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Hemograma
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2013, 9: 1
Resumen
El uso de la evaluacin hematolgica en animales silvestres y no
convencionales es fundamental para la evaluacin general del estado de
salud de estas poblaciones. La estandarizacin de los procedimientos de
laboratorio, el conocimiento y la experiencia del analista en la identificacin
de las diferencias morfolgicas, son fundamentales para obtener resultados
confiables que proporcionan la mayor utilidad clnica. El objetivo de este
documento es recopilar informacin bsica para la realizacin adecuada de
la evaluacin hematolgica en animales silvestres y no convencionales, as
como los aspectos generales para su interpretacin.
Palabras clave: evaluacin hematolgica, diferencias morfolgicas, mamferos,
aves, reptiles.
Introduccin
La Hematologa es la rama de la medicina, tanto humana como veterinaria,
que estudia los elementos formes de la sangre, los precursores en mdula
sea y los analitos qumicos plasmticos relacionados, abarcando un anlisis
estructural, funcional y la determinacin de concentraciones de estos
elementos. Dentro de las pruebas hematolgicas disponibles el hemograma
es la ms solicitada, ya que permite tener una visin global de la
homeostasis del sistema hematopoytico y obtener excelentes indicadores
de varios aspectos del estado de salud de un animal.
La evaluacin hematolgica, hemograma, cuadro hemtico, biometra
hemtica o hemoleucograma, en realidad no se trata de una prueba
individual sino de un conjunto de anlisis cuantitativos y cualitativos, en el
cual la utilidad clnica es directamente proporcional a la calidad del material
obtenido, la calidad analtica y el nmero de parmetros determinados. [10,
16]
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Sitios de puncin
Se debe escoger el sitio de puncin ms adecuado de acuerdo con la
especie y el tamao del animal (tabla 1). Puede usarse el sistema tradicional
con jeringa o el sistema al vaco tipo Vacutainer (figura 1). Se debe tener
en cuenta que el calibre de la aguja debe asegurar una extraccin de sangre
rpida sin colapsar la vena, dentro de la limitacin de evitar hematomas; el
calibre deber ser justo menor que el dimetro de la vena. [21]
Figura 1. Toma de muestra en un puma (Puma concolor) con sistema
tradicional de jeringa, en la vena femoral. Fotografa: Santiago LozadaCardona.
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Convenciones: *, Exclusiva en quelonios [8]; **, Minimiza los cambios que se producen con
frecuencia por contaminacin linftica de la sangre durante la extraccin, debido a que en
reptiles los vasos linfticos acompaan a los sanguneos [8, 28]
Recoleccin y almacenamiento
Existen tubos para recoleccin de sangre con fines hematolgicos,
comercialmente disponibles, en diferentes tamaos y presentaciones.
Generalmente se usan los tubos de tapa lila los cuales contienen cido
Etilendiamino Tetractico (EDTA) lquido o liofilizado, compuesto
anticoagulante de eleccin en hematologa; el EDTA es el que mejor
conserva las caractersticas morfolgicas y permite la tincin adecuada de
los leucocitos. [32] Sin embargo, en algunos casos la sangre debe
recolectarse en tubos con heparina, material que se encuentra disponible
comercialmente (tabla 2). [20, 40] Los tubos con heparina se encuentran
disponibles en diferentes tamaos y se identifican con la tapa de color verde.
Los tubos con anticoagulante tambin pueden ser preparados en el
laboratorio.
En reptiles se prefiere la recoleccin con heparina ya que en algunas
especies, sobre todo en quelonios, el EDTA produce hemlisis. Algunas
especies aviares presentan una anticoagulacin incompleta y hemlisis
parcial cuando se mezclan con EDTA. En estos casos tambin se utiliza
heparina como anticoagulante. [7] La relacin anticoagulante/sangre debe
ser la correcta para evitar fenmenos de dilucin y/o distorsin celular por
exceso.
