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Fermentation of Soybean Meal Hydrolyzates

with Saccharomyces cerevisiae and


Zymomonas mobilis for Ethanol Production
Deivis E. Lujan-Rhenalns, Ruben O. Morawicki, Edward E. Gbur, and Steven C. Ricke

Resumen: La mayor parte del etanol producido actualmente por la fermentacin se


deriva de la caa de azcar, maz o remolacha. Sin embargo, es de sentido comn
ecolgico y econmico para utilizar los carbohidratos contenidos en los subproductos y
coproductos de la industria de procesamiento de alimentos para la produccin de
etanol. La harina de soja, un co-producto de la produccin de aceite de soja, tiene una
contenido relativamente alto de hidratos de carbono que podra ser un sustrato
razonable para la produccin de etanol despus de azcares fermentables se liberan a
travs de la hidrlisis. En esta investigacin, la capacidad de Saccharomyces cerevisiae
NRRL Y-2233 y Zymomonas mobilis subsp. mobilis NRRL B-4286 para producir etanol
se evalu utilizando hidrolizados de harina de soja como sustratos para la fermentacin.
Estos sustratos se producen a partir de la hidrlisis de cido diluido de la harina de soja
a 135 C durante 45 min con 0, 0,5%, 1,25%, y 2% de H2SO4 y a 120 C durante 30
min con 1,25% de H2SO4. Los parmetros cinticos de la fermentacin se estimaron
utilizando el modelo logstico. La produccin de etanol usando S. cerevisiae fue ms
alta con los sustratos obtenidos en 135 C, 45 min, y 0.5% de H2SO4 y fermentado
durante 8 h, 8 g / L (4 g de etanol / 100 g SBM fresca), mientras Z. mobilis alcanz su
produccin mxima de etanol, 9,2 g / L (4,6 g de etanol / 100 g SBM fresco) en la
primera 20 h de fermentacin con el misma hidrolizado.
Palabras clave: etanol, fermentacin, hidrolizado, harina de soja, Saccharomyces

INTRODUCCIN

El etanol es 1 de los 2 nicos combustibles para el transporte en el mercado a base de

petrleo, que se utiliza principalmente como parte de una mezcla con gasolina.
Actualmente, la mayora del etanol se produce por fermentacin de azcares derivados
de cereales o cultivos de azcar, lo que plantea preocupaciones sobre el uso de cultivos
alimenticios para la industria de los biocombustibles. Por lo tanto, produccin de
bioetanol a partir de fuentes de alimentos no humanos se est convirtiendo atractivo,
especialmente de coproductos asociados con los alimentos produccin (Neureiter y
otros 2002; Karmee y Lin 2014). Una fuente potencial de azcares fermentables que ha
sido pasado por alto es la harina de soja (SBM), un co-producto de la produccin de
aceite de soja. La harina de soja, es una fuente de protena de alta calidad para la
alimentacin animal, contiene aproximadamente el 42% de carbohidratos totales y
protena de 55% (Baker y Stein 2009; Da Silva y otros 2009). De los carbohidratos
totales, la mitad son estructural y la otra mitad se compone de bajo peso molecular
azcares, oligosacridos y almidn en relativamente pequeas cantidades (KarrLilienthal y otros 2005). Alrededor del 17% de azcares de bajo peso molecular
consisten en una mezcla de glucosa, arabinosa, galactosa, fructosa, y sacarosa (y
Grieshop otros 2003). Un mrito adicional de SBM como una fuente potencial de
azcares fermentables para la produccin de etanol es que despus de azcares son
extradas selectivamente, una comida rica en protenas se quede atrs, que puede ser
utilizado para la alimentacin animal. Antes de SBM se puede utilizar como un sustrato,
azcares fermentables necesitan para ser liberado de la matriz slida, por hidrlisis con
cido diluido u otros mtodos.
Para esta investigacin, la capacidad de 2 microorganismos Saccharomyces cerevisiae
y Zymomonas mobilis-fermentar SBM hidrolizados fue probado. S. cerevisiae es uno de
los organismos ms comunes utilizados en las fermentaciones industriales etanlicos.
Es altamente robusto, resistente a los inhibidores txicos, y altamente tolerante de bajo
pH niveles, lo que minimiza el riesgo de contaminacin (Weber y otros 2010). Z. mobilis,
es una bacteria Gram-negativa, es atractivo para la produccin de etanol debido a su
alta productividad. Una desventaja es que Z. mobilis tiene baja resistencia a los
inhibidores txicos y puede fermentar solamente glucosa, fructosa, y sacarosa (Rogers
y otros 1982; Doran 1997; Weber y otros 2010).
El objetivo de esta investigacin fue evaluar la capacidad de los S. cerevisiae y Z.
mobilis para producir etanol a partir de hidrolizados de cido de SBM como sustratos.
Los parmetros cinticos de la fermentacin se determinaron utilizando el modelo
logstico.

