BIO-ALLERGY

Las tcnicas de ultima

tecnologa que su
laboratorio estaba
esperando ahora al alcance
de todos.

Enfermedad
caracterizada
por
una
hipersensibilidad a determinadas sustancias
inocuas que, si se inhala, ingiere o se toca
produce unos sntomas caractersticos.
La sustancia a la que se es alrgico se
denomina
"alrgeno",
y
los
sntomas
provocados son definidos como "reacciones
alrgicas".

Componentes principales que se requieren para que la

reaccin alrgica se desencadene:
ALERGENO: Sustancia causante de la alergia, es
usualmente una protena o una glicoprotena; puede
ser inhalado, como el polvo o el polen; ingerido, como
las protenas de la clara del huevo o el marisco;
inyectado, como la penicilina, o actuar por mero
contacto, como la lana, el esparadrapo o los metales
pesados.
INMUNOGLOBULINA E (IgE): Anticuerpo producido
por el sistema inmunolgico en respuesta al alergeno
MASTOCITOS: Clulas especiales que se encuentran
en la piel y en rganos hmedos del cuerpo (nariz,
ojos, boca), cargadas de grnulos de histamina
HISTAMINA: Sustancia que se libera en el proceso
alrgico y que es la responsable de los sntomas de la
alergia

METODOS EMPLEADOS ACTUALMENTE

PARA EL
DIAGNOSTICO DE LAS ALERGIAS
Pruebas cutneas
Prueba de escarificacin (scratch- test)
Prueba de parche (patch test)
Prueba de puntura (prick test)
PRUEBAS SERICAS
Cuantificacin De Inmunoglobulina E
Total
Cuantificacion De Inmunoglobulina E
Especfica

BIO-ALLERGY

FUNDAMENTO

PRICK-TEST.doc

Sistema integrado que permite la realizacin de prick test y su procesamiento

automtico.
Se coloca al antebrazo el dispositivo de aplicacin por medio de tiras
autoadhesivas. Por los orificios pequeos de su capa gua superior, se coloca
en la piel la gota de alergeno. Y se espera a que haga reaccion.
El Film de Lectura se superpone al dispositivo de aplicacin, que ha
permanecido en el antebrazo del paciente durante la espera. Permite dibujar el
contorno del habn sobre el film y transportarlo al espacio reservado en la hoja
codificada que le corresponda segn la batera de alergenos probada . Esta hoja
es leda por el escner y procesada por el programa Prick-Scan 2000
generando un completo informe del resultado.

Aplicacin Alergenos
Puncin con Lanceta
Secado Piel
Espera de Reaccin
Contorneado de Habones
Traslado a Hoja Codificada
Lectura Escner
Impresin Resultados

FUNDAMENTO RIDA.pdf
La prueba se basa en el principio del anlisis del immunoblot. Los alrgenos
especiales estn pegados a la superficie de las membranas de la nitrocelulosa que
se colocan en un canal de reaccin.
El suero del paciente se mide con una pipeta en el canal de la reaccin y se incuba
en la temperatura ambiente. Durante este tiempo, los anticuerpos-IgE alergenoespecficos reaccionan con los alrgenos y se unen a las membranas de
nitrocelulosa
Se agrega un anticuerpo Anti- IgE humano unido a biotina y se incuba en
temperatura ambiente.
Despus, se agrega un estreptavidina conjugada con fosfatasa alcalina y se incuba
en la temperatura ambiente.
Se observa una reaccin de color enzimtica especfica de la fosfatasa alcalina que
da lugar a la formacin de precipitados en las tiras de prueba.

PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBA
Los alergenos se fijan en membranas de nitrocelulosa
Se adiciona el suero del paciente
Incubar por 45 minutos en agitacin y lavar 3 veces por 5 segundos cada vez
Adicionar anticuerpo anti-IgE marcado con Biotina (Deteccin)
Incubar 45 minutos en agitacin y lavar 3 veces por 5 segundos cada vez
Adicionar Streptavidina
Incubar por 20 minutos y lavar 3 veces por 5 segundos cada vez
Adicionar sustrato (BCIP/NBT)
Incubar por 20 minutos en la oscuridad y lavar con agua abundante
Limpiar y dejar secar al aire
Leer y Evaluar Visualmente o con Equipo RIDA-X-SCREEN

NBT

NBT

FUNDAMENTO immulite.pdf
IMMULITE 2500 3gAllergy IgE Especfica es un anlisis
enzimoinmunomtrico quimioluminiscente en fase slida, en dos pasos,
Se basa en cinticas en fase lquida en formato de bola10,11 .
Representa un avance significativo sobre los mtodos convencionales
basados en la unin de los alrgenos a un soporte slido, como los
discos de papel.
Los alrgenos se unen covalentemente a una matriz
polmero/copolmero soluble, la cual a su vez est marcada con un
ligando. El uso de un copolmero aminoacdico aumenta la cantidad de
alrgeno que puede soportar la matriz.

PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBA
Seleccionar una posicin libre en el Carrusel de Reactivos a travs del
software.
Colocar los Viales de Alrgenos que contienen alrgenos especficos,
paneles de alrgenos especficos, anticuerpo Ajustador IgE Especfica,
y/o anticuerpo Control IgE Especfica, en el Soporte de Viales de Alrgenos,
La muestra a utilizar es de 50ul de suero
Se pone en funcionamiento el equipo y se interpretan los resultados que se
obtienen en pantalla

FA

FA

FA

FUNDAMENTO
Prueba para el diagnostico in Vitro de alergias atpicas
Cuantifica la cantidad de IgE alergeno especifica circulante,
en muestras de sangre
El alergeno de inters es unido por enlace covalente a un
disco de papel, reacciona con la IgE especifica de la muestra
problema
Se aaden Anti-IgE marcado con radioistopos formando un
complejo que se leer con un contador gamma.

PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBA
Aadir discos de referencia al Test
Aadir suero de referencia en duplicado
Aadir muestra a estudiar
Incubar por 3 horas
Lavar con solucin de lavado 3 veces
Aadir Anti-IgE marcada con radioistopos
Incubar durante una noche
Lavar con solucin de lavado 3 veces
Medir radioactividad

REACCION

FUNDAMENTO
Mide la cantidad de IgE total circulante en muestras de
sangre.
Anlisis radio-inmunolgico directo que emplea discos de
papel con Anti IgE covalente pegado que va a reaccionar en
la primera incubacin con la IgE de la muestra problema.
Se aade Anti-IgE marcados con istopos radioactivos y
purificados dando a lugar un complejo
Se mide la radioactividad en un contador gamma

PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBA
Colocar discos de Anti-IgE por duplicado
Aadir solucin estndar IgE para sensibilizar
Aadir muestra a estudiar
Incubar por hora y media
Aadir solucin salina 3 veces para lavar
Aadir Anti-IgE marcada con radioistopos
Incubar por dos horas y media
Lavar con solucin salina 3 veces
Medir radioactividad

CLA+IgE.pdf
prueba para determinacin de IgE alergeno-especfica se realiza en un pequeo
dispositivo de plstico
El suero del paciente se pone en contacto simultneamente con varios alergenos o
mezclas de alergenos. La cmara contiene una serie de filamentos individuales de
celulosa, cada uno tiene unido de forma covalente un alergeno o una mezcla de
alergenos.
La prueba se efecta llenando la cmara de prueba con el suero del paciente. La IgE
del suero se une, durante la incubacin, a los filamentos de celulosa recubiertos de
alergeno.,
Se agrega a un anticuerpo contra IgE marcado con enzima, el cual se unir a la IgE
srica previamente unida a los filamentos de celulosa.
Se aade una mezcla fotorreactiva que reacciona con el anticuerpo marcado y
produce quimioluminiscencia.

PROCEDIMEINTO DE LA PRUEBA
Coloque las cmaras de pruebas llenas de suero en el soporte para cmaras de
prueba.
Aspire lentamente de forma que el suero del paciente se introduzca en la cmara
de prueba hasta cubrir el filamento ms alto.
Incube a temperatura ambiente durante 16 a 24 horas
Lave las cmaras de prueba 3 veces
Llene la cmara de prueba con el reactivo con anticuerpo
Incube a temperatura ambiente durante 4 horas 15 minutos
Lave las cmaras de prueba 3 veces
Llene las cmaras de prueba con la mezcla fotorreactiva
Incube las cmaras durante 10 minutos antes de leer los valores en el
luminmetro. Deben leerse los resultados de todas las cmaras de prueba en un
plazo mximo de 60 minutos tras la introduccin del agente fotorreactivo.

E
E
E
E

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FUNDAMENTOUNICAPSYSTEM.doc
UniCAP IgE total es un anlisis cuantitativo in vitro para la medida de IgE
total en muestras humanas del suero o del plasma.
Anti-IgE, covalente unida a ImmunoCAP, reacciona con el IgE total en el
espcimen paciente.
Se los anticuerpos contra IgE marcados con una enzima se agregan para
formar un complejo.
Se agrega una solucin de desarrollo y una para parar la reaccin.
Despus de parar la reaccin, la fluorescencia se mide. La fluorescencia es
directamente proporcional con la concentracin de IgE en la muestra..

PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBA
Fase slida con Antgenos en exceso
Agrega muestra del paciente
Incubar 30 min y lavar
Agregar anticuerpos marcados con una enzima
Incubar 15 min y lavar
Agregar solucin de desarrollo(4MUP) y luego solucin
stop
Leer reaccin

4MUP

4MUP