Durante el proceso de extraccin sangunea se debe evitar el exceso de
succin para no provocar hemlisis; es necesario usar la jeringa y la aguja
adecuadas al calibre de la va utilizada. Una vez extrada la sangre, se
mezcla por inversin suavemente. Es ideal realizar el frotis sanguneo
inmediatamente, ya que el contacto prolongado de la sangre con el
anticoagulante induce distorsiones celulares e incluso hemlisis; no se
deben hacer recuentos celulares en sangre con ms de 4 das de
almacenamiento. Si la muestra no se va a procesar durante la primera hora
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Mecanismo
de accin
Ventajas
Heparina (litio,
sodio)
Antitrombnico
Reversible,
no txico
cido
Etilendiamino
Tetractico:
Na2EDTA,
K2EDTA y
K3EDTA
Quelante de
calcio
Proporciona
la mejor
preservacin
Desventajas
Usos
Alteracin
morfologa
lecucocitaria y
agregacin; fondo
azul en la
coloracin de
frotis; artefactos
en eritrocitos;
costoso.
Irreversible; en
altas
concentraciones
contrae los
eritrocitos.
Aves
(cuando la
muestra va
usarse
para
bioqumica)
y reptiles.
Mamferos,
aves y
algunos
reptiles.
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Recuento eritrocitario
Determina el nmero total de eritrocitos o hemates que se encuentran en un
volumen de sangre perifrica expresado en clulas por milmetro cbico
(mm3), por microlitro (L) o por litro (L). [10] El sistema de unidades en que
se reporta el resultado puede variar en cada laboratorio, pero la
interpretacin del parmetro sigue siendo la misma y va acorde con los
valores de referencia. Para el recuento pueden usarse mtodos manuales o
automatizados.
El recuento manual consiste en preparar una dilucin de la sangre en
solucin salina en el caso de mamferos, o en solucin de Natt y Herrick para
aves, reptiles, peces y anfibios. [31] Esta dilucin se pone en un
hemacitmetro o cmara de Neubauer para realizar el conteo. [40] Este
mtodo requiere de mucho tiempo y habilidad visual, desventajas para ser
usado de rutina en el laboratorio. Adems, su alto coeficiente de variacin le
resta confiabilidad a los parmetros que a partir de l se calculan. [10]
El conteo automatizado tradicional se basa en el principio de impedancia
elctrica. [4] Los analizadores ms recientes usan centrifugacin asociada a
colorantes y anticuerpos monoclonales, y citometra de flujo por equipos
lser. Estas tecnologas son poco aplicables a muestras de animales
silvestres y no convencionales.
El conteo de eritrocitos es necesario para calcular el volumen corpuscular
medio (VCM) en los hemogramas realizados por mtodos manuales. Este
recuento en sangre perifrica es menor en los reptiles que en los mamferos
y aves. [5]
Hematocrito
Es la relacin del volumen de eritrocitos con el de sangre total, es decir, es el
valor de sangre que se compone realmente de eritrocitos. Se expresa como
un porcentaje o, preferiblemente, una fraccin decimal. El hematocrito se
puede medir directamente por centrifugacin con un micromtodo o, de
forma indirecta como lo hacen los analizadores automatizados, calculando el
producto del volumen corpuscular medio (VCM) multiplicado por el recuento
de eritrocitos. [10, 40]
Hemoglobina
La hemoglobina (Hb), componente principal de los eritrocitos, es una protena
conjugada especializada que sirve de vehculo para el transporte de oxgeno
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ndices eritrocitarios
Las determinaciones del eritrograma descritas hasta ahora, se conocen como
ndices eritrocitarios bsicos o primarios. Aquellos que derivan de estos se
les conoce como parmetros derivados o secundarios. [10, 40] Estos
parmetros son la base para la clasificacin de las anemias y pueden ser
calculados o determinados por analizadores automatizados. A continuacin
se describen los ndices eritrocitarios secundarios que hacen pueden
componer el eritrograma manual y el automatizado:
Volumen corpuscular medio (VCM). Ofrece informacin sobre el tamao
promedio de los eritrocitos, expresado en fentolitros (fL) como unidad de
volumen. A partir del VCM se define el tamao de los eritrocitos como
normocitosis (normales), microcitosis (pequeo) y macrocitosis (grandes),
www.veterinariosvs.org Subdireccin Tcnico Cientfica 23
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Morfologa eritrocitaria
Un perfil hematolgico siempre debe incluir el examen de un frotis sanguneo
para determinar, si existen o no, cambios morfolgicos en los eritrocitos y
dems clulas sanguneas. Esta evaluacin se realiza mediante un extendido
de sangre en lmina teido con coloracin de Wright u otra tipo Romanowsky
como son Wright-Giemsa, May Grnwald-Giemsa o Diff-Quick. [19] La
relevancia de la informacin derivada es proporcional al conocimiento y
experiencia del analista.
