Gastrulacin, Profesora Ulrike Kemmerling W.

Embriologa PERIODO PRESOMTICO GASTRULACIN

Se pueden distinguir dos grandes etapas durante el desarrollo prenatal - Etapa embrionaria: da 0 al 55 aprox. eventos ms caractersticos son: o Segmentacin: semana 1, de cigoto a mrula y a blastocisto o Implantacin: semana 2, blastocisto: presencia del disco embrionario bilaminar o Periodo presomtico: semana 3, se caracteriza por la gastrulacin, donde se formaran las tres capas germinativas embrionarias o Periodo somtico: das 20 a 35, comienza la diferenciacin tres capas embrionarias o Periodo metamrfico o prefetal: das 35 a 55 embrin comienza a adquirir caractersticas que son propias de cada especie - Etapa fetal: 55 das hasta el termino del embarazo Recordar de la clase pasada: Tras la implantacin tenemos el trofoblasto afuera y el embrioblasto adentro, empieza la formacin del disco germinativo bilaminar: capa superior epiblasto en relacin a la cavidad amnitica y capa inferior hipoblasto en relacin el saco vitelino secundario. Las clulas del hipoblasto se diferenciaran hacia mesoderma extraembrionario que despus formar parte del tejido conectivo de la placenta. GASTRULACIN: Al terminar la gastrulacin quedarn definidos los 3 ejes bsicos corporales: - Antero-posterior: se define con la liberacin del segundo cuerpo polar (anterior) - Dorso-ventral: se define cuando se implanta el blastocisto, (polo embrionario-cavidad amnitica dorsal, polo abembrionario-saco vitelino ventral) - Derecho-izquierdo: se define durante la gastrulacin En este periodo el embrin pasa de ser un disco plano de dos capas a ser un embrin de tipo tubular, esto implica que habrn nuevas interacciones celulares del tipo inductivos, migraciones celulares, movimientos, etc. En este proceso las clulas al adoptar posiciones nuevas, van formando interacciones celulares nuevas y esto es la base del desarrollo de este ser en formacin

Disco bilaminar comienzo de la tercera semana

Embrin tubular, comienzo de la cuarta semana

Un embrin que pasa la gastrulacin tiene bastante probabilidad de llegar con xito al trmino del desarrollo prenatal

Gastrulacin, Profesora Ulrike Kemmerling W. Se tiene el embrin implantado, con el disco germinativo bilaminar formado, si sacamos la cavidad amnitica, se ve el epiblasto (arriba) se ve que se forma la lnea primitiva. En una zona por anterior y tambin en una zona por posterior, quedan epiblasto e hipoblasto fuertemente unidos.

Saco amnitico Epiblasto Hipoblasto Saco vitelino

Saco amnitico Nodo Surco primitivo Saco vitelino Epiblasto Hipoblasto

Las clulas del epiblasto se invaginan para pasar a formar el Ectodermo, Mesodermo y Endodermo, es decir el epiblasto origina las tres capas, NO es el hipoblasto que se dif. A endodermo. La formacin de esta lnea indica el comienzo de la gastrulacin. La lnea primitiva comienza a formarse en la zona ms caudal, en la parte ms ceflica hacia anterior de la lnea primitiva (primero lnea despus suerco) se forma el nodo primitivo que es una acumulacin de clulas especiales y que juega un rol fundamental en la interaccin con los tejidos y clulas vecinas, considerndose una especie de centro de sealizacin celular donde se secretan molculas de sealizacin y se expresan factores de transcripcin. Entre el hipoblasto (abajo) y el epiblasto (arriba) se empieza a formar una nueva capa: el mesodermo Clulas del epiblasto migran a la lnea media y se introducen. Clulas convergen y se invaginan Clulas se extienden Cmo se induce la formacin del ndulo primitivo? Son clulas que se ubican en la zona ms caudal del embrin bilaminar y que empiezan a secretar factores de secrecin, como la cordina, nodal, kripto y vg1 que inducen a las clulas del centro para que se diferencien y se forme esta lnea se induce que clulas de la vecindad (del epiblasto) migren hacia el surco desde los lados y se introduzcan, mediante movimientos de invaginacin, convergencia y extensin. Las primeras clulas reemplazadas son del hipoblasto ahora llamado endodermo, el epiblasto pasa a llamarse ectodermo y las clulas que rellenan el espacio que queda al medio pasaran a formar el mesodermo. Ectodermo origina epidermis y Sistema Nervioso y el endodermo origina tubo digestivo.

