Blancos moleculares

en Oncología

Ernesto Gil Deza

Instituto Oncologico Henry Moore
Universidad de Salvador

domingo 20 de septiembre de 2009

 Historia

domingo 20 de septiembre de 2009

 Composición química de la
célula

Albrecht Kossel

Premio Nobel de Medicina de 1910: "in recognition of the contributions

to our knowledge of cell chemistry made through his work on proteins,
including the nucleic substances"

domingo 20 de septiembre de 2009

 Cromosomas y herencia

Thomas Hunt Morgan

Premio Nobel de Medicina de 1933

domingo 20 de septiembre de 2009

 Mutagenicidad

Hermann Joseph Muller

Premio Nobel de Medicina de 1946

“for the discovery of the production of mutations by means of X-ray
irradiation"

domingo 20 de septiembre de 2009

 Regulación y recombinación
genética

George Wells Beadle Edward Lawrie Joshua Lederberg

Tatum

Premio Nobel de Medicina de 1958

domingo 20 de septiembre de 2009

 Síntesis de ADN y ARN

Severo Ochoa Arthur Kornberg

Premio Nobel de Medicina de 1959

domingo 20 de septiembre de 2009

 Estructura de ADN y
transmisión de la información

Francis Harry James Dewey Maurice Hugh

Compton Crick Watson Frederick Wilkins

Premio Nobel de Medicina de 1962

domingo 20 de septiembre de 2009

 Control enzimático en la
replicación viral

François Jacob André Lwoff Jacques Monod

Premio Nobel de Medicina de 1965

domingo 20 de septiembre de 2009
 Tumores inducidos por virus

Peyton Rous

Premio Nobel de Medicina de 1966

domingo 20 de septiembre de 2009

 Genes y síntesis de
proteínas

Robert W. Holley Har Gobind Khorana Marshall W. Nirenberg

Premio Nobel de Medicina de 1968

domingo 20 de septiembre de 2009

 Integración de virus tumorales al
material genético

David Baltimore Renato Dulbecco Howard Martin Temin

Premio Nobel de Medicina de 1975

domingo 20 de septiembre de 2009
 Enzimas de restricción y
ADN

Werner Arber Daniel Nathans Hamilton O. Smith

Premio Nobel de Medicina de 1978

domingo 20 de septiembre de 2009

 Factores de crecimiento

Stanley Cohen Rita Levi-Montalcini

Premio Nobel de Medicina de 1986

domingo 20 de septiembre de 2009

 Oncogenes

J. Michael Bishop Harold E. Varmus

Premio Nobel de Medicina de 1989

domingo 20 de septiembre de 2009

 Regulación de ciclo celular

Leland H. R. Timothy (Tim) Sir Paul M. Nurse

Hartwell Hunt

Premio Nobel de Medicina de 2001

domingo 20 de septiembre de 2009

 Apoptosis

Sydney Brenner H. Robert Horvitz John E. Sulston

Premio Nobel de Medicina de 2002

domingo 20 de septiembre de 2009

 Hannahan and Weinberg Cell 2000
domingo 20 de septiembre de 2009
 ¿Qué buscar?

Hannahan and Weinberg Cell 2000

domingo 20 de septiembre de 2009
domingo 20 de septiembre de 2009
 ¿Qué buscar?

