Diseo de un Biorreactor con Aireacin

Un biorreactor con aireacin es por definicin un reactor continuo donde

la entrada F1 es una lnea de alimentacin de aire estril (O 2); la salida
F2 es una lnea de lavado de aire estril y el sustrato limitante de la
velocidad de crecimiento es el oxgeno disuelto (OD).
Existen dos tipos o diseos bsicos de biorreactores con aireacin;
ambos, de uso muy difundido: el primero es tanque agitado con lnea de
aireacin y el segundo es el de levantamiento por aire o "air lift". De
este ltimo existe tambin, una variante que se utiliza para cultivos
aerbicos muy resistentes a esfuerzos cortantes e hidrodinmicos y es la
cama de burbujas o bubble bed.
o sufra un estrs trmico.
Estructura de un biorreactor de Levantamiento por Aire Airlift
Cuando el volumen es muy grande (mayor que 1000 l) o se requiere de
un mayor volumen de aireacin, el sistema CSTR, ya no es eficiente y se
requiere del levantamiento por aire. Debido a que, a mayor volumen de
cultivo, tambin es mayor la cantidad de calor generado; se hace
necesario, aumentar el rea de transferencia de calor y la eficiencia de
refrigeracin; por lo que, el intercambiador de calor de camisa debe ser
reemplazado por uno de serpentn en contra flujo o con circulacin
adyacente a la pared interior del tanque. Ver esquema representado en
la figura.
Al igual que en el diseo de tanque agitado, el aire que ingresa al
biorreactor debe ser estril; esto se consigue, hacindolo pasar por un
filtro microporo de dimetro de poro inferior a los 0,45 micrones (0,2 m
0,1 m) que impida el paso de microorganismos contaminantes. En los
biorreactores de levantamiento por aire o "air lift" la cama de aire
tambin funciona como medio de agitacin; de modo que, se genere una
circulacin fluida de lquido con aire (burbujas) que asciende el
compartimiento interno y luego desciende por el compartimiento
externo, favoreciendo el mezclado perfecto.
Transferencia de 02 y Balance de Oxgeno
La velocidad de transferencia de 02 (r02) desde el seno de la fase
gaseosa (burbujas) hasta la fase lquida (medio lquido) est
determinada por la siguiente ecuacin: rO2 = Kla (C*- C) donde KLa es
el coeficiente volumtrico de transferencia de oxgeno; C la
concentracin de 02 disuelto en el seno del lquido y C* la concentracin
de O2 disuelto en equilibrio con la presin parcial de oxgeno de la fase

gaseosa. El KLa y por lo tanto el grado de transferencia de oxgeno

desde el seno del lquido hasta las clulas o microorganismos en cultivo,
dependen del diseo del biorreactor y de las condiciones de operacin
del sistema de cultivo: caudal de aire, volumen del lquido, rgimen de
agitacin, rea de transferencia y viscosidad del cultivo. En general,
disminuyen el KLa: la viscosidad y el volumen del lquido y aumentan el
KLa: el rea de transferencia, la agitacin y la presencia de dispositivos
que aumenten una, la otra, o ambas.
La ecuacin de balance de oxgeno en el estado estacionario es:
d(VCO2) / dt = F (C C*) VrO 2 + VNiO2 donde Ni es la velocidad de
transferencia de un componente del gas (oxgeno) al lquido (medio).
Dado que el oxgeno es el sustrato limitante de la velocidad de
crecimiento, cuando el cultivo se encuentra en crecimiento, el flujo de
entrada oxgeno (FiO2) ser mayor al flujo de salida de oxgeno (FfO 2)
debido al consumo de oxgeno disuelto en el lquido por parte de las
clulas o microorganismos en crecimiento y/o divisin celular. En este
caso, la ecuacin de balance de oxgeno para clulas o
microorganismos en crecimiento es: d(VCO2) = FiO2C FfO2C*
VrO2 + VNiO2 es decir, debe utilizarse la ecuacin general.
Sistema de Aireacin
El sistema de aireacin externamente comprende las lneas de entrada
Fi y salida de aire Ff e internamente debe optimizar la transferencia de
gases nutrientes (aire) hacia el medio lquido. Un sistema de aireacin
consta de cuatro partes mecnicas: fuente de aire; tubera y filtros de
entrada; boquilla y difusor de aire; tubera y filtros de salida. Y tres
partes de control: control de flujo aire; control de presin de aire; control
de difusin de oxgeno disuelto.
Fuente de Aire: dado que el sistema de aireacin, en su conjunto,
depende de la correcta eleccin del dispositivo que suministrar la
fuente de aire, se suguieren dos opciones:

