Determinacin de Gnero a travs de un anlisis cuantitativo y comparativo de corpsculos de Barr en tejido pulpar.

Autores: Aceves Hernndez Jos Martn, Jimnez Miranda Raymundo, Moreno Rocha Stephanie, Rodrguez Orozco Martn$ Asesores: C.D. Gonzlez Villanueva 'ar&a. Resumen %a determinaci&n de! gnero es una de !as c!aves en e! proceso de identi'icaci&n humana, un mtodo (ti! para cromatina arr o corp(scu!o de este procedimiento es !a o)servaci&n de !a arr *ue son masas condensadas de cromatina os !n"el# C.D. $una %odr&"uez $ilia !anca Mariana, Surez "ordero #ernando

se+ua!, se encuentran en e! n(c!eo de !as c!u!as somticas de !as hem)ras de)ido a un cromosoma , inactivo$ Son una masa heterocromtica, p!ana y conve+a, con un tama-o de .,/+0,1 micras$ 2n !a actua!idad M+ico atraviesa una de sus peores crisis en vio!encia socia! derivada de! com)ate de! go)ierno a !os grupos de !a de!incuencia organizada de! narcotr'ico, esto ha ori!!ado a !os de!incuentes a uti!izar mtodos e+tremistas para e!iminar evidencia humana de !os crmenes cometidos$ 2ste ha!!azgo es de suma importancia de)ido a *ue !a pu!pa denta! est protegida por componentes minera!izados como e! esma!te, !o cua! nos permite !a conservaci&n de! te3ido como medio con'ia)!e para !a determinaci&n de! gnero *ue en caso de otros te3idos de! cuerpo humano no puede ser rea!izado$ 2n este estudio se determina e! gnero y !a edad por o)servaci&n de "orp(scu!os de arr en e! te3ido pu!par de &rganos dentarios$ Se uti!izaron 14 &rganos dentarios e+c!usivamente mo!ares y premo!ares de segunda dentici&n e+trados por tratamiento ortod&ntico y preventivo$ Se o)tuvieron !os te3idos pu!pares, se procesaron y se ti-eron con hemato+i!ina5eosina$ %os cortes histo!&gicos se

o)servaron por microscopa convenciona! a un aumento de 0..,, mostrando 4. c!u!as por p!aca$ %a presencia de c!u!as con 0 cromatina se+ua! visi)!e se consider& positiva para !as mu3eres$ 2n !as muestras ana!izadas, !a prue)a mostr& un 0..6 de precisi&n$ 7or !o tanto, 'ue posi)!e detectar e! gnero por !a o)servaci&n de !a cromatina de arr en !a pu!pa denta!$ 7a!a)ras c!ave: "romatina arr, pu!pa denta!, edad, determinaci&n de! se+o$ A)stract 8ender determination is a 9ey process in the human identi'ication, a method is use'u! 'or this procedure o)servation or chromatin arr arr )ody masses that are se+ua! condensed chromatin, are in the nuc!eus o' somatic ce!!s 'or 'ema!es due to an inactive , chromosome$ :hey are a mass heterochromatic, '!at and conve+ ;ith a size o' .$/ +0, 1 microns$ Me+ico current!y e+periencing one o' its ;orst crises in socia! vio!ence arising 'rom government to com)at organized crimina! groups drug, that has pushed crimina!s to use e+treme methods to e!iminate human evidence o' the crimes committed$ :his 'inding is e+treme!y important )ecause the pu!p is protected )y minera!ized components as ename!, ;hich a!!o;s tissue preservation as re!ia)!e means 'or determining the gender that i' other tissues o' the human )ody can not )e done$ :his study determines the gender and age )y ;atching arr )odies in the denta! pu!p tissue o' organs$ 14 denta! organs ;ere used e+c!usive!y second mo!ar and premo!ar teeth e+tracted 'or orthodontic treatment and prevention$ 7u!p tissues ;ere o)tained, processed and stained ;ith hemato+y!in5eosin$ Histo!ogica! sections ;ere o)served )y microscopy conventiona! 0.., magni'ication, sho;ing 4. ce!!s per p!ate$ :he presence o' ce!!s ;ith 0 visi)!e se+ua! chromatin ;as considered positive 'or ;omen$ <n the samp!es tested, the test sho;ed a 0..6 accuracy$ :here'ore, it ;as possi)!e to detect the genus )y o)serving chromatin in the denta! pu!p$ =ey ;ords: arr "hromatin, pu!pa! tissue, age, se+ determination$ arr

