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Usos de la Microinjertacin en la micropropagacin

MICROPROPAGACION

De acuerdo a la Universidad de Agricultores de Praga , la micropropagacin es un sistema de multiplicacin en un medio artificial y asptico que a partir de pequeas porciones de plantas, tales como: semillas, embriones, tallos, brotes de tallos y de races, clulas y polen, se produce una planta entera.

MICROPROPAGACION
La micropropagacin consiste en la propagacin de plantas en un ambiente artificial controlado, empleando un medio de cultivo adecuado.(Olmos et al) Segn Hartmann y Kester , el xito de la micropropagacin vara segn los explantes que se utilicen y depende de la aplicacin de las hormonas apropiadas..

MICROPROPAGACION
La micropropagacin presenta cuatro etapas principales: 1) establecimiento del cultivo, 2) desarrollo y multiplicacin de vstagos o embriones, 3) enraizamiento y 4) aclimatacin de las plntulas.
(Etapa

0) que es la etapa de preparacin de los explantos para el establecimiento.

Etapa 0: Preparacin del material vegetal

La correcta eleccin y preparacin del explanto incide directamente sobre la calidad del mismo y su respuesta frente a los dos principales problemas que afectan al establecimiento del cultivo, que son la contaminacin con microorganismos y la oxidacin del explanto.

Etapa 1: Establecimiento del cultivo

El objetivo de esta etapa es establecer cultivos viables y axnicos. El xito est determinado Por la calidad del explanto a utilizar. En esta etapa Los principales procesos a controlar son la seleccin, el aislamiento y la esterilizacin de los explantos.
.

Etapa 2: Multiplicacin

El objetivo de esta etapa es mantener y aumentar la cantidad de brotes para los nuevos ciclos de multiplicacin sucesivos (subcultivos) y poder destinar parte de ellos a la siguiente etapa de produccin (enraizamiento, bulbificacin, etc.).

Etapa 3: Enraizamiento y aclimatizacin

En esta etapa se produce la formacin de races adventicias. En las especies herbceas es relativamente fcil mientras que en muchas especies leosas resulta ms complicada por su limitada capacidad rizognica.

Esquema de un Microinjerto

MICROINJERTO
Injertar pices caulinares en un portainjerto Etapas: Germinacin in vitro de las semillas del portainjerto Preparacin de la plntula para ser injertada Extraccin del pice de la planta infectada Mantenimiento de la plntula injertada en cultivo Mantener la planta obtenida en invernadero Indexar las plantas obtenidas

Plntula especialmente acondicionada Ubicacin del pice en la plntula Dos a cuatro semanas

El objetivo de la microinjertacin es la unin de dos vegetales, al igual que en campo. Las principales aplicaciones de esta tcnica son: obtencin de plantas libres de virus, importacin de plantas por procedimientos de cuarentena, separacin de virus en infecciones mezcladas (Navarro, 1988) y estudios sobre incompatibilidad en el injerto (Zecca, 1995). Otras aplicaciones se podran realizar en dependencia de la necesidad de la investigacin; por ejemplo, para reproducir plantas in vitro que presentan problemas de enraizamiento.

Navarro et al. (1972), propone 4 pasos para la microinjertacin:

a) Germinacin de las semillas in vitro en situaciones estriles. b) Obtencin e introduccin de plantas enfermas con virus. c) Decapitacin del patrn a 2 cm. desde la raz y microinjertacin del pice. d) Incubacin de la planta microinjertada en un tubo con medio lquido.

Protocolo clsico de la microinjertacin


( Murashige et al.,1972; Navarro etal., Alkief,1978)

1. Preparacin del portainjerto


Tcnica clsica del microinjerto de pices in vitro, en durazno (Prunus persica Batsch) Fuente: Alskief,1978

Protocolo modificado de microinjertacin


( Mussella et al ,1979)

Microinjerto in vivo

Aplicaciones de la microinjertacin
Las primeras microinjertaciones se aplicaron a especies de Entre las aplicaciones ms reconocidas de la duraznero (Prunus persica (L) Batsch) y a varios ctricos microinjertacin, tenemos la obtencin de plantas libres de (Mosella y Ascui, 1984). El procedimiento del microinjerto de virus. Se conoce que con xito se ha logrado reproducir pices caulinares in vitro, ha demostrado ser la tcnica ms plantas herbceas libres de virus, a travs del cultivo de efectiva en la eliminacin de las principales virosis de los meristemos in vitro (Mosella y Ascui, 1984). ctricos, debido a que las plantas obtenidas por este procedimiento no presentan caracteres de juvenilidad, son fieles a su tipo y en la mayora de los casos se recuperan libres de los principales sndromes que afectan a los ctricos (Navarro,1988).

Aplicaciones de la microinjertacin
Aguilar (1990) prob con xito la reproduccin de embriones somticos a partir de la microinjertacin de los mismos en patrones de especies compatibles con cacao. Esta aplicacin es muy adecuada para tratar embriones somticos con problemas de germinacin en especial especies tropical es arbreas como mango, Enterolobium y cacao.

Aplicaciones de la microinjertacin
Aguilar (1990) prob con xito la reproduccin de embriones somticos a partir de la microinjertacin de los mismos en patrones de especies compatibles con cacao. Esta aplicacin es muy adecuada para tratar embriones somticos con problemas de germinacin en especial especies tropical es arbreas como mango, Enterolobium y cacao.

Aplicaciones de la microinjertacin

La utilizacin de material revitalizado mediante podas severas o microinjertos y la incubacin en medios lquidos suplementados con auxina han permitido obtener porcentajes de enraizamiento similares a los del material juvenil (80-90%).

Aplicaciones de la microinjertacin

En este trabajo se estudian distintos parmetros para la tcnica de microinjerto de pices caulinares in vitro, con la finalidad de obtener plantas de agrios libres de virus. Consiste en injertar un pice caulinar procedente de una planta enferma, compuesto por el meristemo apical y dos o tres primordios foliares, con unas dimensiones comprendidas entre O.1 y 0.2 mm., en un patrn de dos semanas de edad obtenido por germinacin de semillas in vitro y en la oscuridad. El porcentaje de prendimiento oscila normalmente entre el 30 y el 50%. Mediante esta tcnica pueden eliminarse todas las virosis de los agrios y las plantas resultantes no tienen caracteres juveniles, por lo que es la tcnica ms aconsejable en los programas de mejora sanitaria de agrios.

Aplicaciones de la microinjertacin

Las pas tomadas de rboles adultos y microinjertadas directamente no fueron viables. los microinjertos de pas selecccionadas de injertos desarrollados en invernadero y cultivados en MS suplementado con 2 mg-l-1 de 2-iP (2isopenteniladenina) desarrollaron nuevos tallos y yemas axilares despus de 60 90 das de cultivo, indicando por tanto revigorizacin parcial de las yemas adultas injertadas.