Apoptosis (Muerte celular)

Academia de Profesores de Biologa Celular Universidad Autnoma MetropolitanaIztapalapa (UAM-I), Mxico

Apoptosis - UAM-I A. Roco Ortiz Muiz

Fuente imagen apoptosis:

http://www.virtuallaboratory.net/Biofundamentals/lectureNotes/AllGraphics/apoptosisCartoon.gif

Objetivo - Diaporama
El objetivo del presente diaporama es mostrar las caractersticas principales y los mecanismos de la muerte celular, celular, con nfasis en la muerte celular programada o Apoptosis. Ilustrar su Apoptosis. importancia y presentar las diferencias entre los dos tipos principales de muerte celular (apoptosis y necrosis)

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Temario
Parte del temario del Curso de Biologa Celular que cubre el presente diaporama:
Tema IX.- Envejecimiento y Muerte Celular IX.2 Hrs

1.- Apoptosis. Definicin, causas y mecanismos 1.Relacin con ciclo celular y cncer. 2.- Necrosis. Definicin, causas y mecanismos 2.3.- Diferencias entre apoptosis y necrosis 3.-

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Resumen - Diaporama
Tipos principales de muerte celular: celular: Caractersticas y diferencias Apoptosis Necrosis Definicin Apoptosis: Causas Apoptosis: enfermedad y apoptosis Apoptosis: Apoptosis: externas) Induccin Seales de apoptosis, y

(internas

Vas de apoptosis (Extrnseca o de los receptores de muerte e Intrnseca o mitocondrial) Elementos participantes: Caspasas, participantes: Inhibidoras de Apoptosis (IAPs) Fases y Eventos en Apoptosis
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Protenas

Proliferacin y muerte celular

Para mantener el nmero apropiado de clulas en los tejidos, se requiere: requiere: Balance entre: Proliferacin celular Muerte celular

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Tipos principales de muerte celular

Necrosis

Apoptosis
Condensacin Fragmentacin

Cambios Morfologa celular

Organelos Intactos

Cuerpos Apoptticos

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Esquema Apoptosis - Necrosis

Deshidratacin celular Se mantiene integridadmembrana

Cuerpos apoptticos envueltos por membrana

Condensacin de la cromatina

Fragmentacin nuclear Se libera el contenido de la clula

Expansin-clula y organelos

Se rompe la membrana plasmtica

Desintegracin

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Diferencias Apoptosis - Necrosis

Apoptosis
Muerte de clulas individuales Por estmulos fisiolgicos Sin liberacin de enzimas lisosomales Sin ruptura membrana Sin respuesta inflamatoria Requiere energa

Necrosis
Muerte de grupos celulares Por dao celular Liberacin de enzimas lisosomales Ruptura membrana Respuesta inflamatoria No requiere energa

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Trmino - Apoptosis
Fue propuesto por Kerr, Willie y Currie en 1972. 1972. Recuerda a las hojas que caen en otoo desde los rboles. rboles.

Apoptosis - Biologa Celular, UAM-I UAMFuente de la imagen: Presentacin Elena Toledo y col.

Apoptosis
Tipo especial de muerte celular: celular: ordenada y silenciosa Parte del normal desarrollo

Responde a estmulos fisiolgicos y patolgicos Genticamente codificada

Muerte celular programada

Fuente imagen: farm1.static.flickr.com/167/400106830_ae8eee5...

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Causas de apoptosis
Se han propuesto dos razones principales por las que las clulas se comprometen al suicidio: suicidio:

Desarrollo y renovacin celular normal Eliminacin celular selectiva

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Apoptosis Desarrollo y Morfognesis

Ejemplos representativos relacionados con el desarrollo apropiado: apropiado:

Reabsorcin de la cola del renacuajo

Formacin de los rganos reproductivos
Fuente Imagen: http://www.celldeath.de/encyclo/aporev/revfi gs/revfig_1.htm

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Apoptosis Desarrollo y Morfognesis

Ejemplos representativos relacionados con el desarrollo apropiado: apropiado:

Remocin del tejido interdigital, en la formacin de los dedos. dedos.