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Alteraciones de tamao
La variacin en el tamao eritrocitario se conoce como anisocitosis. En la
mayora de mamferos esta alteracin puede discriminarse en macrocitosis
(aumento de tamao) y microcitosis (disminucin de tamao).
En aves y reptiles suele describirse de forma general y es normal encontrar
una ligera variacin en el tamao eritrocitario (1+). Un grado mayor de
anisocitosis asociado con policromatofilia es observado en aves con anemia
regenerativa. [7]
Alteraciones de la forma
Poiquilocitosis es el trmino que se emplea para generalizar las variaciones
en la forma de los eritrocitos. Aunque en aves y reptiles se describe de
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Inclusiones
Cuerpos de Howell-Jolly. Son remanentes nucleares y se observan como
grnulos densos y de color azul rojizo o violeta, localizados excntricamente
(figura 7). Es un hallazgo habitual en felinos, roedores, pequeos primates y
algunos marsupiales sanos. [19] Una cantidad incrementada de estas
inclusiones se asocia con anemia regenerativa e hipoesplenismo. [41]
Figura 7. Cuerpo de Howell-Jolly en un eritrocito de tit gris (S. leucopus).
(1000X, coloracin de Wright). Fotografa: Copete-Sierra M.
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Indicacin
Mamferos
Aves y
reptiles
Hipocroma
Anemia, deficiencia
mineral (hierro)
Significativa
Significativa
Poiquilocitosis
Alteracin metablica,
eritropoyesis
incrementada
Alteracin metablica,
eritropoyesis
incrementada
Significativa
Significativa
Significativa si la
hemoglobina no
tiende a la
polimerizacin
Significativa
Codocitos o
dianocitos
Enfermedad heptica,
anemia hipocrmica
Significativa
No descrita
Estomatocitos
Enfermedad heptica,
anemia hemoltica
Significativa
No descrita
Esferocitos
Anemia hemoltica
Significativa
No descrita
Esquistocitos
Significativa
No descrita
Cuerpos de
Howell-Jolly
Coagulacin
intravascular
diseminada (CID),
sepsis
Hipoesplenismo, divisin
nuclear anmala
Significativa en
algunas especies
Probablemente
significativa
Punteado
basfilo
Deficiencia de hierro,
intoxicacin por plomo
Significativa en
adultos
Significativa
Cuerpos de
Heinz
Exposicin a oxidantes,
hemoglobina inestable,
defectos enzimticos,
hipoesplenismo
Significativa en
algunas especies
Significativa
(rara vez
descritos)
Anisocitosis
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Eritrocitos inmaduros
En mamferos los precursores eritrocitarios aparecen como clulas
nucleadas. En aves y reptiles se observan con un ncleo de mayor tamao
que el de la clula madura
dura y acmulos irregulares de cromatina. Las
caractersticas detalladas de los eritrocitos inmaduros se recopilan en la
Tabla 4. [19]
Prorubricito
Rubricito
Mamferos
Aves y reptiles
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Precursor
Mamferos
Aves y reptiles
Metarubricito
Policromatfilo
Pequeo, redondeado o
ligeramente oval. Ncleo
redondeado o ligeramente
ovalado y acmulos irregulares de
cromatina. Citoplasma grisceo o
rojo plido.
Citoplasma eosinoflico, ncleo de
mayor tamao que el de la clula
madura, con acmulos irregulares
de cromatina. Con tincin
supravital se observa una banda
perinuclear formada por
abundantes grnulos
citoplasmticos.
Tomado y adaptado de: Hawkey C M y Dennet T B. Atlas de Hematologa Veterinaria Comparada. Grass
Ed. Espaa, p. 10-11, 1989.