<ntroducci&n %a odonto!oga 'orense como !a ciencia de identi'icaci&n humana por e+ce!encia actua!mente es de'inida como !a ap!icaci&n de conocimientos odonto!&gicos con 'ines mdico5!ega!es$ >esde *ue en 0?@? cuando Oscar Amoedo pu)!ic& su !i)ro A%Bart dentaire en Medicine %ega!C dando inicio a esta ciencia !a odonto!oga !ega! y 'orense se ha desarro!!ado como una especia!idad de orden medico 3urdico misma *ue ha incursionado en temas como !a identi'icaci&n humana, !a antropo!oga, e! ma!trato in'anti! y !a !egis!aci&n medica$ 2n !a rama de identi'icaci&n humana !a Odonto!oga #orense dio comienzo a! estudio de 8nero a travs de! an!isis de te3idos dentarios por !o *ue a partir de entonces y gracias a esto se puede o)tener in'ormaci&n de un individuo acerca de su 8nero, edad, h)itos a!imenticios, costum)res, po)!aciona!es, pato!ogas, traumatismos y !ugar de origen, entre otros$ 7arte 'undamenta! de un an!isis 'orense de identidad es e! gnero de un individuo mismo *ue se ha di'icu!tado en casos de &rganos dentarios ais!ados por !a 'a!ta de e!ementos para !!egar a este 'in sin em)argo recientes estudios en torno a arr o tam)in !!amada cromatina , a histo!oga y gentica dentaria han hecho pro)a)!e e! determinar esta varia)!e por medio de! estudio de !os corp(scu!os de nive! dentario mismos *ue se encuentran en e! te3ido pu!par$ %os corp(scu!os de arr son masas condensadas de cromatina se+ua!, se encuentran en e! n(c!eo de !as c!u!as somticas de !as hem)ras de)ido a un cromosoma , inactivo$ Son una masa heterocromtica, p!ana y conve+a, con un tama-o de .,/+0,1 micras$D1E Siendo !a gentica y !a histo!oga ramas recientes en !a medicina y espec'icamente en !a odonto!oga, en 0@F@ Murray arr y 2;art 8eorge ertram encontraron una di'erencia entre !as c!u!as 'emeninas y mascu!inas por !o *ue en 0@4. ana!izaron !as c!u!as nerviosas de !os gatos, donde !os n(c!eos ce!u!ares de !as hem)ras tuvieron a!tos porcenta3es de masas densas de cromatina a di'erencia de !os n(c!eos ce!u!ares de !os machos$ Se demostr& *ue estos

corp(scu!os resu!tan de !a condensaci&n e inactivaci&n parcia! de todo cromosoma ,, a estas estructuras se !es dio e! nom)re de "orp(scu!os de arr en honor a su descu)ridor$ A partir de estos estudios !os an!isis de "orp(scu!os de arr no se ha !imitado a zonas espec'icas de! organismoG en 0@4H >i+on y :orr encontraron esta cromatina en !a mucosa ora!, en 0@H. Iernino y %as9in encontraron !a misma condensaci&n, pero en esta ocasi&n, en c!u!as &seas y 'ina!mente en 0@H4 :ep!itz !as o)servo en c!u!as de !a retina$ D0E 2n 0@?H por primera vez Iera et a! descri)i& un mtodo histo!&gico intermedio )asado en o)servaci&n de !a presencia de !os "orp(scu!os de arr, para !a identi'icaci&n de se+o con'irmando *ue estos corp(scu!os se encuentran a!rededor de! F.6 de !as c!u!as 'emeninas *ue son conocidas como cromatina positiva y !os hom)res como cromatina negativa, )asando en !o anterior un mtodo e'iciente para determinaci&n de gnero$ Sa)iendo *ue !os cuerpos de arr son e+ce!entes indicadores para esta