Preinvasive

Invasive

domingo 20 de septiembre de 2009

 Objetivos
Identificación de blancos

Diseño de fármacos

Selección de tumores

Selección de pacientes

domingo 20 de septiembre de 2009

 Hipótesis y dificultades

domingo 20 de septiembre de 2009

 Hipotesis y dificultades
“ Targeting a specific gene or protein is simple in concept. Antitumor
agents can be designed based on known sequence data rather than
depending on empirically screening a large number of compounds.
However, there are still many caveats to successful use of these
approaches. Targeting one gene may have limited impact on
proliferation of neoplastic cells. In many cases, it is not obvious
which gene(s) should be targeted. Genes important in the process
of becoming a neoplastic cell may not be important for continued
proliferation or survival of the cell and, therefore, may be irrelevant
targets for treating established malignancies. Inhibition of many
genes (or function of these genes), even if they are important for
neoplastic cell growth, may only be cytostatic. It would be more
useful to target genes whose inhibition (or stimulation) induces cell
death (i.e., by apoptosis) or terminal differentiation.1 Ultimately,
these approaches must be capable of eliminating (or at least leading
to prolonged growth suppression of) all tumor cells, either by
themselves or in combination with other agents, if they are to be
effective in curing patients. Agents with cytostatic effects might need
to be used in combination with other therapy. It is important that the
targeted protein in the neoplastic cell either be sufficiently different
(if mutant) or not be critical for survival of normal cells to prevent
toxicity. “ (B. Chabner Cap. XXX)

domingo 20 de septiembre de 2009

 Cuidados 1
1. Is the function of the overexpressed or mutated target
essential to the transformed behavior of the tumor? Does
inhibition of the gene product change the phenotype of the
malignant cell? Because many mutations in cancer cells
appear late in their progression and may not be essential to
maintaining growth or metastasis, these questions must be
answered in the affirmative. Experiments in which the
subject gene is mutated, deleted, or neutralized with
antisense oligonucleotides can help answer these
questions.

domingo 20 de septiembre de 2009

 Cuidados 2

2- Are the subject gene and its protein

found in human tumors, and is there
selective expression in tumors versus
normal tissues?

domingo 20 de septiembre de 2009

 Cuidados 3
3- If overexpressed in tumors, is the protein
also expressed in key proliferating normal tissues,
such as intestinal epithelium and bone marrow
progenitors, or even nonproliferating tissues, such
as heart, kidney, or brain? Does a knockout of the
gene have fatal consequences for the host (in
animal models)? Patterns of drug toxicity are often
difficult to predict, but the profile of gene
expression in normal tissue may provide helpful
clues about potential selectivity of an agent
directed against that target.

domingo 20 de septiembre de 2009

 Cuidados 4
4- Are there closely related genes that are essential
for normal tissue function and survival of the host that
might make a molecularly targeted inhibitor nonselective?
These considerations become paramount in determining
the choice of target and the probability of success.
Obviously, even the most validated target may not be
amenable to a drug discovery strategy for any number of
reasons, the most important being failure to understand
the function of the target and related proteins in humans.
Unanticipated toxicities, interactions with previously
inapparent receptors or proteins, pharmacologic problems
in drug distribution, and pharmacokinetics (PK) may
defeat the most rational strategy.

domingo 20 de septiembre de 2009

 Objetivos
Identificación de blancos

Diseño de fármacos

Selección de tumores

Selección de pacientes

domingo 20 de septiembre de 2009

 ¿A qué nivel lo busco?

domingo 20 de septiembre de 2009

 ¿Con qué lo busco?
RNA
DNA
Citogenética Transc. Profiling
FISH - CISH Northern blot

CGH RT-PCR
• ISH, FISH & CISH
CGH arrays
SNPs • Proteins
PCR
• Western blot
Southern blot
• 2D electrophoresis
Microsatellite • MALDI-TOF
instability
• SELDI-TOF
Microarray • IHC

domingo 20 de septiembre de 2009

 Algunos problemas...

domingo 20 de septiembre de 2009

 Muestra analizada
Tumor
PAF
Microdisección tisular

Parafina
Tejido congelado
Tejido fresco

domingo 20 de septiembre de 2009

 Cuantitativo
Human Genome

Nuclear Mitocondrial
3000 Mb 16.6 kb
~30.000 genes 37 genes

Genes Extragenetic
30 % 70%

80%
20%

Low number Higher number

10% 90% of copies of copies

Encoded Non encoded

domingo 20 de septiembre de 2009

 Estadístico
20.000 - 50.000 cambios genéticos
• Pero sólo tres evoluciones:

Rta / No rta

Recurrencia / No
recurrecia

Vivo / muerto
• Altas chances de resultados positivos

domingo 20 de septiembre de 2009

 Patogénesis

domingo 20 de septiembre de 2009

domingo 20 de septiembre de 2009
domingo 20 de septiembre de 2009
 Aplicaciones clínicas

domingo 20 de septiembre de 2009

 Clínica
Predicción de riesgo

Diagnóstico oncológico

Diagnóstico diferencial

Subtipificación tumoral

Fármaco-genética

Factores predictivos

Nuevos blancos
Modified Workman & Johnsto JCO October 10th 2005

domingo 20 de septiembre de 2009

 Predicción de riesgo

Baja penetrancia y alto riesgo

BRCA1

BRCA2

Alta penetrancia y bajo riesgo

domingo 20 de septiembre de 2009

 Bioética

domingo 20 de septiembre de 2009

 Subtipificación tumoral

domingo 20 de septiembre de 2009

 CDI tumor subtypes

70% CDI NOS

Tubullar Medullar Cribiphorm Mucinous Micropapillar Apocrine

Courtesy Dr. Diaz, Dr. Emina, Dr. Japaze

domingo 20 de septiembre de 2009

 Subtipos moleculares

Carey - ASCO 2005

domingo 20 de septiembre de 2009
 Classification requirements

Texto

domingo 20 de septiembre de 2009

 Pronóstico

domingo 20 de septiembre de 2009

 Pronóstico e historia natural

2000 1870 500 BC

domingo 20 de septiembre de 2009
domingo 20 de septiembre de 2009
 “Due to the nature of the genes included in the
21 gene assay, which are mainly proliferation genes
and ER-related genes, it could be argued that the
assay is an expensive replacement for ER and Ki67
inmunohistochemical assays”
Paik and Kim, page 21

domingo 20 de septiembre de 2009

 Factores predictivos

ER

PR

Her2

• Buenos NEGATIVOS.

domingo 20 de septiembre de 2009

 El ejemplo de Her2neu

domingo 20 de septiembre de 2009

 CUIDADOS EN
DETERMINACION DE
HER2

domingo 20 de septiembre de 2009

domingo 20 de septiembre de 2009
 Discordancias en Her-2-neu

domingo 20 de septiembre de 2009

domingo 20 de septiembre de 2009
 ¿En todas las pacientes
Her2neu positivas hay
que emplear
trastuzumab?

domingo 20 de septiembre de 2009

 Trastuzumab

domingo 20 de septiembre de 2009

domingo 20 de septiembre de 2009
domingo 20 de septiembre de 2009
domingo 20 de septiembre de 2009
 Trastuzumab junto a

domingo 20 de septiembre de 2009

domingo 20 de septiembre de 2009
domingo 20 de septiembre de 2009
domingo 20 de septiembre de 2009
domingo 20 de septiembre de 2009
domingo 20 de septiembre de 2009
 Cardiotoxicidad

domingo 20 de septiembre de 2009

domingo 20 de septiembre de 2009
domingo 20 de septiembre de 2009
domingo 20 de septiembre de 2009
 ¿Si progresa a
trastuzumab los nuevos
inhibidores son útiles?

domingo 20 de septiembre de 2009

domingo 20 de septiembre de 2009
domingo 20 de septiembre de 2009
domingo 20 de septiembre de 2009
domingo 20 de septiembre de 2009
domingo 20 de septiembre de 2009
domingo 20 de septiembre de 2009
domingo 20 de septiembre de 2009
domingo 20 de septiembre de 2009
domingo 20 de septiembre de 2009
 Criterio médico
" La experiencia me enseña que con demasiada frecuencia
los pacientes están off-side con respecto a las normas.
Los médicos quedamos abandonados muchas veces
a nuestro propio sentido común para descubrir ese fuera de límite
y nadie se ocupa de exigir o enseñar sentido común
antes de otorgarnos habilitación profesional.
Nos habilitan por nuestra competencia en el uso de armas
pero pocas veces nos exigen saber cuándo no debemos
usarlas."

Prof. Dr. Alberto Agrest

El internista y la oncología moderna
en "Más reflexiones inexactas de un observador médico"
Pag: 150

domingo 20 de septiembre de 2009

 Muchas gracias

domingo 20 de septiembre de 2009