
Santiago de Cuba.
El sndrome MELAS, en cambio, se caracteriza por encefalomiopata mitocondrial (enfermedad
neurolgica que cursa con alteraciones musculares y del sistema nervioso central),
acumulacin de cido lctico en el cuerpo (cuando las clulas utilizan glucosa para obtener
energa, un proceso conocido como acidosis lctica) y episodios parecidos a un accidente
vascular cerebral. Esta trada da nombre al sndrome, MELAS (acrnimo en ingls).
3.-
a) Gluclisis
La gluclisis tiene lugar en el fluido citoplasmtico de la clula, fuera de las mitocondrias y no
requiere la presencia de oxigeno. Por esta razn, se dice que la degradacin glucoltica de la
glucosa es anaerbica.
La gluclisis produce dos molculas de ATP directamente y dos molculas de NADH. Estas
molculas de NADH, producidas en el citoplasma, no pueden cruzar la membrana interna de la
mitocondria, pero otras molculas transfieren los electrones contenidos en el NADH al interior
de la mitocondria.
Debido a que la gluclisis no es un proceso aerbico, es decir que no requiere de oxigeno para su
desarrollo, y adems se lleva a cabo en el citoplasma; no se vera afectado por el dao
mitocondrial.
b) Ciclo de krebs
El ciclo de krebs que tiene lugar dentro de las mitocondrias, completa la ruptura de la glucosa al
descomponer un derivado del acido pirvico hasta dixido de carbono. Produce dos molculas
de ATP, seis de NADH y dos de FADH2, o un total de 24 molculas de ATP por cada molcula de
glucosa.
El ciclo de Krebs ocurre en la matriz de las mitocondrias, por lo tanto se vera afectado ante un
dao mitocondrial.

c) Transporte de electrones
El sistema de transporte de electrones conocido tambin como cadena de transporte de
electrones o cadena respiratoria, se localiza en la membrana mitocondrial interna. Esta formado
por varios complejos de protenas grandes y por dos pequeos componentes independientes, la
ubiquinona y el citocromo c.
Las clulas de todos los eucariotas contienen orgnulos intracelulares conocidos con el nombre
de mitocondrias que producen ATP. Las fuentes de energa como la glucosa son inicialmente
metabolizados en el citoplasma y los productos obtenidos son llevados al interior de la
mitocondria donde se continua el catabolismo usando rutas metablicas que incluyen el ciclo de
los cidos tricarboxlicos, la beta oxidacin de los cidos grasos y la oxidacin de los
aminocidos. El resultado final de estas rutas es la produccin de dos donadores de electrones:
NADH y FADH2. Los electrones de estos dos donadores son pasados a travs de la cadena de
electrones hasta el oxgeno, el cual se reduce para formar agua. Esto es un proceso de mltiples
pasos que ocurren en la membrana mitocondrial interna. Entonces al verse afectada la
membrana mitocondrial, se ve afectado tambin el transporte de electrones.

d) Fosforilacin oxidativa
La fosforilacin oxidativa atrapa la energa en la forma de ATP de alta energa. Para que la
fosforilacin oxidativa contine, se deben reunir dos condiciones principales. Primero, la
membrana mitocondrial interna debe estar fsicamente intacta de tal manera que los protones
solamente puedan re-ingresar a la mitocondria por el proceso que esta acoplado a la sntesis de
ATP. Segundo, se debe desarrollar una concentracin alta de protones fuera de la membrana
mitocondrial interna.
La energa del gradiente de protones se conoce con el nombre de potencial quimioosmotico, o
fuerza motil de protones (PMF). Este potencial es la suma de las diferencias de concentracin de
protones a travs de la membrana y de la diferencia en la carga elctrica a travs de la
membrana. Los dos electrones del NADH generan un gradiente de 6 protones. As, la oxidacin
de un mol de NADH lleva a una disponibilidad de PMF con una energa libre de
aproximadamente 31,2 kcal (6 x 5,2 kcal). La energa del gradiente se utiliza para la sntesis
de ATP cuando los protones se transportan siguiendo su gradiente termodinmico dentro de la
mitocondria.
Los electrones regresan a la matriz mitocondrial a travs de la protena de membrana
denominada ATP sintasa (o complejo V). La sintasa de ATP es complejo proteico compuesto de
mltiples subunidades que se une al ADP y al fosfato inorgnico en su sitio cataltico, y que
requiere un gradiente de protones para su actividad. La ATP sintasa esta compuesta de 3
fragmentos: F0, que se localiza en la membrana; F1, que protruye desde la membrana
mitocondrial interna hacia la matriz mitocondrial; y la protena que le confiere sensibilidad a la
oligomicina (OCSP), que conecta los fragmentos F0 y F1. Cuando la membrana mitocondrial
esta daada, es permeable a los protones, la reaccin de la ATP sintasa es activa pero en la
direccin reversa y acta como una hidrolasa de ATP o ATPasa.

