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Guia AP Estudiantes LAB AMB M-II
Guia AP Estudiantes LAB AMB M-II
LABORATORISTA AMBIENTAL
MDULO II
MXICO 2006
GUA DE APRENDIZAJE
MDULO II
Anlisis de agua
CLAVE: BME317
Enero de 2006
1
Profesores que elaboraron la estructura y los programas de estudio del segundo mdulo: Leticia
Ortuo Bravo, Mara Andrea Leal Prez y Alfonso Montalvo Arrieta.
Coordinadores de la DGECyTM:
M. en C. Gildardo Rojo Salazar
Ocean. Vctor Manuel Rojas Reynosa
Q. B. P. Francisco Escamilla Rodrguez
Bil. Rodrigo Nava Mora
Edicin:
M. en C. Jessica Noemi Montao Vargas
M. en G. Itzia Calixto Albarrn
Primera edicin: 2006.
Subsecretara de Educacin Media Superior, SEP.
Direccin General de Educacin en Ciencia y Tecnologa del Mar.
Direccin Tcnica.
ISBN: (En trmite)
2
DIRECTORIO
NDICE
Objetivo
Introduccin
Pg.
6
6
1.
2.
3.
4.
15
15
26
30
34
2.1.
2.2.
2.3.
2.4.
2.5.
2.6.
2.7.
2.8.
2.9.
2.10.
44
44
49
56
66
71
77
80
84
87
93
102
102
102
114
126
126
126
126
129
129
129
160
160
160
160
160
160
3.
3.1.
3.2.
3.3.
3.3.1.
3.3.2.
3.
3.1.
3.2.
3.4.
3.4.1.
3.5.
3.5.1.
3.5.2.
3.6.
3.6.1.
Pg.
180
180
181
188
188
188
188
188
189
189
197
OBJETIVO
El objetivo de esta gua es apoyar al estudiante en el aprendizaje del Mdulo II del componente
profesional de la carrera de Tcnico Laboratorista Ambiental. En este documento se encuentra
la informacin sobre los contenidos de los 3 submdulos que lo integran.
El componente profesional desarrolla competencias para el mundo del trabajo, por lo cual se
fundamenta en normas que rigen los procesos, productos y servicios. En este caso el Mdulo
de anlisis de aguas se soporta en la normatividad que existe para los anlisis de aguas en
nuestro pas.
Cabe sealar que sta es slo una herramienta ms para el aprendizaje, de muchas otras que
se pueden utilizar para lograr los objetivos de competencia, sin duda la ltima palabra, ser la
experiencia profesional y didctica del docente facilitador del Mdulo.
INTRODUCCIN
De todas las crisis, ya sean de orden social, econmica o relativas a los recursos naturales con
las que nos enfrentamos los seres humanos, la crisis del agua es la que se encuentra en el
corazn mismo de nuestra supervivencia y la de nuestro planeta.
WATER FOR PEOPLE, WATER FOR LIFE
UNESCO- WWAP 2003 PARIS, FRANCE.
Nuestro medio ambiente y nuestra vida, dependen de un recurso muy conocido, el AGUA.
Mucha gente, piensa que el agua es un recurso inagotable, barato y que por tanto podemos
disponer de l todo lo que nos plazca.
Y ahora que sabemos que existe agua en gran cantidad, cabe preguntarse:
Dnde tenemos toda esa cantidad de agua?
La respuesta es fcil, fundamentalmente dispersa por el universo formando nubes y
concentraciones de agua, tambin contenida en cometas cuando estn a una distancia tan
lejana de las estrellas, que el poco calor que reciben impide que el agua en forma de hielo se
evapore escapando al espacio exterior, y finalmente, en cuerpos de mediano o gran tamao
cuya gravedad permite retenerla como son planetas de un tamao ya considerable como la
Tierra.
Nuestro planeta posee la temperatura ideal para que coexista el agua en sus tres fases slida,
lquida y gaseosa, sin que haya cambios muy bruscos de temperatura, gracias a todo esto
tenemos agua disponible.
Y vaya que si tenemos agua, la superficie de la Tierra est cubierta de unos 205 millones de
kilmetros cuadrados de agua englobados en los ocanos y que representa ms del 71% de la
superficie total del planeta, nicamente el 29% restante es la tierra.
Si tenemos en cuenta el volumen de esta agua considerando una profundidad media de 3,750
metros, estamos hablando de un volumen de agua de 524 millones de kilmetros cbicos, que
expresados en litros seran 524 X1018, o lo que es lo mismo: 524 seguido de 18 ceros!
Representa por tanto el agua de los ocanos un 97.2% del agua total del planeta y cada ao se
evaporan del mar unos 128,000 km3 de agua que posteriormente se precipitan de nuevo en
forma de lluvia o nieve.
Gracias a eso podemos tener unos 320,000 Km3 de agua bajo la superficie de los continentes y
unos 48,000 Km3 sobre la misma, en forma de ros y lagos.
Desgraciadamente, no toda esta agua de la que disponemos es apta para el consumo humano,
ya que la que se encuentra en los mares tiene un contenido de sales elevado, principalmente
cloruro de sodio.
El agua es una sustancia qumica que tiene propiedades muy peculiares, una de ellas es su
gran poder de disolver, se le ha llamado "El solvente universal", es por ello que casi nunca
encontramos agua "pura".
Normalmente el agua se clasifica segn su origen y las sustancias que tiene en solucin:
Clasificacin del agua segn su origen:
Agua superficial.
Agua de ro.
Agua de pozo.
Agua de lagos y lagunas.
Agua de mar.
Agua de lluvia.
Agua destilada.
Agua purificada.
Cada una de ellas tiene en forma disuelta, suspendida o coloidal, diversas sales minerales y
gases en cantidades variables dependiendo de donde procedan.
El agua se clasifica tambin segn el uso que se le da:
El agua tal como existe, pocas veces se puede usar en su forma natural. Se requiere conocer
sus caractersticas fsicas, qumicas y la naturaleza y cantidad de las sustancias disueltas o
suspendidas que contenga, para acondicionar un agua particular al uso deseado.
El agua es muy valiosa que se requiere cada vez en forma creciente, pero no se encuentra
disponible de forma ilimitada. Su demanda en servicios y en la industria, para agua potable y
agua de uso industrial demuestra una tendencia ascendente. En el campo de la proteccin
ambiental, el nmero de lugares en que la contaminacin del agua o agua residual debe
analizarse, crece tambin sin parar. Virtualmente todos los sectores que hacen uso del agua,
estn obligados a controlar la cantidad y naturaleza de las impurezas del agua dentro de lmites
bien definidos.
Los estudios fsico-qumicos del agua son un instrumento imprescindible para la determinacin
de la calidad del agua, ya que sirven para identificar y cuantificar muchas caractersticas y la
posible aparicin de contaminantes.
Las muestras de aguas que se analizan permiten tener un amplio y completo conocimiento de
los parmetros evaluados y as hacer una correcta interpretacin de los mismos. Los anlisis de
aguas tienen muchos campos de aplicacin como son: La evaluacin, anlisis y control de
aguas superficiales que se destinen a la produccin de agua potable, control de calidad de
abastecimiento de aguas potables de consumo pblico, evaluacin de calidad de aguas
continentales destinadas a vida pisccola, control de calidad de aguas de bebidas envasadas,
trmites de registro, control y evaluacin de aguas residuales y el control de calidad de aguas
de bao y recreo.
Entorno sobre la normalizacin en Mxico
Como se mencion en la introduccin de esta gua, los anlisis de aguas estn regidos por
normas tcnicas que establecen los lineamientos de procedimientos, reactivos, condiciones de
realizacin, etc., los cuales le dan validez y confiabilidad a los resultados tanto para nuestro
pas como en mbito internacional. Por ello incluimos el panorama general de la normalizacin
en Mxico.
Representatividad.
Consenso.
Consulta pblica.
Modificacin.
Actualizacin.
Este proceso se lleva a cabo mediante la elaboracin, expedicin y difusin a nivel nacional, de
las normas que pueden ser de tres tipos principalmente:
Tipos de Normas:
Norma Oficial Mexicana (abreviada como: NOM, PROY-NOM NOM-EM)
Es la regulacin tcnica de observancia obligatoria expedida por las dependencias
normalizadoras competentes a travs de sus respectivos Comits Consultivos Nacionales de
Normalizacin, de conformidad con las finalidades establecidas en el artculo 40 de la Ley
Federal sobre Metrologa y Normalizacin, establece reglas, especificaciones, atributos,
directrices, caractersticas o prescripciones aplicables a un producto, proceso, instalacin,
sistema, actividad, servicio o mtodo de produccin u operacin, as como aquellas relativas a
terminologa, simbologa, embalaje, marcado o etiquetado y las que se le refieran a su
cumplimiento o aplicacin.
Norma Mexicana (abreviada como: NMX PROY-NMX)
Es la que elabora un organismo nacional de normalizacin, o la Secretara de Economa en
ausencia de ellos, de conformidad con lo dispuesto por el artculo 54 de la LFMN, en los
trminos de la LFMN, que prev para uso comn y repetido reglas, especificaciones, atributos
mtodos de prueba, directrices, caractersticas o prescripciones aplicables a un producto,
proceso, instalacin, sistema, actividad, servicio o mtodo de produccin u operacin, as como
aquellas relativas a terminologa, simbologa, embalaje, marcado o etiquetado. En principio es
de aplicacin voluntaria.
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Normas de Referencia
Son las que elaboran las entidades de la administracin pblica de conformidad con lo
dispuesto por el artculo 67 de la LFMN, para aplicarlas a los bienes o servicios que adquieren,
arrienden o contratan cuando las normas mexicanas o internacionales no cubran los
requerimientos de las mismas o sus especificaciones resulten obsoletas o inaplicables. En
principio son normas provisionales.
Dentro del proceso de normalizacin, para la elaboracin de las normas nacionales se
consultan las normas o lineamientos internacionales y normas extranjeras, las cuales se definen
a continuacin:
Norma o Lineamiento Internacional
La norma, lineamiento o documento normativo que emite un organismo internacional de
normalizacin u otro organismo internacional relacionado con la materia, reconocido por el
gobierno mexicano en los trminos del derecho internacional.
Norma Extranjera
La norma que emite un organismo o dependencia de normalizacin pblico o privado
reconocido oficialmente por un pas.
Leyes que sustentan la Normalizacin en Mxico
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Metrologa
Sistema General de Unidades de Medida; Sistema Nacional de Calibracin; Centro Nacional de
Metrologa; Conceptos fundamentales sobre metrologa; Establecer los requisitos para la
fabricacin, importacin, reparacin, venta, verificacin y uso de los instrumentos para medir y
los patrones de medida; establecer la obligatoriedad de la medicin en transacciones
comerciales y de indicar el contenido neto en los productos envasados, etc.
Normalizacin, certificacin, acreditamiento y verificacin
Comisin Nacional de Normalizacin; Sistema Nacional de Acreditamiento de Organismos de
Normalizacin y de Certificacin, Unidades de Verificacin y de Laboratorios de Prueba y de
Calibracin.
La Secretaria de Economa (SECON) lleva el rol principal a nivel federal en las actividades de
normalizacin; SECON coordinara a las dems secretaras y dependencias segn su mbito de
competencia para la integracin del:
Programa nacional de normalizacin
mbito pblico y mixto:
Comisin Nacional de Normalizacin
Aprueba el Programa Nacional de Normalizacin y coadyuva a las actividades de normalizacin
de las secretaras a travs de los Comits Consultivos Nacionales de Normalizacin
Sistema nacional de acreditamiento (Procedimientos para acreditar a los Organismos
Nacionales de Normalizacin, Organismos de Certificacin, Laboratorios de Prueba,
Laboratorios de Certificacin y UVAs)
Direccin General de Normas de la Secretara de Economa
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mbito privado
ORGANISMOS NACIONALES DE NORMALIZACIN: Tienen la competencia para elaborar las
normas.
ENTIDADES DE ACREDITACIN: Reconocen la competencia tcnica y confiabilidad de los
Organismos de Certificacin, Laboratorios de prueba, Laboratorios de Certificacin y UVAs.
La Direccin General de Normas y sus atribuciones
La Direccin General de Normas tiene entre sus funciones otorgar la aprobacin de los
organismos de certificacin, unidades de verificacin, laboratorios de calibracin y laboratorios
de pruebas, que coadyuvan en la evaluacin de la conformidad, cuyo objeto es comprobar que
un producto, servicio o proceso cumple con las especificaciones sealadas en las normas
oficiales mexicanas y en su caso las normas mexicanas, expedidas por la Secretara de
Economa.
Personas acreditadas
Organismos de certificacin
Los organismos de certificacin, son instituciones de tercera parte integrados por los sectores:
Productivo, distribuidor, comercializador, prestador de servicios, consumidor, instituciones
educativas y cientficas, que tienen como objeto social realizar actividades de certificacin.
Adems, garantizan dentro de su estructura administrativa y funcional que operan con
imparcialidad, capacidad tcnica, material y humana adecuada a sus funciones. Para sistemas
de calidad y control ambiental y para certificacin de productos.
Personas fsicas o morales
Unidades de verificacin
Las unidades de verificacin, son personas fsicas o morales, de tercera parte que tienen la
organizacin, el personal, la capacidad e integridad para coadyuvar en la evaluacin de la
conformidad, a travs de la constatacin ocular o comprobacin, mediante muestreo, medicin,
pruebas de laboratorio o examen de documentos en un momento o tiempo determinado, con la
confianza de que los servicios que presta son conducidos con competencia tcnica,
imparcialidad y confidencialidad.
Laboratorios de pruebas
Los laboratorios de pruebas, son instituciones de primera, segunda y tercera parte,
pertenecientes a los sectores: Produvtivo, distribuidor, comercializador, prestador de servicios,
consumidor, instituciones educativas y cientficas, que coadyuvan en la evaluacin de la
conformidad a travs de la aplicacin de mtodos de prueba. Los laboratorios de pruebas
garantizan dentro de su estructura administrativa y funcional que operan con imparcialidad,
independencia, integridad, confidencialidad y con capacidad tcnica, material y humana.
13
14
15
minutos mientras que aguas de buena calidad pueden ser analizadas por perodos ms largos.
Si el personal es limitado, los analistas pueden comprobar sus observaciones despus de dejar
pasar el suficiente tiempo para relajar el sentido del olfato.
1.5.3. No todas las personas son capaces de llevar a cabo este anlisis. Los analistas deben
ser rigurosamente seleccionados para obtener la mejor precisin posible, especialmente cuando
son con fines de investigacin. Si se ejerce el debido cuidado, la mayora de las personas
pueden ser aptas para trabajos de rutina. Es necesario un mnimo de dos personas; una para
hacer la seleccin preliminar y preparar las diluciones y la otra u otras para hacer la
determinacin del olor. Las personas que hacen la determinacin de olor no debern conocer
las diluciones y, en ningn caso, har la determinacin la persona que hizo las diluciones. Las
diluciones se analizarn de un mbito de baja a alta concentracin, pero no debern ser
presentadas en secuencia. Se recomienda introducir blancos o diluciones de baja
concentracin, dentro de los grupos de diluciones.
1.5.4. El color es comnmente impartido por varios tipos de contaminantes en las aguas
residuales. Este color es evidente bajo perceptibles niveles de olor. Un sistema de luz coloreada
se puede usar para eliminar el color y seleccionar las diluciones para el anlisis. Para sto, se
emplea luz fotogrfica con filtros intercambiables.
1.5.5. La turbidez en algunos desechos es perceptible a niveles bajos de olor. El sistema de luz
coloreada descrito en el inciso 6.4 puede no eliminarla. En tal caso, se recomienda pintar los
matraces de tal modo que enmascare la turbidez de la muestra.
1.5.6. Para un mximo control del olor en el laboratorio, ste debe dividirse en dos reas,
separando el rea de preparacin de muestras del rea de deteccin de olores. Esto permite el
aislamiento del analista que hace las diluciones y un mejor control de los olores en el rea de
medicin.
1.6. Aparatos
Bao de temperatura constante, capaz de mantener una temperatura de 313 1 0K (40 1 0C).
Recipientes de vidrio con tapn esmerilado para las muestras. Las botellas de la demanda
bioqumica de oxgeno son adecuadas para este propsito.
Matraces Erlenmeyer de 500 cm de entrada ancha con tapn esmerilado o cubierto con
vidrios de reloj.
Carbn activado, granular. El carbn debe ser renovado despus del tratamiento, por lo
general 20 litros de agua o ms son necesarios.
Agua libre de olor
Preparar agua libre de olor, pasando agua reactivo a un flujo de menos de 1un litroitros/hora
a travs de una columna de vidrio de 0.9 m de longitud y 51 mm de dimetro, empacada
con carbn activado granular. El agua usada para preparar el agua de dilucin libre de olor,
debe tener un contenido de slidos totales disueltos que no exceda del contenido de slidos
disueltos de la muestra por analizar. Todo el sistema, tubera y conexiones debe ser de
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vidrio. Las columnas deben ser empacadas primero con lana de vidrio que sirve de soporte
al carbn activado. Hacer la prueba con el efluente de la columna de 313 K (40 C). sto es
necesario, ya que la cantidad y naturaleza de las impurezas en el agua puede afectar la vida
til del carbn. Tambin se ha visto que en columnas usadas con poca frecuencia se
desarrolla un crecimiento biolgico, el cual imparte olor. Para comprobar las condiciones de
la columna despus de un perodo de descanso, como un fin de semana, se recomienda
hacer una prueba. Llenar un tubo de vidrio pequeo con carbn activado fresco y filtrar a
travs de l. El agua as preparada, debe reunir las mismas caractersticas de calidad de
olor que las de la columna. El agua libre de olor no debe guardarse, sta debe ser
preparada el da en que se hace el anlisis. En general, para ahorrar tiempo durante el
anlisis mantener el abastecimiento de agua libre de olor a 313 1 K (40 1 C)
1.8. Muestreo
1.9. Procedimiento
a) La seleccin de las diluciones para la determinacin de olor depende del orden de magnitud
de intensidad de olor determinado. La persona que determina la intensidad de olor en la prueba
preliminar, deber hacer las diluciones para el otro analista o analistas que harn la
determinacin, pero en ningn caso la har la misma persona. La dilucin primara deber
contener un mnimo de 12.5 cm de muestra. Si son necesarias diluciones mayores agregar
agua libre de olor a la dilucin primaria. Usar stas subsecuentes diluciones en la evaluacin.
b) Las diluciones debern hacerse en tres matraces limpios, libres de olor agregando
aproximadamente la mitad de la cantidad estimada de muestra (prueba preliminar) a uno de los
matraces. Diluir el contenido de cada matraz a un volumen total de 200 cm con agua libre de
olor. Lavar cada matraz y ajustar la temperatura a 313 K (40 C) en el bao de agua. Agitar
vigorosamente los matraces tapados y presentarlos para el anlisis de olor. En la presentacin
de los matraces para la prueba, el matraz que contiene la muestra deber colocarse al azar.
Agitar vigorosamente pero teniendo cuidado de no derramar el contenido. El fondo plano del
matraz ayudar, tapando el matraz o colocando un dedo en la cubierta que se est empleado.
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Esto imparte un olor cerca de la boca del matraz antes de la prueba. La agitacin disminuye la
sustancia olorosa en el vapor del espacio uniformemente. El analista debe quitar la tapa y
colocar la nariz en la punta del matraz percibiendo el olor con una inhalacin normal. Si no se
percibe ningn olor, se deber disminuir la dilucin (incrementando la concentracin) hasta que
se encuentre una concentracin a la cual el olor sea perceptible, usando el mismo
procedimiento. Anotar la dilucin a que se obtuvieron los resultados. Se dan las muestras para
el anlisis, generalmente incrementando las concentraciones pero no en una secuencia de altas
concentraciones. Introducir blancos, todos conteniendo agua libre de olor o algunas diluciones
de concentraciones muy bajas durante el anlisis para eliminar conjeturas o anticipaciones del
nivel umbral de olor.
