MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR

1.0 INTRODUCCIN
Las vas respiratorias altas se extienden desde los orificios nasales hacia la laringe
y comprende la nasofaringe y la orofaringe,a, los senos paranasales, trompa de
Eustaquio y el odo medio.
Las infecciones del tracto respiratorio superior ms frecuentes son: laringitis,
faringitis, epiglotitis, sinusitis, otitis externa y media, difteria, tos ferina, angina de
Vincent y candidiasis oral.
Es fundamental conocer la flora comensal para la interpretacin de los resultados
de laboratorio.
2.0 FLORA NORMAL DEL TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR
-Streptococcus spp (alfa, beta, no hemolticos)
-Neisseria spp.
-Haemophilus spp.
-Corynebacterium spp.
-Staphylococcus spp
-Micrococcus spp.

-Veillonella spp.
-Peptostreptococcus spp.
-Actynomyces spp.
-Mycoplasma spp.
-Bacteroides spp.
-Fusobacterium spp.
-Candida spp.

3.0 FARINGITIS
La principal causa de faringitis es por Streptococcus pyogenes (grupo A). Otras
bacterias que se incluyen son: Streptococcus grupo C, G, y Arcanobacterium
(Corynebacterium) haemolyticum.
El examen de rutina de laboratorio debe incluir mtodos para el diagnstico de
Streptococcus grupo A que sean sensibles ya que un nmero bajo de esta bacteria puede
indicar no solo colonizacin sino representar una infeccin, adems es importante
detectarlo por la reemergencia de la fiebre reumtica aguda y la posibilidad de un shock
txico like.
El estudio de Neisseria meningitidis generalmente se hace con propsitos
epidemiolgicos.
El estudio de faringitis gonoccica debe ser solicitada en forma especfica por el
mdico.
Corynebacterium diphtheriae se debe buscar slo cuando se solicita
expresamente.

FLUJOGRAMA N 1 : SECRECION FARINGEA

DIFTERIA
( C. diphteriae)

FARINGITIS
( S. GRUPO A )

FARINGITIS
GONOCOCICA

TORULA (2)

TORULA

SILICA GEL

AMIES STUART
TRANSPORTE NUTRITIVO

TORULA
AMIES STUART
O SILICA GEL

LABORATORIO
REFERENCIA
PAS
AGAR SANGRE TELURITO*
AGAR TINSDALE

PAS

ANGINA DE
VINCENT
TORULA

THAYER - MARTIN

GRAM

35 C CO 2 x 72 HORAS

INCUBAR
35C x 18-24-48 HORAS*

INCUBAR 35-37 C
18-24 HORAS

OBS. COLONIAS

OBS. COLONIAS
T. GRAM

OBS.
-HEMOLISIS
T. GRAM

DIAG.
PRESUNTIVO:

PRUEBAS
BIOQUIMICAS

DIAG.
DEFINITIVO

DIAG.
DEFINITIVO

T. GRAM

-UTILIZAC.DE CARBOHIDRATOS

T. OXIDASA

-DET. DE B- LACTAMASA

CATALASA ( - )

(-)

LABORATORIO
DE REFERENCIA

INCUBAR
18-24 HRS

DIAG.
PRESUNTIVO:
-SUSCEPTIBILIDAD
BACITRACINA 0,04

NHDM

DIAG.
DEFINITIVO:
SEROLOGIA

-PYR
PAS: Placa agar sangre
NHDM:No hubo desarrollo microbiano

FLUJOGRAMA N2 : SECRECION NASOFARINGEA

Bordetella
pertusssis

IFD

ASPIRADO NASOFARINGEO

N. meningitidis
(PORTADORES )

Haemophilus
influenzae

SEMBRAR AL
LADO DEL PACIENTE

NASOFARIANGEA

ASPIRACION

CULTIVO:
SEMBRAR INMEDIATAMENTE
AL LADO DEL PACIENTE

REGAN-LOWE
35 C

SEMBRAR AL LADO
DEL PACIENTE
THAYER MARTIN

AMIES STURAT

CHOCOLATE SUPLEMENTADO

35C CO2
24-48 HRS.