determinaci&n y *ue son ha!!ados en distintas partes de! organismoG actua!mente !a odonto!oga 'orense comenz& a estudiar este mtodo a 'in de !!evar este medio de determinaci&n de identidad a !a cavidad ora!$ Actua!mente en e! 1.0. investigadores internaciona!es como Suazo en "hi!e rea!izo una investigaci&n donde eva!u& e! rendimiento diagn&stico, en !a prue)a uti!izo F. premo!ares y terceros mo!ares ma+i!ares e+tra3o !a pu!pa denta! y !a ti-o con hemato+i!ina eosina$ %a presencia de 0 c!u!a con cromatina se+ua! !o considero como de! se+o 'emenino$ A"onc!uyo *ue !a o)servaci&n de !a cromatina se+ua! en pu!pa dentaria es una prue)a con'ia)!e para !a determinaci&n de! se+oC DJE$ 2n e! 1.00 rea!izo otra investigaci&n acerca de !os corp(scu!os de arr donde determino e! e'ecto de !as a!tas temperaturas en !os te3idos dentarios a !o *ue conc!uyo *ue es posi)!e de o)servar !a cromatina en !as piezas dentarias sometidas a di'erentes temperaturas no mayores a ?.. grados$ 2ste ha!!azgo es de suma importancia de)ido a *ue !a pu!pa denta! est protegida por componentes

minera!izados como e! esma!te, !o cua! nos permite !a conservaci&n de! te3ido como medio con'ia)!e para !a determinaci&n de! genero *ue en caso de otros te3idos de! cuerpo humano no puede ser rea!izado$ "a)e destacar *ue !a Odonto!oga 'orense en M+ico est en desarro!!o, diversos autores entre e!!os e! >r$ Oscar %ozano y Andrade han hecho menci&n acerca de este mtodo sin em)argo no e+isten estudios e+perimenta!es re!acionados a este tema de orden naciona!$ 2n !a actua!idad M+ico atraviesa una de sus peores crisis en vio!encia socia! derivada de! com)ate de! go)ierno a !os grupos de !a de!incuencia organizada de! narcotr'ico, esto ha ori!!ado a !os de!incuentes a uti!izar mtodos e+tremistas para e!iminar evidencia humana de !os crmenes cometidos$ 7or !o anterior es una o)!igaci&n y necesidad de !as autoridades 3urdicas e! desarro!!ar mtodos *ue garanticen !a identidad humana postmortem a pesar de !as condiciones *ue rodeen cada caso$ 2s creciente !a cantidad de casos de desaparici&n humana derivados de este grave pro)!ema socia!, e! presente tra)a3o pretende *ue uti!izado este mtodo de orientaci&n de identidad y compro)ando su e'icacia trascienda como mtodo 3udicia! para !os casos *ue !o ameriten contri)uyendo con ! a !a identi'icaci&n humana en casos aun no resue!tos de &rganos dentarios humanos *ue no cuentan con e! derecho constituciona! a !a <dentidad$ 7!anteamiento de! 7ro)!ema K2s posi)!e determinar e! genero a travs de! estudio comparativo y cuantitativo de corp(scu!os de arr o)serva)!es en muestras pu!pares microsc&picas de &rganos dentarios diversosL Hip&tesis A travs de un an!isis cuantitativo y comparativo de !as di'erentes muestras pu!pares uti!izadas y o)servadas a! microscopio previa tinci&n de hemato+i!ina M eosina encontraremos di'erencias cuanti'ica)!es acordes a! gnero 'emenino$