Gastrulacin, Profesora Ulrike Kemmerling W. Cmo se forma ese espacio para que se forme el mesodermo? El epiblasto secreta cido hialurnico (de la MEC no figurada), cuya carga negativa y iones atrae agua y hace que se abran las dos capas para que se pueda formar la capa intermedia. La direccin de las clulas se determina por otro componente de la MEC no figurada, como son las glicoprotenas como la fibronectina (determina hacia donde migran las clulas del epiblasto que van a formar el mesodermo) Pregunta en clase: Cmo es que reemplaza el endodermo al hipoblasto? R: se reemplaza un tipo por el otro, uno de los fenmenos importantes puede ser la muerte celular programada, las clulas se van intercalando y a medida que las clulas de endodermo van ocupando el espacio las clulas del hipoblasto, stas van desapareciendo Al inicio de la gastrulacin en los extremos ceflico y caudal hay dos zonas donde quedan unidos el ectodermo y el endodermo, donde no se forma mesodermo son las membrana bucofarngea (ceflica) y membrana cloacal (caudal) Por qu el disco crece de forma longitudinal (de anterior a posterior) y no transversal? A medida que las clulas del epiblasto van migrando hacia la lnea meda se van topando con las que vienen en sentido contrario (desde derecha y desde izquierda), de manera que clulas que se encontraban dispuestas en paralelo se van intercalando generando un crecimiento longitudinal (de A a P), el embrin se va alargando.

Cmo las clulas del epiblasto que en el fondo es un epitelio, pueda formar una capa de un tejido con caractersticas mesenquimticas? Es una transicin epitelio mesnquima (nota: tambin existe la mesnquima epitelio), donde clulas epiteliales cambian a forma de botella y se diferencian cuando ocupan el espacio entre la capa superficial e interna a una clula mesenquimtica (estrellada, MEC abundante en cido hialurnico, con casi ninguna fibra) Esto implica un proceso de diferenciacin celular muy complejo y regulado. Tejido epitelial tiene abundantes uniones celulares, ausencia casi de MEC, con polaridad (apical y basal se determina especialmente por uniones ocluyentes). Tejido mesenquimtico: clulas que pueden tener movilidad, ausencia de polaridad celular, no hay uniones intercelulares (ms uniones con la matriz), es ms laxo Para transformarse estas clulas epiteliales primero deben perder las uniones intercelulares, atravesar la lmina basal, y luego va a ir cambiando su forma hasta llegar a la de la clula mesenquimtica. Se termina de diferenciar cuando llega al mesoderma *algunos tipos de cncer hacen metstasis mediante transicin epitelio mesnquima

Gastrulacin, Profesora Ulrike Kemmerling W.