19
Colocar la boca del matraz en la punta de la nariz percibiendo el olor con una inhalacin normal.
c) Si se tiene alguna percepcin de olor, vaciar los matraces con las diluciones y preparar dos
blancos con agua libre de olor y una dilucin a 200 cm conteniendo la mitad de muestra de la
dilucin donde se percibi el olor y repetir el procedimiento a partir del inciso 1.1.2, hasta que el
analista detecte nuevamente el olor. En este punto las diluciones debern hacerse a
concentraciones mayores hasta encontrar una dilucin con un olor perceptible mnimo. El
analista deber confirmar entonces su primer resultado.
1.10. Clculos
a) Calcular la intensidad de olor como ndice de intensidad de olor con la frmula siguiente:
Indice de intensidad de olor =
3.3 log
(200)
+3D
A
Donde:
A = Mililitros de muestra o mililitros de alcuota de la dilucin primaria empleadas.
D = Nmero de 25 175 de la dilucin primaria requeridos para alcanzar a determinar la
magnitud de intensidad de olor.
b) La intensidad de olor puede ser calculada como nmero umbral de olor si se desea por el
procedimiento descrito en el anexo 2.
A.1. Sugerencias para la clasificacin de olores
A.1.1. Los tipos de olores presentes en los residuos, varan ampliamente.
20
La tabla 1 auxiliar como una gua en la clasificacin de los tipos de olor. Generalmente, el olor
de la muestra inicial diferir de los olores determinados a varias diluciones. Si se presenta esta
fraccionacin de olores, informar el primer olor caracterstico, as como el intermedio y el final.
Anotar las correspondientes diluciones, as como los grados de dulce, picante, fumoso y podrido
del olor en la dilucin escogida. Si la caracterstica ha sido clasificada como de alta intensidad,
sta deber ser "100", se media intensidad su calificacin ser "50" y siendo de baja intensidad
se calificar como "0". Pueden emplearse mbitos intermedios, pero esto no es muy
recomendable.
A.1.2. El tipo de olor puede ser establecido por comparacin con los niveles de percepcin de
los olores caractersticos mostrados en la Tabla A.2, tal que si un olor es calificado como 100 en
dulce, 50 en picante, 0 en fumoso y 50 en podrido, el olor deber ser descrito como un ster o
un alcohol. Refirindose a los tipos qumicos que producen estos olores podemos guiarnos para
determinar si el olor deber ser reportado como ster o un alcohol.
A.2. Nmero umbral de olor
A.2.1. La intensidad de olor frecuentemente se informa como nmero umbral de olor el cual se
calcula como sigue:
Nmero umbral de olor =
(200)
X 8D
A
A.2.2. Las relaciones entre las diluciones se presentan en la tabla 1. Cuando se presenten
valores de umbral de olor, dar los valores obtenidos por dos o ms analistas. Los nmeros de
umbral de olor no deben promediarse.
A.2.3. Muchas personas encuentran difcil obtener un valor representativo para olores fuertes.
Por lo que se recomienda emplear el ndice de intensidad de olor, en lugar del umbral de olor.
A.3. Formas sugeridas para informar la intensidad de olor
A.3.1. La tabla A.3, ilustra la secuencia de las diluciones de una muestra y el mtodo para
anotar los resultados para la determinacin de umbral de olor por tres analistas. Al primer
analista se le dieron diluciones de la muestra correspondiente a valores de ndice de intensidad
de olor de 10. 9, 8, y 7 en ese orden. El analista no identific las primeras tres diluciones, pero
s la ltima. Los resultados fueron anotados verticalmente hacia arriba en la primera columna
como -, -, - y +. Entonces se presentarn la dilucin 9, un grupo de blancos y diluciones 8 y 7 en
ese orden. Unicamente la dilucin 7 fue identificada. Los resultados fueron anotados como -, B,
-, y + en la segunda columna vertical en orden ascendente. Se continuaron las pruebas hasta
que se hicieron 4 identificaciones positivas a la dilucin 7. El resultado final de (7), (8) y (7)
respectivamente se anot en la columna para cada uno de los tres analistas. Este modelo de
informe se presenta nicamente como una gua y puede ser modificado.
21
Muestra original
Volumen transferido
al matraz prueba
(olor)
200
100
50
25
12.5
Nmero umbral
de olor (factor de
dilucin)
1
2
4
8
16
50
32
25
12.5
64
128
6
7
50
256
25
12.5
512
1024
9
10
50
2050
11
25
12.5
4100
8200
12
13
50
16400
14
25
12.5
32800
65500
15
16
50
131000
17
ndice de
intensidad de olor
25
262000
12.5
524000
6.25
1050000
* Volumen en el matraz de prueba (olor) contenido 200 cm de agua libre de olor.
22
0
1
2
3
4
18
19
20
CLASE
DE OLOR
COMPUESTOS
QUMICOS
DULCE
PICANTE
FUMOSO
PODRIDO
100
50
0 a 50
50
Ester
Esteres, eteres,
bajas cetonas
100
50-100
0 a 100
50
Alcohol
Fenoles y cresoles,
alcoholes e
hidrocarburos.
50
50
0 a 50
50
Carbonilo
Aldehdos, altas
cetonas.
50
100
0 a 50
50
cido
50
50
100
100
Azufre
100
50-100
50 a 100
0 100
100
50
50
100
100
50
0 a 50
100
Haluros
Insaturado
Base
Anhdridos cidos,
cidos orgnicos,
bixido de azufre.
Compuesto de
selenio,
arsenicales,
mercapranos,
sulfuros.
Quinonas, xidos y
ozono, haluros,
compuestos de
nitrgeno.
Derivador de
acetileno,
butadieno,
isopreno.
Monmeros de
vinilo, aminas,
alcaloides,
amonaco.
EJEMPLOS
Laca, disolventes, la mayor
parte de las frutas y muchas
flores.
Alquitrn, humos, alcohol,
licor, rosas, flores aromticas,
hierbas y especias.
Grasa rancia, mantequilla,
huesos de frutas y nueces,
violetas, csped, pastos y
vegetales.
Vinagre, sudor, aceites
rancios, resinas, desperdicios.
Zorrillos, osos, zorros,
pescado y carne, col, cebolla,
alcantarillado.
Insecticidas, maleza, olor a
moho y humus, cscars,
olores medicinales, tierra,
pantano.
Pinturas, thinner, keroseno,
aceites esenciales, pepino.
Olores fecales, estircol,
pescados y mariscos, ciertas
flores como las lilas, lirio,
jazmn y madreselva.
23
COMPUESTOS
QUMICOS
NMERO DE
ANALISTAS
NMERO DE
OBSERVACIONES
cido actico
Acetona
Acetofenona
Acrilonitrilo
Cloruro de alilo 3
n- Acetato de amilo
Anilina 3
Benceno 4
n- Butanol
p- Clorofenol
o- Cresol
m Cresol
Eter
dicloroisoproplico
2-4 Diclorofenol
Dimetilamina
Etilacrilato
Formaldehdo
2 Mercaptoetanol
Meskileno
Metilamina
Metil etil piridina
Metil vinil piridina
B- naftol 4
Alcohol
Fenol
Piridina
Quinolena
Estireno 4
Tiofenol 3
Trimetilamina
Xileno 4
n- Butil mercaptano
9
12
17
16
10
18
8
13
32
16
13
29
9
17
154
104
10
139
8
18
167
24
21
147
PROMEDIO
24.3
40.9
0.17
18.6
14700
0.08
70.1
31.3
2.5
1.24
0.065
0.68
MBITO
5.07 a 81.2
1.29 a 330
0.0039 a 200
0.0031 a 50.4
36.60 a 29300
0.0017 a 0.16
2.0 a 128
0.84 a 53.6
0.012 a 25.3
0.02 a 20.4
0.016 a 4.1
0.016 a 4.0
0.32
0.0178 a 1.1
10
12
9
10
9
13
10
16
8
14
10
12
13
11
16
10
10
16
8
94
29
9
11
9
19
10
20
8
20
10
20
130
17
23
10
10
21
94
0.21
23.2
0.0067
49.9
0.064
0.027
3.33
0.05
0.04
1.29
0.13
5.9
0.82
0.71
0.73
13.5
1.7
2.21
0.006
0.02 a 1.35
0.01 a 42.5
0.0018 a 0.014
0.8 a 102
0.07 a 1.1
0.00024 a 0.06
0.65 a 523
0.017 a 0.225
0.015 a 0.12
0.01 a 11.4
0.0087 a 0.56
0.016 a 16.7
0.007 a 7.7
0.016 a 4.3
0.02 a 2.6
2.05 a 32.8
0.04 a 5.17
0.26 a 4.13
0.001 a 0.06
impreso con autorizacin de la revista AWWA, Volumen 55, Julio de 1963, pgina 916.
Valores de umbral de olor en base a sustancias puras
3
Unbral de soluciones acuosas saturadas. No es necesario el dato de solubilidad.
4
Partiendo de diluciones consolaciones acuosas saturadas a temperatura ambiente; dato de solubilidad obtenido de
la literatura y correcciones para sustancias puras.
2
24
Dilucin A
25 ml de muestra
original/ ml
Dilucin B
25 ml de muestra
A / ml
Dilucin C
25 ml de muestra
B / ml
Analistas
FLJ
Volumen
011
200
100
50
25
12.5
0
1
2
3
4
50
25
12.5
6
7
50
------
++++(8)
+ -----
25
12.5
9
10
B
------
B
-----------
-------
50
11
25
12.5
12
13
RAB
++++(7)
B*
MML
++++(7)
BB
25
2. Temperatura
NMX-AA-007-SCFI-2000. ANLISIS DE AGUA - DETERMINACIN DE LA TEMPERATURA
EN AGUAS NATURALES, RESIDUALES Y RESIDUALES TRATADAS - MTODO DE
PRUEBA (CANCELA A LA NMX-AA-007-1980)
2.0. Importancia ambiental del anlisis de la temperatura en el agua
La temperatura del agua es un parmetro muy importante debido a sus efectos directos sobre
las reacciones qumicas y biolgicas de la vida acutica as como sobre otras propiedades
fsicas de los cuerpos de agua. La temperatura del agua influye en la cantidad de oxgeno que
se puede disolver en la misma. Del mismo modo, puede actuar directamente sobre el
metabolismo de los animales acuticos, ya que el aumento de temperatura incrementa las
velocidades de reaccin biolgicas y la solubilidad de algunos compuestos. En general la
velocidad de las reacciones qumicas aumenta con la temperatura; Van Hoff estableci que el
aumento de 10 C en la temperatura del agua, duplica las velocidades de las reacciones que
ocurren.
El valor de temperatura es un criterio de calidad del agua para la proteccin de la vida acutica
y para las fuentes de abastecimiento de agua potable, es tambin un parmetro establecido
como lmite mximo permitido en las descargas de aguas residuales, imprescindible para la
operacin de plantas de tratamiento biolgico y una especificacin de importancia en los
clculos de balance de energa y de calor de los procesos industriales. Adems como ya se
mencion la temperatura tiene efecto directo en la solubilidad de los gases en el agua como el
oxgeno.
La temperatura termodinmica, tambin denominada temperatura absoluta, es una de las
magnitudes fundamentales que definen el Sistema Internacional de Unidades (SI) y cuya unidad
es el grado kelvin simbolizado como K. Esta unidad se utiliza tanto para expresar valores de
temperatura termodinmica como intervalos de temperatura.
Por acuerdo del Comit Internacional de Pesas y Medidas en 1989, la Escala Internacional de
Temperatura (ITS-90) se define operacionalmente en trminos de tcnicas de medicin por
termometra de presin de vapor, termometra de gas, termometra con resistencia de platino y
pirometra ptica. Es usual expresar la temperatura con base en la escala Celsius (C), definida
con relacin a la temperatura termodinmica por:
T (Celsius) = T (Kelvin) 273.15 K
El grado Celsius es una unidad de temperatura de magnitud idntica al grado Kelvin. Sobre la
escala Celsius, la temperatura de fusin del agua pura a la presin de 101,325 kPa, es igual a
cero grados centgrados y la ebullicin del agua a la misma presin, es igual a 100 C.
El mtodo de prueba normado establece el procedimiento para realizar la medicin en el sitio
donde se encuentra el agua, y el resultado se expresa en grados centgrados (C).
26
Las temperaturas elevadas en el agua son indicadores de actividad biolgica, qumica y fsica.
Lo anterior tiene influencia en los tratamientos y abastecimientos para el agua, as como en la
evaluacin limnolgica de un cuerpo de agua, por lo que es necesario medir la temperatura
como un indicador de la presencia de compuestos y contaminantes en el agua, a travs del
mtodo de prueba que se establece en la presente Norma Mexicana.
2.1. Objetivo y campo de aplicacin
Esta norma mexicana establece el mtodo de prueba para la determinacin de la temperatura,
cuando se usan instrumentos de medicin directa o instrumentos que indican expansiones o
fuerzas proporcionales en los cambios de temperatura, en aguas naturales superficiales o de
poca profundidad, en aguas residuales y residuales tratadas, con incertidumbre estimada en
0.2 C en el intervalo comprendido entre cero y 80 C; tambin es aplicable a la determinacin
de la temperatura de soluciones en las operaciones generales del laboratorio de anlisis de
aguas en el intervalo de cero a 100 C y para efectuar el control de calibracin del material
volumtrico. El mtodo no es aplicable a la determinacin de la temperatura en aguas
profundas ni tampoco a aguas industriales sobrecalentadas o sometidas a altas presiones.
2.2. Principio
El principio se basa en las propiedades de la materia de dilatarse o contraerse con los cambios
de temperatura a propiedades elctricas y fsicas de los materiales con los que se realizar la
medicin; estas propiedades son siempre las mismas para una temperatura dada lo que permite
graduar los instrumentos de medicin. La temperatura se mide con un instrumento debidamente
calibrado y debe efectuarse en el lugar de muestreo.
2.3. Reactivos y patrones
Agua: Debe entenderse agua que cumpla con las siguientes caractersticas: a)
Resistividad, megohm-cm a 25 C: 0.2 mnimo; b) Conductividad, S/cm a 25 C: 5.0
mximo y c) pH: 5.0 a 8.0.
Hielo picado preparado a partir de agua destilada, mantenido a una temperatura poco
menor que cero grados centgrados.
3. Turbidez
NMX-AA-038-SCFI-2001. ANLISIS DE AGUA - DETERMINACIN DE TURBIEDAD EN
AGUAS NATURALES, RESIDUALES Y RESIDUALES TRATADAS - MTODO DE PRUEBA
(CANCELA A LA NMX-AA-038-1981)
3.0. Importancia ambiental de la determinacin de turbidez
La turbidez es la expresin de la propiedad ptica de la muestra que causa que los rayos de luz
sean dispersados y absorbidos en lugar de ser transmitidos en lnea recta a travs de la
muestra.
La turbidez en el agua puede ser causada por la presencia de partculas suspendidas y
disueltas de gases, lquidos y slidos tanto orgnicos como inorgnicos, con un mbito de
tamaos desde el coloidal hasta partculas macroscpicas, dependiendo del grado de
turbulencia. Es causada por materia en suspensin como arcilla, cieno o materia orgnica e
inorgnica finamente dividida, as como compuestos solubles coloridos, plancton y diversos
microorganismos.
La transparencia del agua es muy importante cuando est destinada al consumo del ser
humano, a la elaboracin de productos destinados al mismo y a otros procesos de manufactura
que requieren el empleo de agua con caractersticas especficas, razn por la cual, la
determinacin de la turbidez es muy til como indicador de la calidad del agua, y juega un papel
muy importante en el desempeo de las plantas de tratamiento de agua, formando como parte
del control de los procesos para conocer cmo y cundo el agua debe ser tratada.
La medicin de la turbidez, en una manera rpida que nos sirve para saber cuando, como y
hasta que punto debemos tratar el agua para que cumpla con la especificacin requerida.
La unidad de turbidez, fue definida "como la obstruccin ptica de la luz, causada por una
parte por milln de slice en agua destilada".
1 unidad nefelomtrica de turbidez (NTU) = 7.5 ppm de Si02
Actualmente, la unidad utilizada es la NTU, Unidad Nefelomtrica de Turbidez y que equivale a;
1 unidad nefelomtrica de turbidez (NTU) = 1 ppm de formazina estndar
30
Los valores de turbidez pueden variar desde cero hasta varios miles de unidades en aguas
altamente turbias, consecuentemente no hay un mtodo de determinacines que abarque tan
amplio intervalo. Existen tres mtodos comnmente empleados:
a) Mtodo del Turbidmetro Hellige.
b) Mtodo del Nefelmetro Fotoelctrico.
c) Mtodo Turbidimtrico de Buja de Jackson.
La unidad utilizada normalmente es la NTU (Unidades Nefelomtricas de Turbidez), otras
unidades que an se usan se pueden trasformar utilizando la siguiente tabla:
Unidad
JTU
NTU
SiO2 mg/l
JTU
1.0
19
2.5
NTU
0.053
0.3
SiO2 mg/l
0.4
7.5
31
Agua: Debe entenderse agua que cumpla con las siguientes caractersticas: a) Resistividad,
megohm-cm a 0.2 min; b) Conductividad, S/cm a 25 C: 5.0 Mx., y c) pH: 5.0 a 8.0.
Sulfato de hidracina (NH2)2 H2SO4.
Hexametilentetramina (CH2)6 N4.
Suspensin patrn de formacina de 400 UNT.
Disolucin I. Pesar aproximadamente y con precisin 1.000 g de sulfato de hidracina,
disolver en agua y aforar a 100 ml.
Disolucin II. Pesar aproximadamente y con precisin 10 g de Hexametilentetramina
disolver en agua y aforar a 100 ml.
2.-
3.-
32
3.6. Procedimiento
Preparacin y acondicionamiento de la muestra: Analizar la muestra en un periodo no mayor de
24 horas. Si la muestra se encuentra en refrigeracin, sacarla y permitir que alcance la
temperatura ambiente antes de que se realice el anlisis.
Anlisis de muestras con turbidez menor a 40 UNT.
Reemplazar la celda conteniendo la disolucin patrn, por la celda que contiene la muestra
por analizar y cerrar el compartimento de la celda.
Leer la turbidez de la muestra, homogeneizando la muestra contenida en la celda entre
cada lectura. Se recomienda tomar varias lecturas homogeneizando entre cada una de
ellas.
Verificar la calibracin del turbidmetro cada vez que se cambie de intervalo de trabajo.
De ser posible y de acuerdo con los intervalos de lectura del equipo, realizar una prelectura
para calcular la dilucin a realizar.
Hacer una dilucin de la muestra empleando agua destilada.
33
3.7. Clculos
a) Calcular la turbidez de la muestra original en base a la dilucin realizada.
UNT =
A*B
C
Donde:
A = Son las UNT encontradas en la muestra.
B = Es el volumen final ml de la dilucin realizada.
C = Es el volumen ml de muestra tomada para la dilucin.
b) Reportar los resultados de la siguiente forma con la precisin correspondiente:
Margen de turbidez UNT
0 1.0
0.05
1 - 10
0.1
10 -40
40 - 100
100 - 400
10
400 - 1 000
50
> 1 000
100
Sales disueltos totales (SDT): Substancias orgnicas e inorgnicas solubles en agua y que no
son retenidas en el material filtrante.
