DETERMINACION DE CARBOHIDRATOS EN AGUAS RESIDUALES DE LA INDUSTRIA AZUCARERA Y CUERPOS DE AGUAS CONTAMINADOS

Lic. Joaqun Gutirrez Daz*

*Ministerio de Ciencia Tecnologa y Medio Ambiente Centro de Informacin, Gestin y Educacin Ambiental Calle 20 No 4110, esq a 18A entre 41 y 47, Playa, Ciudad de la Habana, Cuba Telfono: (537) 229351 email: jmario@unepnet.inf.cu

RESUMEN

Se presenta un procedimiento analtico para la determinacin de carbohidratos en aguas residuales de la industria azucarera, el mtodo utiliza Antrona en un medio sulfrico fuerte. La marcha analtica es simple y poco laboriosa, el equipamiento y medios materiales que se emplean son baratos y de fcil adquisicin. La Antrona en Acido sulfrico concentrado reacciona para formar un derivado del furano de color verde con un mximo de absorcin en 620 nm. La reaccin colorimtrica cumple con la Ley de Beer y Lambert en el rango de concentracin estudiado, entre 10 y 100 mg/l de Glucosa. La sensibilidad del mtodo es de unos 3 mg/l de Glucosa, siendo repetible en las condiciones experimentales que se reportan. La desviacin estndar (ds) en el rango estudiado es de 4 mg/l. El mtodo se aplic con xito como trazador de la contaminacin producida por residuales azucareros en una corriente superficial, la cual tambin estaba sometida a descargas de aguas residuales domsticas. Los resultados obtenidos permitieron llegar a cuantificar la cargas contaminantes relativas que ambos vertimientos aportaban.

FUNDAMENTO DEL METODO

La Antrona forma un compuesto verde en medio cido fuerte (Acido sulfrico) con ciertos carbohidratos y sacridos, en especial con azcares y almidones. La reaccin de la Antrona (9.10 dihydro 9 ketoantraceno) en medio sulfrico produce un derivado del furano que tiene su mximo de absorcin en 620 nm. Existen reportados en la literatura varias alternativas para la determinacin de carbohidratos que emplean la Antrona. En el mtodo desarrollado en este artculo la concentracin de carbohidratos (como Glucosa) se determina espectrofotomtricamente, aunque puede utilizarse un fotocolormetro de filtro con un filtro adecuado (de color rojo) , el calentamiento para el desarrollo del color, utilizando el calor de reaccin entre el cido sulfrico y el agua, es una novedad dentro de los procedimientos analticos que utilizan la Antrona revisados.

APLICACION

Los residuales azucareros son ricos en contenidos de azcares principalmente en sacarosa (la que se hidroliza en fructosa y glucosa) y otros carbohidratos. El mtodo de ensayo propuesto no es especfico para un carbohidrato dado y el color resultante de la reaccin es slo proporcional a la concentracin de la mezcla de azcares presentes que son sensibles a formar en compuesto de furano coloreado . Es por ello que se recomienda la calibracin y expresin de los resultados utilizando la Glucosa. La tcnica analtica ha sido probada con xito en casos de contaminacin por residuales azucareros en corrientes superficiales y aguas subterrneas. Es de valor cuando los residuales azucareros son mezclados en su transporte con otras corrientes residuales, en especial de residuales domsticos.

MATERIALES Y METODOS

REACTIVOS Reactivo de Antrona y Acido sulfrico : Disuelva 0.1 g de Antrona en 500 ml de Acido sulfrico concentrado (con el rigor estipulado en estos casos), aada esta solucin con cuidado sobre 200 ml de agua destilada bien fra. Enfre y agregue 1 g de thiourea. La solucin resultante, de color amarillo intenso, es relativamente estable por 1 semana si se almacena en un frasco mbar y en refrigeracin. Esta cantidad es suficiente para realizar unos 40 ensayos incluyendo las soluciones patrones y blancos. Para pequeas cantidades de muestras se recomienda solo preparar unos 15 ml por cada ensayo. Solucin de Glucosa : Disuelva 100 mg de glucosa seca y de buena calidad en un litro de agua destilada. La solucin es estable por una semana si es guardada en un frasco mbar y en refrigeracin. Esta solucin tiene una concentracin de 100 mg/l de Glucosa. EQUIPAMIENTO Slo es necesario disponer de un espectofotmetro o de un fotocolormetro de filtro, est ultimo con un filtro de 620 nm (rojo), las cubetas a emplear son de 1cm de paso de luz o mayores. Adems para llevar a cabo las pesadas se debe emplear una balanza analtica.