MATERIALES Y METODOS
Los sustratos para la fermentacin
Cinco hidrolizados de SBM comerciales fueron utilizados como sustratos para las
fermentaciones. Los hidrolizados se obtuvieron por tratamiento de harinas de soja con
cido sulfrico diluido bajo la siguiente condiciones: 135 C durante 45 min a 4
concentraciones de cido (0,0%, 0,5%, 1,25%, y 2,0% de H2SO4) y 120 C, 1,25% de
H2SO4 para 30 min. En investigaciones anteriores, estas condiciones han demostrado
producir las ms altas concentraciones de azcares fermentables (Lujan-Rhenals 2013).
Los hidrolizados se prepararon por tratamiento de 50 g de SBM con 250 ml de solucin
de H2SO4 en 500 ml PYREXR el almacenamiento de los medios fueron botellas con
tapa rosca (Lujan-Rhenals 2013). Para evitar la presin y acumulacin dentro de las
botellas durante el tratamiento trmico, gorros no fueron completamente apretados. Un
Autoclave de vapor Tuttnauer 2340E (Tuttnauer EE.UU., Delran, Nueva Jersey, EE.UU.)
operado de acuerdo al programa preestablecido # 1 (de escape rpido sin secado), el
cual se utiliz para la hidrlisis.

Tabla 1-diseo experimental para la fermentacin etanlica de hidrolizados de


harina de soja con S. cerevisiae NRRL Y-2233 y Z. mobilis NRRL B-4286.

Anlisis. Despus del tratamiento trmico, la reaccin se detuvo por el enfriamiento de


la mezcla en un bao de hielo-agua seguido por la modificacin de pH a un rango entre
5,0 y 5,5 con grnulos de NaOH. El Slidos y el lquido A continuacin se separaron por
centrifugacin a 3900 xg durante 35 min a 10 C en una centrfuga Allegra X-22R con
una SX4250 Rotor (Beckman Coulter Inc., Brea, Calif., EE.UU.). Despus, los
sobrenadantes se filtraron a travs de papel Whatman # 4 filtro (Whatman Plc.,
Maidstone, Kent, Reino Unido), se analiz para la concentracin de azcares
fermentables, y se utiliza como sustratos para la fermentacin. Desde este punto en
adelante, estos sustratos sern denominado caldo de harina de soja (SBMB) que se
enumeran en la Tabla 1.