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Apoptosis -Metamorfosis

Est relacionada con la asombrosa transformacin de una oruga en una mariposa

Fuente: The Natural History Museum London www.sciencemuseum.org.uk/onwww.sciencemuseum.org.uk/on-line/lifecycle/im

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Apoptosis Homeostasis
Ejemplos representativos relacionados con el equilibrio celular del organismo: organismo: Es esencial para mltiples procesos fisiolgicos, por ejemplo: mecanismos de ejemplo: maduracin del sistema inmune La eliminacin de linfocitos reactivos durante el desarrollo autoauto-

La remocin del exceso celular despus de completarse una respuesta inmune. inmune.

Vnculo Imagen: http://www.cober.com.ar/links/otros/galeria/galeria.html

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Apoptosis Homeostasis
En el cuerpo humano alrededor de 100,000 100, clulas se producen cada segundo por mitosis y un nmero similar muere por apoptosis. apoptosis. Durante nuestra vida el 99.9% de nuestras clulas 99. mueren por muerte celular programada. programada.

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Enfermedad y muerte celular programada

Homoeostasis Proliferacin Muerte celular

Reduccin en la muerte celular

Incremento en la muerte celular

Supervivencia de clulas normalmente destinadas a morir. morir. Padecimientos auto-inmunes autoCncer

Las clulas se pierden por muerte celular excesiva. excesiva. Enfermedades neurodegenerativas SIDA
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Apoptosis - Eliminacin selectiva Eliminaci

Ejemplos representativos para eliminar amenazas a la integridad del organismo: organismo:

Clulas con dao al ADN que no puede ser reparado Linfocitos T citotxicos activados Clulas auto reactivas del sistema inmune Clulas infectadas
Fuente Imagen: Jese M. Cuezva. Clula tumoral. http://apored.bq.uam.es/investigacion/galeria.html

Proliferacin

Apoptosis

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Proceso Conservado
La muerte celular fisiolgica se observa en todos los organismos multicelulares. multicelulares. Los componentes fundamentales estn conservados Se observa incremento en la complejidad. complejidad. Modelos de estudio: estudio: C. elegans D. melanogaster y mamferos
Fuente: Pascal Meier y col, 2000

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Caractersticas -Apoptosis
Leucocito Normal Leucocito en Apoptosis

Proceso activo (con alta organizacin) Origina cambios estructurales caractersticos

Fuente imagen: fig.cox.miami.edu/.../255/255hist/255history.htm

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Seales - Apoptosis
Seales positivas (Inhiben apoptosis) Seales negativas (Promueven apoptosis) Se inicia apoptosis por: Eliminacin de seales positivas (necesarias para la supervivencia continua) La implementacin de seales negativas

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INDUCTORES APOPTTICOS Seales Externas

Agentes fsicos (Radiaciones) Agentes qumicos (frmacos) Virus, bacterias Deficiencia de factores trficos

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INDUCTORES APOPTTICOS Seales Internas

Incremento de agentes oxidativos en el interior celular Dao al ADN por diversos agentes Generacin eneracin de molculas que

promueven la apoptosis
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Induccin - Apoptosis
A) Agentes usados en Quimioterapia Las clulas en apoptosis se observan amarillas

B
B) Radicales de oxgeno

A)

Vnculo Imagen: http://www.bioon.com/experiment/UploadFiles/200410 /20041019025559633.gif B) Vnculo Imagen: Isabel Fabregat http://apored.bq.uam.es/investigacion/galeria.html

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Vas de induccin de apoptosis

Dos vas de induccin de apoptosis:

Va extrnseca o va de los receptores de muerte Va intrnseca o va de la mitocondria

