SANGRE Y TEJIDO HEMATOPOYETICO La sangre es una forma especializada del tejido conjuntivo, compuesta por una sustancia intercelular

lquida llamada plasma, en la cual se encuentran en suspensin los elementos figurados: hemates, leucocitos y plaquetas. La sangre circula a travs de un sistema de tubos cerrados, denominados vasos sanguneos. En el adulto sano el volumen de la sangre es de 5 L y constituye aproximadamente el 8 % del peso corporal. La sangre acta manteniendo la composicin adecuada y casi constante de los lquidos corporales, los que permiten la nutricin, el crecimiento y la funcin de las clulas del organismo. Participa en el intercambio entre el medio externo y los tejidos corporales y adems es portadora de hormonas y de otras sustancias biolgicamente activas, que regulan el funcionamiento de rganos como el hgado, la mdula sea y las glndulas endocrinas. La funcin primaria de los hemates de la sangre es la de mantener en circulacin una elevada concentracin de hemoglobina, esencial para el transporte del oxgeno y CO2. Los leucocitos participan en el sistema de defensa del organismo, ya sea por medio de la respuesta celular inespecfica o por la respuesta inmunitaria especfica. Por otra parte, en investigaciones realizadas se ha demostrado que los virus son potentes inductores del interfern (alfa) leucocitario humano, el cual tiene propiedades antivirales y antitumorales, por lo que actan tambin en el sistema de defensa del organismo. Las plaquetas son elementos formes o figurados de la sangre y participan en la prevencin de las hemorragias a travs de los mecanismos de la coagulacin y en el mantenimiento de la integridad del endotelio vascular. ELEMENTOS CONSTITUYENTES DE LA SANGRE Plasma El plasma constituye el lquido de la sangre y comprende el 55% del volumen de ella. Est compuesto por un 90 % de agua, un 7 % de protena (fibringeno, albmina y globulinas) y un 3 % de sales inorgnicas. En el plasma se encuentran las sustancias nutritivas provenientes del sistema digestivo, las sustancias de desecho producidas por los tejidos y las hormonas. Cuando la sangre se pone en contacto con el aire o se interrumpe la

circulacin, una de las protenas plasmticas, el fibringeno, se precipita en forma de red (fibrina), dando lugar a la coagulacin. Cuando este fenmeno se produce, del plasma coagulado se obtiene un lquido amarillento y transparente, denominado suero sanguneo. Elementos formes El estudio de los elementos formes de la sangre tiene gran importancia clnica, pues la morfologa, el nmero y las proporciones de los diversos tipos celulares), son indicadores del estado de salud. Por esta razn la hematologa citolgica se mantiene vigente, y es imprescindible en el examen sistemtico de todo individuo. El conjunto de datos cuantitativos y cualitativos se designa con el nombre de hemograma; sus valores normales varan con el sexo, la edad, el estado fisiolgico, la ubicacin geogrfica del individuo, etc. La cantidad de elementos circulantes se determina por las tcnicas hemocitomtricas, que permiten contarlos y referirlos a la unidad de volumen (mm3). Las caractersticas cualitativas se establecen a partir de la observacin al microscopio de preparados (frotis) (figura 6.2), teidos con la tcnica de May-Grnwald Giemsa que permite reconocer la mayora de los detalles morfolgicos de hemates, leucocitos y plaquetas. La concentracin de glbulos rojos es de 5.106 mm3 de sangre en el hombre y de 4.5. 106 en la mujer. Estas cifras pueden variar en estados patolgicos y por la permanencia en grandes alturas. Glbulos rojos Los glbulos rojos (eritrocitos o hemates) son clulas muy diferenciadas que han perdido durante su maduracin todos los organitos. Presentan un color amarillo verdoso pero en masas densas adquieren un color rojo, debido a la alta concentracin que contienen de hemoglobina. Este pigmento se separa con facilidad de los hemates por un fenmeno conocido con el nombre de hemlisis. La parte incolora que queda una vez que sale la hemoglobina es el estroma, denominado tambin sombra del glbulo rojo. Los eritrocitos de los mamferos presentan la forma de discos bicncavos (figura 6.3) y de perfil se presentan como cuerpos alargados con extremos redondeados. El tamao en estado fresco es de 6 a 8 m y en los frotis disminuye a 7 m, debido a la deshidratacin que sufren. Una propiedad fsica caracterstica de los eritrocitos es la tendencia a

