ANLISIS DE PELIGROS Y DE PUNTOS

CRTICOS DE CONTROL (HACCP)

PROCESO PRIMARIO ARTESANAL DE PRODUCTOS
HIDROBIOLOGICOS
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DEFINICIONES Y ASPECTOS TCNICOS

HACCP (Hazard Analysis and Critical Control Point)
Anlisis de Peligros y Puntos de Control Crticos.
PLAN HACCP
Documento escrito basado en principios HACCP que definen los procedimientos que
deben seguirse, para asegurar el control de un proceso o procedimiento especifico.
SISTEMA HACCP
Es el resultado de la implementacin del Plan HACCP
EQUIPO HACCP
Grupo de personas responsables de desarrollar el Plan HACCP
CONTROL
Administrar las condiciones de una operacin para mantener el conocimiento de los
parmetros establecidos.
PUNTO DE CONTROL (PC)
Cualquier punto, paso o procedimiento en el cual se pueden controlar factores
Biolgicos, Qumicos y/o Fsicos.
PUNTO CRTICO DE CONTROL (PCC)
Punto, paso o procedimiento al cual se puede aplicar control y en el cual se puede
prevenir, eliminar y/o reducir a niveles aceptables de un riesgo o peligro para la
inocuidad de los alimentos.
RBOL DE DECISIONES
Secuencia de preguntas, hechas para determinar, si un Punto de Control es un punto
Crtico de Control, durante el proceso.
RIESGO
Probabilidad de que ocurra un peligro, el cual puede ser Alto, Mediano o Bajo.




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PELIGRO
Toda caracterstica inaceptable, de tipo, Biolgico, Qumico, Fsico o Econmico en un
producto alimenticio y este puedan causar enfermedad, angustia o la muerte.
PELIGRO FSICO
Presencia de materias extraas, como Algas, Insectos, arenilla, Piedrecillas, etc.
PELIGRO QUMICO
Restos de Lubricantes, Hidrocarburos, exceso de Desinfectante.
PELIGRO BIOLGICO
Presencia de Microorganismos Patgenos, debido a un tratamiento inadecuado o
insuficiente o re contaminacin posterior al tratamiento.
EFECTOS
Consecuencia o resultado del peligro: Muerte, Enfermedad o Fraude Econmico.
DESVIACIN
Incumplimiento de un lmite crtico.
MONITOREO
Accin de conducir una secuencia planificada de observaciones o medidas, para
evaluar si un punto de control crtico este bajo control y producir un registro exacto
para uso futuro en las verificaciones.
MONITOREO CONTINUO
Procedimiento de registrar y recopilar datos de proceso, como por ejemplo la
temperatura, santidad del agua, tiempos, etc.
REA, ETAPA, OPERACIN, REGIN.
Parte de las fases de un proceso de produccin donde pueden ser identificados los
peligros y/o riesgos.


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VALIDACIN
Elemento de verificacin que envuelve la coleccin y evaluacin de informacin para
determinar si el Plan HACCP una vez implementado correctamente, controla
efectivamente los peligros significativos para la inocuidad.
VERIFICACIN
Aplicacin de mtodos, procedimientos, anlisis y evaluaciones, a parte de los
monitoreos, para validar el cumplimiento y aun ms cuan adecuado es el Plan HACCP.
SEVERIDAD
Gravedad de un peligro, si este no est debidamente controlado.


GRAVEDAD

Magnitud del peligro o grado de las consecuencias que puede generarse cuando
Existe dicho peligro.
LIMITE OPERACIONAL
Criterio ms riguroso que los lmites crticos y que son empleados por el operador
para reducir los riesgos de una desviacin.

PROGRAMAS PRE REQUISITOS
Procedimientos que controlan las condiciones ambientales dentro de la planta, prev
una base para la produccin segura de los productos alimenticios, entre ellos tenemos:
POES : Procedimientos Operacionales Estndares Saneamiento.
BPM : Buenas Prcticas de Manufactura









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TABLA N 01

Criterios Fsico - Organolptico de los Pesados grasos de acuerdo a la categora de
frescura (Anchoveta, Jurel, Caballa)

