1LkAIA GLNL1ICA

I. CONCEPTO
Tcvapia gnica cs c! pvoccso pov c!
cua! un nucvo gcn cs intvoducido
cn c!u!as dc un individuo pava
pvoduciv un cIccto tcvaputico
E! cIccto pucdc scv una activacin o
una supvcsin dc a!guna Iuncin
Iisio!gica quc sc cst
pvoducicndo incovvcctamcntc cn
c! individuoa tvatav
1ICS DL 1LkAIA GLNICA
IN1kCDUCCICN DLL 1kANSGLN
#.I METODOS DIRECTOS
METODOS
DIRECTOS
VENTAJAS:
Son scnci!!os dc pvcpavav
No ticncn !imitacioncs cn
cuanto a! tamano dc! ADN quc
pucdcn tvansIcviv
Son poco txicos
No son inmunognicos
DESVENTAJAS:
Baja tvansduccin dc !as
c!u!as diana
A!gunos so!o pucdcn
uti!izavsc in vitvo
METODOS:
osIato dc ca!cio
Micvo inycccin
E!cctvopovacin
Liposomas
ADN p!asmdico dcsnudo
Micvo pvoyccti!cs
1ronsferencio con fosfoto de co/cio
Se basa en la piecipiiacin del DNA
exgeno y los iones de calcio, piovocando
que la celula, medianie endociiosis,
iniioduzca el DNA en su inieiioi.
O Xicacia de iiansXeccin puede llegai al
io% de las celulas, aunque suele sei
iiansiioiia.
O No es una iecnica que piovoque ioxicidad
en las celulas peio la expiesin del
iiansgen es muy pequea.
O nicamenie se usa en culiivos celulaies, y
poi lo ianio su aplicacin es ex vivo.
,icroinyeccin
onsisie en colocai el DNA medianie una
inyeccin en el nucleo de las celulas.
Se iealiza medianie un miciomanipuladoi,
micioscopio inveiiido que peimiie la
visualizacin.
O as celulas que sobieviven y lan inseiiado
el maieiial geneiico piesenian una alia
eXicacia de expiesin del mismo.
O a iecnica es muy laboiiosa y necesiia
celulas aisladas paia su iealizacin.
O sie sisiema se suele uiilizai ex vivo.
/ectroporocin
Sc intvoducc !a constvuccin gnica
mcdiantc un choquc c!ctvico a !as
c!u!as quc pvovoca !a Iovmacin dc
povos cn sus mcmbvanas , pov
dondc cntva c! tvansgcn.
O Est cspccia!mcntc indicado pava
c!u!as con una a!ta tasa dc
pvo!iIcvacin.
O Muchas c!u!as mucvcn a! no
sopovtav c! choquc c!ctvico pov !o
quc muchas vcccs no cs !a Iovma
ms indicada cn a!gunos tipos
cc!u!avcs.
- desnudo
onsisie en la iniioduccin del DNA
en una solucin salina o seiica,
noimalmenie medianie inyeccin
iniiamusculai, paia conseguii la
expiesin del iiansgen.
O iene un bajo poiceniaje de celulas
iiansXeciadas
O No lay iniegiacin en el genoma y
una vez inyeciado no lay ieplicacin
en el genoma.
O sie es un sisiema uiilizado paia la
iealizacin de la ieiapia genica in
vivo.
iposomos cotinicos
Se encueniian caigados posiiivamenie poi
lo que inieiaccionan con la caiga negaiiva
del DNA.
O Son iecomendables en iiansXecciones in
viiio.
O os liposomas pioiegen de la degiadacin
al iiansgen lasia su llegada al nucleo.
O a ialla del DNA iniioducido en ellos no
iiene limiie.
O Podemos laceilos llegai a iejidos
especiXicos
O Piesenian baja eXicacia de iiansXeccin,
expiesin iiansiioiia, cieiio giado de
ioxicidad celulai y pueden sei inlibidos
poi componenies seiicos
io/istico o 6enequn o
,icroproyecti/es
onsisie en el bombaideo de los iejidos
con paiiiculas de oio o iungsieno que
llevan adleiidas a ellas el DNA. l
bombaideo se iealiza medianie una
descaiga con lelio como si Xueia una
pisiola (de alli el nombie de la
iecnica).
O a capacidad de peneiiacin es
limiiada
O Su expiesin es iiansiioiia y en la
zona de descaiga se pioduce una gian
mueiie celulai.