adherirse entre s, formando columnas en forma de pilas de monedas tambin denominadas rouleaux. Se considera que la causa de esta adhesin sea la tensin superficial de su membrana. Otra caracterstica de los eritrocitos son los cambios de forma que sufren por la accin de los factores mecnicos y/o fsicos. Esta propiedad se debe a que los eritrocitos son blandos y flexibles, pero una vez que dichos factores dejan de actuar, recuperan su forma primaria. Esto explica el paso de los eritrocitos por el sistema capilar (figura 6.4). En condiciones fisiolgicas, existe un estado de equilibrio entre el interior de los eritrocitos y el plasma. Una solucin es llamada fisiolgica o isotnica, al igual que el plasma, cuando no modifica el volumen de los eritrocitos; ejemplo de ello es la solucin de cloruro de sodio al 0.9 % o la solucin salina fisiolgica. Los glbulos rojos pueden presentar variaciones de tamao, forma y contenido; se considera anisocitosis cuando los glbulos rojos de un frotis sanguneo tienen dimetros diferentes. La poiquilocitosis se refiere a la variacin de forma de los eritrocitos, que pueden ser falciformes, esfricos o aplanados (figura 6.5). La variacin del contenido se refiere a los cambios en la concentracin de hemoglobina. Los glbulos rojos hipocrmicos son pobres en hemoglobina y los hipercrmicos la contienen en exceso. La membrana del eritrocito es semipermeable y a travs de ella se realiza el transporte activo de algunas sustancias. Los eritrocitos transportan el oxigeno a los tejidos y el CO2 a los pulmones. Tienen una vida media de 120 das, siendo destruidos en el bazo, hgado y mdula sea, por los macrfagos y no en la sangre. En la destruccin eritroctica la molcula de hemoglobina se desdobla en hematina y globina. De la hematina se separa el hierro, que es utilizado de nuevo o almacenado y la bilirrubina que es secretada por el hgado con la bilis. La formacin de eritrocitos (eritropoyesis) est bajo control hormonal. La disminucin de la presin parcial de oxgeno, su principal estimulante, hace aparecer en la circulacin una hormona, la eritropoyetina (producida en el rin). Glbulos blancos Los glbulos blancos o leucocitos son clulas nucleadas que se encuentran en cantidad mucho menor que los eritrocitos. El nmero promedio de leucocitos en la sangre circulante es de 5000 a 10000 mm3, si bien en los nios y en algunos estados patolgicos las cifras pueden ser ms altas. En la sangre humana pueden distinguirse dos tipos principalmente: Los leucocitos agranulosos y los granulosos. Este criterio de clasificacin se

basa en la presencia de grnulos especficos en su citoplasma y se emplea, desde el punto de vista didctico, en la mayor parte de los libros de texto; aunque se sabe que los leucocitos agranulosos pueden tambin presentar grnulos citoplasmticos. Hay dos tipos de leucocitos agranulosos, los linfocitos, que son clulas pequeas de tamao aproximado al eritrocito, ncleo redondeado y escaso citoplasma, y los monocitos, clulas de mayor tamao, citoplasma mas abundante y ncleo ovalado o reniforme (figura 6.6). Existen tres clases de leucocitos granulosos, los cuales contienen grnulos especficos en su citoplasma. Se les denomina neutrfilos, eosinfilos y basfilos, segn la reaccin de coloracin de sus grnulos citoplasmticos (figura 6.6). Leucocitos agranulosos Linfocitos Los linfocitos son clulas esfricas que en la sangre humana pueden alcanzar un dimetro de 6-8 m, aunque en ocasiones son de mayor tamao. Forman parte del 26-40 % de los leucocitos sanguneos y se presentan generalmente como clulas redondeadas, de ncleo grande, rodeado por un escaso borde citoplasmtico. El ncleo es esfrico y presenta una excavacin pequea. La cromatina condensada no hace posible la visualizacin del nucleolo en los frotis sanguneos coloreados. El citoplasma tiene gran afinidad por los colorantes bsicos (figura 6.7). En las microfotografas electrnicas se aprecia (figura 6.8) que los linfocitos tienen pocas mitocondrias, los centriolos se localizan frecuentemente en la excavacin del ncleo, los retculos endoplsmicos liso y rugoso son escasos y el aparato de Golgi se encuentra situado prximo a los centriolos. Existen abundantes ribosomas libres, lo cual explica la basofilia citoplasmtica antes mencionada. Aunque este tipo celular se clasifica como leucocito agranuloso, aproximadamente un 10 % de estas clulas pueden presentar grnulos azurfilos en su citoplasma, que a diferencia de los especficos en los granulocitos no tienen carcter constante. Todas las caractersticas sealadas corresponden a los denominados linfocitos pequeos, los cuales se encuentran habitualmente en mayor proporcin en la sangre perifrica. Sin embargo, existen otros de mayor tamao (10-12 m de dimetro), los linfocitos medianos y grandes que presentan abundante citoplasma, ncleo de cromatina laxa y nucleolos prominentes, que se localizan en el tejido y rganos linfoides.

En la actualidad se sabe de la existencia de varios tipos celulares de linfocitos que desempean diversas funciones en los procesos inmunolgicos del organismo. En la sangre perifrica circulante encontramos dos tipos de linfocitos pequeos, unos denominados linfocitos T, provenientes del timo y de vida prolongada, en el hombre estos linfocitos llegan a tener una duracin de aos. Los otros linfocitos pequeos son los linfocitos B, denominados as porque se encontraron por primera vez en la bursa de Fabricio, que es una estructura saculiforme del epitelio intestinal de las aves. Estos linfocitos, a diferencia de los T, tienen generalmente una vida breve. Segn algunos investigadores, en el humano, aunque no se sabe con certeza, se piensa que los linfocitos B provienen de la mdula sea; otros son de la opinin que estos pueden derivar de las placas de Peyer del intestino. Los linfocitos de la sangre circulantes constituyen una poblacin mixta de clulas en diversos estadios de actividad inmunolgica. De los linfocitos que se encuentran en la sangre perifrica, del 65-75% corresponden al tipo T, los cuales se encuentran recirculando en ella. En los cortes de tejidos y en los frotis sanguneos es imposible identificar los dos tipos de linfocitos (T y B) con las tcnicas hematolgicas corrientes; sin embargo, los dos tipos pueden reconocerse utilizando tcnicas especiales. La membrana plasmtica de los linfocitos B posee una gran densidad de molculas de anticuerpos, del mismo tipo de los que fabrican cuando son estimulados. Por este motivo, los anticuerpos de superficie pueden reconocerse combinndolos con trazadores fluorescentes que se hacen posteriormente visibles mediante la microscopia de fluorescencia, los cuales aparecen como anillos fluorescentes alrededor de cada linfocito B. Los linfocitos T, poseen pocos anticuerpos en su superficie, de manera que aparecen sin fluorescencia cuando se utiliza esta tcnica. Los linfocitos B y T pueden tambin reconocerse mediante el uso del microscopio electrnico de barrido. Los linfocitos B presentan gran cantidad de proyecciones pequeas en su superficie, mientras que la superficie de los linfocitos T es relativamente lisa (figura 6.9). Esta diferencia morfolgica en la actualidad, se considera que responde a la tcnica empleada. Para distinguir estos dos linfocitos se utilizan tambin mtodos histoqumicos. Con este fin se emplea la tcnica del alfa naftil acetato esterasa cida, la cual marca los linfocitos T maduros y los monocitos (figura 6.10). Con respecto a la funcin de los linfocitos, estos pueden subdividirse en diferentes subpoblaciones, cada una de las cuales posee una funcin diferente en los mecanismos inmunolgicos. Los linfocitos que maduran en el timo, linfocitos T o timodependientes, recirculan desde la sangre y la linfa

