I.

PROCEDIMIENTO
DETALLADO:
1RO.- Se debe Poner en papel craft los bisturs, pinzas, tubos de
ensayo, un vaso de vidrio para llevarlo a esterilizar.
2DO.- Limpiar la superficie del rea de trabajo, en este caso la cmara
de flujo laminar, con hipoclorito de sodio al 25% y luego con etanol al
70%.
3RO.- Encender la cmara de flujo laminar y colocar el mechero por
unos 15 minutos antes de empezar a trabajar.
4TO.- Introducir todos los materiales necesarios para el cultivo in vitro
a la cmara no sin antes haberlos esterilizados con etanol al 70 %.
5TO.- Las pinzas y los bistures deben estar sumergidos en un tubo de
ensayo que contiene un pedazo de algodn con etanol al 70% hasta el
momento de su uso. Cuando llegue el momento de su uso se debe
primero flamear y esperar a que enfriara.

6TO.- Luego colocar sobre la mesa de la cmara papel esteril y

proceder a extraer explantes sobre el papel.

7MO.- Cortar el material en la forma que mas convenga (yemas) y

seleccionar las yemas mas jvenes.

8VO.- Con las pinzas, introducir el material seccionado dentro del

medio MS ligeramente.
9NO.- Tapar el frasco con el medio con plastic wrap, sujetndolo con
ligas.

10MO.- Los frascos con el explante dentro se debern poner en una

bandeja que contenga hipoclorito de sodio ms agua.

II. VI.
RESULTADOS
DISCUSIN:
o

1RA SEMANA: el explante llego a adaptarse al medio MS y

llego a crecer o desarrollarse los explantes.

2DA SEMANA: los explantes siguieron con su desarrollo normal

sin presentar ningn tipo de agente contaminante.

III. Conclusiones:
o

Mediante el cultivo in vitro se puede obtener mayor cantidad

de explantes por medio de la multiplicacin.

Al momento de cultivar, teniendo las condiciones aspticas

adecuadas se lograra que el medio no presente ningn tipo
de contaminante y as el explante logre su desarrollo ptimo.

IV. Cuestionario:
Cul es la diferencia entre aislamiento y repicado en el cultivo in vitro?
-

Repicado: Se entiende por repicado a la supresin de parte del

sistema radical para forzar a este o estimular su ramificacin
favoreciendo
las
condiciones
y
xito
del
trasplante.

Operacin consistente en sacar las plantas de su contenedor y

recortarles ligeramente las puntas de las races, con el fin de que
stas ramifiquen y formen as un sistema radicular mayor y ms
homogneo, dando as una planta de ms calidad.
Describe la influencia del material vegetal sobre el crecimiento y
desarrollo vegetal in vitro.
-

Tiene mucha influencia sobre el material in vitro en desarrollo. Para

poder introducir los explantes dentro del medio de cultivo, la planta
madre debe establecerse en condiciones de asepsia para poder
obtener explantos con un nivel nutricional y un grado de desarrollo
adecuado.

Segn la polaridad Los explantes se pueden situar en el medio

nutritivo de diferentes formas?
-

La mejor manera es posicionarlo como estuvo en la planta madre,

pero si se hace al contrario por fototropismo el explante crecer
hacia donde este la luz.

Qu otros mtodos se utilizan para la

instrumentos en la cmara de flujo laminar?

esterilizacin

de

los

Se usa etanol al 70% para desinfectar los instrumentos antes de

meterlo dentro de la cmara.

Los instrumentos como las pinzas, bistures, tubos de ensayo, papel,

agua esterilizada se esterilizan en el autoclave.

Otra forma de esterilizar los instrumentos es ponindolos en la

estufa pero por un promedio de 2 a 3 horas.

VII.BIBLIOGRAFA:
HURTADO, D., MERINO, M. Cultivo de tejidos vegetales. Editorial
Trillas. Mxico. 2000.
AYERBE, L. Cultivo in vitro de las plantas superiores. Ediciones
MundiPrensa. Espaa. 1990.
ROCA, W., MROGINSKI, L. Cultivo de tejidos en la agricultura.
Fundamentos y aplicaciones. Centro internacional de Agricultura
Tropical (CIAT). Colombia. 1993.