El manejo inadecuado de los materiales y residuos peligrosos ha generado a
escala mundial, un problema de contaminacin de suelo, aire y agua. Actualmente,
numerosos gneros bacterianos han sido descritos como degradadores de contaminantes . Como sistema abierto, el suelo est sujeto a adicin y remocin de compuestos como los pesticidas y los hidrocarburos En suelos contaminados, la biorremediacin es un proceso donde la actividad metablica de organismos vivos, principalmente microorganismos, degradan a los contaminantes orgnicos en compuestos ms simples y/o menos txicos Las bacterias son las ms empleadas en el proceso de biorremediacin Las bacterias de mayor inters para la biorremediacin son del gnero Pseudomonas, el cual incluye especies de gran versatilidad metablica. Muchas tienen capacidad intrnseca de tolerancia de agentes txicos, frecuentemente apoyados por genes contenidos en plsmidos, conocidos como factores de resistencia, los cuales codifican para sistemas de resistencia a metales pesados y una variedad de agentes txicos tanto fsicos como qumicos Estudios con relacin al desempeo metablico de las Pseudomonas spp. ha permitido identificarla como degradadora de gran cantidad de sustratos. Las Pseudomonas spp., son capaces de utilizar una enorme variedad de compuestos orgnicos como sustrato para crecer, capacidad que le permite colonizar nichos en los que son escasos los nutrientes que otros organismos pueden asimilar . Por lo que puede ser til en el tratamiento de la contaminacin ambiental. Esto disminuye la disponibilidad, y principalmente, reduce los riesgos ambientales y de salud humana En este trabajo se busc la presencia de pseudomonas spp. en suelos contaminados con hidrocarburos, agroqumicos y suelo silvestre; ya que son muy numerosas las publicaciones en las que se hace referencia a distintas Pseudomonas sp. capaces de sobrevivir e incluso degradar una amplia variedad de compuestos orgnicos, como pesticidas, diversos compuestos halogenados, e hidrocarburos derivados del petrleo
CONCLUSION
Se observ mayor crecimiento bacteriano en las muestras de suelo contaminadas
con agroqumicos, seguido de las muestras contaminadas con hidrocarburos, y en las muestras de suelo silvestre el crecimiento fue nulo. Por lo tanto, en los suelos contaminados se encontr mayor nmero de Pseudomonas spp. que en los suelos no contaminados. Las especies aisladas de Pseudomonas no son fluorescentes y se descartan las especies de P. aeruginosa, P. fluorescens, P. putida, P. viridiflava y P. syringae.
Porque la pseudomona es selectiva para agar cetrimida
Cetrimida Agar Base. Medio utilizado para el aislamiento selectivo de Pseudomonas aeruginosa y de otras especies del gnero. Fundamento La frmula de este medio est desarrollada para favorecer la seleccin de P. aeruginosa y estimular la formacin de pigmentos. Es ste un medio muy semejante al King A, en el cual el cloruro de magnesio y el sulfato de potasio promueven la formacin de piocianina, pioverdina y piomelanina de P. aeruginosa. La cetrimida es un detergente catinico que acta como agente inhibidor, libera el nitrgeno y el fsforo de las clulas de casi toda la flora acompaante, aunque inhibe tambin algunas especies de Pseudomonas. Pseudomonas 1. 1. PSEUDOMONASMariela Garfio 235948 2. 2. Familia Pseudomonadaceae Habitan en el suelo, en aguas estancadas, forman parte de la flora nativa del intestino de varias especies animales, son de vida libre, se encuentran en material orgnico en descomposicin. Algunas especies son patgenos de plantas, otras pueden producir infecciones en animales y slo unas pocas especies se han encontrado en infecciones humanas. 3. 3. Caractersticas generales Los miembros de ste gnero son: Bacilos gramnegativos rectos o ligeramente curvados que se disponen tpicamente en parejas Aerobios y anaerobios facultativos. La presencia de citocromo oxidasa se emplea para distinguirla de las Enterobacteriaceae. Oxidasa positivos Catalasa positivos
(rojo); Piomelanina (negro) La mayora son mviles por un flagelo polar o un mechn de 2 a 3 flagelos Poseen fimbrias y pilis Algunas especies forman una delgada microcpsula compuesta por polisacridos 5. 5. No forman esporas Son mesfilas (30 37C), aunque pueden desarrollarse a temperaturas relativamente bajas (hasta 4C) No tiene requerimientos nutricionales exigentes NO fermentan los azucares 6. 6. 2 Tipos:Las fluorescentes: No fluorescentesP. aeruginosa P. pseudomalleiP. fluorescens P. malleiP. putida P. cepacia P. maltophila P. picketti De todas las especies, la que frecuentemente se ha encontrado en infecciones humanas es P. aeruginosa. 7. 7. Pseudomonas aeruginosa Se encuentra en el medio ambiente; sobrevive bien en los ambientes domsticos (baeras, hidromasajes, soluciones para lentes de contacto) y en el mbito hospitalario (duchas, equipo respiratorio etc) rara vez forma parte de la flora normal de los seres humanos sanos. Esta especie se ha encontrado confrecuencia en infecciones hospitalarias. 8. 8. Las infecciones por P. aeruginosa se observan frecuentemente en personas con inmunidad deprimida, quemaduras, alteraciones metablicas como la diabetes, neoplasias malignas, instrumentacin o cateterismo. Pude instalarse en cualquier rgano o tejido, desde una simple herida o quemadura, invadir el odo externo, colonizar las vas urinarias, los pulmones, el endocardio, la crnea y los huesos. Puede producir septicemias de alta gravedad y dar lugar a procesos supurativos 9. 