INCUBAR
35C CO2

OBS. COLONIAS

18-24 HRS

( HUMEDAD )
HASTA 7 DIAS
OBS. COLONIAS

T. DE GRAM

T. DE GRAM
OXIDASA

ACCION SOBRE
CARBOHIDRATOS

GRAM
FACTORES X y V
OXIDASA
B LACTAMASA
SEROLOGIA

DIAG. DEFINITIVO
DIAG. DEFINITIVO
INMUNOFLUORESCENCIA
SEROLOGIA
ENVIO AL LAB. DE
REFERENCIA PARA
CONFIRMACIN

ENVIO AL LAB. DE
REFERENCIA PARA
CONFIRMACIN

IDENTIFICACIN
DEFINITIVA: SEROLOGA

TABLA 1: OTRAS MUESTRAS TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR

S.PARANASAL
SEC.OTICA
MUCOSA
ES
BUCAL
DIAGNSTICO
Sinusitis
Otitis
Otitis
Candidiasis
MUESTRA

TIPO MUESTRA

Puncin

media
externa
Timpanocente Trula
sis

AGENTE
ETIOLGICO

S. pneumoniae
H. influenzae
Anaerobios
Neisseria
B. catarrhalis
S. aureus

S. pneumoniae
S. aureus
H. influenzae
B.catarrhalis
Bacilos GAnaerobios

oral
Trula

P. aeruginosa Candida
Otras
albicans
bacterias
aerobias

T.Gram *
T.Gram *
T.Gram *
T.Gram *
Sabureaud
PAS
PAS
PAS
30C hasta 5
ACHO (CO2) ACHO (CO2) M.Conkey
35C-48 hrs das
Cult.
Cult.
Anaerobios
Anaerobios
35C-48 hrs
35C-48 hrs
PAS: Placa agar sangre cordero 5%, ACHO: Placa agar chocolate, * Anexo 1
(Tinciones).
PROCEDIMIENTO

4.0 TOMA DE MUESTRA

4.1. SECRECIN FARNGEA
4.1.1 Cultivo corriente
a.- Deprimir la lengua con bajalengua.
b.- Frotar con una trula la pared posterior de la faringe y las amgdalas tocando
cualquier exudado.
c.- Evitar tocar la lengua, vula y pared de la boca.
4.1.2 Cultivo para Corynebacterium diphtheriae
a.- Deprimir la lengua con bajalengua. Si se advierte la presencia de pseudomembrana,
tomar dos muestras con trula del borde de la misma presionndola sin romper.
b.- Poner ambas trulas en un tubo estril. Si el transporte de las muestras al laboratorio
es superior a cuatro horas, se recomienda enviarlas en un tubo con silica gel. Una de
ellas debe ser usada para la tincin de Gram. En caso de sospecha de difteria cutnea,
tomar muestra de la zona de la piel afectada adems de una muestra farngea.
c.- Hacer tincin de Gram. Si se observan bacilos grampositivo de morfologa
caracterstica, el laboratorio debe entregar un informe preliminar que diga bacilos
grampositivos difteromorfos."