al tejido linfoide, actuando de forma continua en la "bsqueda de antgenos". Respuesta inmunitaria mediada por clulas. Los linfocitos T expresan su actividad inmunolgica por medio de la respuesta inmunitaria mediada por clulas. Cuando se localiza en los tejidos un antgeno especfico, los linfocitos T estn programados para reconocerlo y regresan a los tejidos linfticos. En estos sitios los linfocitos se activan y se vuelven clulas blsticas, originando descendencias por mitosis. Algunas de estas clulas quedan en el tejido linftico como "clulas de memoria", capaces de iniciar una respuesta mas eficaz a una segunda exposicin de este antgeno particular. Otros linfocitos T entran en la circulacin para ejercer su accin destructiva mediante las siguientes formas: 1. Los linfocitos T activados que producen sustancias (linfoquinas) activadoras de los macrfagos locales y circulantes. Estos macrfagos ejercen su actividad fagocitaria sobre los antgenos. 2. Linfocitos T activados, denominados linfocitos T asesinos. Inician la destruccin directa de las clulas por un proceso denominado destruccin citotxica. La accin destructiva se logra porque los linfocitos T liberan una sustancia citotxica e inespecfica, que destruye la clula extraa que lleva el antgeno. Respuesta inmunitaria humoral. En la respuesta inmunitaria humoral participan los linfocitos B; estos se consideran no recirculan de manera continua, como sucede con los linfocitos T. Los linfocitos B inmunocompetentes estn programados para el reconocimiento de un solo antgeno; una vez que entran en la circulacin, se activan, originan descendencia en los tejidos linfticos. Cuando son estimulados por los antgenos, los linfocitos B se transforman en plasmablastos que se dividen posteriormente en clulas plasmticas productoras de anticuerpos. Se cree que una parte de estas clulas plasmticas permanecen en el tejido linfoide como "clulas de memoria". La secrecin de las molculas de anticuerpos por las clulas plasmticas tiene lugar, en el interior del tejido linfoide o en el lugar de estimulacin antignica. En el primer caso los anticuerpos van al lugar afectado por el sistema vascular sanguneo o por el sistema linftico.

Monocitos Tambin los monocitos estn agrupados dentro de los leucocitos agranulosos. Son clulas de gran tamao que miden de 9-12m de dimetro, aunque pueden alcanzar 20 m en los frotis secos; comprenden solamente del 2-8 % de los leucocitos de la sangre normal. Su aspecto morfolgico recuerda en ocasiones, a los macrfagos del tejido conjuntivo laxo; poseen un citoplasma abundante de color azul grisceo plido (con las coloraciones de Giemsa), en el cual pueden observarse grnulos azurfilos de menor tamao, pero ms numerosos que los de los linfocitos. Por su contenido bioqumico se ha demostrado que estos grnulos son lisosomas primarios que intervienen en el proceso de la fagocitosis propio de esta clula. El ncleo de los monocitos es excntrico e irregular; por lo general puede tener forma ovoide o reniforme y muestra una depresin profunda (figura 6.11). En el citoplasma, cerca del ncleo, se encuentra el complejo de Golgi. Tambin los monocitos presentan ribosomas libres, pero en menor proporcin que los linfocitos y un escaso RER (figura 6.11). Por su capacidad fagoctica, los monocitos ocupan un lugar entre las clulas que intervienen en la defensa del organismo. Algunos autores opinan que a partir de ellos se originan los macrfagos de diversos tejidos; hecho este que hace se les considere como parte del sistema de macrfagos (SMF). Leucocitos granulosos A diferencia de los linfocitos y monocitos, los granulocitos contienen en su citoplasma grnulos especficos que los caracterizan, as como un ncleo multilobulado (polimorfo), por lo cual en ocasiones reciben el nombre de leucocitos polimorfonucleares. Neutrfilos Entre los leucocitos de la sangre stas son las clulas ms abundantes. Comprenden del 55-65% del total de los leucocitos y su dimetro varia de 10-15m en estado fresco, mientras que Este tipo de clula recibe su nombre segn los numerosos grnulos neutrfilos que abundan en su citoplasma. Aunque en menor cantidad, en los neutrfilos maduros tambin se pueden observar grnulos azurfilos, denominados por otros autores como primarios no especficos. Estos en la microfotografa electrnica corresponden a grnulos de mayor densidad electrnica y mayor tamao que los especficos o secundarios (figura 6.12). El contenido y la funcin de ambos grnulos estn en estrecha relacin con