1. Compresor de Aire: su principal caracterstica es que opera con:

alta presin y bajo caudal de aire; por eso, cuando operan, es de
manera continua o, cuando se requiere capacidad, debe haber un
tanque de almacenamiento a alta presin como parte del sistema.
Una segunda e importante caracterstica es que produce un alto
nivel de ruido 80dB y una tercera es que, si el compresor es de
tipo pistn debe lubricarse con aceite, por lo que, sta
caracterstica se incluye en el diseo como: autolubricado (oiless)

o no lubricado (oil lubricated). Existen dos tipos de diseo

constructivo para compresores de aire:
a) El compresor de diafragma: esta diseado para un trabajo de
operacin contnua; su presin operacin es moderada 60 psia y como
su nombre lo indica, utiliza un diafragma o fuelle para impulsar y
comprimir el aire. El compresor de diafragma resulta adecuado para
oxigenar volmenes medianos de cultivos o microorganismos aerbicos.
b) El compresor de pistn: es ms utilizado comercialmente, no
obstante, para cultivos celulares sensibles (clulas de membrana
plasmtica), no es recomendable, por cuanto, su presin de operacin es
muy alta (80 psia o ms) para estos cultivos y puede causar dao celular
severo o la lisis de las clulas; y porque, el pistn debe lubricarse con
aceite y esto ocasiona que se filtre en pequeas cantidades a la
corriente de aire.
1. Soplador Regenerativo: se caracteriza por funcionar como si

fuera una bomba centrfuga de succin y desplazamiento de aire

por lo que, opera con presin negativa (vaco) en la succin y
presin positiva (compresin) en el desplazamiento. Aunque su
rango de accin es pequeo: 20H2O a 40H2O en cuanto a las
presiones de operacin, su capacidad de desplazamiento de aire
es muy alta 30 cfm - 50 cfm o 1000 L/min - 1500 L/min por lo que,
puede movilizar grandes volmenes de aire.
Tubera - Lnea de Aire: esta debe ser de acero inoxidable.
Filtros de las Lneas de Aire: para sistemas pequeos de dimetros
de tubera estndar, se utilizan filtros en lnea con la tubera; estos son
de membrana microporo que filtran el 99,99% de los contaminantes.
Para sistemas mayores (industriales) debe disearse un mtodo de
esterilizar in situ la lnea de aire; generalmente se hace calentando
fuertemente la lnea de aire y luego enfriarla. Las membranas microporo
que filtran el aire tienen un punto de burbuja que es la presin de agua
mxima que pueden soportan antes de romperse (recuerde que el
sistema tiene un medio lquido) y un flujo mximo el cual es el mximo
caudal que puede soportar la membrana antes de su ruptura.
Sistema de Difusin de Oxgeno Disuelto: debe optimizar al mximo
la transferencia de oxgeno disuelto al medio lquido. El sistema consta
de dos partes mecnicas: boquilla y difusor de aire; una parte de
medicin: sensor de oxgeno disuelto y una de control: controlador de
oxgeno disuelto.

Difusor de Aire: los cultivos aerbicos requieren que la corriente de

aire estril que se difunda en la forma de miles de pequeas burbujas,
desde el difusor de aire, hacia el volumen del lquido; esta accin se
realiza mediante un plato o domo cilndrico de acero inoxidable
finamente perforado. Alternativamente y si el sistema es pequeo o
mediano en escala, se puede utilizar un difusor de material cermico
poroso el cual, tiene la ventaja de que, provee una cama ms fina de
burbujas (de menor dimetro) y mayor rea de transferencia (volumen
de burbujas).
Control y Regulacin del Flujo de Aire: recuerde que las membranas
que filtran el aire tienen un punto de burbuja y un flujo mximo por
encima del cual, se rompen; por eso, se debe regular el flujo de aire y
controlar la presin en la lnea de aire. La forma ms econmica de
hacerlo es manualmente, con un manmetro para presin. Existe
tambin la versin digital, ms costosa, pero que, controla de forma
automtica el flujo de aire y la presin, segn se escoja.
Control y Medicin del Oxgeno Disuelto (OD): adems de regular
el flujo y la presin del aire en la lnea o tubera, se debe controlar el
valor y la concentracin del oxgeno disuelto (OD) dentro del medio
lquido; variable que puede medirse en dos formas (parmetros):
a) Oxgeno Disuelto (OD): es la concentracin de oxgeno disuelto
requerido para la reduccin qumica de un equivalente en iones sulfito
(de sodio) a la cantidad de materia orgnica presente en el medio
lquido que se debe oxidar.
b) Demanda Bioqumica Oxgeno (DBO): es la taza de oxidacin
biolgica o demanda bioqumica de oxgeno disuelto requerida por el
microorganismo o clula en cultivo para oxidar la materia orgnica
presente en el medio lquido.
La tasa especfica de consumo de oxgeno de un cultivo est
determinada por la velocidad de transferencia de oxgeno (r02) y el KLa
que la correlaciona; recuerde que: rO2 = Kla (C*- C). Se debe conocer la
r02 para poder determinar el KLa; el valor de r02 se consigue en la
literatura; la concentracin de oxgeno disuelto en el lquido (C) es
equivalente al valor de OD, e instrumentalmente, se llama: razn de
toma de oxigeno (OUR) por sus siglas en ingls; el equivalente a C*
(concentracin de oxgeno disuelto en el lquido en equilibrio con el gas)
es la demanda bioqumica de oxgeno (DBO) que, instrumentalmente se
llama: razn especfica de toma de oxigeno: SOUR (specific oxygen
uptake rate). Ambas razones pueden medirse regularse con un
controlador OUR/SOUR de uso comercial.

Una probeta o electrodo OD es un sensor que mide la concentracin

de oxgeno disuelto en el medio lquido. Similarmente, una probeta o
electrodo BOD mide la concentracin de oxgeno disuelto en el medio
lquido en equilibrio con el gas. ) En ambos casos, el material de su
construccin debe ser acero inoxidable y su especificacin es por la
longitud de inmersin (H) y dimetro (D) de la probeta.
Nota: todas la imgenes de los instrumentos y equipos fueron tomadas
del Catlogo en Internet de Cole Parmer: www.coleparmer.com