4.1.3 Cultivo para Neisseria meningitidis

Tomar la muestra con trula por detrs de la vula en la porcin nasal de la
faringe.
4.2. ASPIRADO NASOFARNGEO
a.- Lavarse cuidadosamente las manos y luego colocarse guantes estriles.
b.- Romper el sobre que contiene el kit de aspiracin y conectar el final del tubo con
dimetro menor a una sonda de aspiracin.
c.- Conectar el otro extremo de dimetro mayor a la bomba de vaco.
d.- Introducir la sonda, sin aspirar, por una fosa nasal hasta la nasofaringe y retirarla
aspirando.
e.- Repetir el procedimiento en la otra fosa nasal.
f.- Aspirar el suero fisiolgico a travs del tubo colector para arrastrar toda la secrecin.
g.- Homogeneizar la muestra agitando el tubo con la mano.
h.- Colocar la tapa al tubo que contiene la muestra.
i.- Procesar segn flujograma N 2.
4.3 LARINGITIS
a.- Laringitis aguda habitualmente es de etiologa viral.
b.- Los cultivos bacterianos raramente son orientadores excepto para descartar difteria o
infeccin estreptoccica basndose en la clnica.
4.4 EPIGLOTITIS
a.- Causada habitualmente por Haemophilus influenzae tipo b, ocurre principalmente en
nios de 2 a 6 aos.
b.- El diagnstico de esta infeccin debe ser hecho clnicamente ya que est
contraindicado tomar muestra de la epiglotis, pues puede provocar una oclusin de la
va area.
c.- Si se hace un procedimiento en la va area, en ese momento se puede tomar
muestra.
d.- En muchos casos hay una bacteriemia y esto puede apoyar el diagnstico.
4.5 SINUSITIS
a.- Sinusitis bacteriana frecuentemente es de origen endgeno, causada por organismos
que estn normalmente en el tracto respiratorio superior. Agentes ms comunes se
muestran en la Tabla 1.
b.- La nica muestra apropiada para el laboratorio es el aspirado mediante jeringa de la
cavidad sinusal. Se debe hacer cultivo aerobio y anaerobio.
c.- Rechazar lquidos de lavado o trulas de fosas nasales o nasofaringe, ya que stas
contendrn mucha flora normal y ser muy difcil diferenciar el agente causal.
4.6 OTITIS MEDIA
a.- Es una infeccin comn en nios. Agentes ms comunes se muestran en la Tabla 1.

b.- La muestra del odo medio se toma mediante tmpanocentesis por un especialista, y
se debe cultivar para aerobios y anaerobios. Si hay descarga en el canal externo se debe
hacer cultivo slo para aerobios.
4.7 OTITIS EXTERNA
Para tmpano intacto, limpiar el conducto auditivo externo con solucin jabonosa,
y recolectar la secrecin con aspiracin con jeringa. Para tmpano roto, colectar la
secrecin con trula flexible usando espculo.
a.- Pseudomonas aeruginosa es la causa ms frecuente de otitis externa u otitis del
nadador an cuando hay otras bacterias aerobias que pueden causarla, por lo tanto slo
se debe hacer cultivo aerobio.
b.- En estos cultivos pude haber contaminantes de la piel los cuales no deben ser
tomados en cuenta.
4.8 OTRAS PATOLOGAS
4.8.1 CANDIDIASIS ORAL
a.- La infeccin por levaduras de la mucosa bucal, lengua y orofaringe, habitualmente es
producida por Candida albicans y es comn en recin nacidos y adultos
inmunosuprimidos (Ej.VIH-SIDA).
b.- El diagnstico se hace fcilmente por observacin directa de la muestra en KOH al
10% o tincin de Gram (Anexo Tinciones). La muestra se toma con dos trulas, una
para directo y la otra muestra para cultivo.
4.8.2 ANGINA DE VINCENT
a.- Borrelia vincentii y Fusobacterium spp, estn asociados con esta infeccin que se
caracteriza por la ulceracin de la faringe o encas. Es infrecuente en nios, pero s se
presenta en adultos que tienen una mala higiene bucal, stress o una enfermedad
sistmica grave.
b.- El diagnstico de laboratorio se hace mediante tincin de un extendido directo
obtenido mediante lo descrito en el punto 4.1.b, con fucsina diluida 1:10 en agua, o con
violeta de genciana. La presencia de muchas espiroquetas y fusiformes adems de
polimorfonucleares confirma la infeccin.
5.0 DETECCIN DE PORTADORES
5.1 DETECCIN DE PORTADORES DE Staphylococcus aureus
a.- Tomar muestra de fosas nasales, faringe, axila y perin y sembrarlas en medio
selectivo como agar sangre, feniletilalcohol o agar sal manitol que permita recuperar
poca cantidad de S aureus.
b.- Incubar, aislar e identificar S. aureus de acuerdo a los procedimientos de rutina.
c.- Guardar las cepas aisladas por si solicitan estudios posteriores.
d.- En el informe slo se indica presencia o ausencia de S. aureus en cada muestra.