O)3etivo: "ompro)ar *ue a travs de! estudio comparativo y cuantitativo a !a o)servaci&n microsc&pica de corp(scu!os de arr en muestras pu!pares de &rganos dentarios es posi)!e determinar e! gnero 'emenino$ O)3etivos particu!ares: Nti!izar !a tcnica de tinci&n de Hemato+i!ina M 2osina$ Nti!izar !a tcnica adecuada de microscopia para procesar !a muestra$ O)servar !a cromatina se+ua! en !a pu!pa denta! Reconocer !os corp(scu!os de arr en !a pu!pa denta! Ana!izar !a muestra, compro)ar sus resu!tados y generar conc!usiones$ "omprender !a importancia de !a identi'icaci&n de !a cro matina se+ua! en odonto!oga 'orense$ Metodo!oga 2! estudio se rea!iz& en 14 &rganos dentarios e+c!usivamente mo!ares y premo!ares de segunda dentici&n e+trados por tratamiento ortod&ntico y preventivo en estado ntegro en un rango de 0J a 1@ a-os de edad, con una moda de 1. a-os$ >espus de !a e+tracci&n !os &rganos dentarios se envo!vieron en gasas estri!es y se guardaron en )o!sas zip!oc9, se conservaron en re'rigeraci&n en un promedio de 04 das como m+imo$ Se rea!iz& una 'ractura a !os dientes recopi!ados con una prensa de carpintero, se e+tra3o !a pu!pa denta! con pinzas de disecci&n y cuando !a e+tracci&n se comp!ic& se uti!izo e! e+cavador y pinzas de curaci&n de! 0+F previamente estri!es$Se e!imin& !a pu!pa de !os dientes *ue tenan ms de 04 das de ha)er sido e+trados ya *ue !a pu!pa no se encontra)a en )uen estado$ %as muestras de !a pu!pa denta! se 'i3aron en 'ormo! a! 0.6 en tu)os de ensaye con taparrosca para evitar su auto!isis Se eti*uetaron con n(meros de identi'icaci&n y se mantuvieron a temperatura am)iente$

7reviamente

se rea!iz& !a deshidrataci&n de !as muestras para 'aci!itar !a

penetraci&n de so!ventes uti!izando en etano! en concentraciones crecientes de /.6 5 ?.6 5 @46 en interva!os de 0 minuto y a! 0..6 durante J minutos, se contin(a con !a ac!araci&n para 'avorecer !a penetraci&n de !a para'ina con +i!o! por J minutos, !uego se rea!izo !a inc!usi&n en para'ina para otorgar dureza co!ocando !as muestras en para'ina DF4O 5 H.O en estu'aE durante 4 horas, se deposit& !a muestra en pe*ue-os recipientes y se de3a so!idi'icar$ 2! siguiente paso *ue se rea!iz& 'ue !a preparaci&n de! soporte para e! monta3e en micr&tomo co!ocando e! )!o*ue de para'ina con !a muestra inc!uida se pego en un soporte de p!stico para 'i3ar!o en e! micr&tomo, posteriormente se rea!izaron !os cortes de !as muestras en e! micr&tomo o)teniendo cortes muy de!gados de 4 micras para as 'aci!itar !a o)servaci&n de !os corp(scu!os de arr$ 2! siguiente paso 'ue montar !os cortes en porta o)3etos para proporcionar soporte para !a o)servaci&n en e! microscopio depositando !as muestras en un recipiente con agua y !uego co!ocndo!os so)re e! portao)3etos y se de3aron secar, despus se rea!iz& !a despara'inaci&n en +i!o! durante J minutos para permitir !a penetraci&n de! a!coho! en !a muestra enseguida se rea!iz& !a hidrataci&n uti!izando etano! en concentraciones descendentes de 0..6 5 @46 5 ?.6 5 /.6 en interva!os de J minutos cada uno y un (!timo )a-o en agua desti!ada por 1 minutos$ A! termino de !a hidrataci&n se inicio !a co!oraci&n con hemato+i!ina5eosina *ue !e otorg& co!orantes di'erentes a nuestra muestra donde se sumergieron !as muestras en hemato+i!ina durante F minutos, se vir& con agua corriente 0 minuto y con agua desti!ada 0 minuto$ Se continu& con eosina por F minutos y agua desti!ada 0 minuto$ 7reviamente continuamos con !a deshidrataci&n *ue 'aci!it& e! monta3e con medios hidr&'o)os con etano! en concentraciones ascendentes /.6 5 ?.6 5 @46 en interva!os de 0 minuto y a! 0..6 durante J minutos, despus se rea!iz& e! ac!aramiento *ue otorg& transparencia a nuestras muestras co!ocndo!o en +i!o! durante J minutosG para 'ina!izar se rea!iz& e! monta3e de cu)re o)3etos *ue nos proporciono una preparaci&n permanente, co!ocando una gota de )!samo de