la capacidad bactericida y fagoctica de los leucocitos neutrfilos y contienen enzimas lisosmicas, tales como la peroxidasa. Aunque otros leucocitos tambin presentan polimorfismo en el ncleo, son verdaderamente los neutrfilos los llamados polimorfonucleares, por contener en su ncleo mltiples lobulaciones. Estos pueden presentar hasta cinco lbulos ovales de forma irregular conectados entre s por estrechos filamentos de cromatina. Un hecho notable en esta clula es la presencia de un pequeo apndice nuclear, unido al resto del ncleo por un filamento fino de cromatina en forma de "palillo de tambor"; este se observa en un 3% de los neutrfilos de la sangre perifrica en la mujer. Esta prolongacin est en relacin con el cromosoma sexual (figura 6.13). Eosinfilos Como su nombre lo indica, los leucocitos granulosos eosinfilos reciben este nombre por su afinidad con la eosina. En estado fresco tienen aproximadamente de 9-10 m de dimetro, mientras que en los frotis secos varan de 12-14 m. Estas clulas representan del 1-3% del total de leucocitos en sangre normal, pudiendo elevarse en algunas enfermedades alrgicas y parasitarias. En el humano el ncleo est compuesto por dos lbulos, pero en roedores pueden tener mltiples lobulaciones, al igual que los neutrfilos; sin embargo, son los grnulos de tamaos uniformes y refringentes, los que caracterizan a estas clulas. Si bien con las tcnicas de May-Grnwald Giemsa el aspecto de estos grnulos resulta an ms llamativo, en las microfotografas electrnicas se observa, en el interior del grnulo, cristaloides rectangulares de mayor densidad electrnica en el interior del grnulo (figura 6.14). Los grnulos contienen enzimas como peroxidasa, ribonucleasa, arilsulfatasa, catepsina, betaglucoronidasa y fosfatasa cida y alcalina; sin embargo, carecen de lisozima y fagocitina. La ausencia de estas dos ltimas enzimas hace pensar que los eosinfilos no tienen entre sus principales funciones la de captacin y destruccin de las bacterias. Al igual que en los neutrfilos, en las clulas maduras se pueden encontrar algunos grnulos azurfilos o primarios; estos son muy escasos (figura 6.14). Aunque los eosinfilos no poseen una actividad fagoctica como la de los neutrfilos, se sabe que son capaces de fagocitar complejos de antgeno-anticuerpo y que participan en los mecanismos de defensa. Basfilos De todos los leucocitos sanguneos, los basfilos son las clulas ms difciles de observar, pues constituyen el 0-1% y su tamao es

aproximadamente igual al de los neutrfilos, de 10- 12m. El ncleo es de contornos irregulares y en ocasiones bilobular. Lo m1as sobresaliente en la morfologa de estas clulas es su citoplasma repleto de grnulos redondos de tamao variable y su afinidad por los colorantes bsicos; presentan metacromasia. A diferencia de los grnulos de los otros granulocitos estos no son lisosomas, pues contienen histamina, heparina y serotonina (figura 6.15). La funcin de los basfilos an no est bien definida, aunque existen datos que sustentan que ellos liberan heparina e histamina en la sangre circulante, por lo cual se considera que tienen cierta relacin con las clulas cebadas del tejido conjuntivo. Plaquetas Las plaquetas sanguneas son corpsculos anucleados en forma de discos biconvexos, redondos u ovales, cuyo dimetro est comprendido entre 1.5-3 m. Vistos de perfil tienen forma de bastn (figura 6.16). En el hombre su nmero varia entre 150 000 a 350 000 plaquetas/mm3. Cuando la sangre sale de los vasos las plaquetas se adhieren unas a otras, lo que dificulta el conteo plaquetario. En las extensiones de sangre, con la coloracin de May Grnwald Giemsa, se distinguen en la plaqueta dos zonas bien definidas, una porcin central compuesta por granulaciones prpuras denominadas crommera y una porcin perifrica homognea y mas clara, la hialmera. En la crommera se localizan mitocondrias, ribosomas, glucgeno, vesculas dilatadas y grnulos. El significado fisiolgico de estos grnulos se desconoce, aunque se supone que contienen el factor 3, uno de los factores que intervienen en la coagulacin. La hialmera contiene en su porcin perifrica un anillo constituido por microtbulos, estos son los responsables del movimiento y contractilidad de las plaquetas y de la formacin de los seudpodos; la contractilidad de las plaquetas es de especial importancia en la adhesividad y coagulacin. Los microtbulos estn relacionados con la trombostenina, una protena contrctil del tipo actina. En la hialmera hay sustancias plaquetarias, como son los factores 2 y 4, adrenalina, noradrenalina, fibringeno y serotonina. En las plaquetas hay tambin enzimas que intervienen en el metabolismo intermediario de glcidos, lpidos, ATP y ATP asa. La membrana plasmtica tiene, adems de las propiedades histoqumicas comunes a todas las membranas, los factores de la coagulacin y antiplasmina, un inhibidor de la fibrinlisis.