5.2 DETECCIN DE PORTADORES DE Neisseria meningitidis

a.- Tomar muestra de la garganta y nasofaringe, con trula por detrs de la vula en la
porcin nasal de la faringe. Habitualmente en la muestra de nasofaringe se obtiene
mayor nmero de organismos. Sembrar en un medio selectivo como Thayer Martin.
b.- Emplear los procedimientos habituales para toma de muestra, transporte, incubacin,
aislamiento e identificacin de N. meningitidis. (ver captulo correspondiente).
c.- Guardar las cepas de N. meningitidis por si solicitan estudios posteriores.
d.- Informar slo la presencia o ausencia de N. meningitidis y el grupo serolgico.
6.0 INTERPRETACIN DE RESULTADOS
a.- En una secrecin farngea corriente se debe informar la presencia o ausencia de
Streptococcus hemoltico.
b.- En caso de bsqueda de faringitis gonoccica, se debe informar como Hubo o no
desarrollo de Neisseria gonorrhoeae. Si hay sobre desarrollo de flora normal o cultivo
invadido por levaduras, solicitar nueva muestra.
c.- La investigacin dirigida a otros patgenos especficos, debe ser informando como
presencia o ausencia de los mismos
7.0 REFERENCIAS
1. Ballows A, Shadomy H. J. eds. Manual of Clinical Microbiology. 5th de.
Washington D.C.ASM, 1991.
2. Isenberg H. Clinical Microbiology Procedures Handbook. Vol 1, 1993.
3. Murray, Baron, Pfaller, Tenover, Yolken. Manual of Clinical Microbiology. 6th
de.Washington D.C.ASM, 1995.
4. Murray, Baron, Pfaller, Tenover, Yolken. Manual of Clinical Microbiology. 7th ed.
Washington D.C. ASM, 1999.
5. Vandepitte, K. Engback, P. Piot y C. C. Henck Basic Laboratory Procedures in
Clinical Bacteriology. WHO 1991.

MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR

1.0 GENERALIDADES
Las infecciones del tracto respiratorio inferior, es decir las que comprometen:
trquea, bronquios, bronquiolos, alvolos y/o parnquima pulmonar, constituyen en
Chile la primera causa de mortalidad infantil tarda y una de las primeras causas de
muerte por infeccin nosocomial.
El diagnstico etiolgico de estas infecciones no es fcil debido a que la muestra
clnica necesariamente pasa a travs de la orofaringe, lugar donde se puede contaminar
con numerosas especies bacterianas, salvo aquellas muestras que se obtienen
directamente desde el sitio de la lesin.
2.0 TIPOS DE MUESTRAS
-Expectoracin
-Aspirado traqueal
-Lavado bronquial
-Boncoscopa (cepillado bronquial, lavado broncoalveolar)
-Biopsia bronquial
-Biopsia pulmonar
3.0 PROCEDIMIENTO
3.1 EXAMEN MICROSCPICO
Preparar un extendido de la muestra y hacer tincin de Gram (Anexo Tinciones)
para evaluar si hay contaminacin orofarngea, indicada por la presencia de clulas
escamosas; si la secrecin es del tracto respiratorio inferior, indicada por la presencia de
leucocitos ( las muestras obtenidas de pacientes transplantados de Mdula Osea u otro
pacientes inmunosuprimido puede no contener leucocitos) y la presencia del patgeno
probable indicado por el organismo predominante asociado con leucocitos.
3.2 INTERPRETACIN DE LA TINCIN DE GRAM
a.- Cuantificar el nmero de clulas escamosas examinando 10 campos con objetivo
10x.
b.- Interpretar la calidad de la muestra de acuerdo a Tabla 1.
c.- Informar: si hay presencia de un microorganismo predominante, si no hay
microorganismos predominantes o si hay ausencia de microorganismos.
d- Use los resultados de la tincin de Gram para guiarse en la interpretacin de las
placas de cultivo.