e) Fermentacin
En los seres vivos, la fermentacin es un proceso anaerbico y en l no interviene la mitocondria
ni la cadena respiratoria. Son propias de los microorganismos, como algunas bacterias y
levaduras. Tambin se produce la fermentacin en la mayora de las clulas de los animales
(incluido el hombre), excepto en las neuronas que mueren rpidamente si no pueden realizar la
respiracin celular; algunas clulas, como los eritrocitos, carecen de mitocondrias y se ven
obligadas a fermentar; el tejido muscular de los animales realiza la fermentacin lctica cuando
el aporte de oxgeno a las clulas musculares no es suficiente para el metabolismo aerobio y la
contraccin muscular.

4.-
IDENTIFICACIN POR ADN MITOCONDRIAL
En el interior de las clulas existen pequeas formaciones ubicadas fuera del ncleo,
denominadas mitocondrias que contienen ADN con posibilidades de atribuir identidad. La
utilizacin del ADN mitocondrial con fines identificatorios ha sido explorada con resultados
alentadores.
El valor forense del ADN mitocondrial surge de su capacidad para expresar resultados an en
presencia de ADN nuclear muy escaso o seriamente deteriorado, al que se suma la presencia
de igual estructura gentica mitocondrial en todas las generaciones que comparten un mismo
linaje materno, circunstancia que responde a su transmisin hereditaria slo por va materna y
sin sufrir modificaciones en su pasaje de madres a hijos. Tambin resulta significativo, desde el
punto de vista identificatorio, su presencia en clulas sin ncleo (a nucleadas), como son las
que componen el tallo del pelo.
Estas caractersticas favorecen su empleo en circunstancias que impiden o limitan
severamente la obtencin de ADN nuclear, siendo indicaciones especficas para su utilizacin
las siguientes:
a) Anlisis de restos humanos de larga data o sometidos a situaciones externas altamente
desfavorables.
b) Muestras con escasa cantidad de ADN nuclear disponible y/o en estado de degradacin
importante.
c) Identificacin con familiares lejanos, siempre que el parentesco reclamado lo sea por
va materna.
d) Anlisis de pelos hallados en el lugar de un hecho criminal.