ITEM A EVALUAR
CRITERIOS FISICO-ORGANOLEPTICO
EXTRA A B NO APTO
PIEL
Pigmentacin
tornasolada.
colores vivos y brillantes
con irisaciones, clara
diferencia entre
superficie dorsal y
ventral
Prdida de
resplandor y brillo;
colores ms
apagados.
menor diferencia
entre superficie
dorsal y ventral
Apagada sin brillo,
diluidos: piel
doblada cuando se
curva el pez
Pigmentacin muy
apaga, la piel se
desprende de la carne
MUCOSIDAD
CUTANEA
Acuosa, transparente Ligeramente turbia Lechosa
Mucosidad gris
amarillenta, opaca
CONSISTENCIA DE
LA CARNE
Muy firme, rgida
Bastante rgida,
Firme
Un poco blanda
Blanda
(flcida)'
OPRCULOS Plateados
Plateados,
ligeramente
teidos de rojo o
marrn
Parduscos y con
derrames
sanguneo
amplios
Amarillentos
OJOS
Convexo,
abombado;
pupila azul
negruzca
brillante,
prpado
transparente
Convexo y
Ligeramente
hundido.
pupila oscura:
crnea
ligeramente
opalescente
Plano; pupila
borrosa; derrames
sanguneos
alrededor
del ojo
Cncavo en el
centro, pupila
gris, crnea
lechosa'
BRANQUIAS
Color rojo vivo a
prpura uniforme
sin mucosidad
Color menos vivo.
ms plido
en los bordes;
mucosidad
Transparente
Engrosndose y de
colorndose.
mucosidad opaca
Amarillentas,
mucosidad
lechosa
OLOR DE
BRANQUIAS
Fresco: a algas
marinas, a yodo
Ausencia de olor
a algas: olor
neutro
Olor graso un poco
sulfuroso a tocino
rancio o fruta
descompuesta
Agrio
descompuesto
FUENTE: ITP- SANIPES










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TABLA N 02

Criterios fsico-organolpticos de los pescados magros de acuerdo a la categora
de frescura (Perico, Pejerrey)

ITEM A EVALUAR
CRITERIOS FISICO-ORGANOLEPTICO
EXTRA A B NO APTO
PIEL
Pigmento vivo y
tornasolado u
opalescente. sin
decoloracin
Pigmentacin
viva pero sin
brillo.
Pigmentacin en
fase de
decoloracin y
sin brillo
Pigmentacin
decolorada, sin
brillo. piel se
desprende de la
carne
MUCOSIDAD
CUTANEA
Acuosa,
transparente
Ligeramente
turbia
Lechosa Gris
amarillenta
Opaca
CONSISTENCIA DE
LA CARNE
Firme y elstica;
superficie lisa
Menos elstica
Ligeramente
blanda (flcida),
menos elstica,
superficie crea
y opaca
Blanda (flcida)
las escamas se
desprenden
fcilmente de la
piel, superficie
algo arrugada
PERITONEO (EN
EL PESCADO
EVISCERADO)
Liso. brillante;
difcil de separar
de la carne
Un poco apagado;
puede separar
de la de la carne
Grumoso, fcil
de separar
de la carne
No adherido
OJOS
Convexo
(abombado):
pupila negra
y brillante,
Convexo,
Ligeramente
hundido. pupila
negra apagada;
crnea
ligeramente
opalescente
Plano; crnea
opalescente;
pupila opaca
Cncavo en el
centro, pupila
gris, crnea
lechosa'
BRANQUIAS
Color vivo: sin
mucosidad
Menos
coloreadas,
mucosidad
transparente
Color
marrn/gris
decolorndose;
mucosidad
opaca y espesa
Amarillentas
mucosidad
lechosa
OLOR DE LAS
BRANQUIAS Y DE
LA CAVIDAD
ABDOMINAL
Algas marinas
Ausencia de olor ;
algas, olor neutro
Fermentado;
ligeramente
agrio
Agrio,
Descompuesto
FUENTE ITP-SANIPES










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TABLA N 03


Caractersticas fsico - organolpticas de los cefalpodos de acuerdo a la
categora de frescura (Calamar- Pota)

ITEM Criterios Fsico Organolpticos
EXTRA A NO APTO
PIEL Pigmentacin viva,
piel adherida a la
carne
Pigmentacin
opaca, piel
adherida a la carne
Piel decolorada se
separa con bastante
facilidad de la carne
CARNE
Muy firme, color
blanco nacarado
Firme, color blanco
de cal
Ligeramente
blanda, color
blanco rosado o
ligeramente
amarillenta
TENTACULOS Resistentes al
desmembramiento
Resistentes al
desmembramiento
Se separan con
facilidad.
OLOR Fresco _a algas
marinas
Escaso o nulo Olor a tinta