Cepas microbianas
Las cepas de S. cerevisiae NRRL Y-2233 y Z. mobilis subsp. mobilis NRRL B-4286 se
ofrece como polvos liofilizados de la coleccin de cultivos del Departamento de
Agricultura de los Estados Unidos (USDA), Servicio de Investigacin Agrcola (Peoria,
Ill., EE.UU.)
Anlisis azcar fermentable
Los azcares fermentables en los hidrolizados fueron analizados con (HPSEC-RI)
Cromatografa de exclusin por tamaos y Refractiva Index de deteccin conectada en
serie.
(HPSEC-RI) Anlisis de glicerina y mono, di y triglicridos por cromatografa
de exclusin molecular
Las columnas fueron precedidas por una manada Shodex OH SB-G (50 6 mm)
columna de seguridad.
La columna y columna de seguridad eran mantenidos a 55 C en un calentador de
columna. Una solucin de 0,1 M NaNO3 con 0,2% NaN 3 para ejecutar isocrticamente a
un caudal de 0,4 ml / min fue utilizado como la fase mvil. Los azcares se cuantificaron
usando curvas de calibracin de 6 puntos con fructosa y glucosa como estndares.
Las clulas reactivacin y preparacin de pre inculo e inculo
Tanto S. cerevisiae y Z. mobilis se reactivaron en 5 ml de levadura malta (YM) caldo
(Dickinson and Company, Sparks, Md., EE.UU.) y se incubaron a 30 C durante 24 h en
un agitador orbital (Thermo Cientfico Max Q 4450, Dubuque, Iowa, EE.UU.) fijado a 150
rpm.
El pre inculo consista en 5 ml de sterileYMbroth a 30 C donde tanto S. cerevisiae y
Z. mobilis se inocularon por separado y crecido durante la noche en el agitador orbital.
Para cada respectiva cepa, 0,2 ml del cultivo se sembr a cabo con un bucle sobre la
superficie de 2 platos de Petri que contienen agar YM (20 g / L de glucosa, 3 g / L de
extracto de levadura, 5 g / L de peptona, y 3 g / L de extracto de malta) y crecido
durante la noche a 30 C antes de aadir al inculo final.
El inculo se prepar mediante la adicin de todas las colonias formadas en ambos
platos a 80 ml de SBMB y permitiendo que las clulas se adapten por incubar durante la
noche a 30 C en el agitador orbital.

Fermentacin
Las fermentaciones se llevaron a cabo a 30 C durante 36 h con una inicial de pH de 5
a 5,5, oxgeno disuelto (DO%) de menos de 1% despus de estabilizacin, y una
concentracin de biomasa inicial entre 7 106 y 1 107 clulas / mL (Mullins y Nesmith
1987; Siqueira y otros 2008; Laopaiboon y otros 2009). El fermentador fue una 1.3LBioflo / CellinGen 115 sobremesa fermentador y biorreactor (New Brunswick Scientific,
Edison, NJ, EE.UU.) con sistemas de control para la temperatura, el pH, % DO,
agitacin, y el nivel de espuma. Durante la fermentacin, se tomaron muestras cada 4 h
para estimar la fermentacin parmetros cinticos tasa mxima de crecimiento
especfico (max), rendimiento de biomasa a partir de azcar (Yx / s), y el rendimiento
de etanol a partir de azcar (Yp / s) -junto con la productividad volumtrica de etanol, rp
(g / l / h). La densidad celular (nr. De clulas L /) se determin con un hemocitmetro
(Doble Neubauer Contando Cmara, 3110, Hausser Cientfico, Horsham, Pa., EE.UU.) y
un microscopio de contraste de fase (Nikon Eclipse E400, Nikon Corporation, Tokio,
Japn). La densidad celular se correlacion con una curva de calibracin de peso seco
celular obtenido mediante el secado de soluciones acuosas de concentraciones
conocidas de clulas a 80 C durante 20 a 24 h (Alfenore y otros 2002; Bhner y
Agblevor 2004). Todos los parmetros cinticos se calcularon utilizando las siguientes
ecuaciones:

Donde x y s representan las concentraciones de biomasa celular (g / L) y sustrato (g / L),


respectivamente.

Donde P representa la concentracin de etanol (g / L)

Donde rs = g azcar consumida / L, rx = g celular producido / L h, y rp = g de etanol