Slidos suspendidos totales (SST): Slidos constituidos por slidos sedimentables, slidos y
materia orgnica en suspensin y/o coloidal, que son retenidas en el elemento filtrante.
Slidos totales (ST): Suma de los slidos suspendidos totales, sales disueltas y materia
orgnica.
Slidos totales voltiles (SVT): Cantidad de materia orgnica (incluidos aquellos inorgnicos)
capaz de volatilizarse por el efecto de la calcinacin a 550 C 50 C en un tiempo de 15 a 20
min.
4.1. Anlisis de slidos sedimentables
NMX-AA-004-SCFI-2000. ANLISIS DE AGUA - DETERMINACIN DE SLIDOS
SEDIMENTABLES EN AGUAS NATURALES, RESIDUALES Y RESIDUALES TRATADAS MTODO DE PRUEBA (CANCELA A LA NMX-AA-004-1977)
4.1.0. Introduccin. Las aguas naturales, residuales o residuales tratadas con altos contenidos
de slidos sedimentables no pueden ser utilizadas en forma directa por las industrias o las
plantas potabilizadoras. De ello se deriva el inters por determinar en forma cuantitativa este
parmetro.
4.1. 1. Objetivo y campo de aplicacin. Esta norma mexicana establece el mtodo de prueba
para la determinacin de slidos sedimentables en aguas naturales, residuales y residuales
tratadas.
4.1.2. Principio. La materia sedimentable se define como la cantidad de slidos que en un
tiempo determinado se depositan en el fondo de un recipiente en condiciones estticas. El
mtodo propuesto es volumtrico.
4.1.3. Materiales
35
36
37
f)
Leer
el
volumen
de
slidos
sedimentados directamente en la
escala del cono Imhoff y registrar este
resultado como ml/l. Si la materia
sedimentable contiene bolsas de
lquido y/o burbujas de aire entre
partculas gruesas, evaluar el volumen
de aquellas y restar del volumen de
slidos sedimentados.
4.1.6. Clculos
a) Tomar directamente la lectura de slidos sedimentables del cono Imhoff.
c) Reportar la lectura obtenida en ml/l.
Bomba de vaco.
Estufa elctrica, para operar de 103 a 105 C.
Balanza analtica con precisin de 0.1 mg.
Mufla elctrica para operar a 500 50 C.
Materiales
Agua: Debe entenderse agua que cumpla con las siguientes caractersticas: a) Resistividad:
megohm-cm a 25 C: 0.2 min; b) Conductividad: S/cm a 25 C: 5.0 Mx.; c) pH: 5.0 a 8.0.
Cloruro de sodio (NaCl).
Carbonato de calcio (CaCO3).
Almidn en polvo.
Disolucin estndar para muestras de control. Agregar la cantidad necesaria de almidn,
cloruro de sodio y carbonato de calcio de acuerdo con la concentracin deseada de slidos
en las muestras de control y diluir a un litro. Este patrn debe prepararse cada vez que se
realice el mtodo.
39
4.2.6. Procedimiento
4.2.6.1. Preparacin de cpsulas de porcelana
Introducir el filtro de fibra de vidrio en el crisol con la cara rugosa hacia arriba, mojar el filtro
con agua para asegurar que se adhiera al fondo del crisol.
Los crisoles se introducen a la mufla a una temperatura de 550 50 C, durante 20 minutos
como mnimo. Despus de este tiempo transferirlos a la estufa a 103 2 C
aproximadamente 20 min.
Sacar y enfriar a temperatura ambiente dentro de un desecador.
Pesar los crisoles y repetir el ciclo hasta alcanzar el peso constante, el cual se obtiene hasta
que no haya una variacin en el peso mayor a 0.5 mg. Registrar como G3.
40
41
43
H2O
O2
C6H12O6
Agua: Debe entenderse agua que cumpla con las siguientes caractersticas: Resistividad:
megohm-cm a 25 C: 0.2 min; Conductividad: S/cm a 25 C, 5.0 mx., y pH: 5.0 a 8.0.
Sulfato manganoso (MnSO4.4H2O MnSO4.2H2O MnSO4.H2O).
Hidrxido de potasio (KOH).
Yoduro de potasio (KI) o yoduro de sodio (NaI).
Azida de sodio (NaN3).
Almidn soluble.
Tiosulfato de sodio pentahidratado (Na2S2O3.5H2O).
cido sulfrico concentrado (H2SO4).
Dicromato de potasio (K2Cr2O7).
Biyodato de potasio (KH (IO3)2).
Hidrxido de sodio (NaOH) hidrxido de potasio (KOH).
cido saliclico (C6H4 (OH) COOH).
2.1.3.1. Soluciones
45
Donde:
N= Es la normalidad del tiosulfato de sodio.
V= Es el volumen de titulante.
46
e)
Aadir 2 ml
concentrado
de
cido
sulfrico
2.1.7. Clculos
OD mg/l= (M X ml de Tiosulfato X 8 x 1 000) / 98,7
Donde:
M = Es la molaridad de tiosulfato 8 = Los gramos / equivalente de oxgeno.
98.7= Es el volumen corregido por el desplazamiento de los reactivos agregados a la botella
tipo Winkler.
Reportar los resultados en mg/l de OD con la precisin correspondiente.
48
Agua: Debe entenderse agua que cumpla con las siguientes caractersticas:a) Resistividad,
megohm-cm a 25 C: 0.2 min.; b) Conductividad, S/cm a 25 C: 5.0 mx., y c) pH: 5.0 a
8.0.
Fosfato monobsico de potasio (KH2PO4).
Fosfato dibsico de potasio (K2HPO4).
Fosfato dibsico de sodio heptahidratado (Na2HPO47H2O).
Cloruro de amonio (NH4Cl).
Sulfato de magnesio heptahidratado (MgSO47H2O).
Cloruro de calcio anhidro (CaCl2).
Cloruro frrico hexahidratado (FeCl36H2O).
cido sulfrico concentrado (H2SO4).
Hidrxido de sodio (NaOH).
Sulfito de sodio (Na2SO3).
2-cloro-6 (triclorometil) piridina.
Glucosa grado patrn primario (C6H12O6).
49
2.2.3.1. Disoluciones
a) Disolucin amortiguadora de fosfato. Pesar aproximadamente 8.5 g de fosfato monobsico
de potasio, 21.75 g de fosfato dibsico de potasio, 33.4 g de Fosfato dibsico de sodio
heptahidratado y 1.7 g de cloruro de amonio, disolver en 500 ml de agua y aforar a un litro.
El pH de la disolucin debe ser de 7.2. Desechar el reactivo (o cualquiera de los siguientes
reactivos) si hay algn signo de crecimiento biolgico en el frasco de almacenamiento.
b) Disolucin de sulfato de magnesio. Pesar aproximadamente 22.5 g de sulfato de magnesio
heptahidratado, disolver en agua y diluir a un litro.
c) Disolucin de cloruro de calcio. Pesar aproximadamente 27.5 g de cloruro de calcio anhdro,
disolver en agua y diluir a un litro.
d) Disolucin de cloruro frrico. Pesar aproximadamente 0.25 g de cloruro frrico
hexahidratado, disolver en agua y diluir a un litro.
e) Disolucin de cido sulfrico (0.1 N). Agregar aproximadamente 2.8 ml de cido sulfrico
concentrado a 500 ml de agua, mezclar bien y diluir hasta un litro.
f) Disolucin de hidrxido de sodio (0.1 N). Pesar aproximadamente 4 g de hidrxido de sodio,
disolver en agua y diluir a un litro.
g) Disolucin de sulfito de sodio. Pesar aproximadamente 1.575 g de sulfito de sodio, disolver
en agua y diluir a un litro. Esta disolucin no es estable; por lo que debe prepararse
diariamente.
h) Disolucin patrn de glucosa-cido glutmico. Secar glucosa y cido glutmico a 103 C
durante una hora. Pesar aproximadamente y con precisin 150 mg de glucosa y 150 mg de
cido glutmico, diluir en agua y aforar a un litro. Preparar inmediatamente antes de usarla.
Esta disolucin tiene una DBO5 de 198 mg/l.
i) Disolucin de cloruro de amonio. Pesar aproximadamente 1.15 g de cloruro de amonio y
disolver en 500 ml de agua, ajustar el pH a 7.2 con disolucin de hidrxido de sodio y aforar
a un litro. La disolucin contiene 0.3 mg N/ml.
2.2.4. Equipo y materiales
2.2.4.1. Equipo
50
Materiales
Botellas Winkler de vidrio para incubacin con capacidad de 300 ml de aforo total y con boca
estrecha, reborde y tapn de vidrio esmerilado, de forma cnica.
Si la muestra presenta alto contenido de biocidas como cloro o se sabe de su bajo contenido de
materia orgnica, es necesario inocular la muestra.
b) Inculo
Fuente de la siembra
Es necesario contar con una poblacin de microorganismos capaces de oxidar la materia
orgnica biodegradable de la muestra. El agua residual domstica, los efluentes no clorados o
sin desinfeccin, los efluentes de las plantas de tratamiento de desechos biolgicos y las aguas
superficiales que reciben las descargas de aguas residuales que contienen poblaciones
microbianas satisfactorias. Algunas muestras no contienen una poblacin microbiana suficiente
(por ejemplo, algunos residuos industriales no tratados, residuos desinfectados, residuos de alta
temperatura o con valores de pH extremos).
Para tales residuos, sembrar el agua de dilucin aadiendo una poblacin de microorganismos.
La mejor siembra es la que proviene del efluente de un sistema de tratamiento biolgico de
aguas residuales. Cuando se usa como siembra el efluente de tratamiento biolgico de sistema
de aguas residuales se recomienda la inhibicin de la nitrificacin. Cuando no se disponga de
sta, utilizar el sobrenadante del agua residual domstica despus de dejarlo reposar a
temperatura ambiente durante al menos una hora, pero no ms de 36 hrs. Determinar si la
poblacin existente es satisfactoria haciendo la prueba de la siembra en una muestra para
DBO5. El incremento del valor de la DBO5 indica una siembra exitosa.
Control del inculo
Determinar la DBO5 del material de siembra como para cualquier otra muestra. sto es una
siembra control. A partir de este valor y de uno conocido de la dilucin del material de siembra
(en el agua de dilucin) determinar el consumo de OD de la siembra. Lo ideal es hacer
disoluciones tales de la siembra que la mayor cantidad de los resultados presenten una
disminucin de al menos el 50 % del OD. La representacin de la disminucin del OD (mg/l) con
respecto a los mililitros de siembra, tiene que ser una lnea recta cuya pendiente corresponde a
la disminucin de OD por mililitro del inculo. La interseccin del eje de las abscisas (OD)
representa el consumo del oxgeno causado por el agua de dilucin y debe ser inferior a 0.1
mg/l (ver inciso 10.8). Para determinar el consumo de OD de una muestra, se resta el consumo
de OD de la siembra, del consumo de OD total. La captacin de OD total del agua de dilucin
sembrada debe oscilar entre 0.6 mg/l y 1 mg/l.
c) Pretratamiento de la muestra
Muestras con pH cidos o bsicos
Neutralizar las muestras a un pH entre 6.5 y 7.5 con cido sulfrico o hidrxido de sodio de
concentracin tal que la cantidad de reactivo no diluya la muestra en ms del 0.5 %. El pH del
agua de dilucin sembrada no debe verse afectado por la dilucin de la muestra.
52
Un anlisis ms rpido tal como la DQO, presenta una correlacin aproximada con la DBO5 y
sirve como una gua para seleccionar las diluciones. En ausencia de datos previos, utilizar las
siguientes diluciones: De cero a 1 % para los residuos industriales fuertes, de 1 a 5 % para las
aguas residuales sedimentadas y crudas, del 5 al 25 % para el efluente tratado biolgicamente
y del 25 al 100 % para las aguas superficiales contaminadas.
Diluciones preparadas directamente en frascos tipo Winkler. Utilizando una pipeta volumtrica,
aadir el volumen de muestra deseado a frascos Winkler individuales de 300 ml. Aadir
cantidades adecuadas del material de siembra a los frascos tipo Winkler o al agua de dilucin.
Llenar los frascos con suficiente agua de dilucin, sembrada si es necesario, de forma que la
insercin del tapn desplace todo el aire, sin dejar burbujas. No realizar diluciones mayores de
1:300 (1 ml de la muestra en un frasco). Determinar el OD inicial en uno de los frascos de cada
una de las diferentes diluciones. En los frascos de los duplicados de cada una de las diluciones,
Ajustar hermticamente el tapn, poner un sello hidrulico y la contratapa e incubar durante 5
das a 20 C.
e) Determinacin del OD inicial
Mtodo yodomtrico
La determinacin del OD inicial se realiza por medio del mtodo yodomtrico de azida
modificado, de acuerdo a lo establecido en la norma mexicana NMX-AA-012-SCFI
Mtodo electromtrico
g) Incubacin
Incubar a 20 1C las botellas de DBO5 que contengan las muestras con las diluciones
deseadas, los controles de siembra, los blancos de agua de dilucin y el control de glucosacido glutmico. En caso de no contar con contratapas, diariamente se debe verificar que el
sello hidrulico est intacto en cada botella incubada, agregar agua si es necesario.
55
Con dilucin:
DBO5 (m/l)=
Donde:
B1= Es el OD del inculo antes de la incubacin en mg/l.
B2= Es el OD del inculo despus de la incubacin en mg/l.
C1= Es el volumen de inculo en la muestra C2 es el volumen de inculo en el inculo control.
Vt= Es el volumen total del frasco Winkler y Vm es el volumen de muestra sembrada.
d) Expresar los resultados como CDBO5 s se inhibe la nitrificacin.
e) Reportar los resultados en mg/l de DBO5 con dos cifras significativas con la precisin
(media, desviacin estndar) correspondiente.
2.3. Alcalinidad y acidez
NMX-AA-036-SCFI-2001. ANLISIS DE AGUA - DETERMINACIN DE ACIDEZ Y
ALCALINIDAD EN AGUAS NATURALES, RESIDUALES Y RESIDUALES TRATADAS MTODO DE PRUEBA (CANCELA A LA NMX-AA-036-1980)
2.3.0. Importancia ambiental de la determinacin de acidez y alcalinidad en agua
La acidez se refiere a la presencia de sustancias disociables en agua y que como producto de
disociacin generan el in hidronio (H3O+), como son los cidos fuertes, cidos dbiles y de
fuerza media; tambin la presencia de ciertos cationes metlicos como el Fe (III) y el Al (III)
contribuyen a la acidez del medio.
La alcalinidad se refiere a la presencia de sustancias hidrolizables en agua y que como
producto de hidrlisis generan el in hidroxilo (OH-), como son las bases fuertes, y los
hidrxidos de los metales alcalinotrreos; contribuyen tambin en forma importante a la
56
Materiales
Limpieza del material: Las botellas de polietileno para las muestras, deben lavarse con
detergente libre de fosfatos, enjuagarse con agua y secarse a temperatura ambiente.
2.3.4. Reactivos y patrones
Los reactivos que requiere el mtodo deben ser grado reactivo a menos que se indique otro
grado.
Preparar todas las disoluciones con agua destilada o desionizada, que ha sido hervida
recientemente durante 15 minutos y enfriar a temperatura ambiente. Al final el pH del agua debe
ser 6 y su conductividad < 2 S/cm.
Debe entenderse agua que cumpla con las siguientes caractersticas: Resistividad,
megohm-cm a 25 C: 0.2 min; Conductividad, S/cm a 25 C: 5.0 mx, y pH: 5.0 a 8.0.
Agua libre de CO2.
57
2.3.6. Procedimiento
2.3.6.1. Valoracin de las disoluciones
58
a) Valoracin del cido sulfrico o cido clorhdrico (0.02 N). Pesar aproximadamente y con
precisin 0.026 5 g del patrn primario de carbonato de sodio, secado 105 C, aadir unos
25 ml de agua y unas gotas de la disolucin de naranja de metilo, valorar con el cido hasta
el vire del indicador (de canela a amarillo). Calcular la normalidad del cido con la siguiente
frmula:
N=
A
B x 53
x 1 000
Donde:
N= Es la normalidad del cido usado, equivalentes/l.
A= Son los gramos de carbonato de sodio.
B= Son los ml de cido utilizados.
53= Son los gramos por equivalente de carbonato de sodio.
b) Valoracin del hidrxido de sodio (0.02 N). Pesar aproximadamente y con precisin 0.102 g
de biftalato de potasio secado a 105 C (ver inciso 5.2), aadir unos 25 ml de agua y unas
gotas de la disolucin de fenolftalena, titular con la disolucin de hidrxido de sodio hasta el
vire del indicador (de incoloro a rosa). Calcular la normalidad del hidrxido con la siguiente
frmula:
N=
A
B x 204.2
x 1 000
Donde:
N= Es la normalidad del hidrxido de sodio, equivalentes/l.
A= Son los gramos de biftalato de potasio.
B= Son los ml de hidrxido de sodio utilizados.
204.2= Son los gramos por equivalente de biftalato de potasio.
2.3.6.2. Acidez
a) Pretratamiento de la muestra
En caso de detectarse la presencia de cloro residual, eliminar la interferencia aadiendo 0.1 ml
de la disolucin de tiosulfato de sodio 0.1 M.
a) Si la muestra se encuentra libre de iones metlicos hidrolizables y cationes polivalentes en su
forma reducida, proceder como se indica a partir del inciso b). Las muestras de desechos
industriales y drenajes que contengan concentraciones mayores a 1 mg/l de iones metlicos,
tales como hierro, aluminio, manganeso, deben tratarse con perxido de hidrgeno caliente.
Este tratamiento con perxido caliente consiste en pasar 100 ml de muestra a un matraz
Erlenmeyer de 250 ml. Medir el pH, si el pH est alrededor de 4 adicionar alcuotas de 5 ml de
cido sulfrico (0.02 N) valorada hasta reducir el pH a menos de 4. Adicionar 5 gotas de
perxido de hidrgeno al 30 % y hervir la muestra de 2 a 5 min. Registrar el volumen total de
59
60
61
62
2.3.6.3. Alcalinidad
a) Transferir 100 ml de muestra en un matraz Erlenmeyer de 250 ml.
b) Adicionar 2 gotas de disolucin indicadora de fenolftalena.
c) Titular con la disolucin valorada de cido (0.02 N) hasta el vire de la fenolftalena (de rosa
a incoloro), registrar los mililitros gastados (alcalinidad a la fenolftalena). Adicionar 2 gotas
de la disolucin indicadora de naranja de metilo.
d) Continuar con la titulacin hasta alcanzar el vire del naranja de metilo (de canela a amarillo),
alcalinidad total.
e) Registrar los volmenes para ambos puntos finales.
f) Calcular la alcalinidad, tomando en cuenta el vire de los indicadores.
Procedimiento de analisis de alcalinidad a la fenolftalena
63
c)
64
2.3.7. Clculos
Calcular la acidez total como CaCO3 en mg/l mediante la siguiente frmula:
Ecuacin 1:
Acidez total como CaCO3 en mg /l =
Donde:
100= Es el volumen de la muestra en ml.
A= Es el volumen de NaOH utilizado al vire de la fenolftalena.
B= Es la normalidad de la disolucin de NaOH.
C= Son los ml de H2SO4 utilizados en el tratamiento con perxido.
D= Es la normalidad del H2SO4 utilizado.
50= Es el factor para convertir eq/L a mg CaCO3/l.
1,000= Es el factor para convertir ml a litros.
Calcular la alcalinidad total como CaCO3 en mg/l, mediante la siguiente frmula:
Alcalinidad total como CaCO3 en mg /l =
Donde:
A= Es el volumen total gastado de cido en la titulacin al vire del anaranjado de metilo en ml.
N= Es la normalidad de la disolucin de cido.