Origen de las plaquetas. Las plaquetas se originan de los megacariocitos, clulas gigantes de la mdula sea (figura 6.17). Los megacariocitos tienen un dimetro de 50 a 100 m, un ncleo polilobulado y un citoplasma ligeramente acidfilo, lleno de granulaciones prpuras. Se estima que fragmentaciones del citoplasma de los megacariocitos se desprenden de ellos y constituyen las plaquetas (figura 6.18). La vida media de las plaquetas es de 6 a 12 das. Las plaquetas son eliminadas de la sangre por fagocitosis de los macrfagos que se encuentran en el bazo, la mdula sea y el hgado. Las plaquetas intervienen en la hemostasia, ya sea por medio de las sustancias que liberan para estimulas la contraccin de los vasos lesionados y evitar la prdida de sangre, o por medio de la aglutinacin en el punto de lesin de los endotelios, de manera que favorecen una solucin de continuidad, participan tambin en la formacin de tromboplastina, uno de los pasos fundamentales en la iniciacin de la coagulacin. A continuacin se resumen en el cuadro 3, las principales caractersticas que distinguen a los elementos figurados de la sangre. CORRELACION HISTOFISIOLOGICA EN EL TEJIDO SANGUINEO Los elementos formes de la sangre realizan variadas funciones en el organismo. Los eritrocitos son los encargados de transportar en la hemoglobina el O2 y el CO2. Es importante tener presente lo necesario que es la deformabilidad del eritrocito en la microcirculacin sangunea: los hemates tienen un dimetro de 8m y el capilar puede ser mucho menor, esto es posible dado que el eritrocito es blando y flexible. Los leucocitos constituyen una lnea de defensa del organismo, ellos se mantienen recirculando en la sangre y se dirigen a las reas donde se ha asentado una infeccin. Se considera como mecanismo defensivo del organismo la respuesta celular inespecfica, proceso que incluye una respuesta tisular (inflamacin aguda), la cual induce cambios locales en el flujo sanguneo y atraccin hacia el lugar afectado de monocitos y neutrfilos, que se transportan en la sangre y la respuesta inmunitaria especfica, pues la funcin primordial del sistema inmunitario es la produccin de una respuesta especfica a agentes patgenos especficos. De esta forma se activa el sistema inmunitario, fundamentalmente los dos tipos de linfocitos y los macrfagos cooperan en la destruccin de los agentes patgenos (respuesta inmunitaria celular).

Las infecciones virales inducen en los leucocitos, principalmente en los linfocitos T y los neutrfilos, la secrecin de una sustancia antivrica, el interfern, por lo que estas clulas participan tambin mediante esta va en la defensa del organismo. Las plaquetas participan en la coagulacin sangunea, manteniendo a su vez la integridad de los endotelios. La coagulacin est relacionada con las propiedades histoqumicas de la membrana plasmtica de las plaquetas, la membrana plasmtica contiene factores de la coagulacin. En la hialmera hay sustancias plaquetarias que tambin intervienen en este proceso. Los microtbulos de las hialmera contribuyen a la contractilidad de las plaquetas, lo cual es importante en la adhesividad y la coagulacin. Tambin son de destacar las sustancias activas, hormonas, inmunoglobulinas, etc. que son transportadas por la sangre y que desencadenan variadas funciones en el organismo. ELEMENTOS CONSTITUYENTES DEL TEJIDO HEMATOPOYETICO El tejido hematopoytico es aquel en el cual tiene lugar la formacin de las diversas clulas de la sangre. En el ser humano se consideran tejidos hematopoyticos, el mieloide y el linfoide. En este captulo nos referiremos a la variedad mieloide. El tejido linfoide lo estudiaremos en el captulo correspondiente al Sistema Linftico. Tejido mieloide En el adulto, el tejido mieloide est limitado a la mdula sea, que ocupa la cavidad interior de los huesos. La mdula sea experimenta cambios con la edad, su funcin no es igualmente activa en el recin nacido que en el adulto. En su evolucin pasa por etapas, las cuales por su aspecto macroscpico se denominan mdula roja y amarilla. En el feto y en el recin nacido, la mdula es intensamente activa, constituye la denominada mdula roja, a sta el tejido adiposo la invade, de manera que en el adulto encontramos mdula amarilla inactiva. En el adulto la mdula roja se halla en el diploe de los huesos del crneo, en las costillas y el esternn, en los cuerpos vertebrales, en algunos huesos cortos y en los extremos de los huesos largos. La composicin citolgica de la mdula sea puede estudiarse realizando cortes histolgicos o extensiones; en este ltimo caso se emplea material obtenido por puncin. Para hacer el medulograma se punciona cualquier hueso que contenga mdula roja hematopoytica.

En algunos procesos patolgicos, para obtener una informacin adecuada de lo que acontece y poder establecer un diagnstico y tratamiento adecuado, es necesario indicar el estudio citolgico simultneo de la sangre perifrica y de los rganos hematopoyticos. El estroma de la mdula sea est constituido por una trama de fibras reticulares y colgenas con abundantes vasos sanguneos, fundamentalmente sinusoides y clulas del estroma: fibroblastos, macrfagos, clulas reticulares, clulas endoteliales, clulas adiposas y clulas ostegenas. Los fibroblastos son abundantes y son las responsables de la formacin de las fibras colgenas. Los macrfagos tambin son abundantes y actan como fagocitos. Las clulas reticulares son grandes, de forma irregular, con citoplasma y ncleo plidos. Estas clulas emiten prolongaciones de su citoplasma que conectan con clulas adyacentes y forman una trama. De acuerdo a las caractersticas de sus prolongaciones y de sus ncleos reciben distintas denominaciones y son particularmente abundantes en el tejido linfoide, donde tienen participacin importante como presentadores de antgeno. Las clulas endoteliales forman parte de la pared de los vasos sanguneos que encontramos en la mdula sea, especialmente la pared de los sinusoides donde estn unidos estrechamente entre s y permiten el intercambio entre la sangre y el medio circundante. En la mdula sea las clulas reticulares producen las fibras reticulares. Las clulas adiposas estn esparcidas entre las dems clulas del estroma, as como las clulas ostegenas a las cuales se les atribuye que ellas mismas o su descendencia hagan que la UFC elabore clulas de la serie mieloide. El parnquima de la mdula sea est constituido por clulas libres, eritrocitos, leucocitos, neutrfilos, eosinfilos, basfilos y plaquetas, adems de toda la lnea celular que le precede a estas clulas. Este proceso de formacin de clulas de la sangre se conoce con el nombre de hematopoyesis. Hematopoyesis Desarrollo embrionario Las primeras manifestaciones de proliferacin hematopoytica se producen