FUENTE ITP-SANIPES






















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METODO Y PROCEDIMIENTO DE MUESTREO

TOMA DE MUESTRA
La toma de muestra se realiza mediante el mtodo aleatorio tomando las muestras al azar que
representan al lote recepcionado de materia prima,

1.1.- RECEPCION DE MATERIA PRIMA
El TAC estar presente al momento de la recepcin de la materia prima tomando muestras
al azar del lote recepcionado en forma aleatoria, de acuerdo al Plan de muestreo detallado
ms adelante, paralelo a ello se efectuara el control l de temperatura y de las muestras
obtenidas se realizara la respectiva evaluacin organolpticas.
El muestreo se realiza siguiendo el procedimiento sealado por el CODEX para alimentos
pre- envasado (NCA 6.5)

TIPOS DE EXAMEN A LOS QUE SE APLICAN LOS PLANES DE MUESTREO
Los Planes de Muestreo tienen por objeto, principalmente, establecer las disposiciones
sobre calidad de las normas para los productos del Codex, en las que un NCA de 6,5 se
considera apropiado para la unidad defectuosa, definida en las normas del Codex. Para
los fines de estos Planes de Muestreo, la "calidad" se refiere a los factores o
caractersticas del producto evaluado por medios organolpticos o fsicos, tales como
color, sabor, textura, defectos, tamao y aspecto. Estos Planes no son aplicables a los
factores que pudieran constituir un peligro para la salud, o que sean nocivos, o que, por
cualquier otra razn, sean altamente objetables para el consumidor, y que, basndose en
los mismos, las autoridades competentes rechazaran el lote en cuestin. Para los factores
de este tipo debern emplearse otros criterios y planes de muestreo. Aunque estos Planes
de Muestreo se destinan fundamentalmente a la evaluacin de la calidad, tambin se
pueden emplear para efectuar otras determinaciones, tales como el peso neto, los valores
Brix y el peso del producto escurrido, siempre que para estas determinaciones sea
apropiado un criterio de aceptacin con un NCA de 6,5.


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TAMAO DEL LOTE Y PUNTO DE APLICACIN
Los Planes de Muestreo y los procedimientos de aceptacin, se destinan a evaluar lotes
que representan partes considerables de la produccin de una fbrica, o cantidades
relativamente grandes de mercancas. Los planes podrn utilizarse tambin para lotes
pequeos; sin embargo, los gobiernos podrn elegir la aplicacin de procedimientos.
DESCRIPCION
Los Planes de Muestreo, que figuran en el Apndice I del presente documento, se
presentan en forma tabular apropiada para fines de muestreo para la aceptacin de los
alimentos pre envasados, en la que se ha aceptado para determinadas caractersticas del
producto un NCA de 6,5. Estos planes comprenden:
1. Niveles de inspeccin;
2. Tamaos de las muestras, en relacin con el tamao del lote y el tamao del
recipiente; y
3. Nmeros de aceptacin.
Se toma una muestra al azar del lote, segn el esquema apropiado de los Planes de
Muestreo. Cada unidad de muestra se examina de acuerdo con los requisitos de la
norma individual del Codex, y se clasifica bien como "aceptable" o bien como
"defectuosa". Sobre la base del nmero total de "unidades defectuosas" de la muestra, el
lote "satisface" o "no satisface" los requisitos de la norma del Codex, a los que se aplican
estos Planes de Muestreo, de conformidad con los siguientes criterios:
- Satisface los requisitos, si el nmero de "defectuosas" es igual, o
menor, que el nmero de aceptacin del plan apropiado.
- No satisface los requisitos, si el nmero de "defectuosas" sobrepasa
el nmero de aceptacin del plan apropiado.