CRISTALERIA Y MISCELANEA DE LABORATORIO Los materiales que se utilizan son comunes a cualquier laboratorio de aguas : frasco de pesada, esptula pequea, frasco lavador, agitador de vidrio, volumtrico de 1000 ml y otros de diferentes capacidades para las diluciones, frasco mbar de 500 ml, frasco mbar de 1000 ml, vaso de precipitado (Beaker) de 880 ml, vaso de precipitado de 1000 ml y vasos de precipitado (forma alta) entre 20 y 25 ml. TECNICA OPERATORIA Seleccionar una pareja de vasos de precipitados entre 20 y 25 ml de forma alta para cada ensayo, los vasos de precipitados deben ser todos iguales para garantizar un similar intercambio calrico durante el calentamiento y enfriamiento que ocurrir durante el proceso, se deben incluir tambin los beakers del blanco y muestra patrn de Glucosa. Se filtran unos 50 ml de la muestra utilizando un papel de filtro de filtracin lenta. Se adicionan 3 ml del filtrado a uno de los vasos de precipitados, el que debe estar totalmente seco, en el otro se agregan 9 ml de la solucin Antrona y Acido sulfrico. Una vez estn preparados y alineados todos los beakers se procede a mezclarlos por parejas rpidamente y por inversin (de uno al otro y viceversa) tres veces. El beaker conteniendo la mezcla se deja enfriar tapado en un lugar obscuro. Una vez fra, se traspasa un volumen apropiado a la celda de vidrio de lectura y se mide la densidad ptica (Dopt) en el espectrofotmetro o fotocolormetro a 620 nm , con un filtro rojo en el ltimo caso. Las lecturas deben hacerse en menos de 2 horas despus de haber desarrollado el color. Igual procedimiento se sigue para el blanco (3 ml de agua destilada) y la solucin patrn de glucosa, esta ltima se prepara por dilucin de la solucin standard. CALCULOS Los clculos se efectuan aplicando la frmula siguiente : Glucosa (mg/l) = Cg/ DoptG . Doptm . F Cg = Concentracin de Glucosa del patrn utilizado DoptG = Densidad ptica del patrn de Glucosa Doptm = Densidad ptica de la porcin medida F = Factor de dilucin = volumen del volumtrico/ volumen de la alicuota de la muestra

Se recomienda preparar puntos patrones entre 20 y 50 mg/l de Glucosa y diluir la muestra hasta alcanzar aproximadamente una concentracin final antes de la medicin de la densidad ptica entre 10 y 100 mg/l de Glucosa. El factor concentracin/densidad ptica (Cg/DoptG) obtenido en estas condiciones experimentales fue de 95 mg/l de glucosa por unidad de densidad ptica. Ejemplo de clculo : Se toma una muestra en un ro contaminado por residuales azucareros. Se filtra en el laboratorio y se toma una alicuota de 10 ml y se llevan a 1000 ml empleando un volumtrico de 1 litro. De esta solucin diluida se sigue la marcha analtica. Cg = 20 mg/l de glucosa DoptG = 0.210 Doptm = 0.320 F = 100 ml/10 ml Aplicando la frmula tendremos : Glucosa (mg/l) = 20 / 0.210 . 0.320 . 100 /10 = 305 mg/l

RESULTADOS Y DISCUSION

Se probaron diferentes alternativas de calentamiento para la mezcla entre la muestra y la solucin de Antrona /Acido sulfrico, se comprob experimentalmente que el calentamiento producido por la reaccin exotrmica SO4H2 y el agua (en proporcin 3:1) generaba establemente suficiente calor para el completamiento de la reaccin de formacin del derivado del furano, adems de ser el mtodo de calentamiento mas econmico y sencillo. Es importante sealar, que el uso de diferentes tipos de vasos de precipitados , en volmenes, tallas, marcas, etc. producen resultados diferentes en los valores de Dopt medidos, lo que es lgico si se piensa en las diferencias de la capacidad calrica entre esos materiales. Es imprescindible seleccionar una caja de beakers, forma alta, entre 20 y 25 ml, de esta manera se garantiza que sean iguales y se asegura un intercambio de calor semejante para todos los ensayos.