producido / L h.
Cintica de crecimiento y desarrollo de modelos para el etanol fermentacin
Se determinaron los parmetros cinticos de la produccin de biomasa con el modelo
logstico (ecuacin (6)) (Wang y otros 2004).
(6)
Donde dx / dt es la tasa de biomasa durante el tiempo de fermentacin (g clula / h),
max es la tasa de crecimiento especfica mxima (h-1), x es la concentracin de
biomasa (g / L), y xmax es la biomasa mximo concentracin (g / L).
Teniendo en cuenta las siguientes condiciones de contorno: t = 0, x = x o, S = S0, y P = 0,
Por lo tanto, la ecuacin (6) se integr y la ecuacin (7) se obtuvo como resultado, que
se refiere a la produccin de biomasa (X) y la fermentacin se utiliz el tiempo (t) y para
ajustar los datos experimentales.
(7)
Para el clculo de los parmetros cinticos, solamente glucosa y fructosa se
consideraron-sustratos limitantes de crecimiento debido estos azcares se consumen
en el ms alto y ms consistente cantidades por los microorganismos de acuerdo con el
anlisis HPLC.
Diseo experimental
Para la fermentacin, el diseo experimental fue un completo diseo de bloques al azar
con el tipo de microorganismo y el caldo como factores (Tabla 1). En cada nivel, los
experimentos se llevaron a cabo dos veces.
El anlisis estadstico

Los datos se analizaron con SAS versin de software 9.2 (SAS Inst. Inc.,Cary, NC,
EE.UU.) Y los parmetros cinticos max, xmax, y xo a determinar. Anlisis de covarianza
(ANCOVA) se utiliz para ajustar los datos al modelo logstico no lineal usando el
Gauss-Newton mtodo de regresin y comparaciones de cada coeficiente de regresin
en todos los tratamientos.
Para las concentraciones de inhibidor mnimo y los parmetros cinticos, los datos se
analizaron con JMP versin 9.0.0 (SAS Inst. Inc.). Para analizar los parmetros
cinticos (Yp / s, Yx / s, ms, y qp), y se utiliz un anlisis de varianza (ANOVA) Se
analizaron las diferencias en la media de los parmetros cinticos mediante la prueba
de Tukey-Kramer ( = 0,05).
Resultados y discusin
La fermentacin del etanol con S. cerevisiae y Z. mobilis
S. cerevisiae exhibi respuestas ptimas para la produccin de etanol, el consumo de
azcares, y el crecimiento celular en todo el SBM caldos utilizados en este estudio
(Figura 1). Sin embargo, en la mayora de fermentacin caldos, Z. mobilis no fue tan
eficiente (Figura 2) Esta bacteria no exhibi crecimiento con la SBMB3 hidrolizado (135
C, 2% de H2SO4, 45 min), pero con la SBMB1 (135 C, 0,5% de H2SO4, 45 min)
muestra su etanol mximo produccin. S. cerevisiae, por otra parte, demostr una
rpida el consumo de azcar, probablemente porque es un microorganismo robusta que
no se vio afectada crticamente por los inhibidores presentes en la mayora de la SBMB
hidrolizado (Lujan-Rhenals y otros 2014). Zymomonas mobilis se vio afectada por los
compuestos inhibidores de la SBMB ((Lujan-Rhenals y otros 2014) y tambin por la
presencia de sales procedentes del hidrolizado, tales como acetato de sodio
(CH3COONa) que es la sal de sodio del cido actico formado durante el sulfato de
reaccin y de sodio (Na2SO4) formado durante la neutralizacin del cido sulfrico con
hidrxido de sodio. (Yang y otros 2010) demostr que la combinacin de iones Na + y
elevadas de acetato condujo a un efecto inhibidor sinrgico sobre la cepa ZM4.
Cintica de consumo de sustrato durante la fermentacin
S. cerevisiae exhibi su consumo ms rpido de azcar 15.6 g / l durante las primeras
12 h de fermentacin con la SBMB4 (120 C, 1,25% de H2SO4, 30 min) y 15,1 g / L
durante la primera 12 h de fermentacin con la SBMB1 (135 C, 0,5% de H2SO4, 45
min) (Figura 1e).Por otro lado, los caldos de preformas desde la ms severa
tratamientos de hidrlisis parecan resultar en una baja tasa de azcar utilizar a partir

