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Cromatografa en columna
Es una tcnica de purificacin, puesto que permite aislar los compuestos deseados de una mezcla. La cromatografa en columna, utiliza una columna de vidrio vertical que se llena con un soporte slido adsorbente (fase estacionaria: los ms utilizados son gel de slice (SiO2) La eleccin del disolvente es crucial para una buena separacin.

Una columna de cromatografa es un tubo de vidrio relleno con una sustancia slida de propiedades adsorbentes constituida por pequeas partculas: gel de slice y almina son las ms usadas. Este relleno es lo que se conoce en cromatografa como la fase estacionaria. A travs de la columna se har pasar una corriente de un disolvente o mezcla de disolventes denominada eluyente o fase mvil.

La mezcla de compuestos a separar se disuelve en una pequea cantidad de disolvente y se coloca sobre el adsorbente, en la parte superior de la columna, quedando adsorbida por el mismo. A continuacin se pasa un flujo de eluyente a travs de la columna. Los compuestos constituyentes de la mezcla son arrastrados por el eluyente a su paso, hacindoles avanzar a lo largo de la columna.

Sin embargo, no todos los compuestos avanzan a la misma velocidad. Algunos compuestos se ven ms fuertemente retenidos por el adsorbente (fase estacionaria) y por lo tanto avanzarn ms despacio. Por el contrario, otros apenas son retenidos y avanzarn a mayor velocidad.

Aplicaciones de la cromatografia en columna

La cromatografia en columna se utiliza con fines de purificacin o aislamiento de un compuesto o mezcla de compuestos. Ejemplos:

Separaciones de componentes de plantas medicinales. Separacin de componentes de una sntesis orgnica. Separacin de colorantes.

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Qu es un Eluyente?
Es un solvente que se usa en tcnicas de cromatografa para extraer un compuesto que se quiere separar de otra fase.

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la cromatografa en El requerimiento bsico para

columna es disponer de un cilindro hueco (preferentemente de vidrio, un reservorio que contenga el solvente revelador, un buen adsorbente y los medios mediante los cuales los componentes separados se puedan recoger a medida que aparezcan en el fondo de la columna.

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La serie eluotrpica:

hexano < tolueno < cloroformo < diclorometano < acetona < acetato de etilo < etanol < metanol < H2O Para conseguir el poder de elucin deseado se utilizan mezclas de disolventes: Hexano: Acetato de etilo, 100: 1 Hexano: Acetato de etilo, 20: 1 Hexano: Acetato de etilo, 10: 1 Hexano: Acetato de etilo, 1: 1
Mayor poder de elucin
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https://www.itescam.edu.mx/principa l/sylabus/fpdb/recursos/r49999.PDF


En este tipo de cromatografa, la fase estacionaria utilizada, es decir, el absorbente, se coloca en el interior de una columna de vidrio, la cual finaliza con una llave para controlar el paso de sustancias al exterior de la columna. La fase estacionaria se impregna con el eluyente o fase mvil. Seguidamente la mezcla orgnica que nos interesa separar la depositamos por la parte superior de la fase estacionaria, y as la fase mvil podr ir atravesando el sistema. https://www.itescam.edu.mx/principa
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Los compuestos que se encuentran disueltos en la fase mvil, poco a poco saldrn de la columna cromatogrfica, y se recogen en fracciones. Las fracciones menos polares, que son por lo general las que se retienen poco o nada en el absorbente, sern las primeras en salir de la columna. En cambio, las sustancias ms polares, quedan retenidas por ms tiempo en el absorbente, y a menudo es necesario el uso de diferentes disolventes con la finalidad de incrementar su polaridad para que sean arrastradas por estos.
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El absorbente mayormente utilizado para las cromatografas en columna, es el GEL DE SLICE. A veces, en sustitucin del gel de slice, cuando ste es incompatible con la mezcla a cromatografiar, se utilizan la ALMINA o el FLORISIL (silicato magnsico).

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Seleccin de eluyentes
Cuando vamos a realizar una cromatografa en columna, lo primero que debemos hacer es elegir un disolvente adaptado para nuestro caso, para as optimizar la separacin de los componentes de la mezcla. Dicha operacin se produce a travs de cromatografa analtica en capa fina. La variante ms influyente en la eficacia de la separacin de la cromatografa a media presin usando gel de slice es el dimetro de la columna, as como la cantidad de gel utilizado.
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Seleccin de eluyentes
Para elegir el disolvente, primero se lleva a cabo una cromatografa en capa fina de la muestra a analizar. El disolvente debe producir una buena separacin de los componentes de la mezcla en la placa, colocando el componente menos polar a un Rf cercano a 0.3. En el caso de columnas pequeas, lo ideal es usar un eluyente menos polar que el conseguido en el resultado de la cromatografa en placa.

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Seleccin de eluyentes
A veces se utilizan mezclas de disolventes y se hace una elucin en gradiente. Para esto, la cromatografa se inicia con una mezcla de disolventes de polaridad adecuada para poder separar el componente que posea mayor Rf, y as, una vez recogido, se aumentar poco a poco la polaridad para poder ir separando los componentes ms polares. Si cuando se empieza la cromatografa se usa un disolvente excesivamente polar, los componentes de la mezcla eluirn conjuntamente, lo que llevara a que la separacin no tenga lugar. Una de las mezclas de disolventes ms utilizadas es HEXANO/ACETATO DE ETILO.
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Por elucin, por absorcin y desplazamiento.