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DEFINICIONES
NIVEL DE CALIDAD ACEPTABLE (NCA): Es el porcentaje mximo de las unidades
defectuosas admisibles en un lote, que ser aceptado en el 95 por ciento de los casos,
aproximadamente. Por ejemplo, segn un plan de muestreo, con un NCA de 6,5 se
aceptar en el 95 por ciento de los casos, aproximadamente, un lote o una produccin que
contenga 6,5 por ciento de unidades defectuosas.
NMERO DE ACEPTACIN (C): Es el nmero que en un plan de muestreo indica la
cantidad mxima de unidades defectuosas que puede contener la muestra para que
pueda considerarse que el lote satisface los requisitos de una norma del Codex.
DEFECTUOSA: Se entiende por "defectuosa" toda unidad de muestra que no satisfaga un
determinado requisito especfico (o requisitos) de una norma del Codex (sobre la base
del nmero total de "puntos negativos", tolerancias individuales para los "defectos", etc.
INSPECCIN: Es el procedimiento aplicado para medir, examinar, comprobar o
comparar, en cualquier otra forma, un recipiente o una unidad del producto (unidad de
muestra) en relacin con los requisitos prescritos.
NIVEL DE INSPECCIN: Se emplea este trmino para indicar la cantidad relativa de
muestras tomadas de los lotes de un determinado producto o clase de productos.
LOTE O LOTE DE INSPECCIN: Es el conjunto de recipientes primarios, o unidades de
muestras, del mismo tamao, tipo y forma de presentacin, que contienen productos
fabricados o elaborados en condiciones esencialmente anlogas.
TAMAO DEL LOTE (N): Es el nmero de recipientes primarios, o de unidades de
muestras, que forman el lote.



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UNIDAD DE MUESTRA: Es el recipiente individual (recipiente primario), una porcin del
contenido del recipiente primario o una mezcla compuesta del producto que se examina o
ensaya como una sola unidad.
MUESTRA: Todo nmero de unidades de muestras que se utilizan en la inspeccin.
Generalmente, la muestra comprende todos los recipientes o unidades de muestras
tomados para examen o ensayo de un determinado lote.
MUESTREO: Es el procedimiento que consiste en tomar al azar o en elegir recipientes o
unidades de muestras de un lote o de la produccin.
TAMAO DE LA MUESTRA (N): Es el nmero de recipientes, o de unidades de muestras
que comprende la muestra total tomada de un lote o de la produccin.
PLAN DE MUESTREO: Es el plan de muestreo en el que se estipulan los tamaos de
muestras, los niveles de inspeccin, los nmeros de aceptacin y/o recusacin, de forma
que pueda tomarse una decisin respecto a si se debe aceptar o rechazar el lote o la
produccin, basndose en los resultados de la inspeccin y en el ensayo de la muestra.

APLICACIN DE LOS PLANES DE MUESTREO
INFORMACIN NECESARIA
Al aplicar los Planes de Muestreo del Apndice I del presente documento debern
conocerse los siguientes datos:
Tamao del recipiente
Nivel de inspeccin



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Tamao del lote (N)
Requisitos de la norma el Codex respecto a la calidad del producto (es decir, clasificacin
de defectuosas y requisitos para la aceptacin del lote).
INSPECCIN
Deben tomarse las siguientes medidas:
Se selecciona el nivel de inspeccin apropiado en la forma siguiente:
Nivel de inspeccin I - Muestreo normal
Nivel de inspeccin II - Controversias, (para fines de arbitraje del
Codex), puesta en vigor o necesidad de proceder a una mejor
estimacin del lote.
Determinar el tamao del lote (N), es decir, nmero de recipientes primarios o
unidades de muestras.
Determinar el nmero de unidades de muestras (tamao de la muestra (n)) que
deben tomarse del lote sometido a inspeccin, teniendo en cuenta el tamao del
recipiente, el tamao del lote y el nivel de inspeccin.
Tomar al azar, en el lote, el nmero requerido de unidades de muestras, teniendo
debidamente en cuenta, al proceder a la seleccin de la muestra, la clave u otras
marcas de identificacin.
Examinar el producto de acuerdo con los requisitos estipulados en la norma del
Codex. Clasificar como defectuoso todo recipiente o unidad de muestra que no
satisfaga el nivel de calidad especificado en la norma como defectuoso, basndose
en la clasificacin de defectuosas que figure en la norma del Codex.
Remitirse al plan de muestreo apropiado.


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Considerar el lote como aceptable cuando el nmero de unidades defectuosas sea
igual, o menor, que el nmero de aceptacin (c) del plan de muestreo apropiado,
que figura en el Apndice I de este documento.
Considerar que el lote no cumple con los requisitos exigidos cuando el
nmero de unidades defectuosas exceda del nmero de aceptacin (c), segn el
plan de muestreo apropiado.