Diferencia Molcula Sealizadora Factor de transcripcin MS: generalmente son factores de crecimiento secretados que actuaran sobre la misma clula o clulas de la vecindad FT: son protenas intracelulares que estn presentes en el ncleo y que regularan la expresin de diversos genes y esto permite que las clulas respondan cambiando su expresin gnica y por esto puedan diferenciarse. (Por ejemplo determinan que las clulas del epiblasto se trasformen en mesenquimaticas y pasen a formar parte del mesodermo) quines se involucran en esta transformacin? En el nodo y en el centro de la lnea o surco primitivo se expresan un conjunto de molculas se pueden dividir en dos grandes grupos: factores de transcripcin (protenas del ncleo que se asocian a DNA y RNA polimerasa II que es responsable de transcribir los genes involucrados en etapas posteriores) y molculas sealizadoras (protenas secretadas que pueden sealizar en forma autocrina, paracrina, etc. Hay receptores que se activan segn la molcula sealizadora que activa una cascada de transduccin de seales y en esta etapa del desarrollo lo ms comn como resultado es la activacin o represin de un factor de transcripcin) entonces factores de transcripcin determinan expresin de las molculas sealizadoras que a su vez determina la expresin de factores de transcripcin. Factores de transcripcin: HNF (rol importante en la misma formacin del nodo primitivo, en la induccin de la formacin de la notocorda), Goosecoid (induce formacin de cordina, nodina y otras molculas sealizadoras), Gen T (al actuar se expresan los genes regulados por este factor, haciendo un rol para que la notocorda se termine de formar, regula la migracin) Molculas sealizadoras: cordina y nogina (eje derecho izquierda) y nodal (eje derecho-izquierdo, induccin lnea primitiva, pertenece a la familia de factores de crecimiento FGF- beta) Para que una celula pueda responder a las seales debe ser competente debe tener maquinaria activa para 4

Gastrulacin, Profesora Ulrike Kemmerling W. poder responder, por ejemplo tener el receptor Molcula wint induce a las clulas a ser competente, nodal y VG1 que inducen la primera migracin de las celulas hacia la lnea primitiva, el FGF mantiene el proceso de migracin hacia la lnea primitiva. Se activan por una va de transduccin de seales, por ejemplo por la caderina que es una molcula de adhesin intracelular que tiene que reprimirse para que las clulas epiteliales se puedan soltar y formar el tejido mesenquimtico

Va wint: metacatenina sin ligando wint es destruido. Cuando llega el ligando esta molcula no se destruye y se une a un factor de transcripcin en el ncleo y se expresan los genes blancos de esos factores de transcripcin Nodal: tambin activa vas, van al ncleo y activa vas gnicas Factor de crecimiento fibroblasto (FGF) pueden activar una cantidad de vas de seales distintas, que luego pueden llegar al ncleo y activar factores de transcripcin Nota: esto no es importante para la prueba

Continuando Dependiendo por donde entran las clulas al surco primitivo durante la gastrulacin ser la estructura que formarn en el embrin en formacin si ingresan ms caudal van a migrar a una regin ms perifrica, y formarn estructuras distintas de las que entran por ceflico, que irn a formar estructuras ms centrales. Las que entran por el mismo nodo primitivo son clulas que forman la notocorda . Clulas por ms anterior incluso algunas que migran por delante de la membrana bucofarngea formaran clulas de la futura regin cardiognica (formar el corazn)
Notocorda

Finalmente queda un embrin trilaminar: ectodermo con la zona central formando el sistema nervioso, endodermo (formar el tracto digestivo, parte del tracto respiratorio) y mesodermo, el cual est formando 3 grandes zonas: mesodermo paraxial (al lado de la lnea media, formar huesos y msculos esquelticos del tronco), inmediatamente al lado, hacia afuera est el mesodermo intermedio (formar el tracto urogenital, y finalmente mesodermo lateral que se dividir en dos hoja somtica (hacia ectodermo, dar origen a distintas estructuras dependiendo del lugar, por ejemplo puede formar dermis, algunos msculos del tronco y algunas clulas migraran y formaran parte del tejido seo y muscular de las extremidades)y hoja visceral (hacia endodermo, dar origen a la parte de la serosa que recubre cavidades) y por abajo se forma en la lnea media la notocorda.