100= Es el volumen de la muestra en ml.
50= Es el factor para convertir eq/L a mg CaCO3/l.
1 000= Es el factor para convertir ml a litros.
65
2.4. Cloruros
NMX-AA-073-SCFI-2001
ANLISIS DE AGUA - DETERMINACIN DE CLORUROS TOTALES EN AGUAS
NATURALES, RESIDUALES Y RESIDUALES TRATADAS - MTODO DE PRUEBA
(CANCELA A LA NMX-AA-073-1981)
2.4.1. Importancia ambiental de la determinacin de cloruros
El in cloruro es uno de los iones inorgnicos que se encuentran en mayor cantidad en aguas
naturales, residuales y residuales tratadas, su presencia es necesaria en aguas potables. En
agua potable, el sabor salado producido por la concentracin de cloruros es variable. En
algunas aguas conteniendo 25 mg Cl-/L se puede detectar el sabor salado si el catin es sodio.
Por otra parte, ste puede estar ausente en aguas conteniendo hasta 1g Cl-/L cuando los
cationes que predominan son calcio y magnesio.
Un alto contenido de cloruros puede daar estructuras metlicas y evitar el crecimiento de
plantas. Las altas concentraciones de cloruro en aguas residuales, cuando stas son utilizadas
para el riego en campos agrcolas deteriora, en forma importante la calidad del suelo.
Es entonces importante el poder determinar la concentracin de cloruros en aguas naturales,
residuales y residuales tratadas en un amplio intervalo de concentraciones.
El cloruro es esencial en la dieta y pasa a travs del sistema digestivo, inalterado. Un alto
contenido de cloruros en el agua para uso industrial, puede causar corrosin en las tuberas
metlicas y en las estructuras.
La mxima concentracin permisible de cloruros en el agua potable es de 250 ppm, este valor
se estableci ms por razones de sabor, que por razones sanitarias.
2.4.2. Objetivo y campo de aplicacin
Esta norma mexicana establece el mtodo de anlisis para la determinacin de cloruros totales
en aguas naturales, residuales y residuales tratadas.
2.4.3. Principio del mtodo
La determinacin de cloruros por este mtodo se basa en una valoracin con nitrato de plata
utilizando como indicador cromato de potasio. La plata reacciona con los cloruros para formar
un precipitado de cloruro de plata de color blanco. En las inmediaciones del punto de
equivalencia al agotarse el in cloruro, empieza la precipitacin del cromato. La formacin de
cromato de plata puede identificarse por el cambio de color de la disolucin a anaranjado-rojizo
as como en la forma del precipitado. En este momento se da por terminada la valoracin.
66
Materiales
Todo el material volumtrico utilizado en este mtodo debe ser de clase A con certificado, o en
su caso debe estar calibrado.
Agua: Debe entenderse agua que cumpla con las siguientes caractersticas: a) Resistividad,
megohm-cm a 25 C: 0.2 min; b) Conductividad, S/cm a 25 C: 5.0 Mx. y c) pH: 5.0 a 8.0.
Nitrato de plata (AgNO3).
Cloruro de sodio (NaCl).
Cromato de potasio (K2CrO4).
Hidrxido de sodio (NaOH).
cido sulfrico concentrado (H2SO4).
Sulfato de aluminio y potasio dodecahidratado [AlK(SO4)2.12H2O].
Amonaco concentrado (NH3).
Disolucin indicadora de cromato de potasio. Pesar aproximadamente y con precisin 50 g
de cromato de potasio y disolver en 500 ml de agua y aadir disolucin patrn de nitrato de
plata hasta que se produzca un precipitado rojo claro. Proteger la disolucin de la luz y dejar
estabilizar durante 24 horas despus de la adicin de la disolucin de nitrato de plata. Filtrar
la disolucin para remover el precipitado y aforar a un litro con agua.
Disolucin estndar de nitrato de plata (0.014N). Moler aproximadamente 5 g de cristales de
nitrato de plata y secar a 100 C durante 2 hrs. Pesar aproximadamente y con precisin 2,4
g de los cristales pulverizados de nitrato de plata disolverlos en aproximadamente un litro.
Valorar contra la disolucin patrn de cloruro de sodio 0.014N.
2.4.7. Procedimiento
a) Acondicionamiento de la muestra
b) Valoracin
Acondicionamiento de la muestra
Utilizar un volumen de muestra de 100 ml.
68
Valoracin
A 100 ml de muestra acondicionada,
adicionar 1 ml de disolucin indicadora de
cromato de potasio.
69
2.4.8. Clculos
a) Calcular la concentracin de iones cloruro en la muestra original en mg/l, como sigue:
Cl- mg /L =
Donde:
A= Son los ml de disolucin de nitrato de plata gastados en la valoracin de la muestra.
B= Son los ml de disolucin de nitrato de plata gastados en la valoracin del blanco.
N = Es la normalidad del nitrato de plata.
b) Todos los valores obtenidos de control de calidad deben ser reportados junto con los
resultados del anlisis.
c) Reportar los resultados en Cl mg/l, con la precisin correspondiente.
2.4.9. Interferencias
70
2.5. Dureza
NMX-AA-072-SCFI-2001.ANLISIS DE AGUA - DETERMINACIN DE DUREZA TOTAL EN
AGUAS NATURALES, RESIDUALES Y RESIDUALES TRATADAS - MTODO DE PRUEBA
(CANCELA A LA NMX-AA-072-1981)
2.5.0. Importancia ambiental de la medicin de la dureza
Este mtodo especifica el procedimiento para determinacin de dureza en agua por titulacin.
La dureza se entiende como la capacidad de un agua para precipitar al jabn y esto est
basado en la presencia de sales de los iones calcio y magnesio. La dureza es la responsable de
la formacin de incrustaciones en recipientes y tuberas lo que genera fallas y prdidas de
eficiencia en diferentes procesos industriales como las unidades de transferencia de calor. El
trmino dureza se aplic en principio por representar al agua en la que era difcil (duro) de lavar
y se refiere al consumo de jabn para lavado, en la mayora de las aguas alcalinas esta
necesidad de consumo de jabn est directamente relacionada con el contenido de calcio y
magnesio.
La dureza es una caracterstica qumica del agua, que est determinada por el contenido de
carbonatos, bicarbonatos, cloruros, sulfatos y ocasionalmente nitratos de calcio y magnesio. La
dureza es indeseable en algunos procesos, tales como el lavado domstico e industrial,
provocando que se consuma ms jabn, al producirse sales insolubles. En calderas y sistemas
enfriados por agua, se producen incrustaciones en las tuberas y una prdida en la eficiencia de
la transferencia de calor. Por otro lado, le da un sabor indeseable al agua potable.
Grandes cantidades de dureza son indeseables por razones antes expuestas y debe ser
removida antes de que el agua tenga uso apropiado para las industrias de bebidas, lavanderas,
acabados metlicos, teido y textiles.
La mayora de los suministros de agua potable tienen un promedio de 250 mg/l de dureza.
Niveles superiores a 500 mg/l, son indeseables para uso domstico.
Existen dos tipos de dureza:
Dureza Temporal: Esta determinada por el contenido de carbonatos y bicarbonatos de calcio y
magnesio. Puede ser eliminada por ebullicin del agua y posterior eliminacin de precipitados
formados por filtracin, tambin se le conoce como "Dureza de carbonatos".
Dureza Permanente: Est determinada por todas las sales de calcio y magnesio excepto
carbonatos y bicarbonatos. No puede ser eliminada por ebullicin del agua y tambin se le
conoce como "Dureza de no carbonatos".
71
Interpretacin de la Dureza:
Dureza como CaCO3 Interpretacin
0-75
agua suave
75-150
150-300
agua dura
> 300
Todo el material volumtrico utilizado en este procedimiento debe ser clase A con certificado o
en su caso debe estar calibrado.
2.5.4. Reactivos y patrones
Agua: Debe entenderse agua que cumpla con las siguientes caractersticas: a) Resistividad,
megohm-cm a 25 C: 0.2 min; b) Conductividad, S/cm a 25 C: 5.0 Mx. y c) pH: 5.0 a 8.0.
72
73
Pesar aproximadamente y con precisin 0.1 g de la sal de sodio del rojo de metilo y aforar a
100 ml con agua.
74
2.5.6. Procedimiento
a) Tratamiento previo de muestras de aguas contaminadas y residuales:
Si la muestra contiene partculas o materia orgnica requiere un tratamiento previo al anlisis.
Se recomienda llevar a cabo una digestin con cido ntrico - cido sulfrico cido ntrico cido perclrico y ajustar posteriormente el pH de la disolucin a un valor de 9, utilizando
disolucin de amonaco.
b) Titulacin de muestras:
a) Colocar 50 ml de muestra en un
matraz Erlenmeyer de 250 ml.
Aadir 1 ml 2 ml de disolucin
amortiguadora. Generalmente 1
ml es suficiente para alcanzar
un pH de 10 a 10.1.
75
b) Aadir 1 ml 2 ml de disolucin
amortiguadora. Generalmente
un ml es suficiente para
alcanzar un pH de 10 a 10.1.
76
2.5.7. Clculos
a) Calcular la dureza total como se indica en la siguiente ecuacin:
Dureza total expresada como CaCO3 (mg/l) =
(A-B)X C X 1,000
D
Donde:
A= Son los ml de EDTA gastados en la titulacin en la muestra.
B= Son los ml de EDTA gastados en la titulacin en el blanco (si fue utilizado).
C= Son los mg de CaCO3 equivalentes a 1 ml de EDTA.
D= Son los ml de muestra.
b) Expresar la dureza total como mg/l CaCO3 con la precisin correspondiente.
2.6. Sulfatos
NMX-AA-074-1981. "ANLISIS DE AGUA. DETERMINACIN DEL IN SULFATO, MTODO
GRAVIMTRICO
2.6.0. Introduccin
Los sulfatos se encuentran en las aguas naturales en un amplio intervalo de concentraciones,
los estndares para agua potable del servicio de salud pblica tienen un lmite mximo de 250
ppm de sulfatos, ya que a valores superiores tiene una accin "purgante.
Los lmites de concentracin, arriba de los cuales se percibe un sabor amargo en el agua son:
Sulfato de magnesio:
Sulfato de calcio:
77
2.6.4. Interferencias
Errores positivos
Los sulfitos y sulfuros pueden oxidarse a sulfatos y precipitarse, la materia en suspensin,
slice, cloruro de bario, nitratos y agua, frecuentemente quedan ocludos en el precipitado. Los
silicatos solubles pueden insolubilizarse durante el desarrollo del mtodo.
Errores negativos
Los sulfatos cidos de metales alcalinos pueden no precipitar totalmente como sulfato de bario,
debido a que quedan ocluidos en el precipitado como tales, y por lo tanto con un peso molecular
menor.
Nota: El cromo y el hierro interfieren en la completa precipitacin, una alta acidez solubiliza al
sulfato de bario, en cambio una baja acidez facilita la precipitacin de fosfato y carbonato.
2.6.5. Reactivos y soluciones
en
de
de
de
Bao de vapor.
Horno de secado, equipado con control de temperatura.
Mufla con indicador de temperatura.
Desecador.
Balanza analtica con sensibilidad de 0.1 mg.
Cpsula de platino.
2.6.7. Procedimiento
a) Eliminacin de slice.
78
Agregar 1 cm de cido fluorhdrico concentrado (ver Nota 1), e inclinar la cpsula y rotar
hasta que el cido est en contacto con el residuo.
Nota: Esta operacin debe efectuarse bajo campana y con el equipo de proteccin adecuado.
b) En caso de que la muestra tuviera una concentracin menor de 25 mg/l de slice, efectuar el
procedimiento anterior sin la adicin de cido fluorhdrico. Pasarla directamente de la flama
del mechero a una mufla a 1073 K (800 C) durante una hora.
c) Transferir con pipeta volumtrica a un vaso de precipitados, un volumen de muestra
clarificada que contenga no ms de 50 mg de ion sulfato y ajustar a un volumen de 250 cm.
d) Llevar a un pH de 4.5 - 5 con la solucin de cido clorhdrico 1:1, usando un potencimetro
o solucin indicadora de rojo de metilo.
e) Adicionar de 1 a 2 cm de la solucin de cido clorhdrico 1:1, calentar la solucin a
ebullicin y agitar lentamente, agregar lentamente solucin de cloruro de bario caliente
hasta que la precipitacin sea completa. Aadir aproximadamente 2 cm en exceso de la
solucin de cloruro de bario. Si la cantidad de precipitado es pequea, agregar un total de 5
cm de solucin de cloruro de bario.
f)
g) Mezclar una pequea cantidad de la pulpa del papel filtro de cenizas conocidas con el
precipitado de sulfato de bario y filtrar a temperatura ambiente. La filtracin de la pulpa
facilita y reduce la tendencia del precipitado a separarse.
h) Lavar el precipitado con porciones pequeas de agua caliente, para que los lavados estn
libres de cloruros y hasta que 10 cm de las aguas de lavado no produzcan turbidez al
adicionarles 1 cm del reactivo de nitrato de plata cido ntrico.
i)
Secar el papel filtro y precipitado en estufa, pasar a un mechero evitando que el papel filtro
se inflame y posteriormente llevar a una mufla a 1073 K (800 C) durante una hora.
j)
79
2.6.8. Clculos
El contenido del ion sulfato en mg/l se conoce aplicando la frmula siguiente:
1 mg de BaSO4 = 0.4115 mg de SO4=
mg de SO4=/l=
A x O.4115 x 1000
B
Donde:
A = Peso del sulfato de bario, en mg.
B = Volumen de la muestra original en cm.
El mtodo gravimtrico tiene una precisin del 1 %.
2.7. Grasas y aceites
NMX-AA-005-SCFI-2000. ANLISIS DE AGUA - DETERMINACIN DE GRASAS Y ACEITES
RECUPERABLES EN AGUAS NATURALES, RESIDUALES Y RESIDUALES TRATADAS MTODO DE PRUEBA (CANCELA A LA NMX-AA-005-1980)
2.7.0. Introduccin
Este mtodo permite una estimacin del contenido de grasas y aceites en aguas naturales,
aguas residuales y aguas residuales tratadas al determinar gravimtricamente las sustancias
que son extradas con hexano de una muestra acuosa acidificada. La determinacin de grasas
y aceites es indicativa del grado de contaminacin del agua por usos industriales y humanos.
En la determinacin de grasas y aceites no se mide una sustancia especfica sino un grupo de
sustancias con unas mismas caractersticas fisicoqumicas (solubilidad). Entonces la
determinacin de grasas y aceites incluye cidos grasos, jabones, grasas, ceras, hidrocarburos,
aceites y cualquier otra sustancia susceptible de ser extrada con hexano.
2.7.1. Objetivo y campo de aplicacin
Esta norma mexicana establece un mtodo de anlisis para la determinacin de grasas y
aceites recuperables en aguas naturales, residuales y residuales tratadas.
2.7.2. Principio
Este mtodo se basa en la adsorcin de grasas y aceites en tierra de diatomeas, los cuales son
extrados en un Soxhlet empleando hexano como disolvente. Una vez terminada la extraccin
se evapora el hexano y se pesa el residuo que ha quedado en el recipiente; siendo este valor el
contenido de grasas y aceites.
80
2.7.4. Materiales
2.7.5. Equipo
81
j)
k) Una vez terminada la extraccin retirar el matraz del equipo Soxhlet, y evaporar el
disolvente.
82
l)
(A - B)
V
Donde:
A= Es el peso final del matraz de extraccin (mg).
B= Es el peso inicial del matraz de extraccin (mg).
V= Es el volumen de la muestra, en litros.
b) Restar al resultado obtenido de la muestra el valor del blanco de reactivo.
c) Reportar los resultados del anlisis en mg/l.
2.7.9. Interferencias
Los hexanos tienen la facilidad de disolver no solamente las grasas y aceites minerales y
vegetales, sino tambin otras sustancias como azufre elemental, tintes y otros compuestos
orgnicos.
Existen prdidas importantes de hidrocarburos de cadena corta y aromticos simples con
puntos de ebullicin menores a 150 C.
Puede obtenerse interferencia positiva durante el secado del residuo debido a la adsorcin de
humedad si no se utiliza un desecador.
83
84
2.8.4. Material
2.8.5. Reactivos
1
ml Na2S2O3 consumidos
86
2.8.8. Clculos
a) Para soluciones patrn de cloro:
mg C1 como Cl2/ml =
(A -B) x N x 35.45
ml de muestra
(A -B) x N x 35450
ml de muestra
Donde:
A = Volumen de Na2S2O3 gastado en la muestra (ml).
B = Valor absoluto del volumen de Na2S2O3 gastado en el blanco (ml).
N = Normalidad del Na2S2O3.
2.9. Fsforo total
NMX-AA-029-SCFI-2001. ANLISIS DE AGUAS - DETERMINACIN DE FSFORO TOTAL
EN AGUAS NATURALES, RESIDUALES Y RESIDUALES TRATADAS - MTODO DE
PRUEBA (CANCELA A LA NMX-AA-029-1981)
2.9.0. Introduccin
El fsforo generalmente se encuentra en aguas naturales, residuales y residuales tratadas
como fosfatos. stos se clasifican como ortofosfatos, fosfatos condensados y compuestos
rgano fosfatados. Estas formas de fosfatos provienen de una gran cantidad de fuentes, tales
como productos de limpieza, fertilizantes, procesos biolgicos, etc.
El fsforo es un nutriente esencial para el crecimiento de organismos, por lo que la descarga de
fosfatos en cuerpos de aguas puede estimular el crecimiento de macro y microorganismos
fotosintticos en cantidades nocivas.
2.9.1. Objetivo y campo de aplicacin
Esta norma mexicana establece dos mtodos de anlisis para la determinacin de fsforo total
en aguas residuales, naturales y residuales tratadas.
2.9.2. Principio del mtodo
Mtodo cloruro estaoso
Este mtodo se basa en la reaccin del fsforo contenido en la muestra como ortofosfato con el
cido molbdico para formar el cido 12-molibdofosfrico segn la reaccin:
87
Agua: Debe entenderse agua que cumpla con las siguientes caractersticas: Resistividad,
megohm-cm a 25 C: 0.2 min.; Conductividad, S/cm a 25 C: 5.0 mx., y pH: 5.0 a 8.0.
88
Mtodo vanadomolibdofosfrico
89
Materiales
2.9.6. Calibracin
Se debe contar con un registro de verificacin de la calibracin de los equipos y materiales
siguientes:
Material volumtrico.
Balanza analtica con precisin de 0.1 mg.
Espectrofotmetro. Para utilizarse de 190 a 900 nm y equipado con celda de 1 cm de paso
ptico de luz.
Desarrollo del color en la muestra. Tomar una alcuota que contenga de 0.05 mg a 1 mg de
fsforo, en un matraz volumtrico de 50 ml. Aadir 10 ml de la disolucin reactivo vanadomolibdato y diluir hasta la marca con agua. Preparar un blanco usando una cantidad de agua
equivalente a la alcuota de la muestra. Despus de 10 minutos ms, medir la absorbancia de
una muestra contra un blanco a una longitud de onda de 400 a 490 nm, dependiendo de la
sensibilidad deseada. El color es estable por das y su intensidad no se ve afectada por las
variaciones de la temperatura ambiente.
Los intervalos de concentracin para diferentes longitudes de onda son:
Intervalo de P (mg/l)
1.0. - 50.
2.0 10
420
4.0 20
470
2.9.8. Clculos
a) Calcular la concentracin de la muestra por medio de la ecuacin obtenida de la curva de
calibracin y que es representada por la siguiente ecuacin: Y = mX + b
Donde:
M = Es la pendiente.
B = Es la ordenada al origen.