Si bien las aplicaciones mencionadas resultan de inters forense y constituyen, en ocasiones, la
nica posibilidad de identificacin gentica, debe sealarse que, en la prctica, los resultados
obtenidos no siempre satisfacen las expectativas generadas por el empleo de la tcnica.
La identificacin por ADN mitocondrial brinda niveles de certeza menores que los obtenidos
con el anlisis del ADN nuclear.
Si bien mencionamos como propiedad del ADN mitocondrial su pasaje de generacin en
generacin sin sufrir modificaciones estructurales, existe la posibilidad de observar variaciones
menores entre familiares, generadas por fenmenos de mutacin. Ello puede complicar la
comparacin de los resultados favoreciendo falsas exclusiones, por lo cual dicha mutacin
deber ser contemplada como situacin especial.
Es probable que investigaciones futuras, sobre todo las dirigidas a establecer frecuencias
poblacionales de los perfiles mitocondriales, permitan superar estas limitaciones. Hasta
entonces la informacin brindada por la tcnica deber ser evaluada cuidadosamente a la hora
de asignar identidad.
5.- LA MAQUINARIA DE FISIN MITOCONDRIAL
La fisin mitocondrial est regulada en mamferos por, entre otras, las actividades de la
protena relacionada con la dinamina 1 (Drp-1) y la protena de fisin 1 (Fis1). Drp-1 posee
homologa de secuencia con las dinaminas, GTPasas que regulan el trfico vesicular y la
endocitosis. El mecanismo molecular preciso de las dinaminas y Drp-1 en este proceso es an
materia de debate. Sin embargo, uno de los modelos postula que estas protenas actan como
mecanoenzimas que participan activamente en el corte de membranas por constriccin.
Drp-1 es una protena de distribucin principalmente citoplasmtica, pero con una fraccin
que se localiza en puntos especficos de la membrana mitocondrial externa que representan
futuros sitios de fisin. Drp-1 carece de una secuencia de destino mitocondrial, por lo que se
recluta a la membrana a travs de Fis1. Esta protena adaptadora participa en el ensamblaje de
complejos de fisin de alta masa molecular. Actualmente, la interaccin directa entre Fis1 y
Drp-1 slo se ha demostrado con protenas recombinantes, a diferencia de lo observado en
levaduras, en las que la localizacin mitocondrial de Dnm1p (homlogo de Drp-1) se pierde
completamente en mutantes para Fis1p (homlogo de Fis1). Fis1p recluta a Dnm1p en la
mitocondria a travs de los adaptadores moleculares Mdv1p y Caf4p; sin embargo, la
existencia de estas protenas en mamferos an no se ha demostrado.
Es importante aclarar que el proceso de fisin mitocondrial ocurre habitualmente en todas las
clulas en condiciones normales. Sin embargo, la fisin mitocondrial tambin se ha asociado a
condiciones de estrs metablico, as como a la autofagia y la apoptosis.
LA MAQUINARIA DE FUSIN MITOCONDRIAL
Los principales reguladores de la fusin mitocondrial en el humano son las protenas
mitofusinas (Mfn) y la protena de la atrofia ptica 1 (OPA1) Mfn tiene dos isoformas (Mfn1 y
Mfn2) que se localizan en la membrana mitocondrial externa con sus dominios N-terminal
(dominio GTPasa) y C-terminal orientados hacia el citosol. Mientras que las Mfn 1 y 2
interactan entre s para coordinar la fusin de la membrana mitocondrial externa de
mitocondrias opuestas, OPA1 se localiza en el espacio intermembrana y asociada a la
membrana mitocondrial interna y participa en el remodelado de las crestas mitocondriales y el
acercamiento y la fusin de la membrana mitocondrial interna. La fusin de ambas
membranas mitocondriales parece funcionar como dos eventos independientes y separados.
Mientras que la fusin de la membrana externa mitocondrial requiere baja concentracin de
GTP, la fusin de la membrana interna requiere de la hidrolisis de GTP, adems de depender
de un potencial de membrana mitocondrial (mt) intacto y, por lo tanto, de una alta sntesis
de ATP.
Evidencias recientes muestran que la fusin regula directamente el metabolismo mitocondrial.
De esta forma, la disminucin de la concentracin de la protena OPA1 o de cualquiera de las
dos Mfn mediante ARN de interferencia conduce a la formacin de mitocondrias fragmentadas
con menor consumo de oxgeno y menor mt. Aunque se conoce la funcin de estas protenas
(Mfn y OPA1) en la fusin y el remodelado mitocondrial, su relacin con la maquinaria
metablica se desconoce, as como por qu la prdida de algunas de estas protenas interfiere
directamente con la respiracin celular. Por el contrario, la sobrexpresin de Mfn2 incrementa
directamente la actividad de los complejos respiratorios, la oxidacin mitocondrial y la
utilizacin de glucosa. La expresin de Mfn2 est disminuida en el msculo esqueltico de
ratas Zucker obesas y en pacientes obesos y diabticos, lo que destaca la importancia
patolgica de las alteraciones en la dinmica y la morfologa mitocondrial y evidencia que la
plasticidad mitocondrial es crtica en el mantenimiento de la funcin de este organelo.