NOTAS SOBRE EL TAMAO DE LA MUESTRA
No es necesario limitar el tamao de la muestra al mnimo correspondiente al tamao del
lote y al nivel de inspeccin respectivos. En todos los casos, podr tomarse una muestra
mayor. En el siguiente cuadro se describe la toma de muestra, segn la unidad de
muestreo.
PLAN DE MUESTREO
(Nivel de inspeccin I, NCA = 6,5)

PESO NETO IGUAL O INFERIOR A 1 KG (2,2 LB)













Tamao del lote (N) Tamao de la muestra (n) Nmero de
aceptacin (c)
4 800 o menos 6 1
4 801 - 24 000 13 2
24 001 - 48 000 21 3
48 001 - 84 000 29 4
84 001 - 144 000 38 5
144 001 - 240 000 48 6
ms de 240 000 60 7

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PESO NETO MAYOR DE 1 KG (2,2 LB)
PERO NO MAYOR PESO NETO MAYOR DE 1 KG (2, DE 4,5 KG (10 LB)










PESO NETO MAYOR DE 4.5 Kg (10.0 LB)









FUENTE: Plan de muestreo para Alimentos Pre envasados (NCA) _Codex Stan 233- Volumen 13 del CODEX
ALIMENTARIUS 1969 NCA: NIVEL DE CALIDAD ACEPTABLE


DE ACUERDO AL PLAN DE MUESTREO
SE ACEPTA EL LOTE: Si el total de Defectuosos es < Al Nmero de aceptacin.
SE RECHAZA EL LOTE: Si el lote de Defectuosos es > al nmero de aceptacin.
Tamao del lote (N) Tamao de la muestra (n) Nmero de
aceptacin (c)
2 400 o menos 6 1
2 401 - 15 000 13 2
15 001 - 24 000 21 3
24 001 - 42 000 29 4
42 001 - 72 000 38 5
72 001 - 120 000 48 6
ms de 120 000 60 7
Tamao del lote (N) Tamao de la muestra
(n)
Nmero de
aceptacin (c)
600 o menos 6 1
601 - 2 000 13 2
2 001 7 200 21 3
7 201 - 15 000 29 4
15 001 -24 000 48 6
24 001 -42 000 84 9
ms de 42 000 126 13

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PLAN DE MUESTREO PARA EL CONTROL DE HISTAMINA EN PRODUCTOS DE LA PESCA


Se toma a prueba un mnimo de 18 ejemplares, obtenidos de forma representativa a lo
largo de cada lote (o la totalidad del lote, cuando hay menos de 18 peces en el lote). El
pescado adicional debe ser examinado si la variabilidad en el contenido de histamina
de pescado a los peces se espera que sea alta.
Cuando son varias especies, se tomara la muestra de cada especie.
El pescado recogido para el anlisis puede mezclarse si el lmite crtico se reduce en
consecuencia. Por ejemplo, una muestra de 18 pescados pueden ser mezclados en 6
unidades de 3 pescados cada uno, siempre que el lmite crtico se reduce de 50 ppm a
17 ppm para cada unidad. Si se realiza una mezcla de los 18 pescados el lmite ser de
50 ppm.

Cuando el lmite de temperatura crtica interna no se ha cumplido mayor que 4.4 y
5C y la histamina no supere 50 ppm en las pruebas inciales:

Se debe enfriar y mantener el lote afectado (es decir, pescados de origen comn) hasta el
anlisis de histamina se lleva a cabo en un mnimo de 60 pescados recogidos de forma
representativa en todo el lote, incluyendo cualquier pescado medido a tener temperaturas
que superaban el lmite crtico (o la totalidad del lote de lotes ms pequeos que 60
peces). Rechazar el lote si cualquier pescado se encuentra con la histamina mayor que o
igual a 50 ppm. El pescado recogido para el anlisis puede mezclarse para el anlisis de si
el punto de accin se reduce en consecuencia. Por ejemplo, una muestra de 60 peces
pueden ser mezclados en 20 unidades de cada 3 peces, siempre que el punto de accin se
reduce de 50 ppm a 17 ppm para cada unidad;







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CRTICOS DE CONTROL (HACCP)
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Cuando el lmite de un examen crtico sensorial no se ha cumplido y la histamina no
supere 50 ppm en las pruebas inciales:

Se debe enfriar y mantener el lote afectado (es decir, peces de origen comn) hasta el anlisis
de histamina se lleva a cabo en un mnimo de 60 peces recogidos de forma representativa en
todo el lote, incluyendo todos los peces en el solar que muestra la evidencia de la
descomposicin (los olores persistentes y perceptible con facilidad) (o todo el lote para lotes
de menos de 60 peces). Rechazar el lote si cualquier pescado se encuentra con la histamina
mayor que o igual a 50 ppm. El pescado recogido para el anlisis puede mezclarse para el
anlisis de si el punto de accin se reduce en consecuencia. Por ejemplo, una muestra de 60
peces pueden ser mezclados en 20 unidades de cada 3 peces, siempre que el punto de accin
se reduce de 50 ppm a 17 ppm para cada unidad;

Se rechazara el lote si cualquier pescado se encuentra con la histamina mayor que o
igual a 30 ppm segn control de planta.

















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PROCEDIMIENTO PARA DETERMINACION DE HISTAMINA

MATERIALES

- 48 columnas de intercambio inico.
- 6 soluciones estndares de Histamina. (0, 20, 40,80, 160 y 320 ppm).
- Solucin de elucin. (55 ml). Listo para usar.
- Solucin de lavado concentrada. (50 ml)
- Reactivo de color 1 y 2
- 96 pozos desglosables
- 1 placa porta pozos.
- Manual de Instrucciones en Castellano.


PROCEDIMIENTO

Preparacin de reactivo:
Solucin de lavado diluida: Mezclar 1 ml de la solucin de lavado concentrada
con 9 ml de agua destilada. Se requiere preparar 8 mililitros de Sol. Lavado
diluida por cada muestra.
Mezcla Reactivo de color 1y 2: Para una corrida de 6 estndares y 4 muestras se
aconseja mezclar 250 ul del reactivo 1 + 250 ul del reactivo 2. Esta mezcla es
estable durante 10 horas.
Preparacin de muestra (pescado).
Pesar 50 g de la muestra molida y agregar 50 ml de agua destilada (o cantidad
equivalente )
Separar 1 gr de esta mezcla, en un tubo de vidrio y adicionarle 3 ml de 2-
Propanol (Iso-Propanol) P.A.
Agitar vigorosamente durante 3 minutos (a mano o con agitador). Filtrar el
extracto a travs de papel de filtro (p. ej. Whatman No. 1),


ANLISIS DE PELIGROS Y DE PUNTOS
CRTICOS DE CONTROL (HACCP)
PROCESO PRIMARIO ARTESANAL DE PRODUCTOS
HIDROBIOLOGICOS
CODIGO: LFOT- HACCP
VERSI ON: 01-2013
ANEXOS
PAGINA: 18 al 18



REVISADO POR:
Departamento de Aseguramiento de
la Calidad
ELABORADO POR:

Equipo HACCP

APROBADO POR:

Gerente General

Preparacin y uso de las Columnas de Intercambio.
Lavar la Columna con 2 ml de solucin de lavado diluida antes de usarla.
Aadir 1 mililitro del sobrenadante del extracto a la Columna.
Aadir 1 mililitro de una solucin de Isopropanol al 70%
Aadir 3 ml de solucin de lavado diluida a la Columna (fase de lavado). Repetir
nuevamente
Desechar el lquido de lavado que ha pasado a travs de la Columna. Colocar un
nuevo tubo para recoger el eluado.
Comience la fase de extraccin, aadiendo cuidadosamente 0.5 ml de solucin de
elucin a la columna, permitiendo que el extracto penetre de nuevo en el gel y
pipetear otros 0.5 ml de solucin de elucin en la columna. .Recolectar ambos
eluados en un tubo y homogenizar por agitacin.
Recupere al menos 200 l del eluado, para ser transferido posteriormente a un
pozo para la reaccin de color
Realizacin de la prueba.
Retire y coloque un nmero suficiente de pozos en el marco porta pozos (para
los estndares y para las muestras a analizar). Marque las posiciones de los
estndares y de las muestras.
Agregue 150 l de la solucin de elucin a cada pozo que va a contener un
estndar, luego agrguele 50 l del estndar correspondiente. Utilice una punta
de pipeta nueva para cada estndar.
Agregue 200 l de cada eluado de la muestra al pozo separado para recibir esa
muestra.
Agregue 50 l de la Mezcla de Reactivo de Color a cada uno de los pozos
(muestras y estndares).