ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA Y ANTIPARASITARIA IN VIVO DEL EXTRACTO DEL SYZYGIUM AROMATICUM CLAVO DE OLOR EN CUYES DESTETADOS

ANTIMICROBIAL AND ANTIPARASITIC ACTIVITY IN VIVO OF SYZYGIUM AROMATICUM EXTRACT "CLOVE" IN GUINEA PIGS AT WEANING

Luis Linares 1, Junior Nina*1, Virginia Linares 1, Gilmar Mendoza 2 , Melissa Bocanegra , Victor Pretel 1, Carmen Alva1,
1 Institucin de Investigacin Eco - Agropecuaria Uku Pacha 2 Escuela de Zootecnia - Universidad Nacional de Trujillo

RESUMEN En la presente investigacin se determin la actividad antimicrobiana y antiparasitaria del extracto del Syzygium aromaticum clavo de olor en cuyes destetados. Se utilizaron 30 animales destetados en un diseo complemente al azar con 3 tratamientos (T0: Aplicacin de 0.03 ml de Suero fisiolgico, T1: Dosificacin oral de 25 mg / kg PV de Sulfadimidina+Trimetroprima, T2: Dosificacin con 0.5 ml de extracto de Syzygium aromaticum. Para el recuento de ooquistes de Eimeria caviae y de Enterobacterias se recogieron heces y se realizaron hisopados rectales antes de la aplicacin y 7 das despus. El anlisis estadstico incluy el anlisis de varianza y la prueba de Duncan (=0.05). T1 redujo las Enterobacterias fecales de 6.01.73 a 0.630.37 x106 UFC / g de heces, mientras que T2 de 5.01.52 a 0.540.44 x10 6 UFC / g de heces, existiendo diferencias altamente significativas en comparacin T0 (p<0.01).T1 obtuvo la mayor reduccin de Eimeria caviae en heces, disminuyendo de 90035.8936627.28 a 1462.4872.44 ooquistes/ g de heces (98.38%), superando a T2 que redujo de 85896.5755531.54 a 5755.493727.93 ooquistes/g heces (93.30%; p<0.05). Ambos redujeron significativamente la excrecin de Eimeria caviae en comparacin con T0 (p<0.01). El costo por dosis fue menor en T2 (S. /0.04) comparado a T1 (S/.0.08). El costo de reducir 10000 ooquistes de Eimeria caviae, fue menor en T2 que en T1 (S/.0.005 y S/.0.009). El extracto de clavo de olor va oral se presenta como en una alternativa eficaz y econmica en el control de enfermedades entricas y Eimeria caviae en cuyes.

Palabras claves: Actividad antimicrobiana, antiparasitaria, Syzygium aromaticum, cuyes ABSTRACT In the present study was assessed antimicrobial and antiparasitic activity of the Syzygium aromaticum "clove" extract in weaned guinea pigs. 30 animals were used in a randomized design with 3 treatments (T0: Application of 0.03 ml of saline, T1: oral dosage of 25 mg Sulfadimidine + trimethoprim / kg BW, T2: Dosing with 0.5 ml of Syzygium aromaticum extract. For counting of

oocysts of Eimeria caviae and Enterobacteriaceae were collected feces and rectal swabs before and 7 days after application. Statistical analysis included analysis of variance and Duncan test ( = 0.05). T1 reduced fecal Enterobacteriaceae of 6.0 1.73 to 0.63 0.37 x 106 CFU / g of feces, whereas T2 of 5.0 1.52 to 0.54 0.44 x 10 6 CFU / g of feces, there were highly significant differences compared to T0 (p <0.01) . T1 had the highest reduction of Eimeria caviae in feces, decreasing from 90035.89 36627.28 to 1462.4 872.44 oocysts / g of feces (98.38%), better than T2 that reduced from 85896.57 55531.54 to 5755.49 3727.93 oocysts / g feces (93.30 %, P<0.05). Both significantly reduced the excretion of Eimeria caviae compared to T0 (p <0.01). The cost per dose was lower in T2 (S. / 0.04) compared to T1 (S/.0.08). The cost of reduce 10,000 Eimeria caviae oocysts was lower in T2 than in T1 (S/.0.005 and S/.0.009). The clove extract orally presented as a cost-effective alternative to control enteric diseases and Eimeria caviae in guinea pigs. Keywords: Antimicrobial, antiparasitic, Syzygium aromaticum, guinea pigs INTRODUCCION Los aceites esenciales y extractos vegetales cubren un amplio espectro de efectos farmacolgicos mostrando diversas propiedades como antiinflamatorios, antioxidantes, anticancergenos y

