REPLICACION DEL ADN EUCARIOTA

Las moléculas de ADN en células eucariotas son mucho mayores y más complejas ya que el
proceso de la replicación es bastante más complicado. Los orígenes de la replicación son
secuencias mayores, en levaduras de unos 400 pares de bases, que se presentan en varios puntos
de los cromosomas. La velocidad de desplazamiento de la horquilla de replicación es de unos 50
nucleótidos por segundo, una velocidad relativamente baja si se compara con la de los procariotas
(10 veces mayor). Para incrementar la velocidad global del proceso, en eucariotas existen varios
puntos de origen sobre la misma molécula de ADN, estando separados entre 30.000 y 300.000
pares de bases. La presencia de múltiples horquillas de replicación acelera el proceso, y permite
que la replicación en eucariotas se desarrolle a velocidades mayores que en los procariotas. Los
fragmentos de Okazaki en el ADN eucariota son más cortos, generalmente contienen 135
nucleótidos, debido a que la horquilla de replicación se mueve más despacio. También se han
descrito diferencias respecto a las ADN polimerasas en eucariotas, la ADN polimerasa α es una
proteína oligomérica, en la que una de sus subunidades tiene acción primasa. Por último, el ADN
eucariota está unido a las histonas y empaquetado en los nucleosomas. El proceso de replicación
ha de ir acompañado por el proceso de síntesis de histonas, ya que en cada ciclo de replicación no
sólo se ha de duplicar el ADN sino también las histonas. Las enzimas que desarrollan ambos
procesos son distintas pero han de ir coordinadas, ya que la velocidad debe ser igual. Las histonas
recién sintetizadas se incorporan a la molécula de ADN que lleva la hebra retrasada, mientras que
las viejas histonas permanecen en el dúplex que lleva la hebra conductora.

1. DOBLE CADENA, COMPLEMENTARIAS Y ANTIPARALELAS

2. PROCESO SEMICONSERVATIVO

LA REPLICACIÓN SEMICONSERVATIVA DEL ADN EN EUCARIOTAS

Cuando una célula se divide, o cuando se originan los gametos, las nuevas células que se forman
deben contener la información genética que les permita sintetizar todas las enzimas y el resto de
las proteí nas necesarias para realizar sus funciones vitales. Ésta es la principal razón por la que el
ADN debe replicarse. La replicación del ADN es el proceso según el cual una molécula de ADN de
doble hélice da lugar a otras dos moléculas de ADN con la misma secuencia de bases. En la célula
procariótica la replicación parte de un único punto y progresa en ambas direcciones hasta
completarse. En la célula eucariótica el proceso de replicación del ADN no empieza por los
extremos de la molécula sino que parte de varios puntos a la vez y progresa en ambas direcciones
formando los llamados ojos de replicación. Primero se separan las dos hebras y, una vez
separadas, van entrando los nucleótidostrifosfato complementarios de cada uno de los de las
hebras originales del ADN. Las enzimas ADN polimerasas los unen entre sí formando una hebra de
ADN complementaria de cada una de las hebras del ADN original. Se dice que la síntesis de ADN es
semiconservativa porque cada una de las moléculas de ADN "hijas" está formada por una hebra de
ADN original y otra complementaria sintetizada de nuevo. Es de destacar que la dirección en la
que progresa la replicación es la misma en ambas hebras. Ahora bien, las enzimas que unen los
nucleótidos sólo pueden efectuar la unión en dirección 5'3'. Esto nos indica que ambas hebras, al
ser antiparalelas, deben de sintetizarse de diferente manera.
 a) Síntesis continua de la hebra en dirección 5 '  3'. La síntesis de esta hebra no plantea ningún
problema. Así, una vez separadas ambas hebras, la ADN pol. III (una de las J. L. Sánchez Guillén
Página III-5-2 Fig. 5 Cromosoma de eucariota replicándose. El replisoma es un complejo formado
por todas las enzimas que intervienen en el proceso de replicación. Fig. 6 Enzimas y otras
proteínas que forman el replisoma. Se muestra en este esquema un detalle del recuadro de la
figura anterior. A C T T G A Hebra de ADN ADN polimerasas ATP asa Proteínas estabilizadoras
Helicasa Topoisomerasa Fig. 4 Microfotografía al MET de un fragmento de la doble hélice de un
cromosoma de eucariota replicándose. Fig. 3 Replicación del ADN en procariotas y en eucariotas.
En procariotas sólo hay un ojo de replicación, mientras que en eucariotas hay varios. Cromosoma:
arriba : arriba, en procariotas, abajo, en eucariotas. Ojos de replicación replisomas Cromosoma
(doble hélice de ADN) III) La información celular 5) Replicación del ADN enzimas que unen los
nucleótidos) va a elongar la cadena en dirección 5' 3' a partir de un primer o fragmento de ARN
que después será eliminado.

b) Síntesis discontinua. La hebra complementaria no se va a replicar en sentido 3' 5' sino que se
replica discontinuamente en dirección 5' 3'. Los diferentes fragmentos sintetizados, llamados
fragmentos de Okazaki, son posteriormente unidos entre sí. El proceso es complejo y consiste en
lo siguiente: En primer lugar se sintetiza un pequeño fragmento de ARN, fragmento denominado
primer. Partiendo de este primer se sintetiza un fragmento de ADN en dirección 5' 3'. Al llegar al
primer del fragmento anteriormente sintetizado, éste es degradado y se rellena el hueco con ADN.
Se dice que la replicación es discontinua porque el ADN se va a ir sintetizando en fragentos que,
posteriormente, son soldados uno al otro.

