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Laboratorio #2: Calibracin de pipetas

automticas
Laboratorio #2
Calibracin de Pipetas Automticas
Puntaje=0.35pts
Objetios!
Al "inali#ar esta unidad$ el alumno deber ser capa# de!
1. Identificar las partes de una pipeta.
2. Manejar y operar una pipeta.
3. Seleccionar correctamente y leer el volumen en microlitros de manera apropiada.
4. Realizar una calibracin usando el mtodo !ravimtrico.
%ateriales!
1. "ipeta de volumen variable
2. "untas para pipetas
3. #alanza $nal%tica
4. &ontenedor
'. $!ua
(. $!ua )estilada a temperatura ambiente
Calibracin de Pipetas
*ficialmente si!nifica determinar la diferencia entre el volumen dispensado y el volumen
seleccionado. "or ajuste se entiende la alteracin de la pipeta de manera +ue el volumen
dispensado est, dentro de ciertas especificaciones.
Procedimiento &raim'trico -basado en $S.M Met/od 0 11'4123 4Standard Specification for
"iston or "lun!er *perated 5olumetric $pparatus67 ta8en from Seidman7 9.S. : &.;. Moore.
Basic Laboratory Methods for Biotechnology. "rentice <all. -1333==
(esumen del %'todo> 0l funcionamiento correcto de una pipeta se determina mediante la
comprobacin de la e?actitud y precisin de los vol@menes +ue entre!a. 0l peso de las
muestras de a!ua entre!ados por el instrumento se convierte en un volumen basado en la
densidad del a!ua. 9as calibraciones se deben revisar en dos vol@menes> uno en el ajuste
m,?imo y otro en la mitad de este as% +ue esto si!nifica dos conjuntos de mediciones para cada
pipeta.
Actiidad de Calibracin de una Pipeta!
1. Seleccione una pipeta de volumen variable. Se verificar, la calibracin de la pipeta
seleccionada en dos medidas -ma? and A ma? volumen=
2. 9a balanza anal%tica utilizada para comprobar la pipeta debe estar bien mantenida y
calibrada correctamente. .ambin debe estar en un ambiente libre de vibraciones sin
corrientes de aire.
3. )ocumente toda la informacin relevante7 incluyendo la fec/a B /ora7 el n@mero de serie de
pipeta7 ran!o de volumen de la pipeta7 la temperatura7 y el nombre de la persona +ue
realiza la evaluacin. ** Nota: Si el agua y pipeta no se almacenan en la misma
temperatura de!e pasar al menos 2 horas para "ue la temperatura se e"uilibre.
#. Seleccione el volumen de la pipeta -m,?imo volumen para la primera verificacin7 lue!o
'CD=.
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Laboratorio #2: Calibracin de pipetas
automticas
$. .are -encere= la balanza con el recipiente de pesaje.
%. Esando su mejor tcnica de pipeteo mida y dispense un volumen de a!ua destilada en el
interior del recipiente de pesaje.
&. Inmediatamente re!istre el peso obtenido.
'. .are -encere= la balanza entre cada medida.
(. .rabajando r,pidamente repita los pasos '1F para un total de 1C mediciones de peso.
GGNota: )*ite prolongar este proceso ya "ue se "uiere e*itar p+rdidas por e*aporaci,n.
1-. Repita las 1C mediciones para el se!undo volumen seleccionado.
11. "ara cada volumen seleccionado7 calcule la media del peso obtenido - =.
12. &alcule el 5olumen Medio -5t= a la temperatura del a!ua usando la si!uiente frmula. Hote
+ue7 ./0 es el factor de conversin en -I9Bm!= para la temperatura media del a!ua. 4/6 para
este laboratorio es 1.CC33.
5tJ - = G /
13. )etermine el D de ine?actitud mediante el c,lculo del porcentaje de error de la pipeta en
cada ajuste de volumen de la si!uiente manera>
D error J media volumen obtenido K volumen esperado ? 1CC
5olumen esperado
Re!istre sus resultados en la /oja de reporte.
1#. )etermine la precisin -repetibilidad= de la pipeta para cada volumen calculando la
desviacin est,ndar -S)= como si!ue>
Li J cada peso medido
Jmedia obtenida de los pesos medidos
n n@mero de mediciones -1C=
Re!istre sus resultados en la /oja de reporte.
1$. )etermine la imprecisin con el c,lculo del coeficiente de variacin -&5D=
C) = *+ , -00.

Re!istre sus resultados en la /oja de reporte.
1%. $ continuacin compruebe las especificaciones del fabricante7 para la pipeta seleccionada
para ver si sus medidas se encuentran dentro del ran!o esperado.
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S D
x x
n
=

2
1
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Laboratorio #2: Calibracin de pipetas
automticas
Hombre>MMMMMMMMMMMMMMMM
Nec/a>MMMMMMMMMMMMMMMMM
Reporte de &alibracin
C.3' pts.
O Serie>MMMMMMMMMMMMMMMMM Ran!o de volumen de la "ipeta>MMMMMMMMMMMMMMMM
Hombre de la persona +ue realiza la calibracin>MMMMMMMMMMMMMMMMM
Nec/aB/ora de la &alibracin>MMMMMMMMMMMMMMMMMMMMM
.emperatura $mbiente>MMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMM
5olumen 1> 5olumen 2>
&*RRI)$ "esos Medidos &*RRI)$ "esos Medidos
1
2
3
4
'
(
F
2
3
1C
.otal
"eso medio - =
5olumen medio -5t=
)S -9=
&5D
D 0rror -imprecisin=
Conclusiones!
MMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMM
MMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMM
MMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMM
MMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMM
MMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMMM
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