biocidas en contra de una amplia gama de microorganismos como bacterias, hongos, virus, protozoarios, insectos y plantas (Kalemba and Kunicka 2003). El aceite esencial de clavo de olor contiene de 85 a 95% de eugenol y acetileugenol; adicionalmente, y cariofilenos y pequeas cantidades de steres, cetonas y alcoholes (Pilco y otros, 2009). La presencia de compuestos fenlicos como el timol, el carvacrol y el eugenol sugieren su actividad bactericida, la cual se ve favorecida por la naturaleza cida de su grupo hidroxilo el cual forma un puente de hidrgeno con un sitio activo enzimtico (Kalemba and Kunicka 2003) . MATERIALES Y METODOS En el presente trabajo se utilizaron 30 animales destetados de pesos homogneos (15-18 das) en un diseo complemente al azar con 3 tratamientos y 10 repeticiones (T0: Aplicacin de 0.03 ml de Suero fisiolgico, T1: Dosificacin oral de 25 mg / kg peso vivo de Sulfadimidina +

Trimetroprima , T2 : Dosificacin con 0.5 ml de extracto de Syzygium aromaticum . Para la obtencin del extracto de clavo de olor, se utiliz la destilacion por arrastre de vapor obteniendo 204.5 ml de hidrolato de clavo de olor de 250 gramos de botones florales secos de Syzygium aromaticum . Se recogieron heces previas a la aplicacin, y 7 das despus para los recuentos

parasitolgicos a travs del mtodo de flotacin en solucin salina saturada y posterior conteo en cmara de Mac Master. Para el anlisis microbiolgico se tomaron muestras rectales mediante hisopos estriles antes del tratamiento y a los 7 das del mismo y se remitieron en condiciones de refrigeracin al laboratorio para su cultivo. En el anlisis estadstico se realiz el anlisis de varianza y la prueba de Duncan (=0.05). RESULTADOS Y DISCUSION Actividad antimicrobiana in vivo: Los tratamientos con Sulfamidina + Trimetroprima y de extracto de clavo de olor redujeron significativamente el nmero de UFC de entero bacterias por gramo de heces en cuyes destetados 7 das post aplicacin (Figura 1).
Numero de UFC ( 10e6)de Enterobacterias / g de heces
10,00 Tratamientos Testigo Sulfadimidina+Trimetr oprima Extracto de clavo de olor

8,00

6,00

4,00 5,50 2,00 6,00 5,00 3,87

0,00 Preaplicacin

0,63

0,54

7 dias post-aplicacin

Barras de error: +/- 1 DT Figura 1 . Nmero de UFC de enterobacterias / g de heces de cuyes destetados pre y post aplicacin del extracto de clavo de olor y de Sulfadimidina + Trimetroprima.

En el caso del primero se observo una reduccin de 6.0 1.73 a 0.63 0.37 x 10 6 UFC / g de heces , y en el segundo de 5.0 1.52 a 0.54 0. 44 x 10 6 UFC / g de heces (p<0.01). El testigo mantuvo niveles similares pre y post aplicacin con 5.50 1.60 y 3.87 1.16 x 10 6 UFC / g de heces, respectivamente. Estos resultados son respaldados por Lee y Son (2004) , quienes reportaron que el extracto de clavo , redujo significativamente in vitro enterobacterias tales como E.coli, Salmonella typhymurium y otras como Staphylococcus aureus. Resultados similares fueron reportados por Kim (2011) , que al probar 13 extractos vegetales , encontr que el Syzygium

aromaticum present el mayor efecto inhibidor ante Salmonella typhymurium , el patgeno ms comn y de mayor impacto en la produccin de cuyes . Actividad antiparasitaria : El tratamiento con Sulfamidina + Trimetroprima obtuvo la mayor reduccin de ooquistes de Eimeria caviae por gramo de heces, disminuyendo de 90035.89 36627.28 a 1462.41 872.44 ooquistes/ g heces a los 7 das despus de la aplicacin siendo

significativamente mayor al tratamiento con clavo de olor que redujo de 85896.57 55531.54 a 5755.49 3727.93 ooquistes/ g heces (p<0.05) (Figura 1).
120.000,00 Tratamiento Testigo Sulfamidina + Trimetroprima Hidrolato de clavo de olor

