Protocolo de Biotecnología Vegetal.

Materiales.
 5-7 limones.
 1 mortero.
 1 cuchillo.
 Cepa de E.Coli.
 Equipo de Extracción Soxhler.
 2 Soporte universal
 2 nueces
 2 pinzas sujetadoras.
 N-dimetilformamida.
 Alcohol al 70.
 Cloro (2 gotas en 10 mL) .
 5 Vasos de precipitado de 100 mL.
 5 Tubos de ensayo de 10 mL.
 1 balanza.
 Papel filtro
 Equipo de filtración al vacio.

Metodología.
1. Cortar los limones en trozos pequeños (aprox. 1/8 del tamaño del fruto completo)
2. Poner a secar en estufa a 50°C por 1 hora o hasta que los trozos se encuentren
completamente secos.
3. Una vez seco, colocar en el mortero y moler hasta obtener material particulado muy fino.
4. Una vez obtenido, pesar 100 gramos de picadillo y mezclar con 20 (mL) de N-
dimetilformamida y agua en proporción 2:1.
5. Paralelamente, montar equipo de extracción: Colocar lasnuecesy pinzas en los soportes y y
posteriormente fijar los tubos y refrigerantes que componen el equipo de destilación.
6. Extraer por método de extracción soxhler, utilizando como solvente la N-
dimetilformamida.
7. Una vez obtenido el metabolito, agregar en placa de petri el metabolito en papel filtro.
8. Posteriormente se procede a realizar la siembra con el microorganismo elegido (en este
caso cepa de E.Coli). Se hace por duplicado dejando un control.
9. Una vez finalizada la siembra, llevar a incubar por 25°C.