Y = Es la absorbancia.
X = Es la concentracin (mg P/L).
b) En caso de haber dilucin de la muestra a lo largo del desarrollo del mtodo (digestin y
alcuota de muestra), utilizar la siguiente ecuacin:
mg P/L = concentracin x factor de dilucin
c) Reportar los resultados en mg P/L con dos dcimas, con la precisin correspondiente.
2.9.9. Interferencias
Arseniato, fluoruro, torio, bismuto, sulfuro, tiosulfato, tiocianato o excesos de molibdato
interfieren. El hierro en su forma ferrosa produce un color azul, pero no afecta a los resultados,
si su concentracin es menor a 100 mg/l. La interferencia de sulfuro puede eliminarse por
oxidacin con agua de bromo. Los siguientes iones no interfieren en concentraciones superiores
a 1 g/L: Al3+, Fe3+, Mg2+, Ca2+, Ba2+, Sr2+, Li+, Na+, K+, NH4+, Cd2+, Mn2+, Pb2+, Hg22+, Sn2+, Cu2+,
Ni2+, Ag+, U4+, Zr4+, AsO3-, Br-, CO32-, ClO4-, CN-, IO3-, SiO44-, NO3-, NO2-, SO42-, SO32-,
pirofosfato, molibdato, tetraborato, selenato, benzoato, citrato, oxalato, lactato, tartrato, formiato
y salicilato.
92
2. 10. pH
NMX-AA-008-SCFI-2000 ANLISIS DE AGUA - DETERMINACIN DEL pH - MTODO DE
PRUEBA (CANCELA A LA NMX-AA-008-1980)
2.10.1. Importancia de la determinacin del pH
En 1909, el qumico dans Sorensen defini el potencial hidrgeno (pH) como el logaritmo
negativo de la concentracin molar de los iones hidrgeno. Esto es: pH = - log [H +]. Desde
entonces, el trmino pH ha sido universalmente utilizado por la facilidad de su uso, evitando as
el manejo de cifras largas y complejas.
Por ejemplo, una concentracin de [H+] = 1x10-8 M (0.00000001), es simplemente un pH de 8 ya
que: pH= - log [10-8] = 8.
La relacin entre pH y concentracin de iones H se puede ver en la siguiente tabla, en la que se
incluyen valores tpicos de algunas sustancias conocidas:
93
94
Agua: Debe entenderse agua que cumpla con las siguientes caractersticas: a) Resistividad,
megohm-cm a 25 C: 0.2 min; b) Conductividad, S/cm a 25 C: 5.0 Mx. y c) pH: 5.0 a 8.0.
cido Clorhdrico concentrado (HCl).
Disolucin de cido clorhdrico (1:9): Adicionar un volumen de cido clorhdrico concentrado
(seccin 6.1) a 9 volmenes de agua.
Disoluciones amortiguadoras comerciales de pH nominal cercano a 4, 7 y 10. cuyo valor de
pH se conozca con dos cifras decimales.
Carbonato de Calcio bajo en lcali (CaCO3).
Cloruro de Potasio (KCl).
Disolucin comercial de relleno de electrodos de referencia de plata/cloruro, de plata o
calomel.
Timol cristalizado (5-metilo-2-isopropilofenol).
Tetraoxalato de Potasio (KH3 (C2O4) 2.2H2O).
Monohidrgenotartrato de Potasio (KHC4H4O6).
Hidrgenoftalato de Potasio (KHC8H4O4).
Fosfato de Potasio monobsico (KH2PO4).
Fosfato de Sodio dibsico (Na2HPO4).
95
Termmetro que cumpla con las especificaciones establecidas en la norma mexicana NMXAA-007-SCFI.
Electrodo comercial de membrana de vidrio o electrodo combinado con compartimiento de
referencia rellenable, para uso general, con intervalo de trabajo de pH comprendido por lo
menos entre 2 y 12, cuya eficiencia electromotriz sea superior al 95%.
97
2.10.5. Equipo
98
Registrar las dos lecturas de pH con dos cifras decimales y la temperatura de la muestra,
as como informar el mtodo de calibracin del dispositivo de determinacin del pH,
mediante el "Sistema calibrado con dos patrones operacionales":
pH (patrn 1) =
pH (patrn 2) =
Valor de la pendiente:
Temperatura:
102
3.1.3. Definiciones
Para propsitos de esta nrma mexicana, se aplican las siguientes definiciones:
Organismos coliformes: Organismos capaces de crecimiento aerbico ya sea 35 1 C 37
1 C, en un medio de cultivo lquido lactosado con produccin de cido y gas dentro de un
periodo de 48 horas.
Organismos coliformes fecales (termotolerantes): Organismos coliformes que tienen las
mismas propiedades fermentativas a 44 0.5 C.
Escherichia coli presuntiva (E. coli): Organismos coliformes termotolerantes que tambin
producen Indol a partir de tripofano a 44 C.
3.1.4. Principio
El mtodo se basa en la inoculacin de alcuotas de la muestra, diluida o sin diluir, en una serie
de tubos de un medio de cultivo lquido conteniendo lactosa.
Los tubos se examinan a las 24 y 48 horas de incubacin a 36 1 C. Cada uno de los que
muestran turbidez con produccin de gas se resiembra en un medio confirmativo ms selectivo
y, cuando se busca E. coli presuntiva, en un medio en el que se pueda demostrar la produccin
de indel.
Se lleva acabo la incubacin de estos medios confirmativos basta por 48 horas a 36 1 C,
para la deteccin de organismos coliformes y a 44 C para organismos termotolerantes y E. coli.
Mediante tablas estadsticas se lleva acabo el clculo del nmero ms probable (NMP) de
organismos coliformes, organismos coliformes termotolerantes y E. coli que puedan estar
presente en 100 ml de muestra, a partir de los nmeros de los tubos que dan resultados
confirmativos positivos.
3.1.5. Aparatos y equipo
Aparte de los equipos que se suministran estriles, el material de vidrio y el resto del equipo
deben esterilizarse.
3.1.6. Reactivos
Los reactivos que a continuacin se mencionan, deben ser grado analtico a menos que se
indique otra cosa. Cuando se especifique el uso de agua, se debe entender agua destilada in
vitro agua desionizada libre de sustancias que pueden inhibir el crecimiento bacteriano en las
condiciones de prueba.
Para la preparacin de los reactivos, las condiciones de esterilizacin deben ser 121 C y
0.098066 Mpa (1 kg/cm2) de presin manomtrica durante 15 minutos. Los tubos de
fermentacin (Durham) no deben contener burbujas de aire despus de la esterilizacin.
En caso de utilizar medios deshidratados, seguir las recomendaciones del fabricante para su
preparacin.
a) Utilizar uno de los siguientes medios de cultivo
Agua de tristona.
Reactivo de Kovacs para indol.
Reactivo oxidasa para prueba de oxidasa.
104
e) Diluyentes
3.1.7. Muestreo
El procedimiento para la recoleccin de las muestras de agua para el anlisis bacteriolgico,
depende del tipo de agua que se desee muestrear.
Las muestras para el anlisis bacteriolgico, se deben tomar en frascos muestreadores que se
hayan lavado con extremo cuidado y esterilizado. En su interior colocar previo a la
esterilizacin, 0.1 ml de solucin de tiosulfato de sodio al 1% con el propsito de inhibir la
accin del cloro que puede contener la muestra, cubriendo adems el tapn del frasco hasta el
cuello con papel aluminio.
Muestreo en cuerpos receptores
1.- Siempre que sea posible, llenar el frasco a 2/3 partes de su capacidad; una cantidad menor
sera insuficiente, si fuera mayor disminuira el espacio de aire disponible, necesario para
homogeneizar la muestra. Las muestras deben ser representativas del agua en el estudio y
asimismo no deben contaminarse en forma alguna.
2.- El frasco donde se colecta la muestra no se debe destapar sino hasta el momento en el que
se efecte el muestreo. Al muestrear, se debe evitar que el cuello del frasco se ponga en
contacto con los dedos o cualquier otro material contaminante.
3.- El examen de la muestra colectada debe realizarse lo ms pronto posible, para evitar
proliferacin o muerte de las bacterias. Cuando el examen se practica dos horas despus de
tomar la muestra, los resultados empiezan a ser inciertos.
4.- El volumen de muestra suficiente para efectuar el anlisis bacteriolgico, de preferencia
debe ser de aproximadamente 100 ml. Es importante que todas las muestras estn
acompaadas de datos completos y exactos de identificacin y descripcin.
El mecanismo de muestreo superficial es el siguiente
1.- Quitar el papel aluminio del cuello del frasco; introducir el frasco aproximadamente 30 ml
bajo la superficie del agua.
2.- Destapar el frasco dentro del agua. La boca del envase debe quedar en sentido contrario al
flujo de la corriente. Si no existe corriente, como en los embalses, crearla empujando el
frasco horizontalmente, en direccin opuesta al movimiento de la mano.
105
3.- Una vez que la muestra ocupe el volumen correspondiente del frasco (2/3 partes); tapar sin
sacarlo del agua teniendo cuidado de que el papel aluminio vuelva a cubrir el cuello de la
botella.
4.- Si no es posible la recoleccin de muestras en las condiciones antes anunciadas; fijar un
lastre al frasco, al que se hace descender en el agua.
5.- Para tomar muestras profundas en lagos o embalses; usar aparatos especiales que
permitan destapar y tapar mecnicamente el frasco debajo de la superficie.
Muestreo en pozos y grifos
1.- Si el pozo est provisto de bomba de mano, bombear durante 5 minutos Para que el agua
fluya libremente, antes de tomar la muestra.
2.- Si el pozo est dotado de bomba mecnica, tomar la muestra en una llave previamente
flameada de la descarga, dejando que fluya el agua libremente 5 minutos antes de tomar la
muestra.
3.- A efectuar este muestreo, se deben flamear los bordes del frasco y tapn durante el tiempo
que dura el muestreo. Esto se hace con objeto de mantener el mximo las condiciones de
asepsia.
4.- Si no se cuenta con equipo de bombeo, tomar la muestra directamente del pozo por medio
de un frasco estril con lastre. En este caso se debe evitar la contaminacin de la muestra
por las notas superficiales.
5.- Si se trata de tomar una muestra de un grifo del sistema de servicio, flamear el grifo y abrirlo
completamente, dejando que el agua fluya de 2 a 3 minutos, o el tiempo suficiente para
permitir la purga de la lnea.
6.- En el momento del muestreo, restringir el flujo de la llave para que se pueda llenar el frasco
sin salpicaduras.
3.1.8. Preservacin y almacenamiento
El anlisis bacteriolgico de la muestra debe practicarse inmediatamente despus de su
recoleccin. Es por ello que se recomienda que de no efectuarse as el anlisis, se inicie dentro
de las dos horas prximas a la recoleccin de la muestra y en ningn caso, este lapso debe
exceder de 24 horas para agua potable y de 6 horas para otros tipos de agua para que sea
vlido el resultado del anlisis. Durante el perodo que transcurra del muestreo al anlisis, se
debe conservar la muestra a 4 C, con objeto de inhibir la actividad bacteriana para no obtener
resultados falsos o dudosos.
106
3.1.9. Procedimiento
3.1.9.1. Pruebas presuntivas
Preparacin de la muestra e inoculacin del medio
Antes del examen, mezclar perfectamente la muestra agitndola vigorosamente para lograr una
distribucin uniforme de los microorganismos y, dependiendo de la naturaleza del agua y el
contenido bacteriano esperado, hacer las diluciones necesarias en esta etapa. Utilizar series
que constan de por lo menos tres diluciones: 10 ml, 1 ml y 0.1 ml bien 1 ml y 0.01 ml. Por
cada dilucin debe haber 3 5 tubos.
Para diluciones a 10 veces, poner 90 9 ml del diluyente en matraces o tubos de dilucin
esterilizados. Alternativamente, usar volmenes de diluyente preesterilizado en botellas de
tapn de rosca. Hacer una o ms diluciones a 10 veces transfiriendo un volumen de la muestra
de agua a 9 volmenes de diluyente. Repetir estos pasos cuantas veces sea necesario.
Preparar suficiente cantidad de cada dilucin para todas las pruebas que se vayan a llevar a
cabo con la muestra. Para diluciones diferentes a 10 veces ajustar el volumen de diluyente a la
porcin de prueba. Inocular los tubos conteniendo medios de aislamiento de doble
concentracin con porciones de prueba de un volumen mnimo de 5 ml.
Incubacin de los tubos
Incubar los tubos inoculados ya sea a 35 1 C 37 1 C durante 48 horas.
Examen de los tubos
Examinar los cultivos de los tubos despus de un perodo de incubacin de 18 a 24 horas y
considerar como resultados positivos a aquellos que muestren turbidez debida al crecimiento
bacteriano y formacin de gas en los tubos internos invertidos (Durham) junto con produccin
de cido si el medio de aislamiento contiene un indicador de pH. Reincubar aquellos tubos que
no muestran alguno o todos estos cambios y examinarlos nuevamente para detectar reaccionan
positivas a las 48 horas.
3.1.9.2. Pruebas confirmativas
Inoculacin del medio
Resembrar a partir de cada tubo de medio de aislamiento que muestro un resultado positivo en
uno o ms tubos de medio confirmativo (6.2) para detectar la produccin de gas e indol.
Nota: Si se usa el medio ms inhibitorio de caldo lactosa para aislar, resembrar en alguno de
los dos medios confirmativos ms selectivos, Caldo de bilis lactosa verde brillante Caldo EC
para efectuar la confirmacin.
107
Incubacin y examen
Para confirmar la presencia de organismos coliformes, incubar un tubo de 9.2.1 de Caldo de
bilis lactosa verde brillante Caldo EC a 37 C y examinarlo para ver si hay produccin de gas
dentro de un perodo de 48 horas.
Para confirmar la presencia de organismos coliformes termotolerantes, incubar otro tubo de
9.2.1 de Caldo de bilis lactosa verde brillante Caldo EC a 44 C durante 24 horas para ver si
hay produccin de gas.
Para confirmar la presencia de E. coli. Presuntiva, incubar un tubo de 9.2.1 de agua de triptona
para detectar la formacin de indol a 44 C durante 24 horas. Despus aadir de 0.2 a 0.3 ml de
reactivo de Kovacs (6.3) el tubo de agua de triptona; El desarrollo de un anillo de color rojo
despus de agitar suavemente de note la presencia de indol.
Nota: La deteccin de E. coli presuntiva, se considera una evidencia satisfactoria de
contaminacin fecal. Sin embargo, pueden efectuarse mayores pruebas para la confirmacin de
E. coli si se considera necesario.
Coliformes
E. coli
108
Con una barra de vidrio o un asa de alambre de platino (no de nicromel), colocar parte del
cultivo en el papel filtro preparado.
Considerar la aparicin de un color azul marino purpra en un lapso de 10 segundos como
una reaccin positiva.
Nota: En cada ocasin que se use el reactivo de oxidasa, llevar a cabo pruebas de control con
cultivos de organismos que se sepa dan una reaccin positiva (Pseudomonas aeruginosa) y
uno que de una reaccin negativa (E. coli) en 100 ml de la muestra.
3.1. 10.
Clculos
A partir del nmero de tubos que dan reacciones positivas en los medios de aislamiento y
confirmativo, calcular por referencia a las tablas estadsticas (ver tabla) el nmero ms probable
de organismos coliformes, organismos coliformes termotolerantes y E. coli presuntiva en 100 ml
de la muestra. Cuando se emplean de dilucin para hacerlo equivalente.
ndice del NMP y lmite confiable de 95 % para varias combinaciones de resultados positivos y
negativos cuando se usan: 5 tubos con porciones de 10 ml en cada uno, 5 con porciones de 1
ml y con 5 porciones de 0.1 ml.
No. de tubos con
reacciones positivas
Lmite confiable
ndice
de 95%
del NMP
5 tubos 5 tubos 5 tubos
por
Inferior Superior
con
con
con
100 ml
10 cm
1 ml
0.1 ml
0
0
0
0
0
0
1
2
0
1
0
0
<2
2
2
4
<0.5
<0.5
<0.5
7
7
11
1
1
1
1
1
0
0
1
1
2
0
1
0
1
0
2
4
4
6
6
<0.5
<0.5
<0.5
<0.5
<0.5
7
11
11
15
15
2
2
2
2
2
2
0
0
1
1
2
3
0
1
0
1
0
0
5
7
7
9
9
12
<0.5
1
1
2
2
3
13
17
17
21
21
28
19
Lmite confiable
ndice
de 95%
del NMP
5 tubos
5 tubos
por
5 tubos
Inferior Superior
con
con
100 ml
con 1 ml
10 ml
0.1 ml
5
5
5
0
0
0
0
1
2
23
31
43
7
11
15
70
89
110
5
5
5
1
1
1
0
1
2
33
46
63
11
16
21
93
120
150
5
5
5
2
2
2
0
1
2
49
70
94
17
23
28
130
170
220
5
5
5
5
3
3
3
3
0
1
2
3
79
110
140
180
25
31
37
44
190
250
340
500
5
5
4
4
0
1
130
170
35
43
300
490
109
Lmite confiable
ndice
de 95%
del NMP
5 tubos 5 tubos 5 tubos
por
Inferior Superior
con
con
con
100 ml
10 cm
1 ml
0.1 ml
3
3
3
3
3
3
0
1
1
2
2
3
1
0
1
0
1
0
11
11
14
14
17
17
2
2
4
4
5
5
25
25
34
34
46
46
4
4
4
4
4
4
4
4
4
4
0
0
1
1
1
2
2
3
3
4
0
1
0
1
2
0
1
0
1
0
13
17
17
21
26
22
26
27
33
34
3
5
5
7
9
7
9
9
11
12
31
46
46
63
78
67
78
80
93
93
110
Lmite confiable
ndice
de 95%
del NMP
5 tubos
5 tubos
por
5 tubos
Inferior Superior
con
con
100 ml
con 1 ml
10 ml
0.1 ml
5
5
5
4
4
4
2
3
4
220
280
350
57
90
120
700
850
1,000
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
0
1
2
3
4
5
240
350
540
920
1600
=>2400
68
120
180
300
640
750
1,000
1,400
3,200
5,800
ndice del NMP y lmite confiable de 95 % para varias combinaciones de resultados positivos y
negativos cuando se usan: Un tubo con porciones de 50 ml 5 tubos con porciones de 10 ml y 5
tubos con porciones de 10 ml.
No. de tubos
con reacciones positivas
1 tubo
con
50 ml
Lmite confiable
ndice
de 95%
del NMP
5 tubos 5 tubos
por
Inferior Superior
con
con
100 ml
10 ml
1 ml
Lmite confiable
ndice
de 95%
del NMP
5 tubos 5 tubos
por 100
Inferior Superior
con
con
ml
10 ml
1 ml
0
0
0
0
0
0
0
0
0
1
1
1
0
1
2
0
1
2
<1
1
2
1
2
3
<0.5
<0.5
<0.5
<0.5
<0.5
4
6
4
6
8
1
1
1
1
1
2
2
2
3
3
1
2
3
0
1
7
10
12
8
11
1
3
3
2
3
17
23
28
19
26
0
0
0
0
0
0
2
2
2
3
3
4
0
1
2
0
1
0
2
3
4
3
5
5
<0.5
<0.5
<0.5
<0.5
<0.5
<0.5
6
8
11
8
13
13
1
1
1
1
1
3
3
3
4
4
2
3
4
0
1
14
18
21
13
17
4
5
6
4
5
34
53
66
31
47
1
1
1
1
1
4
4
4
4
5
2
3
4
5
0
22
28
35
43
24
7
9
12
15
8
69
85
100
120
75
1
1
1
1
1
5
5
5
5
5
1
2
3
4
5
35
54
92
160
=>240
12
18
27
39
100
140
220
450
1
1
1
1
1
1
1
1
1
0
0
0
0
1
1
1
1
2
0
1
2
3
0
5
7
9
5
1
3
4
6
3
5
7
9
5
<0.5
<0.5
<0.5
<0.5
<0.5
<0.5
1
2
<0.5
4
8
11
15
8
13
17
21
13
111
ndice del NMP y lmite confiable de 95 % para varias combinaciones de resultados positivos y
negativos cuando se usan: 5 tubos con porciones de 50 ml, 5 tubos con porciones de 10 ml y 5
tubos con porciones de 1 ml.