en parte del saco vitelino durante el transcurso de la segunda y tercera semanas de desarrollo embrionario. Los focos de proliferacin se observan como pequeas lagunas, rodeadas del endotelio de los vasos sanguneos en formacin, donde yacen grandes eritroblastos. La pared de los vasos formados se elonga y la confluencia de estos origina el sistema vascular, el cual pondr en contacto la circulacin vitelina con la intraembrionaria. A partir de la sexta semana, en el hgado se establece el centro de hematopoyesis. Entre los cordones de clulas hepticas, los hemocitoblastos proliferan, dando origen a los distintos tipos de clulas sanguneas, donde predomina la eritropoyesis sobre la formacin de granulocitos, linfocitos y megacariocitos. Posteriormente se desarrolla el tejido mieloide de la mdula sea, cuando los primordios cartilaginosos de los huesos han sido invadidos por mesnquima en el proceso de osificacin; esto ocurre alrededor del tercer mes de vida fetal. Por ltimo aparece tejido hematopoytico en el bazo, hacia el octavo mes de embarazo. De todos estos rganos productores de clulas hemticas en el perodo embrionario, slo la mdula sea mantiene su actividad hematopoytica despus del nacimiento. En el transcurso de algunos estados patolgicos pueden apreciarse focos hematopoyticos en algunos de los rganos ya mencionados, proceso conocido como hematopoyesis extramedular. Teoras hematopoyticas El tema de la hematopoyesis ha sido uno de los ms discutidos en el campo de la Histologa. El principal punto de desacuerdo radica en determinar el carcter de las clulas originales de las distintas lneas de diferenciacin celular. En la actualidad se acepta la teora monofiltica, que establece que todos los tipos celulares de la sangre se originan de una clula madre primitiva, la UFC (Unidad Formadora de Colonias), porque ha podido demostrarse mediante experimentos. Aos atrs los partidarios de la teora monofiltica, planteada en sus inicios por Maximov, establecan como clula madre primitiva al hemocitoblasto. La UFC o clula madre pluripotencial da lugar a diferentes lneas de diferenciacin, como se puede observar en el cuadro 4.

Eritropoyesis (formacin de eritrocitos) Aunque en la sangre perifrica los eritrocitos constituyen el mayor porcentaje de los elementos formes, slo constituyen en la mdula una minora de las clulas sanguneas en desarrollo. Existen dos causas principales para que esto se produzca: una, el rpido desarrollo de clulas inmaduras a clulas maduras, para lo cual se requiere slo tres das y, la otra, su larga vida en sangre perifrica, en comparacin con la de los granulocitos. Para facilitar la descripcin del proceso de desarrollo del eritrocito se ha dividido su estudio en distintas etapas; sin embargo, se debe de tener en cuenta que esto es un fenmeno continuo y que, en ocasiones, se hace difcil diferenciar con exactitud el final y el principio de dos etapas sucesivas. Las etapas del desarrollo eritroctico, partiendo de la UFC-E, a la cual podemos considerar como la clula progenitora inmediata y que es sensible a la Eritropoyetina, son: proeritroblasto, eritroblasto basfilo, eritroblasto policromatfilo, normoblasto, reticulocito y eritrocito. A continuacin pasamos a describir las principales caractersticas de cada etapa (figura 6.19). Eritroblasto basfilo (rubriblasto). Es una clula voluminosa, puede alcanzar de 12 a 15 m de dimetro, su ncleo es vesiculoso y presenta uno o dos nucleolos bien definidos. La basofilia citoplasmtica es intensa, producto del elevado nmero de ribosomas que presenta (figura 6.19). Una caracterstica de estas clulas, precisada por M/E es el poco desarrollo del RER y del Aparato de Golgi. Al proliferar y diferenciarse aumentan los ribosomas libres y se convierten en: Eritroblasto basfilo. Es de tamao algo menor que el proeritroblasto, y su ncleo presenta condensacin de la cromatina, con lo cual puede quedar enmascarado el nucleolo. El citoplasma, observado al M/E, muestra un aumento de los ribosomas libres y la presencia de polirribosomas que aumentan ms su basofilia. Se plantea en esta etapa una escasa sntesis de hemoglobina. El desarrollo de otros organitos es mnimo. Eritroblasto policromtico (rubricito). Esta clula es producto de las continuas divisiones mitticas del eritroblasto basfilo y la mayor produccin de hemoglobina. En su citoplasma se sintetiza una cantidad mayor de hemoglobina y provoca que con la tincin de Giemsa aparezca una coloracin rosada en contraste con la azul violcea del citoplasma basfilo, por lo cual recibe el nombre de