Mamferos
La policromasia y la hipocroma son alteraciones eritrocitarias evidentes en
frotis teidos por sus patrones de coloracin, de gran utilidad en la
clasificacin y monitoreo de anemias. La policromasia tiende a producirse en
anemias por prdida de sangre y anemias por destruccin eritrocitaria,
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Aves
La anemia es un hallazgo comn en los hemogramas aviares. [38] En las
aves, el desarrollo de la anemia por carencia de eritropoyesis parece ser ms
rpido que en los mamferos debido, probablemente, a la vida media
relativamente corta de sus eritrocitos, que puede variar de 28 a 45 das. [7]
La policromasia puede usarse como un indicador de eritrognesis. En aves
anmicas con una respuesta regenerativa apropiada el grado de
policromasia debe ser superior al 5% del total de eritrocitos (3+ y 4+). La
presencia de clulas en mitosis, eritrocitos inmaduros binucleados y de otros
precursores eritroides en el frotis sanguneo, son evidencias de eritropoyesis
activa (figura 11). [3, 7]
Reptiles
La respuesta regenerativa a anemia en reptiles es ms lenta comparada con
la de aves y mamferos, y se evidencia con aumento de eritrocitos
policromatfilos, presencia de eritrocitos inmaduros, anisocitosis (moderada a
marcada), eritrocitos en mitosis y poiquilocitosis. Sin embargo, algunos de
estos hallazgos pueden presentarse en reptiles posthibernacin o asociados
a estados de ayuno, malnutricin y enfermedad inflamatoria severa. [8, 28]
La hipocroma est asociada a la deficiencia de hierro al igual que en
mamferos. [43]
Leucograma. Consiste en el anlisis cuantitativo y cualitativo de los
parmetros relacionados con los glbulos blancos o leucocitos en sangre
perifrica. Comprende los recuentos total y diferencial lecucocitarios y la
evaluacin morfolgica de las clulas blancas en el frotis de sangre
perifrica. [10]
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Mamferos
Aves
Reptiles
Granulocitos
Neutrfilos
Eosinfilos
Basfilos
Heterfilos
Eosinfilos
Basfilos
Heterfilos
Eosinfilos
Basfilos
Mononucleares
Monocitos
Linfocitos
Monocitos
Linfocitos
Azurfilos
Monocitos
Linfocitos
Evaluacin morfolgica
Mamferos
Neutrfilos. En todas las especies de mamferos los ncleos de los
neutrfilos son polimrficos y la variacin radica en el grado de lobulacin.
Existen diferencias en tamao, forma y patrones de tincin. Los grnulos de
los neutrfilos pueden ser basoflicos como en primates y algunos
artiodctilos, o fuertemente eosinoflicos como en algunos roedores (figura
12). [12, 41] Los neutrfilos son las clulas de mayor proporcin dentro del
recuento diferencial de mamferos adultos. [14, 19]
En el frotis sanguneo de mamferos pueden observarse neutrfilos
inmaduros. Estas clulas se caracterizan por su gran tamao, basofilia
citoplasmtica y disminucin o ausencia de lobulacin nuclear. [19] Un
incremento en la cantidad de neutrfilos inmaduros se conoce como
desviacin a la izquierda, alteracin en la que generalmente se observan
bandas, pero tambin pueden aparecer metamielocitos y mielocitos (figura
13).
La toxicidad en neutrfilos se refiere a los cambios morfolgicos que se
observan en el citoplasma como resultado de una liberacin temprana de
estas clulas, desde la mdula sea, a la circulacin. [9] Los cambios txicos
evidentes consisten en granulaciones y vacuolizacin citoplasmticas, e
inclusiones azul-grisceas llamadas cuerpos de Dhle.
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Figura 15. Basofilo de un tit gris (S. leucopus).). En esta clula puede
apreciarse la fuerte granulacin basoflica que, enn ocasiones, esconde al
ncleo. (1000X, coloracin de Wright). Fotografa: Copete-Sierra
Sierra M.
