Trabajo Presentado a la Catedra de Micologa Alumna de la Carrera de Biologa Profesora de la Catedra: Lic. Lorena Martnez Encargado de Laboratorio: Lic. Edgar Galeano
INTRODUCCION
Esterilizacin significa la eliminacin de toda forma de vida de un medio o material, lo que se lleva a cabo generalmente por medios fsicos, por ejemplo, filtracin, o por muerte de los organismos por calor, productos qumicos u otra va. Esta definicin excluye por lo tanto cualquier tcnica que resulte solamente en un dao a los microorganismos o atenuacin de la actividad de cualquier tipo.
El medio de cultivo constituye el aporte de nutrientes indispensables para el crecimiento de los microorganismos. La composicin precisa depender de la especie que se quiera cultivar, porque las necesidades nutricionales varan considerablemente. Hay microorganismos muy pocos exigentes que crecen bien en medios de laboratorios normales y microorganismos muy exigentes que necesitan determinadas sustancias como vitaminas, suero o sangre para crecer. He aqu la importancia de la esterilizacin cuando se har un preparado de cultivo, pues as se evita que cualquier otro microorganismo ajeno a la que se desea inocular, prolifere.
OBJETIVOS
Conocer los principios generales de las tcnicas de esterilizacin de materiales de vidrio y medios de cultivo de uso comn en Micologa, as como de observar el efecto y la importancia de las condiciones aspticas en el control de la contaminacin microbiana.
MATERIALES
Matraces Erlemeyer Probeta Vaso precipitado 25-250 ml. Tubos de ensayo Varilla de cristal Gradillas Pinzas Caja de Petri
1- Encender el esterilizador. 2- Lavar con detergente y escobilla los materiales a ser utilizados. 3- Escurrir el agua y enjuagar con agua destilada. Secar con papel absorbente. 4- Una vez secos, se forro con papel madera e hilo. En el caso de los matraces y tubos, se coloc el tapn de gasa y algodn en la boca de manera que el tapn quede holgado. Luego se coloc sobre estos papel de madera sujeto con un hilo. 5- Las cajas de Petri, los tubos y los matraces envueltos debern ser esterilizados en horno a 150 aproximadamente durante 1 hora 30 minutos.
Segunda Parte
1- Se pes medio de cultivo Agar Sabouraud segn indicacin del frasco. Se coloc en un Erlenmeyer estril, se agrega agua destilada (150 ml). Se llev al calentador y se revolvi constantemente con una varilla de vidrio, sosteniendo el matraz con una franela. 2- Se procedi de la misma manera para la preparacin de Agar Papa. 3- Se revis que el nivel de agua del autoclave se encuentre en condiciones. 4- Se coloc los cultivos preparados en el autoclave. Se tap el autoclave ajustando las manijas en forma enfrentada. Se puso en funcionamiento y esperar que el vapor salga por la vlvula de seguridad. Luego se cerr. 5- Se esterilizo en el autoclave por 30 minutos y bajo presin de 121 por 1 atm. 6- Se abri con cuidado el autoclave, teniendo en cuenta que se encuentre en 0 el indicador de temperatura y presin. 7- En caliente se distribuy 20 ml de los medios de cultivo a cada placa de Petri estril. Se tap rpidamente las placas. 8- Se enfri las placas, se sell con cinta de papel parafilm, se rotulo y se conserv en la heladera.
ANALISIS
El agar Sabouraud es un tipo de agar que contiene peptona. Es un medio de Cultivo selectivo y diferencial para el aislamiento de hongos y levaduras. Este medio tiene un alto contenido de glucosa, cloranfenicol y PH acido, favoreciendo el crecimiento de hongos por sobre el de las bacterias, adems de un medio de cultivo puede agregrsele agentes selectivos para el crecimiento.
El agar Papa dextrosa es el medio ms utilizado para el crecimiento de hongos y bacterias que atacan a las plantas vivas o materia vegetal muerta en descomposicin. Es una solucin de agar compuesta de infusin de papa, dextrosa (azcar) y agar simple, es de color amarillo semi-oscuro y es el medio de cultivo predilecto utilizado para el cultivo in vitro de hongos y levaduras.
CONCLUSION
Gracias a esta prctica, se logr nuevamente a fijar los conceptos fundamentales de esterilizacin, y de la importancia de la misma a la hora de preparar medios de cultivos.