Katal

Ensayo y unidades enzimticas

Las enzimas son ensayadas tomando una muestra de suero y agregando el sustrato adecuado.
Luego de un tiempo de incubacin, la mezcla es ensayada para el producto formado. Las enzimas
NAD
+
o NADP
+
dependientes son ensayadas por espectrofotometra, ya que las formas reducidas de
estas coenzimas absorben la luz a una longitud de onda de 340nm; pero sus formas oxidadas no
absorben la luz. Una reaccin de nuestro inters puede ser adecuadamente acoplada con otra
reaccin que use NAD
+
o NADP
+
y entonces la velocidad de la reaccin puede ser evaluada.
La actividad enzimtica es expresada en micromoles de sustrato convertido a producto por minuto
bajo condiciones de ensayo especficas. Una unidad estndar (o unidad internacional) de actividad
enzimtica (U) es la cantidad de enzima que convierte un micromol de sustrato por minuto por litro
de la muestra y se abrevia U/L
El mtodo moderno de expresin de la actividad enzimtica es en Katals (Kat), un Katal (actividad
cataltica) es definido como el nmero de moles de sustrato transformados por segundo por litro de
muestra (Kcat= Vmax dividido por el nmero de sitios activos). (60 U = 1 nkat = 0,60 U)(1 I.U =
1 MOL/MIN = 16,67 nkat). Cuando se expresa Katals, la actividad de diferentes enzimas puede ser
comparada. La eficiencia cataltica es expresada como la relacin de Kcat dividida entre Km.
En cintica enzimtica, es la cantidad de enzima necesaria para transformar un mol de sustrato por
segundo. 1 Katal equivale a 60 x 106 unidades de actividad enzimtica. Como es una unidad muy
grande, se suele utilizar sus submltiplos microkatal (kat) y nanokatal (nkat).

Actividad cataltica
La actividad cataltica se refiere a la velocidad con la cual se induce a la reaccin a seguir hacia el
equilibrio qumico y puede definirse como la propiedad de aumentar la velocidad de la reaccin con
respecto a la manifestada sin catalizador, en las mismas condiciones de temperatura, presin,
concentracin, etc. La actividad puede incrementarse usualmente elevando la temperatura, aunque
de esta manera se puede acortar la vida del catalizador o incrementar reacciones adversas.


Bibliografa
Vasudevan, D., Vaidyanathan, K., & S, S. (2010). Textbook of Biochemistry for Medical Students.
Madrid: JP Medical Ltd.