del caldo de fermentacin por S. cerevisiae (Figura 1e). Esta baja tasa de consumo de
azcar se produjo debido a los compuestos txicos formado durante el proceso de
hidrlisis que reduce el crecimiento de la levadura (Lujan-Rhenals y otros 2014). Z.
mobilis tambin expres su ms rpida absorcin de azcar de 15,0 g / L por 16 h de
fermentacin con la SBMB1 (135 C, 0,5% de H2SO4, 45 min) (Figura 2b). Al igual que
en S. cerevisiae, Z. mobilis tena bajo las tasas de consumo de azcar aparente durante
el crecimiento en los caldos (Figura 2C y 2D) como resultado de los pretratamientos
ms graves, particularmente SBMB2 (135 C, 1,25% de H2SO4, 45 min), que es
probablemente debido al efecto inhibidor del cido actico y sales como discutido
previamente.
En general, los coeficiente de mantenimiento ms (g azcar consumida / g celular h) para
ambos microorganismos no di estadsticamente significativa diferencias con excepcin
de S. cerevisiae con SBMB2 y SBMB3, que dio valores ms altos (2,7 y 2,8 g de
azcar / g de clulas h, respectivamente) que los otros coeficientes (Tabla 2). Sin
embargo, numricamente, todos los coeficientes para ms de Z. mobilis eran ms bajos
que los coeficientes EM calculado para S. cerevisiae que significa que las bacterias
aparentemente requiere menos sustrato de carbono por clula de la levadura. Este
resultado tambin se ha informado anteriormente por (Dien y otros, 2003). Por lo tanto,
Z. mobilis utiliza menos de sustrato por gramo de clulas producidas de S. cerevisiae y
tiene ms de carbono disponible para la produccin de etanol (Dien y otros, 2003).
Cintica de la produccin de etanol
S. cerevisiae exhibi su produccin mxima de etanol de 8 g / L durante la primera 8 h
de fermentacin de la SBMB1 (135 C, 0,5% de H2SO4, 45 min) y SBMB4 (120 C,
1,25% de H2SO4, 30 min). En contraste, la produccin de etanol ms baja (5,67 g / L de
etanol) se produjo con la SBMB3 (135 C, 2% de H2SO4, 45 min) despus de 28 h de
fermentacin, donde, posiblemente, algunos compuestos inhibidores de (sales de
acetato, a partir de cido actico, y otra no identificada txicos sustancias) podran
haber reducido la productividad de etanol.
La produccin de etanol por Z. mobilis alcanz un mximo de 9,2 g / l de etanol despus
de 20 h de fermentacin con la SBMB1 (135 C, 0,5% de H2SO4, 45 min). El SBMB0
(135 C, 0% de H2SO4, 45 min) permite una tasa mxima de etanol de 3,9 g / L de
etanol despus de 20 h de fermentacin.
Sin embargo, los niveles ms bajos de produccin de etanol-1 g / L a 20 h-se han