TABLA 1: CLASIFICACIN DE LA MUESTRA DE EXPECTORACIN POR

TINCIN DE GRAM
GRUPO

N de clulas por campo

Leucocitos
Clulas Epiteliales
6
< 25
< 25
5
> 25
< 10
4
> 25
10 25
3
> 25
> 25
2
10 25
> 25
1
< 10
> 25
Se recomienda no cultivar los Grupo 1,2,3
3.3
FLUJOGRAMA PARA EL EXAMEN DE MUESTRAS DEL
TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR SEGN OBSERVACIN DE TINCIN
DE GRAM
Cantidad de clulas epiteliales (C.E.)y polimorfonucleares(PMN)

MUESTRAS DE
LB, CP, BB,LBA;BP (*)
(sin importar cantidad
C.E 10-25
de clulas epiteliales)
PMN>25 por campo

ESPUTO
C.E > 25 por campo
PMN 10-25 por campo

MUESTRA NO
APTA PARA CULTIVO
(solicitar nueva muestra).
CULTIVAR E
INVESTIGAR
Streptococcus hemoltico:
investigar S.pneumoniae
Streptococcus hemoltico:
investigar Streptococcus Grupo A
bacilos gramnegativos
Staphylococcus
levaduras
hongos
Micobacterias
Nocardia.

Estudiar solo si es predominante:

Haemophilus
Moraxella
(*)

LB = Lavado bronquial
CB = Cepillado bronquial
BB = Biopsia bronquial
LBA= Lavado broncoalveolar
AP = Aspirado pulmonar

LBA y CB sembrar en forma cuantitativa y establecer niveles de corte.

3.4 SIEMBRA DE LAS MUESTRAS
a.- Sembrar muestras en agar sangre, agar chocolate suplementado, agar Mac Conkey
(opcional).
b.- Incubar agar sangre y agar chocolate a 35C en atmsfera con 5-7% de CO2. Agar
Mac Conkey y tioglicolato ( solo en muestras no contaminadas con flora oral) en
atmsfera normal.
c.- Examinar las placas a las 24 hrs. de incubacin, si no hay desarrollo visible, incubar
por 24 hrs. adicionales. El tioglicolato incubarlo hasta 5 das antes de descartar.
d.- Si hay desarrollo, hacer identificacin del microorganismo patgeno.
3.5 CEPILLADO BRONQUIAL Y LAVADO BRONQUIOALVEOLAR
Lavado Bronquial y Cepillado Bronquial son muestras tomadas por
broncoscopa, el cual es un mtodo seguro para obtener secreciones directamente de los
bronquios y alvolos, pero debe ser realizado por personal entrenado, es un mtodo caro
de obtencin de muestras, que se contamina con flora de la porcin superior del aparato
respiratorio y no exento de complicaciones. Por lo anterior es poco realista utilizar este
mtodo de rutina en todo paciente con infeccin de las vas respiratorias inferiores y
debe reservarse para casos seleccionados, tales como pacientes con patologa crnica o
refractaria o aquellos casos de pacientes inmunocomprometidos en los cuales el
diagnstico etiolgico no pueda establecerse con muestras de expectoracin. Los
cultivos obtenidos por broncoscopa para agentes bacterianos habituales causantes de
neumonias son considerados comparables, pero no mejor que los cultivos obtenidos de
expectoracin obtenida con criterios citolgicos aceptables.
3.51 Toma de Muestra
La broncoscopa se realiza con el paciente sentado o recostado y el instrumento
se pasa a travs de las fosas nasales o por va oral. Se aplica antestesia local por
nebulizacin o aplicacin tpica con xilocana u otro equivalente. Los anestsicos
tpicos tienen propiedades antibacterianas, pero los estudios disponibles muestran que
esto no afecta el recobrar microorganismos si la muestra es procesada dentro de dos
horas de obtenida.