No. de tubos
Lmite confiable
con reacciones positivas ndice del
de 95%
5 tubo 5 tubos 5 tubos NMP por
100 ml Inferior Superior
con
con
con
50 ml
10 ml
1 ml
0
0
0
0
0
0
0
0
1
1
2
3
0
1
0
1
0
0
<1
1
1
1
1
1
<0.5
<0.5
<0.5
<0.5
<0.5
2
2
2
2
2
1
1
1
1
1
1
1
0
0
1
1
2
2
3
0
1
0
1
0
1
0
1
1
1
1
1
2
2
<0.5
<0.5
<0.5
<0.5
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<0.5
<0.5
2
2
2
2
2
4
4
2
2
2
2
2
2
0
0
1
1
2
2
0
1
0
1
0
1
1
1
1
2
2
2
<0.5
<0.5
<0.5
<0.5
<0.5
<0.5
2
2
2
4
4
4
2
2
2
3
3
4
0
1
0
2
3
3
<0.5
1
1
4
7
7
3
3
3
3
3
3
0
0
1
1
1
2
0
1
0
1
2
0
2
2
2
2
3
3
<0.5
<0.5
<0.5
<0.5
1
1
4
4
4
4
7
7
112
4
4
4
4
4
4
1
1
2
2
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3
1
2
0
1
2
0
4
4
4
4
5
5
1
1
1
1
2
2
9
9
9
9
12
12
4
4
4
4
4
4
3
3
4
4
5
5
1
2
0
1
0
1
5
6
6
7
7
8
2
2
2
3
3
3
12
14
14
17
17
19
5
5
5
5
5
0
0
0
1
1
0
1
2
0
1
4
4
6
5
6
1
1
2
2
2
9
9
14
12
14
5
5
5
5
5
1
2
2
2
2
2
0
1
2
3
7
6
8
10
12
3
2
3
4
4
17
14
19
23
28
5
5
5
5
5
3
3
3
3
4
0
1
2
3
0
9
11
14
18
13
3
4
5
6
6
21
26
34
53
31
No. de tubos
Lmite confiable
con reacciones positivas ndice del
de 95%
5 tubo 5 tubos 5 tubos NMP por
100 ml Inferior Superior
con
con
con
50 ml
10 ml
1 ml
3
3
3
3
3
3
4
4
4
4
2
2
3
3
4
4
0
0
0
1
1
2
0
1
0
1
0
1
2
0
3
4
3
4
4
4
2
3
3
3
1
1
1
1
1
1
<0.5
1
1
1
7
9
7
9
9
9
4
7
7
7
5
5
5
5
5
4
4
4
4
5
1
2
3
4
0
17
22
28
35
24
6
7
9
11
8
47
70
85
100
75
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
1
2
3
4
5
35
54
92
160
=>240
11
18
27
39
100
140
220
420
113
ndice del NMP y lmite confiable de 95 % para varias combinaciones de resultados positivos y
negativos cuando se usan: 3 tubos con porciones de 1 ml y 3 con porciones de 0.1 ml.
No. de tubos con reacciones positivas
3 tubos con
3 tubos con
3 tubos con
10 ml
1 ml
0.1 ml
0
0
0
0
1
0
0
0
1
1
0
0
1
1
0
1
0
1
1
1
1
1
0
2
2
0
0
2
1
0
2
0
1
2
1
1
2
0
2
2
1
2
3
0
0
3
1
0
3
2
0
3
0
1
3
1
1
3
2
1
3
0
2
3
1
2
3
2
2
3
0
3
3
1
3
3
2
3
3
3
3
114
ndice
del NMP por ml
<3
3
3
4
7
7
11
11
9
14
15
20
21
28
23
39
64
43
75
120
93
150
210
240
460
1,100
=> 2,400
Superior
<0.5
<0.5
<0.5
1
1
3
3
1
3
3
7
4
10
4
7
15
7
14
30
15
30
35
36
71
150
9
13
20
21
23
36
36
36
37
44
89
47
150
120
130
380
210
230
280
380
440
470
1,300
2,400
4,800
3.1.12. Confiabilidad
El procedimiento de fermentacin en tubos mltiples es el mtodo ms usado por su facilidad y
economa. El resultado de esta prueba se expresa por el nmero ms probable (NMP), pero
debe entenderse que este mtodo no es exacto ya que slo nos da la probable densidad de
bacterias coliformes totales o fecales de una muestra determinada.
La confiabilidad est dada por los niveles superiores o inferiores del lmite de confianza a los
95% establecidos en las tablas para cada NMP/100 ml, no obstante, es una indicacin
importante para evaluar la calidad sanitaria del agua.
115
Aparte de los equipos que se suministran estriles, el material de vidrio y el resto del equipo
deben esterilizarse.
Horno de aire caliente para esterilizacin con calor seco.
Autoclave.
Incubador o bao de agua, controlado termostticamente a 35 1 C 37 1 C.
Incubador o bao de agua, controlado termostticamente a 44 0.5 C.
Medidor de pH.
Equipo para filtracin con membrana.
Membranas filtrantes estriles de aproximadamente 47 mm de dimetro, con caractersticas
de filtracin equivalentes a un tamao de dimetro nominal de poro de 0.45 mm. Si no
pueden conseguirse estriles, deben esterilizarse de acuerdo con las instrucciones del
fabricante.
Pinzas de punta redondeada, para manejar las membranas.
Frascos para toma de muestras, de vidrio resistente o cristal refractario de 250 ml de boca
ancha, con tapn de cristal esmerilado, o bolsas de plstico estriles de volumen
equivalente.
Material comn de laboratorio.
117
b) Medios de aislamiento
Utilizar uno ms de los siguientes medios de cultivo ya sea en forma slida como agar o bien
como caldo para saturar cojinetes absorbentes:
c) Medios confirmativos
Utilizar uno o ms de los siguientes:
Reactivos
3.2.5. Muestreo
El procedimiento para la recoleccin de las muestras de agua para el anlisis bacteriolgico,
depende del tipo de agua. Las muestras para el anlisis bacteriolgico, se deben tomar en
frascos que se hayan lavado con extremo cuidado y esterilizado. En su interior colocar, previo a
la esterilizacin, 0.1 ml de solucin de tiosulfato de sodio al 10% con el propsito de inhibir la
accin del cloro que pueda contener la muestra, cubriendo adems el tapn del frasco hasta el
cuello con papel aluminio.
Muestreo en cuerpos receptores
1.- Siempre que sea posible, llenar el frasco a 2/3 partes de su capacidad; una cantidad menor
sera insuficiente, si fuera mayor, disminuira el espacio de aire disponible, necesario para
homogeneizar la muestra. Las muestras deben ser representativas del agua en estudio y asi
mismo no deben contaminarse en forma alguna.
2.- El frasco donde se colecta la muestran no se debe destapar si no hasta el momento en el
que se efecte el muestreo. Se debe evitar que el cuello del frasco se ponga en contacto
con los dedos o cualquier otro material contaminante.
118
3.- El examen de la muestra colectada debe realizarse lo ms pronto posible, para evitar
proliferacin o muerte de las bacterias. Cuando el examen se practica dos horas despus de
tomar la muestra, los resultados empiezan a ser inciertos.
4.- El volumen de muestra suficiente para efectuar el anlisis bacteriolgico, de preferencia
debe ser aproximadamente 200 ml. Es importante que todas las muestras estn
acompaadas de datos completos y exactos de identificacin y descripcin.
El mecanismo de muestreo superficial es el siguiente
1.- Quitar el papel aluminio del cuello del frasco; introducir el frasco aproximadamente 30 cm
bajo la superficie del agua.
2.- Destapar el frasco dentro del agua. La boca del envase debe quedar en sentido contrario al
flujo de la corriente. Si no existe corriente, como en los embalses, crearla empujando el
frasco horizontalmente, en direccin opuesta al movimiento de la mano.
3.- Una vez que la muestra ocupe el volumen correspondiente del frasco (2/3 partes), tapar sin
sacarlo del agua, teniendo cuidado de que el papel aluminio vuelva a cubrir el cuello de la
botella. Si no es posible la recoleccin de muestras en las condiciones antes enunciadas,
fijar un lastre al frasco, al que se hace descender en el agua.
4.- Para tomar muestras profundas en lagos o embalses, usar aparatos especiales que
permitan destapar y tapar mecnicamente el frasco debajo de la superficie.
Muestreo en pozos y grifos
1.- Si el pozo est provisto de bomba de mano, bombear durante 5 minutos para que el agua
fluya libremente, antes de tomar la muestra.
2.- Si el pozo est dotado de bomba mecnica, tomar la muestra en una llave previamente
flameada de la descarga, dejando que fluya el agua libremente 5 minutos antes de tomar la
muestra.
3.- Al efectuar este muestreo, se debe evitar que el agua escurra fuera del frasco, adems se
deben flamear los bordes del frasco y tapn durante el tiempo que dura la toma de muestra.
Esto se hace con objeto de mantener al mximo las condiciones de asepsia.
4.- Si no se cuenta con equipo de bombeo, tomar la muestra directamente del pozo por medio
de un frasco estril con lastre. En este caso se debe evitar la contaminacin de la muestra
por las natas superficiales.
5.- Si se trata de tomar una muestra de un grifo del sistema de servicio, flamear el grifo y abrirlo
completamente, dejando que el agua fluya de 2 a 3 minutos el tiempo suficiente para
permitir la purga de la lnea.
119
6.- En el momento de tomar la muestra, restringir el flujo de la llave para que se pueda llenar el
frasco sin salpicadura.
El anlisis bacteriolgico de la muestra debe practicarse inmediatamente despus de su
recoleccin. Es por ello que se recomienda que de no efectuarse as el anlisis, se inicie dentro
de las dos horas prximas a la recoleccin de la muestra, y en ningn caso, este lapso debe
exceder de 24 horas para agua potable y de 6 horas para otros tipos de agua para que sea
vlido el resultado del anlisis. Durante el perodo que transcurre del muestreo al anlisis, se
debe conservar la muestra a 4 C, con objeto de inhibir la actividad bacteriana para no obtener
resultados falsos o dudosos.
3.2.6. Procedimiento
a) Pretratamiento de la muestra
Para muestras con alto contenido de materia en suspensin, filtrar utilizando un prefiltro de 0.8
a 1 mm.
b) Seleccin del volumen de muestra
El volumen mximo de la porcin de prueba depende de la cantidad de materia orgnica en la
muestra de agua y de las membranas utilizadas. Para ello se debe seleccionar un volumen de
muestra una dilucin del mismo, que d menos de aproximadamente 100 colonias en una
membrana de 47 50 mm de dimetro. Para trabajo rutinario se recomienda una muestra de
200 ml. Cuando se espere un contenido alto de bacterias, puede tomarse una muestra ms
pequea (20 ml); pero se recomienda poner en el embudo previamente 50 ml de agua de
dilucin estril.
c) Filtracin
Colocar las bases en la unidad filtrante y en ambiente estril (mecheros encendidos). Colocar la
membrana estril con ayuda de las pinzas de punta redondeada. La cuadrcula de la membrana
debe quedar visible. Colocar el embudo con cuidado y sujetarlo. Agitar vigorosamente la
muestra, verter 100 ml en el embudo y filtrar con ayuda del vaco. Enjuagar el embudo con la
membrana todava en su lugar, con 3 porciones de 20 a 30 ml de agua de dilucin estril. Filtrar
un volumen similar de la muestra, o una dilucin de ella, a travs de dos membranas
separadas.
d) Transferencia de la membrana
Despus del ltimo enjuague y terminada la filtracin, quitar el embudo y con ayuda de la pinza
de punta redondeada flameada; levantar la membrana y sobreponerla, ya sea en una caja de
Petri con medio de agar en un cojinete absorbente estril saturado previamente con medio de
lquido en una caja de Petri. Para evitar cualquier crecimiento confluente, verter cualquier
exceso de medio antes despus de colocar la membrana en el cojinete en un medio de agar
fundido a 45 C, vertido sobre una base de agar al 1.5% en una caja de Petri.
120
Asegurarse de que no haya burbujas de aire atrapado entre la membrana y el medio. Para
diferentes volmenes de la misma muestra, puede reutilizarse el equipo de filtracin sin
desinfectarlo, siempre y cuando se filtren primero los volmenes ms pequeos. Para filtrar otra
muestra, usar otro equipo de filtracin o bien desinfectar el equipo, por ejemplo, por inmersin
en agua hirviendo durante cuando menos un minuto. As tambin se debern seguir las
instrucciones del fabricante para la desinfeccin.
Durante la filtracin de una serie de muestras, no es necesario desinfectar la base del filtro a
menos que se contamine o que se dae la membrana. No alternar la filtracin de muestras
contaminadas con muestras de agua tratada en el mismo equipo. Primero filtrar todas las
muestras de agua clorada y aquellas de las que se esperan resultados negativos y despus las
muestras contaminadas. Se sugiere que se utilice un equipo de filtracin para todas las
muestras cloradas y otro para las muestras contaminadas.
e) Incubacin
Invertir las cajas de Petri y colocarlas en una incubadora. Las cajas que contienen membranas
en cojinetes absorbentes, deben colocarse siempre en recipientes hermticos para evitar la
desecacin del medio. Incubar una membrana ya sea a 35 0.5 C 37 0.5 C, entre 18 y 24
horas para aislar los organismos coliformes; incubar la otra membrana a 44 0.5 C entre 18 y
24 horas para organismos coliformes termotolerantes. El mismo tipo de medio generalmente
puede usarse para ambas membranas, pero utilizar el medio MFC solamente a 44 C y los
medios Endo y LES Endo a 35 37 C.
Nota: Se recomienda un perodo preliminar de incubacin a menor temperatura, como por ejemplo
a 30 C durante las primeras 4 horas de incubacin para reactivar organismos, especialmente en el
anlisis de agua potable. El cambio puede efectuarse ya sea por transferencia a otra incubadora o
utilizando un aparato, en el que la temperatura cambia automticamente despus de un perodo
dado. Idealmente todas las cajas deben colocarse en la incubadora al mismo tiempo.
Alternativamente, las membranas pueden incubarse durante un perodo limitado (2 a 4 horas) en un
medio de reactivacin y despus transferirse a otro medio, usualmente selectivo, para proseguir la
incubacin.
f) Examen de las membranas
Las cajas o membranas deben examinarse inmediatamente. Si esto no es posible, pueden
almacenarse entre 4 y 5 C durante perodos cortos, siempre y cuando esto no afecte la
apariencia de las colonias.
Para los organismos coniformes, se debern examinar las membranas y contar como
organismos coliformes presuntivos todas las colonias, independientemente del tamao que
muestren, que tengan las siguientes caractersticas despus de su incubacin a 35 37 C:
121
En agar lactosa TTC con tergitol 7 (6.2.1): Un halo central amarillo en el medio bajo la
membrana.
En agar lactosa con tergitol 7 (6.2.2): Una coloracin amarilla, naranja o rojo ladrillo con un
halo central amarillo en el medio bajo la membrana.
En membrana con caldo lauril sulfato (6.2.3): Un color amarillo extendindose hacia la
membrana.
En caldo o agar Endo (6.2.4): Un color rojo obscuro con brillo metlico verde-dorado.
En agar LES Endo (6.2.5): Un color rojo obscuro con brillo metlico verde-dorado.
Considerar como organismos coliformes termotolerantes presuntivos todas las colonias que
muestren, despus de incubacin a 44 C, las mismas caractersticas coloniales que se
describen anteriormente (9.6.1). Si se usa medio MFC (6.2.6), las colonias sern de color azul.
g) Es importante hacer notar que las cuentas de colonias en membranas a 37 y a 44 C,
son solamente resultados de coliformes presuntivos
Dado que no se detecta la produccin de gas, hay tambin un supuesto adicional de que los
organismos que forman las colonias pueden producir gas. Para el anlisis de agua cruda o
parcialmente tratada, esto puede ser suficiente, pero para agua potable y otras circunstancias,
es importante llevar a cabo las pruebas confirmativas.
Resembrado, incubacin y examen
Para confirmar los resultados de la membrana, resembrar cada colonia (9.6.1) un nmero
representativo de ellas (una por tubo) en agua lactosa peptona (6.3.1), e incubar a 35 37 C
durante 48 h. La produccin de gas durante este perodo confirma la presencia de organismos
coliformes. Para organismos coliformes termotolerantes y E. coli presuntiva en membranas, ya
sea que hayan sido incubadas a 44 C 35 37 C, resembrar cada colonia (9.6.2) un
nmero representativo de ellas (una por tubo), en agua lactosa peptona y agua triptona e
incubarlos a 44 C durante 24 h. La produccin de gas en agua lactosa peptona, confirma la
presencia de organismos coliformes termotolerantes,mientras que el desarrollo de un color rojo
en la superficie del cultivo en agua de triptona despus de la adicin de 0.2 a 0.3 ml de reactivo
de Kovacs (6.4.1), confirma la presencia de E. coli presuntiva.
Nota:
1. El uso de caldo de lauril triptosa manitol con triptofano, permite analizar tanto la produccin
de gas como de indol en un solo tubo.
2. La deteccin de E. coli presuntiva se considera una evidencia satisfactoria de contaminacin
fecal. Sin embargo, pueden llevarse a cabo mayores pruebas para la confirmacin de E. coli
si se considera necesario.
122
h) Prueba de oxidasa
Algunas bacterias encontradas en el agua pueden conformarse a la definicin de organismos
coliformes en muchos aspectos, pero pueden producir gas a partir de lactosa solamente a
temperaturas inferiores a 37 C. Por consiguiente, dan resultados negativos en las pruebas
confirmativas estndar para organismos coniformes, y su presencia en agua usualmente no se
considera significativa. Las especies de Aeromonas que se encuentran naturalmente en el
agua, tienen una temperatura ptima de crecimiento en el rango de 32.5 2.5 C, pero a pesar
de ello pueden producir cido y gas a partir de lactosa a 37 C. Tienen poco significado como
indicadores de contaminacin fecal y se distinguen del grupo coliforme por una reaccin de
oxidasa positiva.
Llevar a cabo la prueba de oxidasa con subcultivos puros de organismos fermentadores de
lactosa, crecidos en medio nutriente de agar, como sigue:
Nota: En cada ocasin en la que se utilice el reactivo de oxidasa, llevar a cabo pruebas de
control con cultivos de organismos que den una reaccin positiva (Pseudomona aeruginosa), y
uno que d una reaccin negativa (E. coli).
3.2.7. Expresion de resultados
A partir del nmero de colonias caractersticas contadas en las membranas y tomando en
cuenta los resultados de las pruebas confirmativas, calcular el nmero de organismos
coliformes, organismos coliformes termotolerantes y Escherichia coli presuntiva presentes en 10
ml de la muestra, expresando el resultado como unidades formadoras de colonias en un
volumen de referencia especificado de la muestra (generalmente 100 ml 1 ml) de acuerdo con
la siguiente frmula:
Colonias coliformes totales
Volumen de referencia
S Ni
(n1V1 F1 ) + (n2 V2 F2 ) +......+ (nn Vn Fn )
Vs
123
Donde:
Cs =
S Ni =
n1 =
V1 =
F1 =
Vs =
Nota: La cuenta final as obtenida, es el promedio ponderado de las cuentas de cada una de las
placas.
