BIOSNTESIS DE PROTENAS

Dr. Marcelo O. Lucentini

DOGMA CENTRAL DE LA
BIOLOGA MOLECULAR:
ETAPAS DE LA TRADUCCIN:
1. Activacin del aminocido;
2. Iniciacin;
3. Elongacin;
4. Terminacin;
5. Procesamiento postraduccional
(maduracin).
1. ACTIVACIN DEL AMINOCIDO:
Aminoacil ARNt sintetasas:
Reaccin general catalizada:
AA + ARNt + ATP Aminoacil-ARNt + AMP + PPi
AA
ARNt
1. ACTIVACIN DEL AMINOCIDO:
Primera etapa:
ENZ+ATP+AA-CO.OH ENZ-AA-AMP+PPi
Segunda etapa:
ENZ-AA-AMP+ARNt ENZ+AMP+ARNt-AA
1. ACTIVACIN DEL AMINOCIDO:
Estructura de un aminoacil-ARNt:
O C C NH
3
+
R
A
C
C
O
CH
2
.OH
H
Enlace ster
ARNt
3
2. INICIACIN DE LA TRADUCCIN:
A. Disociacin del ribosoma:
80 S
60 S
40 S
FI 3
FI 3
GTP + FI 2 + Met
GTP FI 2 Met
B. Formacin del complejo de entrada:
Met
FI 2 FI 3
GTP
Complejo de entrada
40 S FI 3
Complejo ternario
C. Formacin del complejo de
iniciacin 40 S:
Met
AUG
GTP
FI 2 FI 3
5
3
Complejo de iniciacin 40 S
40 S
ARNm
Met
Met
5 3
A U G
Met
AUG
GTP
FI 2 FI 3 FI 4
5
AUG
Met
P A
GDP; FI 2, 3, 4
Complejo de iniciacin 40 S
Complejo
funcional 80S
3
ARNm
5 3
D. Formaci
D. Formaci