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Aves
Heterfilos. Constituyen la subpoblacin ms abundante dentro del recuento
diferencial en aves son las clulas anlogas a los neutrfilos de los
mamferos. [39] Generalmente son redondos, con un ncleo lobulado de
cromatina densa que se tie de color morado. Su citoplasma es plido y
presenta grnulos de color rojo ladrillo de forma espiculada, aunque en
algunas especies estos grnulos pueden ser ovalados o redondos (figura 18).
[7, 19]
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Reptiles
Heterfilos. Al igual que en aves son las clulas equivalentes a los neutrfilo
de los mamferos. Son clulas redondeadas, de gran tamao, con citoplasma
plido que contiene grnulos fusiformes refringentes, generalmente. Estos
grnulos se tien de color naranja brillante y en una misma clula pueden
aparecer grnulos opacos y refringentes. El ncleo es ovalado o redondo, de
posicin excntrica y con un patrn de cromatina denso (figura 21). Algunas
especies de lagartos, como las iguanas o los dragones barbudos, tienen
heterfilos con el ncleo lobulado. El nmero de heterfilos en el leucograma
de reptiles sanos vara con la especie. [1, 8, 28]
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Trombograma
En animales silvestres y no convencionales el trombograma consiste en el
anlisis cuantitativo (recuento) y cualitativo (morfologa) de las plaquetas en
mamferos, y de los trombocitos en aves y reptiles. El recuento puede
realizarse de forma manual en hemacitmetro (recuento directo), o en el
frotis sanguneo (recuento indirecto) como recuento estimado. [4, 40]
El recuento de plaquetas y trombocitos define los conceptos de
trombocitopenia y trombocitosis. Trombocitopenia se refiere a la disminucin
de estas clulas y est asociada en la mayora de especies a un aumento del
consumo o destruccin. [9] Pueden producirse falsas disminuciones en los
recuentos por agregacin plaquetaria in vitro.
La trombocitosis define el aumento en la cantidad de plaquetas o trombocitos
y est asociada con anemia ferropnica, enfermedades inflamatorias,
neoplasias e infecciones bacterianas. [7, 8, 9]
Mamferos
Las plaquetas son los fragmentos citoplasmticos de los megacariocitos,
clulas que se encuentran en la mdula sea, no poseen ncleo y presentan
granulacin (figura 25). Tienden a ser redondas pero pueden variar en forma
y tamao. [19] Normalmente son ms pequeas que los eritrocitos pero
pueden aparecer mucho ms grandes. A estas clulas de mayor tamao se
les denomina macroplaquetas, son producto de una liberacin de formas
inmaduras hacia la circulacin y, en algunas especies, regeneracin
plaquetaria. [9]
Aves
Los trombocitos aviares son clulas pequeas, redondas u ovaladas. Poseen
un ncleo que puede ser redondo u ovalado, y presenta un patrn de
cromatina denso. El citoplasma es incoloro o se tie de un gris plido y
contiene grnulos eosinfilicos (figura 26). Su identificacin y recuento se
dificulta ya que tienden a agregarse. Los trombocitos se forman a partir de un
precursor mononuclear en mdula sea. [7]
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Reptiles
En reptiles los trombocitos son clulas pequeas, elpticas o fusiformes, con
un ncleo ovalado y central. El citoplasma es casi transparente, hecho
importante que lo que permite diferenciarlos de los linfocitos pequeos. [8,
28]
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Protenas plasmticas
La estimacin de la concentracin de protenas plasmticas se realiza
mediante refractometra y es un parmetro de gran utilidad, ya que refleja el
estado de hidratacin de una animal al correlacionarse con el hematocrito.
Se debe tener en cuenta que condiciones del plasma como la lipemia y la
hemlisis interfieren en la lectura resultando, generalmente, en una falsa
elevacin de este analito (8, 23). [29, 40]
A la vez que se determine la concentracin de protenas se debe observar el
aspecto y color del plasma.
