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Se manipula el papel filtro solo con pinzas metlicas. Se pesa el papel filtro seco en balanza analticas (P1). Se deposita el papel filtro en un embudo Buchner, que a su vez esta en un matraz quitasato, conectado a un sistema de vaco. Se toma una muestra del fermentador (V = 10 ml) y se deposita en el papel filtro. Una vez eliminada la mayor parte de agua se pone en una capsula de Petri y se pone en horno a 105 por 12 horas. Se lleva el papel con la muestra a una desecadora y se deja enfriar hasta peso constante. Se pesa el papel filtro con la muestra (P2). Se obtiene la concentracin biomasa con la siguiente ecuacin.
X
-
P2 P 1 V
V (L) X (gr/L)
Se llena la tabla con los datos obtenidos y se grfica la concentracin en el tiempo. Tiempo (horas) P1 (gramos) P2 (gramos)
2. Determinacin por absorbancia Se prepara una solucin salina isotnica (8,5 gr/L de NaCl). Se toma una muestra del fermentador (V = 5 ml). Se diluye la muestra con la solucin salina (FD = 10). Se hace un espectrofotograma y se determina la longitud de onda a la cual ser medida. Se mide la absorbancia (A) a la longitud de onda determinada La absorbancia no debe superar el valor de 0,3. Si pasa esto, se aumenta el FD. Esta medida solo nos dar un comportamiento de la biomasa y no una cuantificacin. Para obtener el valor a graficar (Y) con la siguiente frmula.
Y A FD
Se completa la tabla a continuacin y se grafica el valor Y en el tiempo. Tiempo (horas) FD A Y
3. -
Determinacin por conteo en cmara de Neubauer. Se toma una muestra del fermentador (5ml). Se diluye la muestra con la solucin isotnica (FD = El que permita un buen conteo). Se pone la muestra en la cmara de Neubauer y se coloca el cubreobjeto. Se observa en microscopio y se cuentan las clulas en un cuadrado de la cmara, que contiene 16 cuadrados pequeos. (C). Se cuentan N cuadrados. La concentracin (X) se obtiene con la siguiente frmula.
X
-
C
i 1
A h N 16
C3 (cl) C4 (cl)
FD 1000