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AGAR HEKTOEN ENTERICO

O-P.PD-07
Versin 1

El agar Hektoen entrico es usado en procedimientos

cualitativos para el aislamiento de microorganismos gram
negativos entricos, especialmente Shigella y Salmonella, a
partir de gran variedad de especimenes clnicos.
EXPLICACIN DEL TEST: Por muchos aos han existido
diferentes medios para el aislamiento de patgenos entricos.
La diferencia entre estos medios consiste en el grado de
selectividad para las especies patgenas. Algunos se han
creado para la diferenciacin de especies de Shigella, otros para
la diferenciacin de especies de Salmonella. Estos medios
tienen un amplio espectro en el aislamiento de patgenos
entricos, adems inhiben muy poco a los miembros de la flora
intestinal no patgena. El agar Hektoen entrico fue desarrollado
en 1967 por King y Metzger del instituro Hektoen cuando se
comparaba con otros medios para incrementar el aislamiento de
especies de Salmonella y Shigella en los laboratorios clnicos.
Este medio es considerado moderadamente selectivo y es
particularmente usado para el aislamiento de especies de
Shigella
PRINCIPIOS DEL PROCEDIMIENTO: La selectividad del medio
es dada por la incorporacin de sales biliares en su frmula.
Estas sustancias inhiben los microorganismos gram positivos;
pero a la vez pueden ser txicas para algunas especies gram
negativas.
El medio contiene tres carbohidratos, lactosa,
sucrosa y salicina, los cuales permiten una clara diferenciacin y
ayudan a reconocer los agentes fermentadores. El hiposulfito y
el citrato frrico sirven para detectar los agentes productores de
cido sulfhdrico, creciendo colonias punto negro.
PROCEDIMIENTO: Sembrar el espcimen tan pronto como sea
posible despus de recibirlo en el laboratorio. Un medio no
selectivo puede ser sembrado a la par para incrementar la
recuperacin de los microorganismos entricos cuando cuando
la poblacin es baja. Alternativamente si la muestra fue tomada
con aplicador sembrar sobre la superficie y en un extremo del
medio, repartir el inculo a partir de esta siembra inicial.
Incubar a 37 grados centgrados entre 18 a 24 horas.
RESULTADOS ESPERADOS: Despus de la incubacin de los
medios se puede observan un rea de crecimiento microbiano,
ya que el procedimiento de estriar la muestra a partir de un
inculo inicial es una tcnica de dilucin, disminuyendo el
nmero de microorganismos depositados en cada estra; por lo
tanto una o varias reas pueden exhibir el crecimiento de
colonias aisladas de microorganismos contenidos en el
espcimen.
MORFOLOGA TPICA DE LAS COLONIAS SOBRE EL MEDIO
Microorganismo
Caractersticas de las colonias
E. coli
Colonias grandes, color entre
amarillo y salmn.
Algunas
especies pueden ser inhibidas
Enterobacter y Klebsiella

Colonias grandes,
amarillo y salmn

color

Salmonella
Pseudomonas

Colonias con centro negro y

regulares
Colonias irregulares, color verde o
caf

FORMULA:
Peptonas de tejido animal
Extracto de levaduras
Sales biliares
Lactosa
Sucrosa
Salicina
Cloruro de socio
Tiosulfito de sodio
Citrato de amonio de hierro
Azl de bromothimol
Fuscina cida
Agar
pH final 7.5 +/-0.2

12.0 gr
3.0 gr
9.0 gr
12.0 gr
12.0 gr
2.0 gr
5.0 gr
5.0 gr
1.5 gr
0.065gr
0.1 gr
14.0 gr

CONSERVACION: Las placas se conservan entre 4 y 12 C en

su empaque original hasta la fecha de vencimiento, protegidas
de la luz directa. La Duracin de las placas desde su produccin
es de 5 meses.
DISPOSICIN FINAL Y PRECAUCIONES EN LA
MANIPULACIN
La inoculacin de un medio de cultivo con bacterias,
deliberadamente o accidentalmente, lleva al crecimiento rpido
de estos en el medio, y altas concentraciones de cualquier
microorganismo son potencialmente peligrosos, y deben ser
descartados de manera segura y por mtodos aprobados, como
la inactivacin en hipoclorito de sodio a 5000 p.p. por no menos
de 4 horas, descartando luego los agares en sus cajas
contenedoras en doble bolsa roja para luego descartarlo como
material de riesgo biolgico; o por autoclavado, sin remover
previamente el agar, colocando todo el contenido en bolsa roja
doble y ser luego descartado como material de riesgo biolgico.
Todos los medios de cultivo deben ser manipulados por personal
calificado y que hayan sido entrenados en procedimientos y
tcnicas microbiolgicas.
PRECAUCION !!
Examine la fecha de vencimiento y signos de
quebraduras de las cajas.
Examine los medios preparados antes de uso.
Observe cualquier evidencia de contaminacin,
burbujas en la superficie del agar, mal llenado, cambios
de color, hemlisis y signos de deshidratacin y perdida
de volumen o hendiduras en la superficie.
Despus de abierto el Rack de 10 unidades, debe
usarse durante la semana siguiente para evitar posible
contaminacin.

entre

Proteus

Tamao variable, color azul

verdoso o azul salmn, muchas
colonias son punto negro

Shigella

Color verde, hmedas, realzadas

en el medio

***INFORMACIN TCNICA A PARTIR DE BASE

DESHIDRATADA***