ESCUELA EUROPEA DE LUXEMBURGO SECCIN ESPAOLA

6 SECUNDARIA BIO 4

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PROTENAS

MATERIALES
Tubos de ensayo
Gradilla
Mecheros Bunsen.
Vasos de precipitados
Pipetas.
Solucin de HCl concentrado
Alcohol etlico
Solucin de SO
4
Cu al 1%
NaOH al 20%
Acetato de plomo.
HNO
3

Albmina (al 5 %).
Aceite vegetal.concentrado.
Solucin de albmina al 1-2%.
Clara de huevo.
Leche
Glucosa.
Bao Mara.
Pinzas de madera.
Guantes y gafas.
Pipetas.
1. COAGULACIN DE LAS PROTENAS

FUNDAMENTO
Las protenas, debido al gran tamao de sus molculas, forman con el agua soluciones coloidales que pueden
precipitar formndose cogulos al ser calentadas a temperaturas superiores a 70 C o al ser tratadas con
soluciones salinas, cidos, alcohol, etc. La coagulacin de las protenas es un proceso irreversible y se debe a su
desnaturalizacin por los agentes indicados, que al actuar sobre la protena la desordenan por destruccin de
sus estructuras terciaria y secundaria.
TCNICA
1. Colocar en tres tubos de ensayo una pequea cantidad de clara de huevo (puede diluirse en un poco de agua
para obtener una mezcla espesa) o 2-3ml de leche. (La mitad de los alumnos con huevo y la otra mitad con
leche).
2. Calentar uno de los tubos al bao Mara, aadir a otro 2-3 ml de HCl concentrado y al tercero 2 o 3ml de
alcohol etlico.
3. Observar y anotar los resultados.

2. REACCIONES COLOREADAS ESPECFICAS.
2.1 REACCIN DE BIURET
FUNDAMENTO
Entre las reacciones coloreadas especficas de las protenas, que sirven por tanto para su identificacin, destaca
la reaccin del Biuret. Esta reaccin la producen los pptidos y las protenas, pero no los aminocidos ya que se
debe a la presencia del enlace peptdico CO-NH que se destruye al liberarse los aminocidos.
El reactivo de Biuret lleva sulfato de Cobre (II) y sosa. El Cu, en un medio fuertemente alcalino, se une con los
enlaces peptdicos formando un complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la
concentracin de protenas.
TCNICA
1. Colocar en un tubo de ensayo 3ml de solucin de albmina al 1-2%.
2. Aadir 4-5 gotas de solucin de CuSO
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al 1%.
3. Aadir 3ml de solucin de NaOH al 20%.
4. Agitar para que se mezcle bien.
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5. Observar y anotar los resultados.
6. Repetir la experiencia en otro tubo con una disolucin de uno de estos aminocidos: Cistena o
Metionina.
7. Repetir la experiencia con una disolucin de uno de estos aminocidos: Tirosina, Triptfano o
Fenilalanina.
8. Repetir la experiencia con un aminocido diferente a los anteriores.
9. Repetir con aceite y huevo (la mitad de los alumnos) y con leche y glucosa (la otra mitad).
2.2 REACCIN XANTOPROTEICA.
FUNDAMENTO. Esta reaccin se debe a la formacin de un compuesto aromtico nitrado de color amarillo,
cuando las protenas son tratadas con cido ntrico concentrado. Generalmente, se forma primero un
precipitado blanco que cambia a amarillo al calentarlo. El color se empieza a tornarse anaranjado cuando la
solucin se vuelve bsica. La prueba da resultado positivo en aquellas protenas con aminocidos portadores de
grupos bencnicos, tirosina, fenilalanina y triptofano, obtenindose nitrocompuestos de color amarillo, que se
vuelven anaranjados en medio fuertemente alcalino (formacin del cido pirmico o trinitrofenol). En esta
prueba se produce la nitracin del anillo bencnico presente en dichos aminocidos. Las manchas amarillas en
la piel se causan por el cido ntrico son el resultado de una reaccin xantoprotica.
Tcnica.-
1. Poner en un tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de albmina.
2. Aadir 1 cc. de HNO
3
concentrado.
3. Calentar al bao Mara a 100 C.
4. Enfriar en agua fra
5. Aadir gota a gota una disolucin de sosa al 40%.
6. Observar y anotar los resultados.
7. Repetir la experiencia en otro tubo con una disolucin de uno de estos aminocidos: Cistena o
Metionina.
8. Repetir la experiencia con una disolucin de uno de estos aminocidos: Tirosina, Triptfano o
Fenilalanina.
9. Repetir la experiencia con un aminocido diferente a los anteriores.
10. Repetir con aceite; clara de huevo; leche; glucosa.

2.3 REACCION DE LOS AMINOACIDOS AZUFRADOS
FUNDAMENTO. Se pone de manifiesto por la formacin de un precipitado negruzco de sulfuro de plomo. Se
basa esta reaccin en la separacin mediante un lcali, del azufre de los aminocidos, el cual al reaccionar con
una solucin de acetato de plomo, forma el sulfuro de plomo.
TCNICA
1. Poner en un tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de albmina.
2. Aadir 2 cc. de solucin de hidrxido sdico al 20%.
3. Aadir 10 gotas de solucin de acetato de plomo al 5%.
4. Calentar el tubo hasta ebullicin.
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5. Si se forma un precipitado de color negruzco nos indica que se ha formado sulfuro de plomo,
utilizndose el azufre de los aminocidos, lo que nos sirve para identificar protenas que tienen en su
composicin aminocidos con azufre.
6. Observar y anotar los resultados.
7. Repetir la experiencia en otro tubo con una disolucin de uno de estos aminocidos: Cistena o
Metionina.
8. Repetir la experiencia con una disolucin de uno de estos aminocidos: Alanina, Tirosina, Triptfano o
Fenilalanina.
9. Repetir la experiencia con un aminocido diferente a los anteriores.
10. Repetir con aceite y huevo (la mitad de los alumnos) y con leche y glucosa (la otra mitad).

CUESTIONES
1. Cmo se manifiesta la desnaturalizacin de la clara de huevo?
2. Cul de los tres agentes utilizados tiene mayor poder de desnaturalizacin?
3. Cmo podramos saber que una sustancia desconocida es una protena?
4. Qu coloracin da la reaccin del Biuret?
5. Una protena coagulada podra dar la reaccin del Biuret?
6. Si se realiza la reaccin del Biuret sobre un aminocido como la Glicina es positiva o negativa? Por
qu?