eritroblasto policromtico. Por su parte, el ncleo tiene cambios en la red cromatnica, observndose una condensacin mayor de ella (figura 6.19). Al continuar su proceso de diferenciacin el eritroblasto policromatfilo puede seguir dos vas, convertirse en un normoblasto o transformarse en un reticulocito. Normoblasto (metarubricito). El proceso de divisin de las clulas antecesoras y el aumento de la concentracin de hemoglobina en el citoplasma, ha dado lugar a una inversin en la afinidad del citoplasma por los colorantes. En esta etapa el citoplasma se muestra acidfilo, lo que recuerda la tincin de las clulas maduras; razn por la cual la nueva clula originada recibe el nombre de normoblasto. Posteriormente el ncleo se hace cada vez ms picntico, la clula pierde su capacidad de dividirse y, al final de la etapa, expulsa su ncleo y se convierte en un eritrocito (figura 6.19). Reticulocito. El reticulocito o eritrocito inmaduro tiene como caracterstica fundamental la presencia de una red interna muy fina que se pone de manifiesto cuando esta clula se tie de forma supravital con azul brillante de cresilo. Este elemento inmaduro presenta un ligero color azulado con la tincin de Romanovski, producto de los vestigios del aparato de sntesis proteica que quedan en su citoplasma (ribosomas y polirribosomas). Al perder estas clulas su estructura reticular se convierten en glbulos rojos maduros o eritrocitos (figura 6.19). Eritrocito. Todo este proceso que acabamos de describir no es ms que la "traduccin" morfolgica del desarrollo de la sntesis de hemoglobina en el transcurso de diferenciacin de de la serie roja; en resumen, estas transformaciones se manifiestan a travs de un descenso progresivo del tamao celular, la prdida progresiva de todos los organitos celulares, el aumento de la sntesis de hemoglobina y la prdida del ncleo. Muchos son los factores que tienen que estar presentes para que ocurra un desarrollo normal del eritrocito. Entre ellos tenemos la presencia de los componentes bsicos de la hemoglobina: globina grupo hemo e hierro, as como los elementos que funcionan como coenzimas en el proceso de sntesis (cido ascrbico, vitamina B12 y el factor intrnseco). Cualquier dficit en uno de estos factores, trae como consecuencia estados patolgicos que se manifiestan en los eritrocitos en los distintos tipos de anemia (figura 6.19). Granulopoyesis (Formacin de granulocitos).

Granulocitos A partir de sus precursores los distintos tipos de leucocitos granulosos o granulocitos (neutrfilos, eosinfilos, basfilos) al igual que el eritrocito, pasan por diferentes etapas de maduracin reconocible, por orden de aparicin son el promielocito, mielocito, metamielocito y granulocito maduro. Por tanto, las etapas de maduracin que a continuacin vamos a estudiar corresponden a todos los tipos de granulocitos, teniendo en cuenta que estos van a diferenciarse entre ellos a partir de las caractersticas de los grnulos especficos de las clulas maduras. Promielocitos. Son clulas algo mayores y su citoplasma basfilo presenta zonas localizadas de acidofilia. Su ncleo, redondeado u oval, contiene cromatina laxa donde se visualiza un nucleolo bien desarrollado. Caracteriza a esta etapa la presencia de grnulos densamente azurfilos denominados grnulos inespecficos o primarios (figura 6.19). Mielocitos. En esta etapa de diferenciacin de los promielocitos estos proliferan y se diferencian en los mielocitos, en los cuales comienza la sntesis de los grnulos secundarios o especficos. Como durante este perodo los mielocitos no sintetizan los grnulos azurfilos y s los especficos, y adems mantienen una rpida divisin celular, la concentracin de los grnulos azurfilos va disminuyendo, y aumenta la de los grnulos especficos. Otro de los aspectos que se observa en esta etapa es la reduccin del volumen celular y la disminucin de la basofilia citoplasmtica. Ya a finales de este proceso el ncleo comienza a adoptar la forma de herradura (figura 6.19). Metamielocito. Luego de ocurridas las divisiones consecutivas de los mielocitos, las clulas cesan su divisin y disminuyen su tamao. El ncleo, que en un inicio tena la forma esfrica, comienza a identarse y su cromatina se condensa mucho ms. En la etapa final de metamielocito las clulas pueden ser llamadas clulas en banda. Stabkerniger, o simplemente, stab (figura 6.19), fundamentalmente las que se diferenciaron en granulocitos neutrfilos. Granulocito maduro o segmentado. Presentan las caractersticas ya estudiadas anteriormente para cada uno de los tipos celulares y pasa de la mdula sea a la sangre a travs del citoplasma de las clulas endoteliales de los sinusoides por los llamados "pasos de migracin" que aparecen al ocurrir esta ltima.

Linfopoyesis (formacin de Linfocitos) La carencia de elementos diferenciadores de los estadios de maduracin, tales como pigmentos, grnulos especficos y cambios morfolgicos nucleares, hace difcil el establecimiento de las etapas de diferenciacin en los linfocitos. Se requieren tcnicas como la autorradiografa, la microscopa electrnica, la citoqumica y otros mtodos inmunolgicos para determinar el ciclo de diferenciacin de los elementos linfoides. Los linfocitos se originan a partir de la UFC del tejido hematopoytico. Algunas clulas en el estadio embrionario migran hacia el timo en desarrollo, penetran en su cpsula y se distribuyen en la periferia de la corteza. Es aqu donde sufren un proceso de transformacin para dar origen al linfocito T o timocito. Luego de este proceso de diferenciacin pasan de nuevo al torrente circulatorio y llegan a los distintos tejidos linfoides (bazo, ganglios, etc.). Estas clulas tienen un largo perodo de vida; pueden durar meses o aos en la circulacin sangunea y linftica del ser humano (figura 6.19). Al igual que los linfocitos T, los B tienen su origen en las clulas primitivas del tejido hematopoytico embrionario. La mayora de los autores plantean que la mdula sea es el lugar donde los precursores derivados de la UFC se transforman en linfocitos B; luego estos pasan al torrente circulatorio y se asientan en rganos como el bazo, los ganglios linfticos y otros tejidos linfoides, donde son capaces de diferenciarse en clulas plasmticas o plasmocitos, al ser estimuladas por la presencia de un antgeno. Tanto en el proceso de maduracin de linfocitos T o B, como en la diferenciacin de estas a clulas inmunolgicamente funcionales (clulas plasmticas, de memoria y otras), los linfocitos pasan por un perodo de transformacin con caractersticas morfolgicas semejantes que no nos permiten diferenciar en cual de las etapas se encuentran las clulas. Sus patrones citolgicos corresponden a los denominados linfocitos medianos y de gran tamao. Monocitopoyesis (formacin de monocitos) Al igual que el resto de las clulas estudiadas, los monocitos se originan en el tejido mieloide de la mdula sea, en el interior de la cual tiene lugar el proceso de maduracin a partir de la clula progenitora de la serie neutrfilo-monocito-macrfago, pasando por dos etapas, el monoblasto y el promonocito. La clula formada, monocito, pasa a la sangre, donde se mantiene por un perodo de 40 h aproximadamente y migra despus hacia