"anad so)re e! portao)3etos y encima e! cu)reo)3etos, cuidando *ue no *uedaran )ur)u3as entre e!!os$ Se o)tuvieron 0H muestras !as cua!es para su an!isis$ Resu!tados Se o)servaron 4. c!u!as por p!aca, y !a visua!izaci&n de un corp(scu!o de arr en !a c!u!a se tomo como positiva para !as mu3eres y con estos resu!tados se eva!u& *ue se puede o)tener e! se+o con !os corp(scu!os de in'ormaci&n *ue se tena de cada muestra$ (o. Diente 0 1 J F 4 H / ? @ 0. 00 01 0J 0F 04 0H )e*o Mascu!ino Mascu!ino #emenino #emenino Mascu!ino Mascu!ino Mascu!ino #emenino #emenino #emenino #emenino #emenino #emenino #emenino #emenino #emenino arr, comparando !a 'ueron o)servadas por un microscopio

compuesto, uti!izando una magni'icaci&n de 0..+, co!ocando aceite de inversi&n

Porcentaje
Masculino 31% Femenino 69%

An!isis de resu!tados 2n !as muestras o)servadas se o)tuvo *ue e! J06 'ueron hom)res y e! H@6 'ueron mu3eres, no se o)servo ning(n corp(scu!o de de! gnero mascu!ino$ 2! !as preparaciones de! se+o 'emenino se pueden o)servar en !os 'i)ro)!astos !os corp(scu!os de arr te-idos con !a tinci&n de hemato+i!ina eosina$ arr en !as pu!pas denta!es

Mientras *ue en !os 'i)ro)!astos te-idos con hemato+i!ina eosina en !a pu!pa denta! de !os varones no se encontr& presencia de corp(scu!os de arr$

2n este estudio se pudo compro)ar !a determinaci&n de! se+o por medio de !os corp(scu!os de arr, estos en !as muestras o)servadas se pudieron !oca!izar por medio de !a tinci&n, ca)e destacar *ue a comparaci&n de! estudio rea!izado por Suazo en e! 1.0. donde pro)o e! rendimiento de !a prue)a diagn&stica, se o)tuvieron !os mismos resu!tados, donde en ninguna c!u!a mascu!ina se o)servo !a cromatina se+ua!$ "onc!usiones Se o)tuvo e! se+o por !a o)servaci&n de !os corp(scu!os de denta!$ i)!iogra'a 0$5 Suazo 8a!dames <vn, et a!$ Se+ "hromatine in >enta! 7u!p$ 7er'ormance o' >iagnosis :est and the 8o!d Standard 8eneration$ <nternationa! Journa! o' Morpho!ogy, "hi!e$1.0., Io!$ 1? pp$ 1$ 1$5 7ierce, 8entica un en'o*ue concepta!, 2ditoria! Medica 7anamericana, 2stados Nnidos Americanos, 1..@ pp$ ??$ J$5 Suazo 8a!dams <vn, et a!$ Se+ >etermination )y O)servation o' Iarr5 ody in teeth Su)3et to High :emperatures$<nternationa! Journa! o' Morpho!ogy, "hi!e$ 1.00, Io!$ 1@ pp$ 1$ F$52ynard , A!do R$Det$a!E, Histo!oga y em)rio!oga de! ser humanoG )ase ce!u!ares mo!ecu!aresG 2ditoria! Medica 7anamericana, uenos AiresG 1..?, pp 0150J 4$5 Marn %i!iana, et a! Odonto!oga #orense: <denti'icaci&n Odonto!&gica Reporte de >os "asos$ Revista 2stomato!&gica, 1..J, Io!$ 00, pp$ F1 M FJ$ H$ 5 >aher P$ Iera, et a!$ "romatina de arr: an!isis de su va!or actua!$ Revista "hi!ena de 7ediatria, "hi!e$ 0@?H$ Io!$ 4/$, pp$ 4.H$ /$5 >as Pirma!, et a!$ Se+ >etermination 'rom 7u!pa! :issue$ J<A#M, 1..F$ Io!$ 1H, pp$ 4.$ arr en !a pu!pa