n del
n del
complejo de
complejo de
iniciaci
iniciaci

n 80S:
n 80S:
3. ELONGACIN:
3. ELONGACIN:
4. TERMINACIN:
Codones sin sentido: UAA, UAG, UGA
MODIFICACIONES
POSTRADUCCIONALES:
Plegamiento proteico;
Modificacin de los extremos amino
y carboxilo terminales;
Hidroxilacin de prolina y lisina;
MODIFICACIONES
POSTRADUCCIONALES:
Fosforilacin del hidroxilo de los residuos de serina,
treonina y fenilalanina;
Agregado de grupo prosttico;
MODIFICACIONES
POSTRADUCCIONALES:
Carboxilacin sobre resduos de aspartato y
glutamato;
Formacin de puentes disulfuro.
Glicosilacin;
DESTINO DE LAS PROTENAS SINTETIZADAS:
Las protenas sin seales especficas
permanecen en el citoplasma.
Las que estn destinadas a organelas
presentan una cadena denominada
pptido seal
PROTENAS SINTETIZADAS EN EL REG:
S
R
P
PROTENAS SINTETIZADAS EN EL REG:
La partcula de reconocimiento de la seal
(SRP) tiene 2 funciones:
A. Detener momentneamente la
traduccin del ARNm hasta que el
complejo ARNm-ribosomapptido se una
a receptores en el REG;
B. Fijar el complejo ARNm-ribosoma-
pptido-SRP a la membrana del REG.
GLICOSILACIN PROTEICA:
Las glucoprotenas pertenecen al grupo
de los hteroglicanos. Contienen cadenas
de oligosacridos covalentemente unidos
a su armazn de polipptidos.
Cerca del 50% de las protenas
eucariontes tienen azcares anexados
GLICOSILACIN PROTEICA:
De acuerdo a la naturaleza de
la unin entre sus cadenas polipeptdicas
y sus cadenas de oligosacridos:
Las glucoprotenas se clasifican en:
A. las que poseen enlaces N-gluc;
B. las que poseen enlaces O-gluc;
C. Glucosilfosfatidilinositol ancladas (GPI-
ancladas).
GLICOSILACIN PROTEICA:
Protenas con enlaces N-glicosdicos
Se distinguen por la presencia de uniones:
Asn-GluNAc;
Constituyen la clase principal de glucoprotenas
e incluyen tanto a protenas circulantes como
las unidas a membrana;
Su biosntesis implica la participacin del
dolicol-PP-oligosacrido.
GLICOSILACIN PROTEICA:
Estructura del dolicol-P:
H CH
3
CH
3
P.O-CH
2
-CH
2
-C-CH
2
-CH
2
-CH=C-CH
2
-CH
2
-CH=C-CH
3
CH
3
n
Unidad
isoprenoide
GLICOSILACIN PROTEICA:
El proceso de N-glicosilacin puede
dividirse en 2 etapas:
A. Ensamblaje y transferencia del dolicol-
PP-oligosacrido;
B. Procesamiento de la cadena de
oligosacrido.
GLICOSILACIN PROTEICA:
A. Ensamblaje y transferencia:
Dol-P + UDP-GluNAc
Dol-PP-GluNAc + UMP
GluNAc GluNAc- -P P- -transferasa transferasa
REG
REG
GLICOSILACIN PROTEICA:
A. Ensamblaje y transferencia
GluNAc-P-P-Dolicol
GluNAc-GluNAc-P-P-Dolicol
M-GluNAc-GluNAc-P-P-Dolicol
(M)
5
-(GluNAc)
2
-P-P-Dolicol
UDP UDP- -GluNAc GluNAc
UDP UDP
GDP GDP- -manosa manosa
GDP GDP
(GDP (GDP- -M) M)
4 4
(GDP) (GDP)
4 4
GLICOSILACIN PROTEICA:
A. Ensamblaje y transferencia
(M)
5
-(GluNAc)
2
-P-P-Dolicol
(M)
6
-(GluNAc)
2
-P-P-Dolicol
M-M
M
M-M M- (GluNAc)
2
-P-P-Dolicol
G-G-G-M-M-M
Dol Dol- -P P- -M M
Dol Dol- -P P
Dol Dol- -P P- -M M y y Dol Dol- -P P- -G G- -G G- -G G
2 2 Dol Dol- -P P
GLICOSILACIN PROTEICA:
B. Procesamiento de la cadena oligosacrida
Retculo Endoplsmico Rugoso:
Dolicol P-P
NAcglu
Glu
Manosa
Protentransferasas
Glucosidasas
Manosidasas
AL GOLGI
Asn Asn
Asn Asn
GLICOSILACIN PROTEICA:
B. Procesamiento de la cadena oligosacrida
El oligosacrido (Glu)
3
-(Man)
9
(GluNAc)
2
se transfiere a partir del dolicol-P-P-
oligosacrido para formar un enlace N-
glicosdico con uno ms resduos
especficos de Asn de una protena
receptora que emerge de la superficie
luminal de la membrana del REG.
GLICOSILACIN PROTEICA:
B. Procesamiento de la cadena oligosacrida
La transferencia se realiza hacia resduos
especficos de asparagina en la secuencia
Asn-X-Ser/Tre, donde la X es cualquier
resduo , excepto prolina, aspartato o
glutamato.
GLICOSILACIN PROTEICA:
B. Procesamiento de la cadena oligosacrida
La transferencia se realiza de modo
cotraduccional en el retculo
endoplsmico...
El oligosacrido unido a la protena,
despus es procesado parcialmente por
las glucosidasas y manosidasas; si no hay
adicin de azcares, el resultado es una
cadena con alto contenido de manosa.
GLICOSILACIN PROTEICA:
B. Procesamiento de la cadena oligosacrida
Aparato de Golgi:
NAcglu
Silico
Manosidasas
Transferasas
Gal
GLICOSILACIN PROTEICA:
Protenas con enlaces O-glicosdicos
Involucra la cadena lateral hidroxilo de serina o
treonina y un azcar como la N-acetilgalactosamina:
GalNAc- Ser (Tr)
Participan glucosiltransferasas de glucoprotenas
unidas a membrana y de accin secuencial;
Cada transferasa es especfica;
Las enzimas que participan estn localizadas en el
Golgi;
El dolicol-PP-oligosacrido no est involucrado;
Cada reaccin de glicosilacin involucra a un
nucletido unido a un azcar;
La O-glucosilacin se lleva a cabo de manera
postraduccional.
Antibiticos y sntesis proteica:
Estreptomicina:
Acta a nivel de la subunidad 30 S de los
ribosomas bacterianos, produciendo
alteraciones en el mecanismo que permite
el encaje perfecto entre codn y
anticodn.
Antibiticos y sntesis proteica:
Tetraciclinas:
Se unen a la subunidad 30 S inhibiendo el
acceso del aminoacil-ARNt al sitio aceptor del
ribosoma.
Cloranfenicol:
Se une a la subunidad 50 S e inhibe a la peptidil
transferasa y aumenta la estabilidad de los
polisomas.
Antibiticos y sntesis proteica:
Eritromicina:
Inhibe la sntesis proteica al unirse a la
subunidad 50 S del ribosoma bacteriano,
bloqueando la peptidil-transferasa.