Virus Hepatitis B superfcie HBsAg)

(Antgeno

de

Clasificacin Internacional de Enfermedades (Cie 10) B16 Hepatitis aguda tipo B Agente Etiolgico Virus de la Hepatitis B Justificacin de la Vigilancia de Laboratorio El virus de la Hepatitis B es uno de los agentes causales de la Hepatitis aguda, la cual es transmitida por contacto sexual, por va transfusional, transmisin vertical madre-hijo o por accidentes con material cortopunzante. La infeccin con virus de la Hepatitis B es capaz de dejar portadores crnicos de por vida, capaces de transmitir silenciosamente la enfermedad, y en algunos casos producir una hepatitis crnica, la cual puede terminar en un hepatocarcinoma maligno. Debido a ello, lo que debe vigilarse es el estado de portador crnico a la Hepatitis B, es decir, aquellos que sean reactivos al Antgeno de Superficie de la Hepatitis B (HBsAg.) Descripcin del Agente El virus de la Hepatitis B pertenece a la familia Hepadnaviridae. Es un virus DNA de doble cadena asimtrica y abierta. Tiene en su superficie el antgeno de superficie del virus de la Hepatitis B (HBsAg), el cual es altamente inmunognico y til para el diagnstico del estado portador. Su nucleocpside est constituida por el antgeno core, en cuyo interior est el material gentico, el antgeno e y la DNA polimerasa. Enfermedades humanas que produce este agente Hepatitis aguda, de curso habitualmente benigno. Aproximadamente un 10 % quedan como portadores crnicos. De ellos, un 20% mueren por Cirrosis heptica y un 4% desarrollarn un hepatocarcinoma primario del hgado. Tipo de muestras requeridos - Suero - Plasma Las muestras pueden recolectarse ya al comienzo de la sintomatologa aguda. Perodo ptimo para la toma de muestra

Para determinar el estado de portador, puede tomarse una muestra de suero posterior a la mencionada en el Artculo 18.5, en la etapa de convalecencia. Conservacin y transporte de las muestras Las muestras de sangre deben recolectarse en envases sin anticoagulantes, para obtener suero. Este debe ser extrado en condiciones de asepsia, ojal en frascos limpios y estriles, plsticos y con tapa rosca. En el caso de enviar ms de una muestra simultneamente al laboratorio, deber tomarse la precaucin de colocar cada una protegida por separado en un recipiente metlico o de material aislante. Esto evitar rupturas, prdidas y contaminacin del operador. Tcnicas de laboratorio utilizadas Tcnicas ELISAs especficas para la deteccin de antgeno de superficie de la Hepatitis B (HBsAg), utilizan un anticuerpo anti-HBsAg en fase slida, que se une al antgeno presente en el suero del paciente, el cual reacciona frente a un conjugado marcado con una enzima, la que en contacto con un sustrato apropiado, desarrolla una reaccin colorimtrica, la que puede ser leda visual o instrumentalmente. La sensibilidad mnima exigida para una tcnica ELISA es que detecte al menos 1 ng/ml de HBsAg. Existen tcnicas ms rpidas para la deteccin de este antgeno, pero son menos sensibles que los ELISAs, y su lectura es generalmente visual. Dado que existen resultados falsos positivos que tienen estas tcnicas de tamizaje, se recomienda confirmarlas con tcnicas suplementarias. Estas ltimas se basan en la neutralizacin del HBsAg, presente en la muestra del paciente, a travs de su anticuerpo especfico, las que son corridas en una prueba ELISA en paralelo, semejante al tamizaje, y en donde se mide posteriormente la absorbancia de la muestra no neutralizada y la neutralizada. Interpretacin de resultados En las tcnicas por ELISAs, las muestras con valores de absorbancia inferiores al valor de la lnea de corte (CUT OFF) se considera que no contiene HBsAg, de acuerdo al lmite de sensibilidad de la tcnica. Las muestras con valores de absorbancia superiores o iguales al valor de la lnea de corte se consideran inicialmente reactivas y debern repetirse. Si vuelve a tener valores de absorbancia superior o igual a la lnea de corte, deber ser confirmada con alguna tcnica confirmatoria. En el caso de las tcnicas confirmatorias, un resultado no reactivo indica que la muestra analizada no contiene HBsAg, o que lo contiene por debajo del lmite de deteccin del ensayo confirmatorio. Un resultado positivo confirmado indica que la muestra analizada contiene HBsAg. Control de calidad interno

Para realizar el tamizaje se deben utilizar ensayos evaluados y recomendados por el ISP que cumplan los requisitos tcnicos de: 95 % de especificidad y 100% de sensibilidad para el caso de utilizarse en Bancos de Sangre. Los ensayos deben realizarse segn las condiciones sealadas por el fabricante. Para utilizar los controles en los ensayos individuales, se recomienda realizarlos por lo menos una vez el da de su ejecucin. Se deben incorporar controles Positivos (alcuotas congeladas de muestras confirmadas por el ISP) cuando abra un nuevo estuche o set de reactivos. Control de calidad externo Participar del Programa Evaluacin Externa de la Calidad (PEEC) del ISP, para antgeno de superficie de la Hepatitis B (HBsAg). Condiciones de bioseguridad Las muestras deben manejarse con todas las medidas de precaucin universal (utilizar guantes desechables, mascarillas, sistema de eliminacin de desechos biopeligrosos, utilizar solucin de hipoclorito de sodio al 0,5 % para desinfectar cualquier salpicadura, etc.). Envo al laboratorio de referencia Los laboratorios clnicos pblicos y privados que identifiquen este agente estn obligados a notificarlos semanalmente al Instituto de Salud Pblica y enviar la informacin correspondiente en forma inmediata al Laboratorio de Referencia de Hepatitis donde se har su registro correspondiente. Las muestras de suero o plasma para confirmacin debern ser enviadas en un tubo plstico estril, con tapa rosca e identificada con el nombre del paciente. Su envo deber hacerse con material refrigerante para garantizar su conservacin. Toda la informacin requerida deber enviarse en el Formulario de Notificacin de Hepatitis para envo muestras / vigilancia de laboratorios, con los antecedentes completos, el que se encuentra disponible en la pagina web del Instituto de Salud Pblica de Chile.