3.52 Procesamiento
Las muestras para estudios microbiolgicos son consideradas en dos categoras:
a) Categora N 1: Incluye estudios para detectar microorganismos que no tienen
problemas de interpretacin, a pesar de contaminacin con flora de la va area
superior. Esto inlcuye agentes micticos oportunistas, parsitos, Legionella spp. y
Mycobacterias.
Para lavado bronquioalveolar: Se instilan 20 ml de suero fisiolgico, luego se
aspiran a 50-100 mm de Hg para recolectar el lquido de lavado. El procedimiento
se repite 5 veces con un total de 100 ml de suero instilado, del cual se recupera
alrededor de 40-70 ml.
Aproximadamente 15 ml se necesitan para cultivo de bacterias aerobias, Legionella
spp., Nocardia spp., hongos, mycobacterias y virus.
Para estudio de bacterias habituales, las muestras de LBA son enviadas al
laboratorio en cantidad mnima de 1 ml de solucin salina estril. Mezclar con
vortex para resuspender previo a la siembra y sembrar en PAS, ACHO, Mac
Conkey y tioglicolato usando un asa calibrada de 0.01 ml o pipeta de 10 Ul.
Incubar a 35 C con 5-7% CO2 hasta por 48 horas. El tioglicolato incubar hasta 5
das.
Recuentos de bacterias de >104 son considerados significativos.
b) Categora N 2: Esta incluye el estudio de microorganismos que pueden ser parte
de la flora oral. Los cultivos de rutina se le pueden realizar de manera similar a la
expectoracin, y estos tambin tienen el problema de contaminacin con flora bucal.
No se deben realizar estudios para bacterias anaerobias.
Se pueden lograr mejor rendimiento utilizando un cepillo protegido, el cual es
dirigido directamente hacia la zona en que hay secrecin purulenta, el cual cuando
es retirado es puesto en un tubo que contiene 1 ml de ringer lactato estril, el cual es
mezclado con un vrtex. Se inocula 0.01 ml en PAS; ACHO, Mac Conkey y
tioglicolato, permite el estudio para bacterias anaerobias.
Incubar durante 48 horas. El tioglicolato incubar hasta 5 das.
Recuentos de colonias de >103 son considerados significativos, dado que estos
representan alrededor de 106/ml de la solucin original.
3.5 Informe Semicuantitativo
- Si no hay crecimiento:
-Si hay crecimiento de 1-2 colonias:
-Si hay crecimiento de 3-10 colonias:
-Si hay crecimiento mayor a 10 colonias
-Si hay colonias presentes:
en un rea 1 y 2 de inoculacin.

No hubo desarrollo microbiano.

Muy escaso desarrollo microbiano.
Escaso desarrollo microbiano.
Moderado desarrollo microbiano.
Abundante desarrollo microbiano.

Si un organismo es observado en la tincin de Gram del caldo (caldo no sub

cultivado o sin desarrollo en el sub cultivo), informar microorganismo observado
solamente por tincin del caldo).

Si un microorganismo est solo presente en el sub cultivo del caldo informar

microorganismo aislado de caldo solamente.
3.54 Informe Cuantitativo
-N de colonias (<10)= <103
-N de colonias (10-100)=103-104
-N de colonias (100-1000)=104-105
-N de colonias(>1000)=>105
3.6 Cultivo cuantitativo de aspirados
Ventilacin Mecnica

endotraqueales en paciente en

La neumonia asociada a ventilacin mecnica se define como la neumonia en un

paciente en ventilacin mecnica luego de 48 horas. Durante aos se utiliz para su
diagnstico los criterios de Johanson et al de 1972, el cual incluye criterios no
especficos, por lo que se recomienda el uso de criterios microbiolgicos
cuantitativos para el diagnstico de Neumonia Asociada a Ventilacin Mecnica
(NAVM). El uso del cultivo cuantitativo del aspirado endotraqueal tiene una
sensibilidad y especificidad diagnsticas comparables a las estrategias diagnsticas
basadas en estudios fibrobroncoscpicos y tiene la ventaja de la universalidad de su
aplicacin, bajo costo independencia de equipos humanos y tcnicos restringidos.
Se recomienda informar los recuentos microbiolgicos de todas las especies
bacterianas potencialmente patgenas y que su lectura sea interpretada utilizando al
menos dos puntos de corte ( <103 y > 106 ufc/ml). Este enfoque permite dar mayor
flexibilidad al grupo tratante sobre interpretacin de la etiologa polimicrobiana
presente en algunos casos y sobre la decisin de dirigir el estudio hacia causas
potenciales y/o suspender el tratamiento antibitico cuando el recuento sea muy
bajo.
No se recomienda su solicitud cuando se ha realizado un cambio en la terapia
antimicrobiana en la ltimas 72 horas, por cuanto el estudio cuantitativo puede verse
afectado.
Esta dirigido hacia algunas etiologas bacterianas.
No existe experiencia significativa sobre estudios diagnsticos invasivos y no
invasivos en el reconocimiento de la NAVM en pediatra. El cultivo cuantitativo del
aspirado endotraqueal puede ser aplicado, aunque su lectura slo puede ser realizada
por extrapolacin, utilizando los puntos de corte descritos para los adultos.
3.61 Indicaciones de cultivo de AET
Se recomienda realizar cultivo cuantitativo de AET a todo paciente con sospecha de
NAVM, conectado en un tiempo mayor de 48 horas y que presente criterios clnicos
y radiolgicos y en el que no se haya realizado un cambio en el tratamiento
antimicrobiano en las ltimas 72 horas.