Gastrulacin, Profesora Ulrike Kemmerling W. Formacin del eje derecho izquierdo Durante la gastrulacin se forma eje derecho izquierdo debido fundamentalmente al nodo (por caractersticas citolgicas articulares) son clulas responsables del flujo nodal: clulas del nodo tienen cilios (c/u tiene uno) que son especiales ya que no tienen geometra 9 +2 (9 pares de microtbulos en la periferia y un par al centro) ya que no tienen los microtubulos del centro, de forma que los cilios se mueven hacia una direccin principalmente, es decir el movimiento es tal que las molculas sealizadoras que se

producen alrededor del nodo se van a ir moviendo hacia un lado del embrin, este flujo es hacia el lado izquierdo y es el que se conoce como flujo nodal. Quines son los que se movilizan? FGF-8 (factor de crecimiento fibroblasto-8) se desplaza y se concentra en el lado izquierdo Sonic Hedgehog molcula sealizadora

El hecho que haya un aumento del FGF-8 en el lado izquierdo implica que en esa zona se expresaran enes que son especficos del lado izquierdo, como el lefty 1 y nodal - Nodal: induce expresin de un factor de transcripcin, algunos de los cuales son responsables de la rotacin del intestino y estmago, la posicin del bazo y de la asimetra de lbulos pulmonares, - Lefty1 y sonic hedgehog se concentran ms en la lnea media impiden el paso de molculas del lado izquierdo al derecho. El lado derecho no se forma por defecto, pues se expresan genes propios del lado, como son el Snail.

Notocorda Se forma por clulas que entran por el nodo y migran hacia ceflico justo por la lnea media. Esta estructura se forma en el mesodermo en la lnea media. Es una estructura celular cilndrica que se

Gastrulacin, Profesora Ulrike Kemmerling W. ubica en el eje longitudinal del embrin, ventral, en la zona donde se est formando el futuro sistema nervioso central. Al principio tiene rol estructural (soporte inicial del embrin, hasta que se empieza a formar la columna) y es un centro de sealizacin celular, que son de tipo inductivas, como por ejemplo media la transformacin del ectodermo en tejido nervioso, acta en forma diferencial sobre algunas clulas del ectodermo versus otros, dando la diferencia de donde se formaran tubo, crestas, etc. neurales o de epidermis, induce formacin de somitos (zona donde se diferencia el mesodermo paraxial) y tiene rol en la formacin del pncreas dorsal. Estas clulas que se introducen por el nodo se conocen como clulas prenotocordales que van a desplazarse por la lnea media hacia adelante hasta llegar antes de la membrana buco farngea, pues en esa zona se diferencia la placa precordal, que tambin es una diferenciacin del mesodermo, inmediatamente por atrs de la membrana bucofarngea y que limitan el crecimiento de las clulas que forman la notocorda. Las clulas de la placa precordal son fundamentales en inducciones de donde se formara el futuro encfalo Las clulas prenotocordales se insertan en el endodermo es lo que se conoce como placa notocordal, cuyas clulas proliferan y se comienzan a levantar, se forma un surco, el cual se cierra y forma un tubo, que queda despus incluido en el mesodermo. * Clula prenotocordales se insertan y forman placa prenotocordal, despus se fusionan y se termina formando la notocorda compacta su remanente en el adulto es el ncleo pulposo Regresin de a lnea primitiva: notocorda migra a ceflico, pero el tamao del surco primitivo va a ir regresando; si la regresin no se completa, por tener clulas con alta potencialidad, se pueden formar teratomas sacro coccgeos (forma cualquier tipo de tejidos, son como tumores) Las distintas clulas sealizadoras de la zona del nodo y la lnea y luego en la notocorda, van a inducir distintas estructuras segn las molculas que acten tiempo y espacio en que acten formara distintas estructuras Qu hace la notocorda? formacin tubo neural La notocorda induce a que el ectodermo sobre ella se engruese, formacin placa neural para que luego se pliegue formando el surco, el cual se ir cerrando hasta formar el tubo neural. Las clulas de la punta del surco son las clulas de la cresta neural, tienen una alta capacidad migratoria y son capaces de formar distintos tejidos a distancias: clulas de la gla, melanocitos en la piel, tejidos de origen mesenquimtico a nivel de la cara y parte del cuello. Induce la formacin de somitos y la formacin del pncreas dorsal. Induce tambin