3.2.8. Reporte de la prueba
El reporte de la prueba debe hacer referencia a esta norma y dar toda la informacin relevante,
incluyendo:
a) Todos los detalles necesarios para la identificacin completa de la muestra.
b) La tcnica y medios de cultivo empleados.
c) El tiempo, temperatura y condiciones de incubacin.
d) Los resultados, expresados de acuerdo con lo establecido en el punto 10.
e) Cualquier suceso particular observado durante el curso del anlisis y cualquier operacin no
especfica da en el mtodo o considerada opcional que pueda haber influido en los
resultados.
3. 3. Anlisis del plancton
3.3.1. Fitoplancton
a) Anlisis cualitativo (Cyanophyta, Chlorophyta, Euglenophyta, Pyrrophya, Bacillariophyta
centrales, pennales).
Por sus cortos ciclos vitales, las algas microscpicas responden rpidamente a los cambios
ambientales ocasionados de manera natural o por las actividades humanas, por esto la
composicin de sus especies es un indicador de la calidad del agua en la que se encuentran, y
por tanto es necesario analizar la estructura de las comunidades para caracterizar el ambiente
que los rodea.
En los contextos taxonmico y ecolgico se requiere de la encuesta descriptiva, comparativa o
del estudio de un grupo de algas nacidas en algn intervalo de tiempo y en el mismo lugar, por
lo que se pueden obtener conclusiones de observaciones nicas al comparar los grupos de
algas de dos o ms localidades diferentes como ros, arroyos, lagos, esteros, lagunas y el
medio marino (De la Lanza, 2003).
124
Nace de aqu la importancia de familiarizarse con los grupos taxonmicos ms frecuentes que
se presentan en una muestra de fitoplancton.
Las algas se pueden dividir en 8 subdivisiones que son las siguientes:
Cianfitas: Se trata de organismos unicelulares carentes de un ncleo verdadero y de
plastidios, que se multiplican por divisin transversal. La mayora de estas especies vive en el
agua, aunque algunas de stas tienen la habilidad de vivir en la tierra porque pueden fijar el
nitrgeno atmosfrico a ellas.
Euglenfitas: Son algas de estructura muy sencilla, cuya caracterstica ms distintiva es la
presencia de una mancha de pigmento fotosensible. stas disponen de uno o dos flagelos, lo
cual les permite cambiar su forma, adems se multiplican por divisin longitudinal.
Pirrfitas: Son algas en su mayora unicelulares que tienen dos flagelos de longitud distinta. La
clula se encuentra desnuda o provista de una cubierta ms o menos dura. Al igual que los
Euglenfitos tienen un ocelo, que junto con su forma de vida parasitaria o depredativa (en
algunos casos), posibilita que en el pasado se les tomara como organismos animales. Esta
especie tambin es marina, excepto por algunas que son terrestres (Noctiluca miliaris).
Crisfitas: Conocidas como algas amarillas, son organismos unicelulares o pluricelulares que
se renen en colonias. Su principal caracterstica es la presencia de cromatforos con
pigmentos de color amarillo, que les confiere un aspecto dorado. Son de morfologa variable
con flagelos y sin ellos, y en algunos casos se mueven por rizpodos. Siempre se reproducen
por reproduccin vegetativa.
Clorfitas: Las clorfitas o algas verdes son en su mayora de color verde, pueden ser unicelulares
pluricelulares y de formas muy variables. La mayora de las especies microscpicas son propias
de agua dulce, aunque hay nmerosos grupos marinos que alcanzan cierto tamao, como la
conocida lechuga de mar. Se multiplican por divisin celular, o sexualmente, o por la fusin de dos
gametos de tamaos diferentes. Este grupo de algas se encuentra muy extendido en la naturaleza,
ya que algunas de estas le dan color a los estanques o cubren la capa de los rboles. Esta especie
se mantiene en grupos, como muchas de las especies de la costa marina.
Carfitas: Son algas muy complejas cuya estructura se parece a veces a la de las
fanergamas. De color verde en su mayora, son frecuentes en las orillas de los ros y lagos y
muy pocas especies estn en la vida marina. Estas se reproducen sexualmente o por va
vegetativa.
Nefitas: Son algas que alcanzan mayor tamao (hasta 100 mm). Aunque poseen clorofila los
pigmentos marrones las esconden, por lo que presentan coloracin marrn o parda. Estas algas
son tpicas del agua salada pero muy pocas de ellas viven en agua dulce.
Rodfitas: A estas algas se le conoce como alga roja, comprenden especies tpicas de aguas
marinas de grandes profundidades en zonas donde otras especies no pueden sobrevivir por la
falta de la luz. Son de color rojo, aunque poseen as mismo clorofila. Se reproducen
sexualmente y asexualmente y poseen complicados ciclos de alternancia de generaciones.
125
126
Para reducir los errores estadsticos de recuento, es necesario contar un nmero suficiente de
organismos; por lo menos 100 individuos de las especies ms importantes.
Los clculos para obtener el nmero de clulas por volumen de agua se hacen siguiendo la
frmula:
Clulas /m =
n x l x 1000 mm3
d x t h 1 ml
Donde
n = Nmero de clulas contadas en los transectos.
d = Dimetro del campo, en mm; si se desconoce, se determina mediante un micrmetro ocular.
t = Longitud de los transectos, en mm.
h = Altura de la cmara de sedimentacin, en mm.
Recuento de Sedgwick-Rafter
Es un dispositivo empleado comnmente para el recuento de plancton. El mayor inconveniente
es que no se pueden utilizar objetivos de gran aumento, por lo que la clula no es apropiada
para examinar nanoplancton. Tiene aproximadamente 50 mm de largo por 20 mm de ancho y 1
mm de profundidad. El rea total del fondo son 1000 mm2 aproximadamente, y el volumen total,
1000 mm3 o 1 ml.
Para el recuento se coloca el cubreobjetos de vidrio diagonalmente a travs de la clula y se
agrega 1 ml de muestra con una pipeta de 1 ml de luz amplia. Si la muestra es demasiado
densa, deber desecharse y colocar otra diluida.
La clula Sedgwick-Rafter es colocada en el microscopio y se enfoca con el objetivo 10X. Se
realiza el conteo por tiras y el nmero de stas depender de la precisin que se quiera
obtener. Dedzcase el nmero de plancton en la clula a partir de la siguiente ecuacin:
No./ml =
C x 1000 mm3
LxDxWxS
Donde:
C = Nmero de organismos contados.
L = Longitud de cada tira en mm.
D = Profundidad de una tira en mm.
W = Anchura de una tira en mm.
S = Nmero de tiras contadas.
127
Introdzcase la muestra con una pipeta en uno de los canales de la cmara de 2 por 5 mm,
con el cubre colocado en su sitio.
Al cabo de un periodo de sedimentacin de 10 minutos, cuntense los elementos del
plancton en campos elegidos al azar, en un nmero dependiente de la densidad y variedad
del plancton y de la precisin estadstica deseada.
En esta cmara o cualquier otra circular, se puede contar por tiras, midiendo el dimetro
efectivo y contando dos tiras perpendiculares que se crucen en el centro. Calclese el nmero
por mililitro como sigue:
No./ml =
C x 1000 mm3
AxDxF
Donde:
C = Nmero de organismos contados.
A = rea de un campo.
D = Profundidad de un campo en mm.
F = Nmero de campos contados.
Recuento con hematocitmetro
En una placa de recuento, tiene una cuadrcula rayada divisiones de 1 mm2 la cual se encuentra
acoplada con un cubre de vidrio esmerilado. La cmara tiene 0.1 mm de profundidad.
Introdzcase la muestra con una pipeta y obsrvese con un aumento de 450X. Cuntese todas
las clulas del interior de la cuadrcula. La cmara va acompaada con las instrucciones
detalladas del fabricante con las normas para uso adecuado y para los clculos. Un
inconveniente de estas clulas de recuento, es que la muestra debe tener una densidad de
plancton muy alta para que proporcione datos estadsticamente fiables.
* Para mayor informacin consultar el libro Mtodos Estndar.
Identificacin de grupos taxonmicos
Esta tcnica constituye un mtodo sencillo para obtener la abundancia relativa y diversidad de
los organismos fitoplanctnicos.
1. La muestra obtenida con la red se deja sedimentar 30 minutos.
128
2. Con una pipeta Pasteur se toma una muestra directa del fitoplancton sedimentado,
introducindola muy despacio para evitar la agitacin del medio.
3. Se realizan 10 preparaciones temporales (por cada uno de los ambientes muestreados),
poniendo una gota de la muestra sobre un portaobjetos y colocando un cubreobjetos.
4. Observe al microscopio ptico o invertido, moviendo de derecha a izquierda las
preparaciones, anotando el nmero de organismos presentes e identificando los grupos con
la ayuda de claves taxonmicas y libros especializados.
Con los datos obtenidos de las 10 preparaciones, elabore en papel milimtrico un histograma,
poniendo en el eje de las abscisas los diferentes grupos de organismos y en el eje de las
ordenadas sus porcentajes. Con esto se pueden observar las diferencias existentes en la
diversidad y abundancia de las especies en los diferentes ambientes acuticos.
3.3.2 Anlisis de zooplancton
Coppodos, quetognatos, nauplios, ostrcodos, cladceros, rotferos, larvas pluteus, larvas de
peces, etc.
a). Anlisis cualitativo
La riqueza de grupos zooplanctnicos en una muestra de agua, puede ser indicativo del estado
de salud del ecosistema, de pocas de reproduccin de las especies, de la abundancia de
fitoplancton presente, de perturbaciones antropognicas, de las condiciones hidrolgicas
prevalecientes, de los ritmos, fluctuaciones y sucesiones propias de esta comunidad.
Como una primera etapa el acercarse al reconocimiento de los grupos representativos de una
muestra de zooplancton, a travs de claves de identificacin o lminas especficas, son de vital
importancia.
b).- Anlisis cuantitativo
La distribucin de la abundancia del zooplancton en los ecosistemas acuticos, nos puede
indicar, entre otras cosas, el aporte de materia orgnica presente en stos, que puede ser por
causas naturales, ejemplo aportes de diferentes afluentes al sistema por alteraciones
antropognicas, e inferir as de manera indirecta, el potencial de las pesqueras en ciclos
inmediatos en el ecosistema. El manejo adecuado de los mtodos utilizados en el anlisis
cuantitativo es de primordial importancia, en los estudios de la comunidad zooplanctnica.
Los mtodos ms empleados para la cuantificacin de las muestras de zooplancton, van desde
el examen total de la muestra hasta la observacin de alcuotas de volumen determinado,
pasando por los separadores Folsom. Cada uno de dichos mtodos presenta serios
inconvenientes, ya sea por el tiempo que se emplea en el estudio de las muestras o por la baja
precisin de stas.
129
130
Coscinodiscus
Coscinodiscus wailesii
Coscinodiscus en divisin
celular
Coscinodiscus
Arachnoiduscus ehrenbergi
Coscinodiscus asteromphatus
Coscinodiscus
Coscinodiscus
Coscinodiscus
Streptotheca thamensis
Fragilaria oceanica
Thalassionema nitzschioides
Pelurosigma sp.
Asterionella japonica
Licmophora sp.
131
Biddulphia obtusa
132
Biddulphia
Biddulphia reticulata
Biddulphia aurita
Biddulphia
Biddulphia
Biddulphia longicruris
Biddulphia longicruris
Chaetoceros
Chaetoceros decipiens
Chaetoceros diversus
Chaetoceros
Chaetoceros
Chaetoceros brevis
Chaetoceros didymus
133
Nitzschia seriata
Nitzschia paradoxa
Nitzschia
Bacillaria
Licmophora flabellata
134
Licmophora
Rabdosphaera sp.
Pyramimonas sp.
(criptophyceae)
Silicoflagellate
Prorocentrum micans
Varias formas de
cocolitofridos
Prorocentrum scutellum
Chromulina sp.
Isochrysis sp.
Hemiselmis
cryptophyceae
Noctiluca scintillans
135
Phalacroma sp.
Dinophysis acuta
Gynodinium glaucum
Exuviella sp.
Goniauolax sp
P. depressum
P. divergens
P. granii
136
Piridinium
excentricum
P. globulum
Diplopsalis lenticula
Ceratium
candelabrum
C. gravidum
C. setaceum
C. tripos
C. macroceras
C. lineatum
C. extensus
C. longipes
C. furca
Ceratium fusas
C. arclicum
137
Epiplocycloides
reticulata
Flavella ehrenbergii
Helicostomalla subulata
Rhabdonella
amor
Dictyocysta dilatata
Ptychocylis arctica
Dictyocysta alagans
Codonella
amphorella
Coxiella ampla
Codonellopsis acuadata
Acanthostomella
norvegica
Condonellopsis
pusilla
138
Globigerina pachyderme
Globigerina bulloides
Acanthochiasma serrulatum
Globigerina quinquelobe
Acanthochiasma fusiforme
139
Strombidium styliferum
Strombidium canicum
Strombidium gracillime
Strombidium acumination
Strombidium strobilus
Strombidium marinum
Hexacontinum sp (esqueleto)
Thalassicolla sp.
140
S. Prolifera
Eucodonium brownei
Sarsia eximia
Cladomena radiatum
Bouganvillia ramosa
S. tubulosa
Aglantha digitale
Hybocodon prolifer
Liriope tetraphylla
141
Melicertum octocostatum
Steenstrupia natans
Obelia sp.
142
Laodicea undulata
Turritopsis nuticula
Phialella quadrata
Cosmetira pilosella
Valella valella
Muggiaea kochi
Hippopodium hippopus
Dimophyes arctice
Physalia physalia
Eudoxides spiralis
Lensis conoidea
Chakiohyes appendiculata
143
a)
campana nadadora
Aphysonectia cormidium
c) Bractea
Beroe cumis
Pleurobrachia pilaus
a) campana nadadora
Bolinopsis infundibutum
144
Sagitta setosa
Sagitta elegans
Sagitta
serratodentata
Sagitta maxima
Sagitta
hexaptera
Krohnitta subsilis
Sagitta lyra
Eukrohnia
hamata
Sagitta zetosios
Sagitta
macrocephala
145
Proceraea pica
Autolytus edwardsi
Proceraea cornuta
Travisiopsis
lanceolata
Tomopteris
septendrionalis
Tomopteris
helgolandica
Lopadorhynchus
uncinatus
Lamisca hubrechti
Proceraea prismatica
146
Crustceos (cladceros y ostrcodos) (Newell y Newell, 1979) (tomado de Snchez RuedaPonce Mrquez, 2003)
147
Calanus
Calanus
Olthona
148
Epilabidocera longipedata
Oithona spinorostris
Centropages
Oithona helgolandica
Tanaid
Estomatopodo
Munna
Idothea
Larva cyptoniscan
Sphaearoma
Cumacea
149
Crustceos (decpodos, ispodos y cumceos) (Smith, 1977) (tomado de Snchez RuedaPonce Mrquez, 2003)
150
Systellaspis debilis
Synisoma
acuminatum
Pasiphaea tarta
Caridion gordoni
Synisoma
lancifar
Plesionika martia
Acanthephyra purpurea
Eurydice
grimaldii
Pasiphaea multidentata
Leptostylis villosa
Pseudocuma longicornis
Hemilamprops rosea
Diastylis turnida
Crustceos (anfpodos, gamridos e hipridos) (Smith, 1977) (tomado de Snchez RuedaPonce Mrquez, 2003)
Hyperidae
Hyperidae
Escala en mm
Crustceos (anfpodos: capllidos) (Smith, 1977) (tomado de Snchez Rueda-Ponce
Mrquez, 2003)
Metacaplrella
Caprella
Caprella
Escala en mm
151
Escala en mm
152
Corystes cassivelaunus
megalopa
Maia squinado
megalopa
Gennadas sp (penaidea)
Athanas sp (Alpheidae)
S. balea
S. retroversa
Carinaria lamarcki
J. globosa
Janthina janthina
154
P. reticulata
P. moluccensis
Peraclis bispinosa
P. triacantha
J. exigua
Vista dorsal
Veliger en huevo
Vista lateral
veliger
Littorina littorea
Veliger
Albania crassa
Vista lateral
Trivia monorcha
veliger
Concha
primera veliger
ltima veliger
Velutina sp.echinospira
larva
Lamellaria
perspicua
echinospira larva
155
156
V. ovata
Venus stiatula
Mactra coralina
Spisuta solida
Dosinia sp.
Petricola pholadiformis
S. elliptica
Tellina fabula
T. crassa
Cultellus pellucidus
Ensis ensis
E. siliqua
Antedon bifida
Asterias rubens
brachiolaria
Asterias rubens
bipinnaria
Asteropecten
irregularis
Ophiocomina nigra
D. nationalis gonozooide
de la superficie dorsal
158
Fritillaria borealis
Fritillaria ventusa
Fritillaria tenella
Appendicularia sicula
Oikopleura dioica
O. fusiformis
O. labradoriensis
159
Los datos morfomtricos se obtienen colocando al pez sobre su lado derecho (con el hocico a la
izquierda del observador), el cual se mide con un ictimetro o regla graduada en milmetros.
Para medir estructuras pequeas se utiliza un vernier o un comps de dos puntas; las tallas se
consignaran refirindolas siempre al medio centmetro inferior o superior. Las tallas que
terminen medidas de longitud se registran siempre en milmetros.
Es recomendable obtener los datos morfomtricos de organismos recin capturados, ya que
stos se encuentran relajados. Si se trabaja con ejemplares preservados, los datos obtenidos
son menps precisos debido a la rigidez del material biolgico causada por los fijadores.
A continuacin se especifican las medidas morfomtricas ms empleadas en la
identificacin de los peces.
Regin ceflica: Basndose en la forma general del pez, la regin ceflica se delimita entre el
borde externo del oprculo y el borde de la boca. En esta regin se encuentran: el hocico, la
boca, el oprculo, las membranas branquiostegas, el istmo, el preoprculo, las narinas
(nostrillos), las barbillas y los ojos.
El hocico est delimitado por el margen anterior del ojo y el borde anterior de la mandbula
superior, incluye la boca, definida como el orificio de entrada hacia el aparato digestivo. La boca
esta formada generalmente por tres huesos; premaxilar, maxilar, y mandibular; los dos primeros
se localizan en la parte superior y forman la maxila, mientras que el ltimo se encuentra en la
porcin inferior y constituye la mandibula.
La longitud y la disposicin de los huesos determinan la posicin de la boca. Utilizando como
referencia un eje horizontal imaginario en el cuerpo del pez, los ictiolgos reconocen tres
posiciones bsicas: terminal, superior e inferior.
Boca terminal: Se caracteriza por la posicin del orificio de la cavidad bucal, que coincide con
el eje horizontal del cuerpo del pez. Adems, en este tipo de boca, la mandbula y la maxila
tienen la misma longitud. Casi todos los peces tienen este tipo de boca, la cul es caracterstica
en las familias Serranidae, Stromatidae y Carangidae.
Boca superior (dorsal u oblcua): El orificio bucal se localiza en posicin dorsal, de manera
que al observar al pez por el dorso de la cabeza, puede apreciarse el orificio. La mandibula y la
maxila tienen la misma longitud, pero se encuentran en posicin casi vertical en relacin con el
eje horizontal. Estas caractersticas se presentan en los peces de la familia Uranoscopidae.
Boca inferior: El orificio de la boca se encuentra muy por debajo del eje horizontal del cuerpo,
en posicin ventral, lo cual se debe a una modificacin del maxilar, que crece y se alarga ms
que la mandbula, como en los organismos de la familia Acipenseridae.
