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2.3 Deteccin y/o Cuantificacin de Marihuana (Cannabis) en Matriz Orgnica A. Caractersticas Fsico-Qumicas Marihuana, usualmente se refiere a la mezcla de las hojas y flores de la planta (Cannabis sativa), adems de la utilizacin de la resina. Las molculas psico-activas son derivadas del ncleo 2-(2-isopropil-5-metilfenil)-5pentilresorcinol, conocido comnmente como cannabinoide. Dentro de estos cannabinoides, cinco son los que destacan: cannabidiol (CBD), cannabinol (9 THC), (-)-trans-8(CBN), (-)-trans-9-tetrahidrocannabinol tetrahidrocannabinol (8 THC) y cido 9-tetrahidrocannabinlico.

CH3 OH

CH3 OH
CH3

H2C

CH3

OH

C5H11

H3C

C5H11

CBD C21H30O2 Peso molecular: 314.5 CAS: 13956-29-1 Punto de fusin: 66 67 C Solubilidad: Insoluble en agua, poco soluble en cloroformo y ter de petrleo

CBN C21H26O2 Peso molecular: 310.4 CAS: 521-35-7 Punto de fusin: 76 77 C Solubilidad: Insoluble en agua, poco soluble en cloroformo y ter de petrleo

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CH3 OH
CH3

CH3 OH
CH3

H3C

C5H11

H3C

C5H11

9 THC C21H30O2 Peso molecular: 314.5 CAS: 1972-08-3, pKa 10.6 Aceite viscoso Solubilidad: Insoluble en agua, Soluble en 1 parte de etanol, poco soluble en cloroformo y ter de petrleo

8 THC C21H30O2 Peso molecular: 314.5 CAS: 5957-75-5 Aceite viscoso Solubilidad: Insoluble en agua, poco soluble en cloroformo y ter de petrleo

CH3 OH COOH
CH3

H3C

C5H11

cido 9 tetrahidrocannabinlico C22H30O4 Peso molecular: 358.5 CAS: 23978-85-0 Principalmente la actividad psicomimtica es ejercida por el 9 THC y el contenido de este cannabinoide vara entre un 2 a 5 % en la planta. El cido 9 tetrahidrocannabinlico es inactivo, pero al aplicar temperatura se vuelve activo (humo de marihuana).
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B. Identificacin Test colorimtrico, (Duquenois)* coloracin azul-violeta Cromatografa en capa fina: Sistemas TI (FE slica gel F254, FM tolueno, CBD Rf = 5, CBN Rf = 52, 9 THC Rf = 30), TJ (FM xileno:hexano:dietilamina 25:10:1 v/v/v, CBD Rf = 36, CBN Rf = 20, 9 THC Rf = 29). Revelado mediante solucin Fast blue B** (CBD color naranjo, CBN color violeta y 9 THC color rojo), la coloracin se puede intensificar aspersando o sumergiendo en una solucin de hidrxido de sodio 3N. * Reactivo Duquenois: Disuelva 2 g de vanilina y 0.3 mL de acetaldehdo en 100 mL de etanol (almacene protegido de la luz). ** Reactivo Fast blue B: Elabore una solucin al 1 % p/v del compuesto (odianisidina diazotada). Debe preparase al momento de utilizar. Espectrofotometra Infrarroja (lquido), bandas de absorcin caractersticas para CBD 1585, 1630, 1020, 1210, 1240 y 1050 cm-1, CBN 1620, 1050, 1580, 1030, 1120, 1228 cm-1, 8 THC 1580, 1030, 1620, 1180, 1080, 1260 cm-1, 9 THC 1580, 1040, 1620, 1180, 1130, 1050 cm-1. Espectrofotometra Ultravioleta (solucin etanlica), CBD 278 nm, CBN 285 nm, 9 THC 278 nm y cido 9 tetrahidrocannabinlico 278 y 283 nm. C. Cuantificacin Cromatografa Lquida de Alta Resolucin (CLAR o HPLC): Sistema HL (FE ODS-slica C-18, 5 m, 250 x 4.6 mm, FM cido sulfrico 0.01 M:metanol:acetonitrilo 7:8:9 v/v/v, deteccin 254 nm). Cromatografa de Gas (CG o GC): Sistema GH con derivatizacin de los cannabinoides (FE columna de vidrio 3 % SE-30 2 m x 2 mm, gradiente de temperatura 100 a 320 C, FM nitrgeno a flujo 30 mL/min, detector ionizacin de llama).

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D. Caractersticas Txico-Cinticas 9 THC es absorbido lenta e irregularmente en el tracto gastrointestinal, la biodisponibilidad luego de la ingesta es de alrededor de 6 a 20 % y de un 18 % cuando se fuma; es altamente lipoflico y se distribuye ampliamente en el organismo. Es oxidado a los metabolitos activos 11-hidroxi-9 THC y 8hidroxi- 9 THC, para posteriormente ser conjugados con cido glucurnico. Recirculacin enteroheptica puede ocurrir con los metabolitos formados en un pequeo porcentaje. Sobre un 25 % de la dosis ingerida en excretada a travs de la orina durante 3 das, an cuando la principal va de excrecin (65 %) es por las heces. La vida media en plasma y el volumen de distribucin para 9 THC corresponde a 30 horas y 10 L / kg de peso corporal respectivamente. La unin a protenas es bastante alta (94 a 100 %) para 9 THC y el metabolito 11-hidroxi-9 THC. (1) E. Toxicidad La toxicidad de cannabis (9 THC) se manifiesta con prdida de la conciencia, descoordinacin motora, despersonalizacin, hipotermia, taquicardia, coma e incluso la muerte, aunque esto ltimo es raro de encontrar. Concentraciones post-mortem de 9 THC se han reportado en diferentes rganos, hgado 37.5 g/kg, pncreas 42 g/kg y bazo 12 g/kg. (2,
3)

F. Procedimiento a Desarrollar en el Laboratorio Realice un ensayo cualitativo a la matriz orgnica que se le proporciona a fin de identificar la presencia de cannabinoles. M.O.: 1. Observe a simple vista las caractersticas fsicas que presenta la matriz proporcionada. 2. Extraiga apropiadamente una cantidad de resina a modo de realizar el ensayo cualitativo posterior (cromatografa en capa fina).

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3. Desarrolle la cromatografa en capa fina empleando el siguiente sistema: FE slica gel F254, FM ter de petleo:ter etlico (80:20 v/v), deteccin ultravioleta a 254 nm y revelado colorimtrico con solucin fast blue B y luego sumerja la placa cromatogrfica en una solucin de NaOH 1N. 4. Una vez que obtenga los resultados del anlisis, interprtelos adecuadamente. G. Referencias 1. Moffat, A., Clarkes Isolation and Identification of Drugs, 2nd edition, The Pharmaceutical Press, 1986, Great Britain. 2. Tewari, S., Sharma, J. Toxicol. Lett., 1980, 5, pp 279 - 281. 3. Fenton, J., Toxicology, A Case-Oriented Approach, CRC Press, 2002, U.S.A.

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