Media del recuento de ooquistes / g de heces

100.000,00

80.000,00

60.000,00

40.000,00

20.000,00

0,00 Preaplicacin 7 dias post aplicacin

Barras de error: +/1 ET Figura 2. Nmero de ooquistes de Eimeria caviae /g de heces de cuyes destetados pre y post

aplicacin del extracto de clavo de olor y de Sulfadimidina + Trimetroprima Ambos tratamientos disminuyeron significativamente la excrecin fecal de Eimeria caviae en comparacin con el tratamiento testigo, que mantuvo niveles similares pre y post aplicacin (66907.14 24899.83 y 49669.31 29407.37 ooquistes/ g heces). Estos resultados concuerdan con los obtenidos por Remmal et al. (2011), quienes evaluaron la actividad antiparasitaria de 10 extractos vegetales ante Eimeria sp, reportando la mayor eficacia para el extracto de clavo de olor. Este efecto se dio a travs de la lisis de la membrana de la cubierta del oocisto. Anlisis econmico: Al analizar la eficacia de ambos tratamientos se observ que el mayor porcentaje de reduccin lo obtuvo el tratamiento con Sulfadimidina + Trimetroprima llegando al 98.38 %, en comparacin al tratamiento con extracto de clavo de olor que alcanzo el 93.30% de reduccin (Tabla 1). Referente a los costos por dosis, se determin un costo de S/. 0.08 para el tratamiento con Sulfadimidina+Trimetroprima y de S./ 0.04 para el extracto de clavo de olor.

Asimismo relacionando el numero de ooquistes que redujeron ambos tratamientos y el costo de cada dosis se calcul el costo de reducir 10000 ooquistes de Eimeria caviae, siendo de S. /0.009 para el caso de la Sulfadimidina + Trimetropima y S. /0.005 para el extracto de clavo. Tabla 1. Eficacia antiparasitaria y evaluacin econmica del tratamiento con Sulfadimidina + Trimetropima y extracto de clavo. Sulf+ Trimetoprima Extracto de clavo 90035.89 85896.57 1462.41 5755.49 88573.48 80141.08 98.38 93.30 0.08 0.04 0.009 0.005

Preaplicacin (ooquistes /g heces) Post aplicacin (ooquistes /g heces) Reduccion (ooquistes /g heces) % Reduccion Costo de una dosis S/. Costo de reducir 10000 ooquistes /g heces S./

CONCLUSIONES El tratamiento con extracto extracto de Syzygium aromaticum redujo significativamente la

excrecin de ooquistes de Eimeria caviae (93.30 %), aunque ligeramente en menor grado que la Sulfadimidina + Trimetroprima (98.38 %) 7 das post aplicacin. El costo por dosis fue menor en el tratamiento con extracto de clavo de olor (S. /0.04) comparado al de Sulfadimidina (S/. 0.08). De la misma manera el costo de reducir 10000 ooquistes de Eimeria caviae, fue menor en el primero (S/.0.005 y S/. 0.009 respectivamente). El extracto de clavo de olor va oral se presenta como en una alternativa eficaz y econmica en el control de enfermedades entricas y Eimeria caviae en cuyes. REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS Remmal A. Achahbar S, BouddineL, Chami N, Chami F .2011. In vitro destruction of Eimeria oocysts by essential oils. Veterinary Parasitology 182 (2) 121-126 Kim SY, Kang DH, Kim JK, Ha YG, Hwang JY, Kim T, Lee SH. 2011 Antimicrobial activity of plant extracts against Salmonella Typhimurium, Escherichia coli O157:H7, and Listeria monocytogenes on fresh lettuce. J Food Sci. 76 (1) 43-49 Lee, O.H.;Son, J.Y.2004. Antimicrobial Activity of Clove Extract by Extraction Solvents.Journal of The Korean Society of Food Science and Nutrition 33(3) 494-499 Kalemba, D. and A. Kunicka (2003). "Antibacterial and antifungal properties of essential oils." Curr Med Chem 10(10): 813-29.