AMBAS VAS TIENEN CONEXIN posterior en la etapa de activacin de caspasas

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Va Extrnseca
Extrnseca o de los receptores de muerte:
Recibe seales pro-apoptticas desde el exterior y de las clulas vecinas Participan dos familias de receptores: la protena Fas (CD95) (CD95) y el factor de necrosis tumoral (TNF) TNF) Se unen con su ligando: Fas L o TNF R1 Se une un complejo de sealizacin inductor de muerte (DISC). Se activa la caspasa 8 (iniciadora) caspasas efectoras Activa

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Ligando de muerte
(FasL, TRAIL o TNF)

Va Extrnseca
Receptor de muerte

Fas + FADD + pro caspasa 8

FADD

DISC
(complejo de sealizacin inductor de muerte) Pro caspasa 8

FLIP Apoptosis
Caspasas Efectoras

Caspasa 8 Activa

FADD = Dominio de muerte asociado a FAS FLIP = Protena inhibidora, puede desactivar el proceso Caspasas = cisten-proteasas , mediadoras esenciales de apoptosis cistenCaspasa 8 = iniciadora de Va Extrnseca
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Va Intrnseca
Intrnseca o mitocondrial: mitocondrial:
Se ejecuta principalmente en respuesta a dao en el DNA y estrs celular Dentro de la mitocondria se encuentran protenas propro-apoptticas Es muy relevante la ubicacin del citocromo c Las protenas de la familia de Bcl-2 son esenciales Bclen la regulacin de sta va (actan sobre la mitocondria). mitocondria). Se forma el Apoptosoma (Citocromo c + Apaf-1 + Apafcaspasa 9)
BclBcl-2 = gen linfoma clulas B ApafApaf-1 = activador - proteasa apopttica
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Va Intrnseca
Seales apoptticas intracelulares (Dao al ADN)

Citocromo c (en citoplasma)

Pro caspasa 9

Mitocondria
Salida Citocromo c: Bax y Bak Promueven BclBcl-2 y Bcl-X L Bclinhiben

ApafApaf-1

XIAP

Caspasa 9 Activa

Caspasas Efectoras

Apoptosis

APAF-1= Factor de activacin-1 de proteasa apopttica XIAP = protena inhibidora de apoptosis - inhibe caspasas (Pro- 9, 3 y 7) Bax y Bak = de familia Bcl-2 (pro-apoptticas). Bcl-2 y Bcl-X L = anti-apo Caspasa 9 = cisten-proteasa iniciadora de Va Intrnseca
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Miembros de la familia Bcl-2

El nombre de la familia se debe al gen aislado implicado en el linfoma de clulas B (bcl: bcl: B-cell lymphoma) lymphoma) Incluye genes apoptticos y apoptticos proantide en c, al
Familia

Bcl-2

Anti-apoptticos

Pro-apoptticos

Regulan la liberacin factores pro-apoptticos pro-apoptticos, particular el citocromo desde la mitocondria citoplasma.

Fuente: Serotec,www.ab-direct.com

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Citocromo c (Re - localizacin)

Seales apoptticas

Miembros Bcl-2 con Bclslo el dominio BH3 BH3 (Bid, Bad, Bim, Bik) Bim,

blanco

blanco

Integrantes Bcl-2 con varios dominios: Bcl-2 y Bcl-XL inactivan a Bax y Bak

Salida Citocromo c

Componentes Bcl-2 con varios dominios: (Bax y Bak) promueven salida Cit.

blanco

Bax y Bak Promueven

blanco
blanco

blanc o

BclBcl-2 y Bcl-X BclL Inhiben Apoptosis - Biologa Celular, UAM-I UAM-

Fuente Parte imagen: Bianchi ME, 2004

Convergen las dos vas de Apoptosis

Va Intrnseca - mitocondrial Va Extrnseca - receptores

Apoptosoma

DISC

Pro caspasa 9

Caspasa 9

Caspasa 8

Pro caspasa 8

Iniciacin Ejecucin XIAP Pro caspasa 3 Pro caspasa 7 FLIP

Caspasa 3 Caspasa 7

Apoptosis

Unin a sustratos
Fuente Base Imagen: Riedl SJ, Salvesen GS, 2007 GS,

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Elementos participantes Caspasas