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Y Cmo induce la notocorda? Induccin neural La concentracin de FGF aumenta, mientras que la de BMP-4 se inhibe, induce la formacin de la placa y el tubo neural Cmo? FGF reprime transcripcin de BMP 4 e induce la transcripcin de Cordina y nordina, que a su vez inhiben la actividad de BMP (hay dos vas de inhibicin: 1) se inhibe expresin de BMP, que se sintetice la protena, que se exprese el gen; 2) se inhibe la actividad del BMP ya presente). Por ende se puede decir, que si el ectodermo no queda expuesto al BMP se forma el tejido nervioso (inhibicin activa de BMP inducira la formacin del tejido) y el tejido que queda expuesto al BMP formara epidermis Cantidad de BMP que llega determina la estructura que se formar: Gran cantidad de inhibidor de BMP (nada de BMP en la zona)formacin de placa neural Si llega algo de BMP, pero en pocas cantidades formacin cresta neural Si llega gran cantidad de BMP (sin inhibidores) formacin de epidermis Todas estas interacciones son mltiples, no solo notocorda acta sobre ectodermo, sino que tambin hay inducciones mutuas, por ejemplo se puede estar inhibiendo el BMP, pero en la misma placa neural se sintetiza BMP tambin (no necesariamente el tipo 4); el mesoderma intermedio puede actuar sobre el paraxial, la notocorda sobre el paraxial, el paraxial sobre la placa neural no solo es gradiente de BMP, sino que tambin depende de las seales que llegan de la regin vecina. El mesoderma paraxial se diferencia en somitos (pasando a la etapa somtica) el que a su vez se diferencia en el esclerotomo (lnea media en contacto con tubo neural, que formar parte de las vertebras) las que estn debajo del ectodermo forman el dermamiotomo que se diferenciara en demortomo y miotomo y como sus nombre lo indican forman dermis de la parte dorsal y musculatura asociada

Gastrulacin, Profesora Ulrike Kemmerling W. Se termina entonces en la tercera semana, comenzando la cuarta semana de desarrollo, con un embrin tubular * Efecto Establecimiento eje derecho izquierdo Induce la formacin de la lnea primitiva y ayuda tambin a establecer el eje derecho izq Factores de HNF 3 formacin nodo primitivo e induce la Trascripcin formacin de la notocorda, regula a gen T Goosecoid Regula expresin de cordina, nogina y otras MS, regula a gen T Gen T Formacin notocorda en una etapa ms tarda, participa en la migracin hacia Mesoderma Formacin del Wint Induce la competencia de las clulas, que estn mesodermo, preparadas para recibir los FS y MS que EMT correspondan transformacin Nodal y Vg1 Induce la primera migracin de las clulas hacia epiteliola lnea primitiva mesnquima FGF factor de crecimiento Fomenta el mantenimiento del proceso de fibroblastico migracin Snail Inhibe expresin cadherinas, por tanto se pierden uniones intercelulares. Tambin participa en la dif. del lado derecho Formacin FGF - 8 Se desplaza y se concentra en izquierdo asimetra Activa otros factores y molculas como nodal y derecho-izq lefty-1 Se debe a flujo Nodal y Lefty-1 Se expresan en el lado izquierdo nodal por cilios en clulas del Nodal Induce la expresin de pitx2 (FT) que es nodo responsable de genes de: rotacin intestino y estmago, posicin bazo, asimetra pulmonar Lefty 1 y Shh Sonic Impide paso de molculas del lado izquierdo al hedgehog derecho Induccin neural Aumento FGF, generado por Inhibe la transcripcin de BMP-4 e induce la la notocorda transcripcin de cordina y nogina (que tambin inhiben BMP4) y esto induce la formacin de la placa neural BMP-4 Ventraliza el mesodermo durante la gastrulacin, forma laminas intermedia y lateral del mesodermo (si no lo inhibieramos no podriamos formar el tubo neural que es dorsal, se formara epidermis) Molculas Sealizadoras Proteina Cordina y Nogina Nodal

Nota:

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