Mamferos
El plasma en mamferos puede ser incoloro o ligeramente amarillo. Una
coloracin amarilla intensa puede indicar ictericia, lo que sugiere
hiperbilirrubinemia. La lipemia produce un plasma blanco, opaco o de
aspecto lechoso; se asocia con dislipidemias o muestras tomadas en estado
postprandial. Una coloracin de rosado a rojo indica hemlisis, que puede ser
inducida durante el proceso de recoleccin o por hemlisis intravascular. [41]
Aves
En aves el plasma normalmente es incoloro, aunque puede ser amarillo e
inclusive anaranjado, debido a carotenos de la dieta; esto puede observarse
en aves granvoras. El color verde en el plasma aviar sugiere biliverdinemia,
indicador de falla heptica o renal. [8] Pueden observarse lipemia y hemlisis
asociadas a las mismas causas que en mamferos.
Reptiles
El plasma en reptiles debe ser incoloro o ligeramente amarillo. Sin embargo,
se puede observar un plasma de amarillo a anaranjado por pigmentos en la
dieta de reptiles hervboros, o verde a amarillento en las serpientes. [6]
Referencias
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
COPETE-SIERRA M
33. Reed GF, Lynn F, Meade BD. Use of Coefficient of Variation in Assessing
Variability of Quantitative Assays. Clin Diagn Lab Immunol. 2002; 9: 1235-1239.
34. Ruzicka K, Veitl M, Thalhammer-Scherrer R. The New Hematology Analyzer
Sysmex XE-2100: Performance Evaluation of a Novel White Blood Cell
Differential Technology. Arch Pathol Lab Med. 2001; 125: 391-396.
35. Salakij Ch, et al. Hematology, Morphology, Cytochemical Staining, and
Ultrastructural Charachteristics of Blood Cells in King Cobras (Ophiophagus
hannah).Vet Clin Path. 2002; 31: 116-126.
36. Sardi A, Usma A. Gua de Hematologa General. Cali (Colombia): Universidad
del Valle; 1999: pp 9-68.
37. Stamper MA, et al. Relationship Between Barnacle Epibiotic Load and
Hematologic Parameters in Loggerhead Sea Turtles (Caretta caretta), a
Comparison Between Migratory and Residential Animals in Pamlico Sound,
North Carolina. J Zoo Wild Med. 2005; 36: 635-641.
38. Strik NI, Alleman AR, Harr KE. Circulating Inflammatory Cells. En: Jacobson ER
(ed): Infectious Diseases and Pathology of Reptiles: Color Atlas and Text, Cabo
Raton (USA): CRC Press; 2007: 167-218.
39. Thrall MA et al. Veterinary Hematology and Clinical Chemistry. Philadelphia
(USA): Lippincott Williams & Wilkins; 2004. Chapter 6, Classification of and
Diagnostic Approach to Anemia; pp 83-93.
40. Thrall MA et al. Veterinary Hematology and Clinical Chemistry. Philadelphia
(USA): Lippincott Williams & Wilkins; 2004. Chapter 1, General Principles of
Laboratory Testing and Diagnosis; pp 3-38.
41. Thrall MA et al. Veterinary Hematology and Clinical Chemistry. Philadelphia
(USA): Lippincott Williams & Wilkins; 2004. Chapter 16, Mammalian
Hematology: Laboratory Animals and Miscellaneous; pp 211-224.
42. Thrall MA et al. Veterinary Hematology and Clinical Chemistry. Philadelphia
(USA): Lippincott Williams & Wilkins; 2004. Chapter 17, Hematology of Birds; pp
225-258.
43. Thrall MA et al. Veterinary Hematology and Clinical Chemistry. Philadelphia
(USA): Lippincott Williams & Wilkins; 2004. Chapter 18, Hematology of Reptiles;
pp 259-276.
44. Velez H, Rojas W, Borrero J, Restrepo J. Fundamentos de Medicina:
Hematologa. 5ta ed. Medelln (Colombia): CIB; 1998. Captulo 1, Concepto,
Funcin y Origen del Eritrn; pp 1-14.
45. Villar LJ, Puigb P, Riera CM. Analysis of Highly Phosphorylated Inositols in
Avian and Crocodilian Erythrocytes. Comp Biochem Physiol. 2003; 135: 169175.
46. Wintrobe MM. Anemia: Classification and Treatment on the Basis of Differences
in the Average Volume and Hemoglobin Content of the Red Corpuscles. Arch
Intern Med. 1934; 54: 256-261.