Caspasa Activa Conformada por 2 dmeros

Fuente: Serotec,www.ab-direct.com Serotec,www.abApoptosis - Biologa Celular, UAM-I UAM-

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Caspasas (cistena-aspartato (ciste aspartato proteasas) proteasas)

Mediadores esenciales de apoptosis cistencisten-proteasas,
caracterizadas por presentar un residuo de cistena en su sitio activo. activo. Cortan al nivel de un residuo de

aspartato
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Grupos de caspasas
De acuerdo a su actividad se han clasificado en dos grupos: grupos: Caspasas iniciadoras (activadoras de apoptosis): 2, 8, 9 y 10. Caspasas efectoras (operadoras de la apoptosis): 3, 6, 7.

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Esquema Diferentes Caspasas

Caspasas Tipos de Caspasas

Caspasas Ejecutoras

Caspasas Iniciadoras

Caspasas Inflamatorias

Las relacionadas con apoptosis se clasifican en: iniciadoras y efectoras Las iniciadoras procesan las formas inactivas de las efectoras, activndolas. Las efectoras una vez activadas procesan otros sustratos proteicos

Adaptadores

Caspasas Iniciadoras

Caspasas Ejecutoras

transactivacin

Caspasas Activas Apoptosis - Biologa Celular, UAM-I

Fuente: Serotec,www.ab-direct.com

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Protenas Inhibidoras de Apoptosis (IAPs) IAPs)

IAP son antiapoptticas ya que Caspasas Inhiben la Iniciadoras actividad de las caspasas. Hay al menos 5 en mamferos XIAP Caspasas c-IAP1 Efectoras c-IAP2 IAP neuronal Survivina s

Apoptosis

Inhibidor de las IAPs

Inhiben tanto a las caspasas iniciadoras como a las efectoras, bloqueando diversos puntos del proceso
Apoptosis - Biologa Celular, UAM-I UAMFuente: Holcik, 2002 Holcik,

Fases de la Apoptosis
El proceso se ha subdividido en 3 fases diferentes: diferentes: Fase de Induccin Fase Efectora Fase de degradacin Los cambios caractersticos de la apoptosis, aparecen en secuencia en las diferentes fases

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Cambios en la membrana Plasmtica

Clula normal Clula apopttica

INTERIOR

Fosfatidilserina

INTERIOR

EXTERIOR

EXTERIOR

Movimiento transmembranal de la fosfatidilserina: Se encuentra en la cara interior de la membrana, al iniciar el proceso de apoptosis se localiza en ambas caras
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Fragmentacin del ADN

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Citoesqueleto
Clula Viva Clula en Apoptosis

Desorganizacin citoesqueleto
Fuente: Apo_iifaemt.jpg

de

los

componentes

del

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Eventos Apoptosis - Resumen

Estmulos externos Estmulos Internos Cambios en la membrana plasmtica Activacin caspasas Cambios Mitocondria

Apoptosis

Receptores Membrana

Mitocondria

Expresi n genes

Degradacin ADN
Receptores y ligandos, Caspasas -14, Reguladores de Caspasas Bcl2 12 Adaptadores Protenas: Inhibidoras, reguladoras (cinasas)

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Bibliografa - Libros
Alberts, B., Bray, D., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K. y Watson, J. D. 2004. Biologa Molecular de la Clula. Ed. Omega. Espaa. Cooper, Geoffrey M. The Cell - A Molecular Approach. 2000. Sunderland (MA): Sinauer Associates, Inc Jimnez, L. F., Merchant, H. 2003. Biologa Celular y Molecular. 1a. ed. Editorial Prentice Hall. Mxico.
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