cumplido con la SBMB2 (135 C, 1,25% de H2SO4, 45 min) y SBMB4 (120 C, 1,25%
de H2SO4, 30 min), que es probablemente causado por los inhibidores (acetato a partir
de cido actico, otras sales, y compuestos desconocidos). Ha habido informes
anteriores de que la produccin de etanol con Z. mobilis y su crecimiento se puede
reducir sustancialmente incluso con bajas concentraciones (2-8 g / L) de cido actico
(Wang 2008).
El rendimiento de etanol (Yp / s, g etanol / g de azcares) en la Tabla 2 no mostr
diferencias estadsticas significativas entre los 2 y los microorganismos respectivos de
caldos de preformas utilizadas. Sin embargo, numricamente ambos microorganismos
mostraron rendimientos de etanol similares a los valores tericos, que es 100% para
0,51 g de etanol / g de azcares (Doran 1997).
Las fermentaciones en el SBM0 y SBMB1 dieron los ms altos rendimientos de etanol,
96% del rendimiento terico para ambos microorganismos, que son comparables o
incluso superiores a valores reportados en la investigacin anterior (Siqueira y otros
2008; Zhang y Feng 2010; Da Cunha-Pereira y otros 2011; Letti y otros 2012; Romao y
otros 2012). Adems, la productividad volumtrica ms alta etanol (rp) para S.
cerevisiae era logrado con el SBM1 (1,01 g de etanol / L h) y SBMB4 (1,00 g de etanol /
L h), sin diferencia significativa entre el 2, pero diferan con respecto a los otros caldos
utilizados en esta investigacin (Tabla 2). Estos valores de S. cerevisiae son
comparables, y algunos ms altos que los reportados por otros investigadores (Da
Cunha-Pereira y otros 2011). Sin embargo, Z. mobilis alcanz una productividad
volumtrica mxima etanol (rp) de 0,61 g de etanol / Lh slo con el SBM1, que es
inferior a los valores, 1.4 a 1.8 g de etanol / Lhwith Z. mobilis durante la produccin de
etanol a partir de melaza de preformas (Letti y otros 2012). Adems, es menor que 2,8 g
de etanol / Lh obtuvo para la produccin de etanol con Z. mobilis de patata dulce (Zhang
y Feng 2010); sin embargo, es mayor que 0,59 g / Lh usando material lignocelulsico
como sustrato (Mohagheghi y otros 2002). Estos resultados demuestran que la
aplicacin de Z. mobilis para la fermentacin de etanol no es factible cuando el sustrato
es caldo de SBM obtenida bajo las condiciones aplicadas en estos experimentos. Esto
es probablemente debido a la alta concentracin de cido actico, sales y otros
compuestos desconocidos txicos formados durante la hidrlisis cida en los caldos
obtenidos bajo tratamientos severos.

Tabla 2- Medios de parmetros cinticos de la fermentacin del etanol en cultivo


discontinuo con S. cerevisiae NRRL Y-2233 y Z. mobilis subespecies mobilis
NRRL B-4286 en hidrolizados caldos harina de soja SE. Acrnimos definidos en
la Tabla 1.
Viene tabla

Cintica de crecimiento de la biomasa y el desarrollo de modelos para la


fermentacin
Los datos reportados en la Figura 1a indican que S. cerevisiae cedi su concentracin
mxima de biomasa (2,3 g / L) despus de 12 h de fermentacin anaerbica cuando se
expone a la SBM0 (135 C, 0% de H2SO4, 45 min), seguido por tratamiento enzimtico
con celulosa. Del mismo modo, Tambin se lleg a esta concentracin mxima de
biomasa (2,3 g / L) con SBMB4 (120 C, 1,25% de H2SO4, 30 min) a 24 h. Sin
embargo, SBMB3 (135 C, 2% de H2SO4, 45 min) mostr una importante inhibicin de
crecimiento de la levadura ya que la biomasa dio no ms de 0,5 g / L despus de 32 h
de fermentacin. En general, la produccin de biomasa de S. cerevisiae parece estar
asociado directamente con la produccin de etanol.
Z. mobilis exhibi su ms alta concentracin de biomasa, 3,9 g / L, despus de 20 h de
fermentacin (Figura 7.2a) con el SBMB0 (135 C, 0%, H2SO4, 45 min), seguido por

tratamiento enzimtico con celulasa. Del mismo modo, la biomasa producida (3,3 g / L)
cuando se fermenta el SBMB1 (135 C, 0,5% de H2SO4, 45 min) estaba muy cerca de
la primera, pero requiere 24 horas para llegar a este nivel. En contraste, SBM2 (135 C,
2% de H2SO4, 45 min) mostr los efectos inhibitorios sobre el crecimiento primario de
Z. mobilis debido a mayores concentraciones de sales,
Figura 2-perfiles de fermentacin de los caldos de preformas con Z. mobilis NRRL B-4286.
Acrnimos definidos en la Tabla 1

Tabla 3-medias de los parmetros del modelo logstico de la fermentacin del etanol en cultivo
discontinuo con S. cerevisiae NRRL Y-2233 y Z. mobilis subespecies mobilis NRRL B-4286 en
hidrolizados caldos harina de soja SE. Acrnimos definidos en la Tabla 1.

