Preguntas 1.

Calcule la fuerza eulotrpica de la fase mvil que se utiliz en la prctica (valor 30%): La fuerza eluotropica () de la fase mvil que usamos en la prctica se puede calcular con la [] siguiente ecuacin : (Ecu 1) Donde solv es la fuerza de elucin del solvente puro y es la fraccin en volumen del solvente en la fase mvil. Solvente Fuerza de elucin Agua 0.0 Metanol 2.6 Tabla X. fuerza de elucin de los solventes en fase reversa. Se us para la fase mvil una mezcla agua-metanol (50:50) con lo cual se obtiene que la fraccin de los solventes es de 0,5.

Entonces se puede concluir que la fuerza eluyente de nuestra fase mvil va a depender de la fraccin en volumen de metanol, se emplea el agua como un solvente de soporte debido a que no es toxico y su transparencia en el UV. Controlar la fuerza eluyente permite ajustar el parmetro K (El factor de capacidad) que proporcional a la retencin en la fase mvil, que a la portes va a mejorar la resolucin, pero un aumento exagerado de dicho parmetro se ver reflejado en el tiempo de anlisis, en el anchamientos de los picos, perdida de la sensibilidad y la dificultad de la cuantificacin.

Referencia: Oscar Alberto Quattrocchi, Ral Felipe Laba, Sara Albelaira de Andrizzi; Introduccin a la HPLC: a aplicacin y practica; 1 Ed. Artes grficas Farro S.A, Argentina, 1992, pg.: 281-286. 2. explique clara y concretamente en que consiste los mtodos de extraccin en fase solida (SPE) y cual es su utilidad (valor 70%): La extraccin en fase slida SPE es una tcnica preparativa para la cuantificacin por HPLC, cromatografa de gases, UV o cualquier otra tcnica. La PSE es usada para limpiar la muestra y preconcentrar el analito con un riesgo mnimo de prdida o contaminacin de la misma, con el fin de eliminar interferentes y preservar el equipo si se usan tcnicas cromatograficas. El trmino extraccin en fase slida es debido a que el material de soporte que va a retener el analito para la separacin en una muestra es una fase estacionaria slida, a travs del cual pasa un solvente adecuado para absorber los analitos en el soporte y para luego ser eluidos con otra fase mvil que debe tener mayor afinidad por el analito que la fase estacionaria.

En donde se obtiene un extracto con el analito, todo el proceso lleva 6 etapas las cuales son: 1. Etapa de Acondicionamiento: En esta etapa se hace la activacin del absorbente, la cual consiste en dejar pasar una cantidad de solvente suficiente a travs de lo columna para que los grupos funcionales de la fase estacionaria se solvaten. 2. Etapa de carga de muestra: Aplicar la muestra por encima de la columna, en donde el analito interacta con la fase estacionaria a medida que el caudal de solvente se mantiene constante, en esta etapa algunos contaminantes pasan sin ser retenidos pero hay otros componentes de la matriz que pueden interactuar con esta fase mvil. 3. Etapa de lavado: En este paso lo que se hace es dejar pasar un solvente o mezcla de solventes de diferentes tipo con el fin de eliminar los interferentes del anlisis pero manteniendo el analito en la fase slida. 4. Etapa de secado: Las trazas de solvente se eliminan haciendo circular aire a travs de la columna durante 2 a 10 minutos. Esta etapa mejora el rendimiento de extraccin. 5. Etapa de elucin: Se elige un eluyente adecuado para que rompa la interaccin analitofase estacionaria, dicho eluyente debe tener una fuerte interaccin con el analito pero muy poca con los interferentes. 6. Etapa de concentracin: En esta etapa lo que se hace es evaporar el solvente para que la concentracin del analito aumente tambin es necesario aadir sulfato de sodio para eliminar posibles trazas de agua. Explique clara y concretamente los diferentes mtodos de inyeccin utilizados en CG y cul es su utilidad? En cromatografa de gases la inyeccin de la muestra es crtica para un anlisis cuantitativo, ya que se deber inyectar la cantidad adecuada de muestra en el orden de los L , en el menor tiempo posible y conseguir la vaporizacin total de la muestra aadida, al no cumplir estas condiciones se produces ensanchamientos de los picos cromatograficos, una pobre resolucin y la aparicin de colas en las bandas, lo cual dificulta la cuantificacin. Para la inyeccin de la muestra

ya que se deben agregar cantidades de muestras adecuadas, en el orden de los L, a su vez debe formar una clase de tapn de vapor cuando es volatilizado en la cmara de vaporizacin, tambin la velocidad de la inyeccin, una inyeccin lenta puede afectar el anlisis ya que una inyeccin lenta puede ensanchar y dar una psima resolucin de los picos. Se suelen presentar problemas de reproducibilidad en la inyeccin de la muestra porque se presentan variaciones significativas en las cantidades de muestra inyectadas debido a que son L y que las velocidades de inyeccin varan, para mejorar la reproducibilidad se han creado sistemas de inyeccin los ms usados son:

Inyeccin con divisin de muestra o inyeccin de Split: Se recomienda este modo de inyeccin para muestras que tengan concentraciones de analito relativamente grandes 0.1%, en donde se aade un volumen de muestra del orden de los L, despus de vaporizar y homogenizar la muestra con el gas portador se divide la muestra La inyeccion con division sirve para analitos en concentracin apreciable, ya que diluye mucho la muestra. Es la que da los picos mas finos y la mejor separacion. Mal limite de deteccin y baja repetibilidad para analisis cuantitativo.

Inyeccin de Splitess Inyeccin en columna u on-column Vlvula de inyeccin de gases Desorcin trmica Inyectores de espacio de cabeza

http://www.cromlab.es/EFS_Principal.htm