PROTOCOLO PARA TUFFYS Los tuffys a monitorear desde los sitios de muestreo se debern tratar de la siguiente forma: RECOLECCION

1. En cada sitio de muestreo existen 7 rplicas (tuffys) las cuales estn dispuestas de norte a sur con nmeros correlativos (1-7) siendo la rplica 1 la situada ms al norte. 2. Cada tuffy deber ser retirado de la plataforma con una llave que sacar el perno con el cual est sujeto al sustrato, este tuffy deber introducirse en una bolsa ziploc previamente rotulada con el nmero de la rplica (i.e. #1). 3. Las rplicas (tuffys) obtenidas del sitio de muestreo se debern almacenar dentro de UNA SOLA bolsa ziploc de mayor tamao rotulada con el Sitio y Fecha de Muestreo, posteriormente se congelar para que no se deterioren los organismos. Pasos 1 al 3 lo haran el profesor de la asigatura y ayudantes Una vez tomadas las muestras, congeladas y almacenadas para su posterior anlisis en laboratorio, se les realizar el siguiente protocolo: LIMPIEZA 1. Retirar de la bodega de freezer una bolsa Ziploc correctamente rotulada y registrar en la puerta de este a que sitio y mes corresponde y la persona que lo retiro para su limpieza. 2. Una vez en el laboratorio, se debe registrar en el libro de protocolo de tuffys la informacin contenida en la etiqueta, en relacin a sitio, fecha y nmero de tuffys. 3. Tomar un tuffy y quitarlo de su bolsa sobre una bandeja de plstico. Lavando con agua dulce lo que quede en la bolsa. Esta agua debe ser contenida en la bandeja. 4. Usando tijeras romper amarras del tuffy. 5. Lavar el Tuffy. Para su lavado se utiliza poco flujo de agua dulce. Debe lavarse MUY BIEN para asegurarse de que sean extradas todas las especies colectadas en el tuffy. 6. Tamizar el contenido de la bandeja. Una vez lavado el tuffy y comprobado que no hay ms organismos en l, se deber filtrar su contenido a travs de un tamiz de 150 m de dimetro. De esta forma quedarn todos los organismos retenidos en el tamiz. 7. Montar en cpsula. Una vez tamizada, la muestra deber traspasarse a una cpsula de Petri para su posterior observacin y separacin bajo la lupa.

SEPARACIN 1. En la lupa se separarn los organismos contenidos en la cpsula en 4 GRANDES GRUPOS, los cuales son: 1.- MITILIDOS, 2.GASTROPODOS (dentro de los cuales se incluyen Fissurellas y Scurrias, Equinoideos, Asteroideos y Polyplacforos), 3.POLIQUETOS Y 4.-CRUSTCEOS DECPODOS (se excluyen Anfpodos e Ispodos). 2. Cada GRUPO de organismos se almacenar dentro de frascos de 5 ml o ependorf con alcohol al 70%. Siendo cada uno de ellos rotulados con el Sitio de estudio, Fecha, Grupo de organismos y el nmero de la rplica. (i.e. Guanaqueros, 04 junio 08, Mitlidos #1). 3. Registrar en el libro de protocolo la presencia o ausencia de cada grupo en la cpsula de las rplicas (tuffys) correspondiente. En el caso de los poliquetos y crustceos indicar tambin el nmero. Debe anotarse en el libro de protocolo la cantidad de poliquetos encontrados por tuffy. 4. Una vez terminado de revisar la rplica con que inici la bolsa, repetir el mismo procedimiento de limpieza y separacin con siguiente tuffy. 5. Finalmente cuando termine la bolsa se almacenarn en conjunto las rplicas de cada GRUPO, y se guardaran dentro de un cajn dispuesto para dichos fines dentro del laboratorio. 6. Finalmente las muestras ya previamente separadas sern identificadas en el laboratorio de Montemar