Diferentes corridas con soluciones patrones de Glucosa entre 10 mg/l y 100 mg/l, siguiendo el procedimiento descrito, dieron valores de densidad ptica proporcionales a las concentraciones, el ploteo en papel milimetrado de los datos obtenidos result siempre en lneas rectas de semejantes pendientes, lo que indicaba que la reaccin cumpla con la Ley de Beer y Lambert . La pendiente media de las rectas obtenidas en los ploteos de 6 corridas diferentes fue de 0.010 unidades de Dopt por mg de Glucosa, con una desviacin tpica (ds) de 0.002. Se observ una cierta variabilidad entre los valores de la densidad ptica de los patrones entre cada corrida experimental, sin embargo entre los valores de una misma corrida existi siempre una buena proporcionalidad entre las concentraciones y la Dopt, donde el factor (Cg/DoptG) present una buena repetibilidad. Lo anterior hizo en extremo recomendable el trabajo por series de muestras, las que se corresponden en los clculos con la Dopt del patrn seleccionado, lo que es una manera de llevar a cabo una calibracin interna para la serie, ya que existe un factor de calibracin hallado en las condiciones experimentales del grupo de ensayos. La sensibilidad del mtodo segn el convenio de tomar dos veces la desviacin estndar del blanco medido contra agua destilada , se realiz en 12 ocasiones, fue de 3 mg/l de Glucosa, valor que se considera aceptable si se compara con las altas concentraciones de carbohidratos que vierten a ros y arroyos los residuales azucareros. Se midi la concentracin de Glucosa en 8 corrientes superficiales afectadas solamente por residuales domsticos, el rango de DBO5 fue de 18 a 64, el rango de la DQO fue de 50 a 135. Los valores obtenidos de Glucosa nunca fueron mayores de 15 mg/l. Se aplic el mtodo en un ro afectado por descargas de aguas residuales azucareras en su tramo superior, posteriormente la corriente reciba diferentes aportes de residuales domsticos. Se determino la Glucosa del residual al entrar al ro, en el ro en diferentes tramos y en el residual domstico. La DQO fue determinada por el mtodo del dicromato en medio cido por reflujo (APHA, 1992). Los resultados obtenidos se pueden apreciar en la Tabla 1.

Teniendo en cuenta el comportamiento de la relacin DQO/Glucosa a lo largo del recorrido del ro, cuyo valor medio fue de 1.75, se puede calcular aproximadamente la DQO que es generada por la concentracin de Glucosa remanente, que es el aporte de los residuales azucareros, o sea para el caso de estudio : 192 mg/l multiplicado por 1.75, lo que da un valor de 336 mg/l de DQO. Si la DQO total medida, en el ltimo punto de muestreo, fue de 420 mg/l se restan los 336 mg/l de DQO relacionados con la Glucosa para calcular el peso relativo de los residuales domsticos. De esta manera se puede estimar que en el ltimo sitio de muestreo, aguas abajo de la mezcla de ambos residuales, el 80% de la contaminacin orgnica es producto del vertimiento de la industria azucarera, el 20% restante es el aporte de los residuales domsticos. Los resultados obtenidos son satisfactorios en trmino de poder calcular la influencia real de la contaminacin producida por descargas azucareras en presencia de mezclas con residuales domsticos.

CONCLUSIONES Se desarroll un mtodo sencillo para la determinacin de carbohidratos en aguas residuales azucareras. El procedimiento analtico es til como trazador del comportamiento del transporte de la contaminacin en cursos de aguas superficiales afectados. El monitoreo y determinacin de la Glucosa a lo largo de una corriente superficial afectada por descargas de residuales azucareros y domsticos permite el clculo de los pesos relativos en trminos de contaminacin orgnica biodegradable que producen ambos tipos de vertimientos.

BIBLIOGRAFIA American Public Health Association. Standards Methods for the examination of water and wastewater. 19 th. APHA, 1992

TABLA 1 . CONCENTRACIONES DE GLUCOSA Y DQO AGUAS ABAJO DE UN RIO AFECTADO POR RESIDUALES AZUCAREROS Y DOMESTICOS.
Sitio del muestreo Residual azucarero Ro antes del vertimiento Ro 3 km aguas abajo Ro 6 km aguas abajo Residual domestico Ro aguas abajo ambos vertimientos Q (l/s) 18 70 110 128 55 184 Glucosa (mg/l) DQO (mg/l) 2100 8 358 288 10 192 3800 18 633 480 280 420