El botnico ruso Mikhail S. Tsvet formaliz el uso de la cromatografa en los estudios cientficos -por el ao 1910-, dio ese nombre a la tcnica y la aplic a la separacin de los pigmentos naturales que se encuentran en las plantas (conocidos como carotenoides y clorofilas).

Tsvet empac material adsorbente en una columna de vidrio vertical (de unos cuantos centmetros de dimetro). Posteriormente, por dicha columna vertical verti una disolucin que contena la mezcla de pigmentos provenientes de las hojas molidas de una planta. Pasados unos minutos, el material empacado en la columna haba adquirido una coloracin diferente por segmentos. Es decir, se haba logrado la separacin de los pigmentos naturales de la planta. En cada segmento de color definido haba un pigmento diferente.
Las tcnicas de separacin de cromatografa, slo sirven para eso, separar, y que no nos dan ninguna otra informacin acerca de la naturaleza de los componentes separados, de ah que en la mayora de los casos estas tcnicas o mtodos de separacin vayan acompaados de otros mtodos de anlisis (composicional y/o de grupos) con el fin de identificar y en algunos casos cuantificar los componentes de la muestra separados.

http://ocw.uc3m.es/ciencia-e-oin/caracterizacion-de-materiales/material-de-clase1/Apuntes_Tecnicas_de_separacion_cromatografica.pdf

Cromatografa de Adsorcin
La separacin se basa principalmente en la diferente afinidad en trminos de adsorcin de los componentes de la muestra sobre la superficie de un slido activo. La fuerza con que es adsorbido un componente depende de las interacciones (tipo y magnitud) existentes, o bien del componente y la fase estacionaria, o el componente y la fase mvil, es decir de la polaridad de los componentes, de la actividad del adsorbente (fase estacionaria) y de la polaridad de la fase mvil. La cromatografa de adsorcin, es una tcnica particularmente til para separar compuestos de polaridad baja o media. La separacin de compuestos muy polares mediante cromatografa de adsorcin requiere, debido a la gran retencin que ofrecen, la utilizacin de adsorbentes muy poco activos, o bien, tratamientos qumicos previos a fin de reducir su polaridad.

Cromatografa de Elucin
Representa el concepto bsico de la separacin cromatografa y es la tcnica ms usada en los distintos mtodos cromatogrficos (gaseosa, lquido-gas, lquidolquido, slido-lquido). Para describir esta tcnica considrese una mezcla de slo dos componentes. Dicha mezcla se introduce en el extremo superior de una columna adsorbente y sus componentes se separan en zonas, al pasar uno o ms eluyentes a travs de la columna, debido a las distintas afinidades entre los componentes y ambas fases. La fase mvil es adsorbida dbilmente por la fase slida estacionaria. Este ideal terico de desarrollo por elucin no siempre se consigue en la prctica. Es un mtodo analtico esencial. Es la tcnica ms utilizada en casi todas las separaciones cromatografas analticas y en muchas preparativas.

Cromatografa de Desplazamiento
Consiste en desarrollar con un disolvente que sea adsorbido por la fase estacionaria con mayor fuerza con que adsorbe a los componentes de la mezcla, al contrario que el desarrollo por elucin. A medida que el disolvente pasa a lo largo de la columna, desplaza a la mezcla, que al mismo tiempo se separa parcialmente. Parte del material menos fuertemente adsorbido se recupera de forma pura, seguido por una mezcla (interfase) y seguido posteriormente del otro componente en forma pura. Es un mtodo preparativo til.

www.textoscientificos.com/quimica/cromatografia/clasificacion

Un adsorbente (fase estacionaria) para una separacin determinada debe reunir las siguientes caractersticas: a) Debe ser insoluble en el disolvente (eluyente) que se va a utilizar para la separacin. b) No debe reaccionar con las sustancias que se van a separar, ni catalizar procesos de descomposicin. c) Debe poseer una composicin uniforme. d) Cuanto menor sea el tamao de las partculas, mayor ser el grado de separacin de la mezcla. Los tipos de adsorbentes ms utilizados son: silica gel, almina, talco, sacarosa, almidn.

(Fase mvil) Es una mezcla de disolventes: La eleccin del eluyente depende de la polaridad de las sustancias que van a ser separadas. En cromatografa la naturaleza del eluyente tiene una gran importancia

Eluyentes polares: Rompen ms eficazmente las uniones de los compuestos con la fase estacionaria. Arrastran ms rpidamente a los compuestos. Eluyentes no polares: No rompen las uniones de los compuestos con la fase estacionaria. Arrastran muy lentamente a los compuestos.
En general los eluyentes mas comunes son: hexano, tolueno, ter di etlico, diclorometano, acetato de etilo y metanol

Bibliografia http://es.scribd.com/doc/14172697/6-Cromatografia en-Columna


http://www.ub.edu/oblq/oblq%20castellano/cromato grafia_tipus.html#columna http://books.google.com.mx/books?id=ZxYTJD65gV8C &pg=PA76&lpg=PA76&dq=eluyentes+para+cromatogr afia+en+columna&source=bl&ots=DiLlMbm6IA&sig=5s MkJC3hc1a9rYf4I7InZybPFCg&hl=es&sa=X&ei=qfU5T9 DNGIb22gW1n4DGCg&ved=0CDcQ6AEwADgK#v=on epage&q=eluyentes%20para%20cromatografia%20en%2 0columna&f=false https://www.itescam.edu.mx/principal/sylabus/fpdb http://quimica.laguia2000.com/genera l/cromatografia-en-columna /recursos/r49999.PDF

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