Viene tabla
cido actico, y otros inhibidores en el caldo que restringe su crecimiento (doran 1997;
yang y otros 2010). En general, z. mobilis tambin mostr la produccin de etanol de
crecimiento asociado con la excepcin de los caldos donde las bacterias eran
considerablemente inhibida.
Los datos de las respuestas de crecimiento de clulas ajustaron a un modelo logstico
durante la primera 24 h de fermentacin se muestran en la Tabla 3. Las tasas de
crecimiento especficas mximas (max) muestra que en el SBM0 y SBMB4, max para
S. cerevisiae (0,63 y 0,60 h- 1, respectivamente) fueron mayores pero no
significativamente diferente de max para Z. mobilis, 0,55 h-1, en el sustrato T3C0t3.
Wang y otros (2004), tambin utilizando el modelo logstico, reportaron una max de 0,1
h-1 para la fermentacin etanlica de jugo de manzana con S. cerevisiae (Huang
andWang 2010) obtuvo una max de 5,2 h-1 utilizando Saccharomyces diastaticus con
mixta azcares como sustrato. Mohagheghi y otros (2002) informaron de Z. mobilis un
max de 0,34 h-1 para la fermentacin etanlica de biomasa lignocelulsica hidrolizada.
En general, max para S. cerevisiae fue mayor para los sustratos obtenidos con
tratamientos previos de menor gravedad; Z. mobilis max no mostraron el mismo
patrn, debido al efecto de los inhibidores presentes en algunos de los caldos de

preformas.
La concentracin inicial de biomasa (x0) no fue significativamente diferente entre todos
los caldos para ambos microorganismos, lo cual es una indicacin de que el inculo se
prepar de forma homognea y se introduce en cada caldo de SBM. El otro parmetro
cintica derivada ajustando el modelo logstico a las primera 24 h de fermentacin era la
concentracin mxima de biomasa (xmax). Para S. cerevisiae, xmax fue de 2,28 y 2,23
g / L para SBMB0 y SBMB4, respectivamente, mientras que el xmax mximo para Z.
mobilis era 3,79 g / L y 5,1 g / L para la SBMB0 y SBMB1, respectivamente. El
rendimiento de biomasa a partir de sustrato (Yx / s) enumerados en la Tabla 2 fue
significativamente mayor (P = 0,05) para S. cerevisiae (0,1 g de clulas / g de azcar
consumido) de Z. mobilis (0,08 g de clulas / g de azcar consumida) cuando se
fermenta el SBMB1. Los valores ms altos con S. cerevisiae que mobilis Z. Tambin
han sido reportados por otros investigadores (Dien y otros 2.003, Aitabdelkader y Baratti
1993). Esta es una funcin de la mejor resistencia de la levadura a los inhibidores
presentes en estos sustratos (Weber y otros 2010). Sin embargo, con SBM2 el efecto
era el contrario, el valor de Z. mobilis fue de 0,15 g de clulas / g de azcar y para S.
cerevisiae fue de 0,04 g de clulas / g de azcar. No obstante, la mayora de los valores
de S. cerevisiae fueron ms altos que los informes anteriores (Siqueira y otros 2008)
para la produccin de bioetanol a partir de melazas de soja y similares a los valores
(0,14 g / g) inform en otro trabajo (Ahmad y otros 2011)
Conclusiones
S. cerevisiae mostraba buenas cualidades en la produccin de etanol, el consumo de
azcares, y el crecimiento celular para todos cido hidrolizado de soja caldos de
comidas probados sin ningn tipo de nutrientes adicionales, mientras Z. mobilis tena un
rendimiento inferior para la mayora de caldos. Se alcanz la mayor produccin de
etanol de S. cerevisiae, 8 g de etanol / L, (4 g de etanol / 100 g SBM fresco) durante la
primera 8 h de fermentacin con el caldo obtenido a 135 C, 0,5% de H2SO4, 45 min y
el de 120 C, 1,25% de H2SO4, y 30 min. Sin embargo, Z. mobilis dio la mxima
produccin de etanol, 9,2 g / l de etanol, (4,6 g de etanol / 100 g SBM fresco) slo
despus de las primera 20 h con el hidrolizado obtenido a 135 C, 0,5% de H2SO4, 45
min

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