el tejido conjuntivo u otro rgano, dando lugar a los macrfagos (figura 6.19). Megacariopoyesis. (Formacin de plaquetas) Se admite que los megacariocitos se originan del progenitor comn eritrocito-megacariocito por medio de una etapa intermedia, el megacariocito, clula de gran tamao, con un ncleo voluminoso, muchas veces dentado y de cromatina laxa. Los megacariocitos dan origen a los megacariocitos mediante una forma peculiar de divisin nuclear, en la cual el ncleo experimenta varias divisiones mitticas, sin la consecuente divisin citoplasmtica (figura 6.19). Los megacariocitos presentan en su citoplasma un sistema de membrana encargado de delinear la extensin de las plaquetas futuras. Despus que el citoplasma se ha fragmentado para formar las plaquetas, los megacariocitos se contraen y fragmentan su ncleo. Esta clula tiene un corto perodo de duracin en la mdula sea. Sistema de macrfagos El sistema retculo endotelial (SRE) incluye variados tipos celulares, los cuales se distinguen fundamentalmente por su localizacin y funcin que realiza en el organismo, fagocitosis activa. Nos muestran diferencias morfolgicas capaces de distinguirlas entre ellas. Las clulas fagocticas fueron descubiertas en el siglo XIX por Metchnikoff, quien se percat de que algunas clulas del tejido conjuntivo eran capaces de captar colorantes que se inyectaban vitalmente; a estas clulas se les denomin macrfagos. A principios del siglo XX Aschoff descubri que las clulas fagocitarias tambin estaban presentes en los sinusoides hepticos, en el bazo, en los sinusoides de los ganglios linfticos y en la mdula sea. A este grupo celular se le propuso el nombre de sistema retculo endotelial (SRE). Aunque Maximov y otros autores estuvieron en desacuerdo con esta denominacin, pues no inclua a los macrfagos del tejido conjuntivo, este trmino ha sido el que clsicamente se ha utilizado por la mayora de los especialistas. En los ltimos aos tambin se le ha denominado sistema retculohistiocitario. El problema fundamental de la denominacin de este sistema consiste en la diversidad de criterios respecto a la celularidad que integra el sistema, ya que sus funciones han estado bien definidas. Sin embargo, actualmente los datos obtenidos por medio de las tcnicas autorradiogrficas y microscopa electrnica han permitido dilucidar algunos

de los problemas bsicos. El uso de la timidina marcada con tritio, ha permitido conocer el origen de las clulas de Kupffer del hgado y de otros macrfagos. Para estos estudios se utilizaron clulas antecesoras de los monocitos, ya que estos ltimos no suelen dividirse, lo que implica la no incorporacin de ADN. Las clulas se fijaron y se estudiaron con el empleo combinado de autorradiografa y microscopa electrnica. Los estudios arrojaron datos tales como que las clulas de Kupffer se originaban a partir de los promonocitos y no de las clulas endoteliales, como antiguamente se pensaba. Estos resultados indican que no existe un componente endotelial en el sistema, por lo que resulta un equvoco el trmino SRE empleado por Aschoff. A partir de estas investigaciones, hoy da la mayora de los autores, como Furth (1975), utilizan el nombre de sistema mononuclear fagoctico (SMF) o simplemente sistema de macrfagos. Este sistema incluye: 1. Macrfagos del tejido conjuntivo, los denominados por algunos autores, histiocitos. 2. Macrfagos de la sangre, representados por monocitos. 3. Macrfagos alveolares del pulmn. 4. Macrfagos en el hgado, denominados clulas de Kupffer. 5. Macrfagos presentes en bazo, ganglio linftico y mdula sea. 6. Macrfagos presentes en las glndulas endocrinas: suprarrenales e hipfisis. 7. Microglia, localizadas en el SNC, de origen mesodrmico (figura 6.20). 8. Clulas mesangiales, localizadas en el rin. El sistema de macrfagos participa en la depuracin de la sangre y de los fluidos orgnicos. En el bazo y en el hgado los macrfagos fagocitan los eritrocitos y acumulan pigmento de hemosiderina en el citoplasma. En el bazo tambin son captados los grmenes u otros microorganismos patgenos que llegan en la sangre. En el SNC el lquido cefalorraqudeo es depurado por las microglias y el lquido tisular por el sistema linftico. Los macrfagos, adems de fagocitar, participan tambin en el sistema inmunolgico del organismo fagocitando los antgenos, que son degradados parcialmente y fijados en la superficie celular; se sabe que los macrfagos activan los linfocitos T mediante los mecanismos de cooperacin celular. Se ha demostrado tambin la participacin de los macrfagos en la produccin del interfern, sustancia antiviral. De lo expuesto podemos inferir que el sistema de macrfagos participa

activamente en la defensa del organismo, ya sea mediante la fagocitosis, la respuesta inmunitaria, la cooperacin celular o produciendo interfern.