3.62 Toma de Muestra

Se debe tomar una muestra en forma estril, utilizando sonda de aspiracin
introducida por el tubo endotraqueal (TET), conectado en el otro extemo a un
colector o trampa estril. Debe ser realizado por un profesional entrenado.
La muestra no se debe diluir y debe ser enviada de inmediato al laboratorio.
3.62 Procesamiento
-Diluir la muestra a la mitad con suero fisiolgico estril(dilucin1:2).
-Homogeneizar con perlas de vidrio y agitador durante 2 minutos.
-Extraer 100 Ul y diluir en 9,9 ml de suero fisiolgico y agitar ( dilucin 1:100).
-Rotular una placa de agar sangre y Mac conkey como A y el otro set como B.
-Sembrar 100 Ul (0,1 ml) en el set de placas A ( dilucin final 1:2000).
-Sembrar 10 Ul (0,01 ml ) en el set de placas B ( Dilucin final 1:20.000).
-Incubar a 35 C en atmsfera aerbica hasta 72 horas.
La muestra puede tambin ser sembrada en ACHO para la deteccin de
Haemophilus influenzae en caso de NAVM de inicio precoz.
La tincin de Gram de este tipo de muestras tiene un rendimiento limitado, ya que
no permite predecir que tipo de microorganismos tendr un recuento significativo.
3.63 Informe de Laboratorio
La emisin del informe debe incluir un detalle de cada microorganismo aislado, con
su recuento y antibiograma correspondiente. La presentacin de los potenciales
agentes identificados es necesaria debido a que cerca de un tercio de los casos tienen
aislamientos polimicrobianos.
- Set Placas A:
1 colonia: equivale a 2000 ufc/ml (2x103).
5 colonias: equivale a 10.000 ufc/ml (1x104).
50 colonias equivale a 100.000 ufc/ml ( 1x105).
-Set de placas B:
1 colonia: equivale a 20.000 ufc/ml (2x104).
5 colonias : equivale a 100.000 ufc/ml ( 1x105).
50 colonias equivale: 1.000.000 (>1x106).
4.0 INTERPRETACIN DE LOS CULTIVOS
El desarrollo de un microorganismo potencialmente patgeno en forma
predominante, asociado a una buena calidad de muestra tiene valor diagnstico cuando
el cuadro clnico es compatible.

5.0 REFERENCIAS
1. Ballows A, Shadomy H. J. eds. Manual of Clinical Microbiology. 5th de.
Washington D.C.ASM, 1991.
2. Cumitech 7A. Diagnstico de Laboratorio de Infecciones del tracto respiratorio
bajo.Septiembre,1987
3. Isenberg.H. Clinical Microbiology Procedures Handbook. Vol 1, 1993.
4. Murray, Baron, Pfaller, Tenover, Yolken. Manual of Clinical Microbiology. 6th de.
Washington D.C.ASM, 1995.
5. Murray, Baron, Pfaller, Tenover, Yolken. Manual of Clinical Microbiology. 7th ed.
Washington D.C. ASM, 1999.
6. Vandepitte, K. Engback, P. Piot y C. C. Henck Basic Laboratory Procedures in
Clinical Bacteriology. WHO 1991.
7. Documento "Consenso diagnstico de la Neumonia Asociada a Ventilacin
Mecnica". Sochinf
8. Clinical Micobiology procedures Handbook. Isemberg H. Volumen N 1. 1.15.
9. Ventilator- Associated Pneumonia or Not? Contemporay Diangosis. Mayhall Glen.
Emerging Iinfectious Diseases. Vol 7;, N 2 Marzo- Abril 2001.