Debido a los hbitos alimenticios y a la forma de vida de los peces en su medio ambiente, se
han originado diversos cambios estructurales en la forma del hocico. Se presentan muchas
modificaciones de los huesos mandibular, maxilar y premaxilar; en algunos peces el premaxilar
puede desplazarse hacia delante, y se dice que es protrctil, como en los gurridos, y
161
semiprotrctil (debido a un hueso que no deja de mover totalmente hacia delante el premaxilar),
como en algunos organismos de la familia Carangidae.
En otros casos, la mandbula y el maxilar son largos y fuertes y se proyectan hacia el frente,
como en los organismos de las familias Belonidae y Lepisosteidae.
Otra modificacin se observa en la familia Syngnathidae: la mandbula y el maxilar se fusionan y
alargan, dando como resultado un hocico tubular.
Placa gular: Es una estructura de importancia sistemtica, constituida por un hueso alargado
que se encuentra por debajo del mentn, entre ambos lados de la mandbula inferior. Esta
presente en individuos de la familia Elopidae.
Aberturas branquiales: Casi todos los peces poseen dos aberturas branquiales localizadas a
ambos lados del cuerpo, las cuales varan en los diferentes grupos de peces; en casi todos
estn situadas por delante de las aletas pectorales, mientras que en las familias Ogcocefalidade
y Antenaridae se encuentran por detrs de ellas.
Las branquias pueden estar tambin bordeadas por membranas, como en las familias ,
oprculo, como ocurre en la mayora de los peces.
Istmo: Es la parte ventral anterior del organismo y se observa como un estrechamiento. Las
membranas branquiostegas se extienden hasta esta regin y pueden estar separadas o libres
del istmo; son de gran importancia sistemtica.
Oprculo: Se origina en el arco hioideo; presenta movilidad, la cul es efectuada por las
membranas branquiostegas, que actan como una vlvula que permite la salida del agua pero
no su entrada.
Preoprculo: Generalmente se encuentra unido al hueso opercular, y tiene un margen angular
con un lado vertical y otro inferior horizontal. Ambos lados pueden tener ornamentaciones, que
van desde pequeas espinas (preoprculo aserrado) hasta espinas largas hacia la parte
posterior; el nmero y la disposicin de la espina varan en cada especie o no existe en los
preoprculos lisos.
Narinas: En los peces seos hay estructuras sensitivas que los relacionan con su medio, como
los orificios en ambos lados del hocico, denominados narinas o nostrilos, los cuales
desembocan en un saco ciego y representan los rganos olfatorios; pueden ser de forma oval o
alargados, y su posicin y nmero vara. En la mayora de los telesteos se localiza un par de
nostrilos a cada lado del hocico, en posicin dorsal y con distinta funcin cada uno: entrada
(incurrente) y salida (excurrente).
Barbilla: Se trata de estructuras sensitivas en la regin ceflica; son extensiones o
proyecciones de la piel, en la cual se encuentran receptores tctiles o qumicos. Pueden
presentar diferentes estructuras y ubicacin, y reciben su nombre segn la regin sobre la que
emergen: maxilares, mandibulares, nasales, etc.
162
Similares a las barbillas, pero sin una funcin sensorial, son los cirros o papilas drmicas,
prolongaciones aplanadas de la piel que pueden adornar el borde de los labios u otras partes de
la cabeza.
Ojos: En los peces, la posicin de los rganos de la vista se puede determinar considerando la
ubicacin que tengan en relacin con la longitud ceflica; se observan tres posiciones: media,
anterior y posterior.
Aletas: Las aletas pueden estar constituidas por radios y espinas. Los radios son elementos
segmentados que pueden estar ramificados o no, y normalmente son blandos. Las
segmentaciones se observan con facilidad bajo el microscopio estereoscpico.
Las espinas nunca presentan segmentaciones y suelen ser duras; cuando se observan con el
microscopio estereoscpico, reflejan la luz emitida sobre ellas.
Generalmente son lisas, pero algunos peces presentan espinas aserradas.
Las aletas se clasifican en: aletas medias (dorsal, anal y caudal) y aletas pares (pectorales y
plvicas), y la notacin ms utilizada para designarlas es: D, aleta dorsal; A, aleta anal; C, aleta
caudal; P1 aleta pectoral; y P 2 aleta plvica.
La aleta caudal es la ms importante para la natacin en la mayora de los peces; ha sufrido
diversas modificaciones en los diferentes grupos, dependiendo de su forma de vida, y puede ser
redondeada, convexa, bicncava, lanceolada, bifurcada y lunada.
Las aletas plvicas son muy importantes para la sistemtica de los peces. Se distinguen tres
posiciones, que se utilizan para separar grandes grupos: aletas torcicas, que estn
implantadas por debajo o alrededor de la base de las pectorales; abdominales, que se insertan
por detrs de la regin de las pectorales; y yugulares, que se encuentran sobre el istmo o
delante de ste.
En las diversas aletas el nmero de radios y espinas, o de ambos, se conoce como frmula
radial y sirve para determinar los diferentes grupos de peces.
Las espinas, siempre y cuando existan, se denotan con nmeros romanos y los radios con
nmeros arbigos. El nmero de espinas se separa de los radios por una coma si pertenecen a
una misma aleta, cuando existen dos aletas se emplea un guin. Ejemplos:
D.12 indica la presencia de una aleta dorsal con 12 radios.
D, III, 12 indica una aleta dorsal con tres espinas y 12 radios.
D, V-II,8 indica la presencia de dos aletas dorsales, la primera formada por cinco radios y la
segunda por dos espinas y ocho radios.
163
Escamas: Son caractersticas de los peces, aunque algunas especies carecen de ellas; derivan
de la dermis y varan de tamao, desde las casi microscpicas hasta las muy grandes y visibles
a distancia. Suelen estar firmemente implantadas en la piel, aunque en ciertos organismos son
caedizas y se consideran deciduas. Generalmente se encuentran imbricadas a manera de tejas,
con el borde libre dirigido hacia la parte posterior del pez.
En los peces seos pueden distinguirse tres tipos estructurales de escamas; ganoideas, que
son rmbicas y caractersticas de los pejelagartos; cicloideas, con forma de disco de borde ms
o menos liso; y ctenoideas, que se caracterizan por tener proyecciones dentadas en su borde
libre.
En la mayor parte de los peces, existe una lnea de escamas con poros o canales
microscpicos que cumplen funciones sensoriales; dicha lnea se ubica a ambos lados del
cuerpo y se conoce como lnea lateral.
Generalmente la lnea lateral es continua y recta; a simple vista se inicia en el margen superior
del oprculo y termina en la base de la aleta caudal, aunque puede continuar ms all de la
placa hiprica.
El nmero de escamas a lo largo de la lnea lateral tiene gran importancia para diferenciar
gneros y especies. El conteo se realiza a partir de la parte posterior del oprculo hasta poco
antes de la placa hiprica (pednculo caudal), donde las escamas comienzan a ser pequeas e
irregulares.
Coloracin Los peces muestran gran variedad de coloraciones, desde las ms simples y
opacas, presentes en casi todos los peces, hasta las ms exticas e inimaginables que se
observan en los peces de arrecifes coralinos. La amplia gama de colores de los peces obedece
a dos causas, una qumica y la otra fsica.
La coloracin qumica esta dada por los cromatforos o biocromos, que contienen grnulos de
pigmento y se localizan en la dermis. Por los colores que poseen, los peces se dividen en
eritrforos (rojo), xantforos (amarillo), melanforos (negros) y leucforos (blanco).
La coloracin fsica es provocada por clulas especializadas llamadas iridocitos o
esquemacromos, que contienen en su superficie una sustancia refringente denominada
guanina. La combinacin entre la coloracin qumica y la fsica produce efectos de interferencia
que dan lugar a una amplia gama de colores.
La coloracin es utilizada por los peces principalmente para comunicarse y puede ser crptica o
de ocultamiento; disruptiva, que se caracteriza por la presencia de bandas longitudinales o
transversales negras y blancas alternadas que rompen la silueta de los peces que la presentan;
aposemtica o de advertencia, que se usa con fines de defensa; y epigmica, que se relaciona
con el sexo y permite al macho y a la hembra atraerse.
Los patrones de coloracin utilizados en la determinacin taxonmica se basan en los colores
que presentan los peces en edad adulta. Se recomienda tener cuidado al emplearlos ya que en
ejemplares preservados es necesario anotar la coloracin en fresco, porque despus sta vara
o desparece a causa de los fijadores usados.
164
Morfologa interna
Son pocas las estructuras internas utilizadas en la identificacin de peces; tradicionalmente slo
se utilizan los dientes, las branquias, las branquiespinas del primer arco branquial, as como la
osteologa en general, los otolitos y la vejiga natatoria.
Dientes: Casi todos los peces presentan dientes en diferentes regiones d su cavidad bucal.
stos reciben su nombre de acuerdo con la estructura sobre la cual estn implantados.
Normalmente se localizan en el premaxilar, en el maxilar y en el mandibular, pero es posible
encontrar dientes sobre los huesos vomer y palatino, as como en la faringe o en la lengua. De
acuerdo con su forma, existen dientes cnicos, incisivos, caninos, molares y viliformes.
Branquias: Se localizan dentro de la cmara branquial, aunque existen organismos que las
presentan externamente, como los peces pulmonados. En las branquias pueden distinguirse
tres partes: el arco branquial, con una funcin de soporte; las lminas branquiales, cuya funcin
se relaciona con la captacin de oxgeno; y las branquiespinas, que tambin tienen una funcin
de soporte, as como de filtracin del material alimenticio, el cul, mezclado con el agua,
atraviesa la cmara branquial.
El nmero de branquias presentes en la cmara branquial tambin es importante en la
identificacin de peces seos. En algunos organismos existe una seudobranquia, constituida
por filamentos branquiales reminiscentes de los espirculos preexistentes.
El primer arco branquial es til para la determinacin de gneros y especies, para lo cual se
requiere contar las branquiespinas y ver la separacin entre ellas, as como su grosor y tamao.
Recuento de branquiespinas
stas se encuentran implantadas sobre los arcos branquiales, en direccin opuesta a los
filamentos branquiales C y D y a lo largo del segmento inferior A y de uno superior B. Las
branquiespinas que se deben contar son siempre las del segmento horizontal o inferior del
primer arco branquial.
Otolitos: A ambos lados de la parte posterior del crneo se localiza un par de cmaras
denominadas cpsulas ticas, que a su vez se dividen en dos compartimientos, el utrculo y el
sculo, y una evaginacin llamada lagena; en estos compartimientos se localizan los otolitos,
que son secreciones calcreas suspendidas en un lquido llamado endolinfa. La funcin de los
otolitos es la percepcin de los sonidos, el mantenimiento del equilibrio y la orientacin de los
peces.
Los otolitos reciben diferente nombre, dependiendo de su ubicacin; el que se localiza en el
utrculo se denomina lapillus; el del sculo, sagita; y el de lagena, asterisco.
Vejiga gaseosa: Es un saco distensible que se localiza sobre la lnea media del cuerpo, entre
la columna vertebral y el intestino, y por detrs del proceso occipital. Su funcin es auxiliar en la
respiracin, en la percepcin y en la emisin del sonido, as como almacenar grasa, y
principalmente como rgano hidrosttico, permitiendo a los peces mantener una determinada
posicin en la columna de agua.
165
166
Opichthidae:
Leptocfala:
mimeros
nmerosos, larva pequea (cerca de 70 mm),
tercer intestino prominente; hgado en forma
creciente sobre el vientre.
Anguila transparente: gran cantidad de
mimeros, origen de la aleta dorsal a la mitad
entre la apertura branquial y el vientre.
167
169
170
171
Nota: Estas claves pueden servir de gua, el profesor tiene la libertad de utilizar las que estn a
su disposicin.
172
173
Huesos de la cabeza
174
Lnea lateral
175
Tipos de boca
Tipos de aleta
176
Redondeada
Truncada
Lunar
Furcada
Punteada
Punteada lanceolada
Lado
Frente
a) Radio blando
Lado
Frente
Lado
Frente
c) Espina
Branquias y branquiespinas
Branquias y branquiespinas
177
Tipos de escamas
Cicloidea
Cicloidea
Tiburn
Cilcoidea
Rmbica ganoidea
Placa sea
Ctenoidea
Ctenoidea
Cicloideas
(A: annuli; L: Anillo juvenil)
178
Ctenoideas
(A: annuli; L: Anillo juvenil)
% Long. patrn
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
Nm
Escamas
Peso
Frmulas radiales
1.aleta dorsal
2 aleta dorsal
Aleta anal
Aletas pectorales
Aletas plvicas
Aleta caudal
Branquiespinas
No. de arcos
branquiales
Branquiespinas 1er
arco
Tamao
branquiespinas
Muestra de escamas
Tipo
Anillos
Media
Dorsal
Ventral
Datos de diseccin
Contenido estomacal
Volumen
1
2
Gonadas
Sexo
Peso
179
Moluscos. Son organismos invertebrados, con cuerpos blandos y babosos, los cuales en su
mayora estn protegidos por un exoesqueleto o concha, que puede estar formada por una, dos
u ocho piezas. Se dividen en clases que son:
Gastrpoda. Son organismos que reptan mediante un pie aplanado que se encuentra en la
superficie ventral; tienen, la gran mayora una masa visceral torcida hacia el lado derecho de la
cavidad del manto. Los ms representativos son los caracoles.
Pelecypoda o Lamellibranchia. Son bivalvos, han perdido la porcin ceflica, la masa bucal y
la rdula. En su mayora son filtradores por medio de sistemas ciliares con un desarrollo
extremo de las branquias. El manto tiene dos cubiertas membranosas simtricas y envuelven el
cuerpo completo; estas cubiertas secretan el exoesqueleto formado por dos valvas. Los
organismos ms representativos son las almejas y los ostiones.
Cephalopoda. Su caracterstica principal es que los ojos son prominentes rganos de los
sentidos. Otra caracterstica son sus tentculos prensiles que estn distribuidos alrededor de la
cabeza y la boca se encuentra en el centro de stos. Pueden tener ocho tentculos (octpodos)
y diez (decpodos). Adems cuentan con un sifn muscular ventral que controla el flujo de agua
al salir de la cavidad palial, produciendo un chorro que el animal emplea para desplazarse. Los
organismos representativos son los pulpos y calamares.
Amphineura (quitones) y Scaphopoda (colmillos).
Nemtodos. Son Organismos vermiformes de simetra bilateral y no segmentados; su cuerpo
es redondo en seccin transversal, cubierto por una cutcula en capas y su crecimiento por lo
general es acompaado por una muda. Se dividen en dos clases Adenophoera y Secementea.
Se encuentran en el medio marino desde la costa hasta las zonas abisales y en el medio
dulceacucola. Son abundantes pero no se les da tanta importancia en el bentos.
Nota: Se recomienda consultar claves de identificacin para los diferentes grupos que
constituyen el bentos en bibliografa especializada.
Anlisis de muestras
a) Preparacin de la muestra
1.- Se vaca la muestra en un juego de tamices, separando las rocas, palos u otro sustrato los
cuales son colocados en una charola blanca de poca profundidad.
2.- Una vez lavados los organismos son colocados con ayuda de unas pinzas o pinceles en un
recipiente.
Fijar con formol al 10 % o etanol al 70 % (llenar ms de la mitad del recipiente con el material
seleccionado).
182
b) Separacin e identificacin
1.- La muestra ya tamizada es colocada en una charola o bandeja blanca con poca profundidad
con agua.
2.- Para facilitar la separacin de los organismos se tien con rosa de bengala (200 mg/l) en el
conservador de formol o etanol por un periodo de 24 horas.
3.- Observar la muestra en el microscopio estereoscpico preferentemente en una caja petri y
colocando los organismos por separado.
4.- Se separan los organismos por categoras auxilindose con las claves de identificacin o
lminas disponibles.
5.- Los organismos una vez clasificados deben almacenarse en frascos y agregar formol al 5 %
o etanol al 70 % y colocar etiquetas con los datos correspondientes.
En estudios de impacto ambiental en el sedimento acutico, para la interpretacin de los
resultados se analiza la informacin de los organismos encontrados antes y despus
determinando las especies presentes y ausentes y por medio de una interpretacin de las
respuestas de las distintas especies a los contaminantes concretos, determinar el dao o
cambio significativo.
183
184
185
a) vista dorsal
Determinacin morfolgica de sexos (tomado de Williams, 1974)
Hembra madura
Medidas
Dientes frontales (DF)
Amplitud sin espina lateral
(AS/E)
Amplitud Total
Hembra inmadura
Bivalvos
Gasteropodos
Macho
Crustceos
Longitud (L)
E. anterolaterales (AL)
Margen postlateral (PL)
Espina epistomial (EE)
Quelipedo (Q)
187
189
El recuento puede reportarse como clulas o filamentos por ml cuadrado de rea de sustrato.
Clulas de raspaduras suspendidas =
Recuento real/tira
Volumen de 1 tira por ml
Volumen total de
raspaduras
rea del portaobjetos
por mm2
N x A1 x V1
AC x AS x VS
Donde:
N = Nmero de organismos contados
A1 = rea total del fondo de la cmara, mm2
V1 = Volumen total de suspensin original de muestra, ml
AC = rea contada (tiras o campos), mm2
VS = Volumen de muestra usada en la cmara, ml
AS = rea del porta o sustrato, mm2
Para la interpretacin de resultados son utilizados los recuentos celulares por unidad de
superficie del sustrato e ndices numricos de contaminacin o calidad del agua. Son utilizados
tambin los ndices de Shannon-Weaver, Simpson y Pink-Pearson y el sistema de Saprobidad,
que se puede emplear cuando se usen nmeros de cdigos asignados para el valor saprobial, y
se utiliza la abundancia de especies individuales para calcular el ndice saprobial.
190
Larvas Eristalis,
Syrphidae (15-30 mm)
Tabanus larva,
Tabanidae (30-40
mm)
Larva mosquito
Aedes, Culicidae (1015mm)
191
Escarabajos
Larva Enochrus,
Hydrophilidae (10-25)
Escarabajo zambullidor
predador adulto Dytiscus,
Dytiscidae (2-40 mm)
Chinches
Pomacea, Pilidae (5
cm)
Camplemona,
Viviparidad (2 cm)
Bithynia, Amnicolidae
(2 cm)
Caracol de ro,
Pleurocera, Pleuroceridae
(3 cm)
Valvata, Valvatidae
(1 cm)
Littorina, Littorinidae
(marino, 2 cm)
193
Familias pulmonares
Lymnaea, Lymnaeidae
(15 mm)
Helisoma,
Plasnorbidae (1 cm)
Physa, Physidae
(5mm)
Caracol Nassa,
Nassidae (marino
Lapa Ferrissia,
Ancylidae (2 mm)
Adulto Isoperla,
Isoperlidae (14-23
mm)
194
Ninfa Isoperla,
Isoperlidae (10-14
mm)
Ninfa Pteronarcys,
Pteronarcidae (10-14
mm)
Ninfa Acroneuria,
Perlidae (20-30 mm)
Ninfa Stenonema,
Heptageniidae (10-14
mm)
Ninfa, Baetis,
Baetidae (7-14 mm)
Ninfa, Hexagenia,
Ephemeridae )20-30
mm)
Ninfa, Ephemerella,
Ephemerellidae (8-15
mm)
195
Cnife, Limnophorus,
Anthomydae
Jejn, Chironomus,
Chironomidae
196
Moscardn, Tabanus,
Tabinidae
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198
SUBSECRETARA DE
EDUCACIN MEDIA SUPERIOR