IMAGEN 1: En la replicación semiconservativa se originan dos

moléculas de ADN, cada una de ellas compuesta de una hebra de el
ADN original y de una hebra complementaria nueva. En otras
palabras el ADN se forma de una hebra vieja y otra nueva. Es decir
que las hebras existentes sirven de molde complementario a las
nuevas.
 Modificada de NCBI

3. REQUIERE
3.1. ADN molde
3.2. Iones de Mg2+
3.3. Desoxinucleotidos trifosfato
3.4. Cebado o iniciador
3.5. ADN polimeraza
Hasta hace unos años el uso de letras griegas para designar a los seis ADN
polimerasas eucarióticas conocidas era suficiente. Sin embargo, la evidencia
reciente indica que varios miembros de la familia más ADN polimerasa eucariótica
son presentar y función en distintos tipos de replicación del ADN. Estos ADN
polimerasas se dividen en cuatro familias grandes designados A, B, X e Y.
Además, existe una actividad de transcriptasa inversa asociado con la telomerasa
como discuten a continuación. Los seis diferentes polimerasas de ADN eucariota se
identifican como α, β, γ, δ, ε, y ζ. La identidad de estas enzimas individuales se
refiere a su localización subcelular, su actividad replicativa primaria y al orden en
el que se describió por primera vez. El ADN eucariótico conocido polimerasas y
descripciones de sus actividades se indican en la Tabla a continuación

IMAGEN 2: CUANDRO DE LAS FUNCIONES DE LAS ADN POLIMERSAS

EN EUCARIOTAS

ADN Polimerasas Eucariotas

Familia de
Nomenclatura
la Función de la Enzima, Comentarios
Común del
Polimerasa
la replicación del ADN mitocondrial; codificada
A γ (gamma)
por el gen POLG en 15q26.1 cromosoma
Reparación del ADN; codificada por el gen
A θ (theta)
POLQ en cromosoma 3q13.33
iniciación de la replicación del ADN
cromosómico, el cebado Okazaki fragmento,
B α (alpha) también involucrados en la doble cadena de
reparación de ruptura; codificada por el gen
POLA en cromosoma Xp22.1–21.3
ADN cromosómico alargamiento de
replicación, reparación por escisión de
nucleótidos, de doble filamento romper la
reparación, de reparación de genes, se
compone de un complejo multisubunit que
B δ (delta) incluye el complejo de la subunidad de la
polimerasa codificada por cuatro la POLD1,
POLD2, POLD3, y POLD4 genes, así como la
replicación multisubunit proteína del factor C
(siglas en Inglés: RFC1) y antígeno de
proliferación celular (siglas en Inglés: PCNA)
ADN cromosómico alargamiento de
replicación, reparación por escisión de
nucleótidos, de doble filamento romper la
reparación, de reparación de genes, se
compone de un catalizador 261kDa subunidad
B ε (epsilon) codificada por el gen POLE en cromosoma
12q24.33 y un accesorio de 55kDa proteína
codificada por el gen POLE2, proteínas
adicionales en el complejo épsilon incluir dos
histona plegada en las proteínas codificadas
por los genes POLE3 y POLE4
bypass (translesion) la síntesis de ADN;
codificada por el gen POLZ en cromosoma
6q21, también conocida como REV3, enzima
B ζ (zeta)
responsable de prácticamente todos los daños
en el ADN inducidos por mutagénesis así como
la mayoría de mutagénesis espontánea
base reparación por escisión, necesaria para la
replicación del ADN y el mantenimiento,
X β (beta) recombinación, y resistencia a los
medicamentos; codificada por el gen POLB en
cromosoma 8p11.21
 base reparación por escisión; codificada por el
X λ (lambda)
gen POLL en cromosoma 10q24.32
no unirse a fin homóloga (siglas en Inglés:
X μ (mu)
NHEJ); codificada por el gen POLL
la cohesión de cromátidas hermanas,
codificada por el gen POLS en cromosoma
5p15.31; también conocido como función de
las proteínas relacionadas con la
X σ (sigma)
topoisomerasa 4 (siglas en Inglés: TRF4) y poli
(A) polimerasa asociada al dominio que
contienen proteínas 7 (siglas en Inglés:
PAPD7)
bypass (translesion) la síntesis de ADN;
codificada por el gen POLH en cromosoma
6p21.1, necesaria para la replicación a través
Y η (eta) de pirimidina ciclobutano inducida por UV
dímeros (CPD), las mutaciones en
consecuencia, en POLH Xeroderma
pigmentosa variante (XP-V)
bypass (translesion) la síntesis de ADN;
Y ι (iota) codificada por el gen POLI en cromosoma
18q21.2; también conocido como RAD30B
bypass (translesion) la síntesis de ADN;
Y κ (kappa) codificada por el gen POLK en cromosoma
5q13.3
pasar por alto (translesion) la síntesis de ADN,
Y Rev1L codificada por el REV1, que interactúa con
POLK y es esencial para la función POLK