9. Diagnostico Se puede hacer la siembra en casi cualquier medio de cultivo, es adaptable a diferentes nutrientes. Cultivado en agar sangre produce una amplia zona de hemolisis beta Se puede cultivar en los medios de cultivo de las enterobacterias, donde produce colonias muy caractersticas de color gris con brillo metlico 10. 10. En todos los medios se puede percibir un aroma que semeja al de uvas fermentadas. Slo utiliza el citrato de sodio como nica fuente de carbono Se utilizan medios como el agar peptona con o sin sangre, Mac Conkey y EMB. Hay medios selectivos para Pseudomonas aeruginosa como agar cetrimida. 11. 11. La identificacin de la especie P. aeruginosa es por: Olor: produce un olor a uvas o nixtamal, por la produccin de trimetilaminas. Pigmentacin: produce piocianina, que es de color azul, y pioverdina o fluorescena, que
va de amarillo verdoso a amarillo caf. Morfologa colonial: Grandes,
pueden ser lisas, rugosas, mucoides o secas, gelatinoides y a menudo se dispersan; en agar sangre algunas cepas presentan Beta hemlisis. Oxidasa: son oxidasa positivas Capacidad para desarrollarse a 42 12. 12. Estructura antignica Ag O: Antgeno somtico Ag H: Localizado en el flagelo Ag M: Ag mucoide que impide la aglutinacin de algunas cepas La expresin del antgeno O en la membrana externa se relaciona de manera inversa con la produccin de alginato: si producen alginato, no expresan el antgeno. 13. 13. Factores de patogenicidadEndotoxina PioverdinaPilis PiocianinaEnterotoxina LectinasaGlucolpido HemolisinasColagenasa Exotoxina AFosfolipasa Exotoxina S 14. 14. Manifestaciones clnicas Pseudomonas aeruginosa produce infecciones nosocomiales y adquiridas en la comunidad. Puede manifestarse como infeccin de vas urinarias nosocomial (en pacientes con sondas), meningitis, septicemia, bacteriemia, ectima gangrenoso, enterocolitis, infecciones de quemaduras y heridas, neumona primaria, neumona necrotizante, infecciones pulmonares crnicas, osteomielitis, infecciones de la piel y tejidos blandos, otitis crnica externa, otitis media crnica y otitis externa maligna, endocarditis, infecciones oculares, queratitis y paroniquia. 15. 15. Resistencia Resistente a los antibiticos y a los efectos de algunos antispticos. La ebullicin destruye a esta cepa en 5 minutos Los desinfectantes fenlicos y de gluteraldehdo son de gran eficacia. La resistencia puede ser mediada por B-lactamasas. 16. 16. Tratamiento La gran mayora de cepas aisladas son suceptibles a:Amikacina, gentamicina, tobramicina y colistina; muchasde ellas son susceptibles tambin a carbenicilina yticarcilina Recientemente se han agregado tambin las cefalosporinas de tercera generacin como cefotaxima, cefoperazona y monobactam, as como algunas penicilinas semisintticas. Validado kirby Bauer 17. 17. Epidemiologa Estas bacterias se encuentran libres en el suelo, aguas negras, agua almacenada, en el intestino de mamferos, y algunas especies son parsitas de las plantas. Se aslan en equipo mdico, en lquidos hospitalarios, catteres, desinfectantes y gotas oftlmicas. El modo de transmisin es de persona a persona. Los pacientes con predisposicin son aquellos que tienen dao tisular directo en mucosas o en la piel.
18. 18. Adems se
BASE DE AGAR CETRIMIDA USO Medio de cultivo selectivo para el aislamiento de Pseudomonas aeruginosa a partir de diversas muestras. PRINCIPIO La cetrimida (Bromuro de cetiltrimetilamonio) inhibe el crecimiento de las bacterias debido a su accin como un compuesto cuaternario de amonio. La base de Agar Cetrimida promueve la produccin de piocianina y fluoresceina que se observan con luz ultravioleta en los cultivos de Pseudomonas aeruginosa, lo que puede considerarse como prueba presuntiva para su identificacin. Posteriormente se puede realizar la prueba de oxidasa. Sembrar la muestra de ensayo en la superficie del medio de cultivo por estra cruzada. Incubar 24 48 h a 35C El Agar Cetrimide se utiliz como medio slido para mantener a la cepa de P. fluorescens debido a que es un medio selectivo para el gnero Pseudomonas. La cetrimida (bromuro de cetiltrimetilamonio) inhibe el crecimiento de otras bacterias debido a su accin como un compuesto cuaternario de amonio. Dicho medio promueve la produccin de piocianina y fluorescena que se observan con luz ultravioleta en los cultivos de P. aeruginosa y P. fluorescens. pseudomonas aeruginosa posee la capacidad de sintetizar diferentes pigmentos hidrosolubles, entre los cuales se incluye el compuesto fluorescente pioverdina (tambin producido por Pseudomonas putida yPseudomonas fluorescens). Cuando la pioverdina se combina con el pigmento fenaznico azul piocianina, se crea el color verde brillante caracterstico de P.aeruginosa, bacteria que tambin puede producir otros pigmentos hidrosolubles, como la piorrubina (rojo) y la piomelanina (marrn) (1, 3). Estas sustancias, cuya produccin se ve favorecida por temperaturas menores a 37 C y por la presencia de hierro en el medio, fueron aplicadas como marcadores epidemiolgicos fenotpicos con utilidad variable, y se ha demostrado que poseen actividad antibacteriana y efecto sobre la integridad del epitelio respiratorio