O sia iecnica puede iealizaise ex vivo
(en el caso de celulas animales) e in
vivo (en el caso de celulas vegeiales).
Mtodos De 1rasferenc|a V|ra|es o
Ind|rectos
Los vcctovcs viva!cs sc obticncn pov c!iminacindc uno o ms gcncs
indispcnsab!cs pava !a vcp!icacin dc! vivus, y su sustitucin pov
c! gcntcvaputico.
METODOS DE
TRANERENCIA
VIRALES
Vcntaja
Constituycn !os sistcmas ms
cIicaccs pava tvansIcviv gcncs
Pucdcn scv uti!izados tanto "in
vivo" como "cx vivo"
Dcsvcntajas:
TvansIcvcncia invo!untavia dc! vivus nativo patgcno
Pucdc activavsc un vivus patgcno o un oncogn
vcaccin inmunitavia quc c! ovganismo vcccptov ponc
cn mavcha
Vcctovcs viva!cs:
Rctvovivus
Adcnovivus
Vivus adcnoasociados
Vivus hcvpcs simp!cx
etrovirus
Son viius ARN que iienen capacidad paia
iniegiai genes ieiapeuiicos ielaiivamenie
giandes (un maximo de Kb). Necesiian de
celulas empaqueiadoias paia su obiencin. Se
iiansXieie el DNA del viius medianie la iecnica
del XosXaio de calcio a las celulas
empaqueiadoias. Posieiioimenie se iealiza
una segunda iiansduccin en la cual
iniioducimos la consiiuccin genica de
inieies.
O os viius inyeciados en el luesped iniegian su
DNA en el genoma del luesped expiesando asi
el gen que le lemos aadido.
O No exisie iespuesia inmuniiaiia.
O ienen una alia eXicacia de iiansduccin y
iambien de expiesin
denovirus
Se pueden llegai a inseiiai en ellos lasia
. Kb. de DNA exgeno.
O n esie caso no se necesiia la iniegiacin
del maieiial leiediiaiio del viius en el
del luesped paia su ieplicacin, poi lo
ianio iampoco el iiansgen seia
iniioducido en el genoma de la celula. Y
poi ianio iampoco necesiian que las
celulas inXeciadas esien dividiendose
paia su ieplicacin.
O Alia eXicacia de iiansduccin, al igual
que la expiesin de la consiiuccin
genica iniioducida, sin embaigo esia es
iiansiioiia (pocas semanas).
Iirus odenoosociodos {I%
Son paivoviius, coniienen DNA como maieiial geneiico,
y iequieien la coinXeccin con un SVWZ[b^a_ paia
muliiplicaise. Su capacidad de iniegiai DNA exgeno
es pequea, slo de Kb.
O os viius adenoasociados iniegian su DNA en la
celula duianie la ieplicacin, poi lo que la
iiansduccin (la cual es aliamenie eXicaz) es esiable
en la celula diana.
O Pueden inXeciai a celulas en divisin como a las que
no lo esian (de gian impoiiancia paia la ieiapia
genica in vivo).
O l iiesgo de una iespuesia inmune esia minimizado ya
que no pioduce pioieinas viiicas.
O Inconvenienie: esie iipo de vecioies iodavia no la
sido ian esiudiado como los ieiioviius y los
adenoviius.
erpesvirus
Son viius DNA cuyas celulas diana son las
neuionas.
O a gian veniaja es el gian iamao de su
DNA , que les peimiie acepiai vaiios
genes ieiapeuiicos, incluso podiian ii
con sus piopias iegiones ieguladoias.
O Uno de los inconvenienies es que labiia
que eliminai las secuencias que
codiXican paia las pioieinas liiicas del
viius.
Lnfermedades tratadas con
terap|a gn|ca
.I EnIcvmcdadcs
Monognicas
INMUNODEICIENCIA
COMBINADASEVERA
l gen deXeciuoso codiXica
una paiie de un
iecepioi celulai que
envia las seales a los
piogeniioies de las
celulas y NK,
componenies ciuciales
del sisiema
inmuniiaiio. Sin el
mando de esie gen, las
celulas no se
desaiiollan, no ciecen y
iampoco pioliXeian.
I8kCSIS UIS1ICA
nXeimedad leiediiaiia, auionmica iecesiva Xiecuenie en la
iaza caucasica (el gen deXeciuoso codiXica paia el canal de
cloio conocido como R). Se iiaia de una enXeimedad
geneializada de las glandulas exociinas, caiacieiizada poi
un iianspoiie anoimal de eleciioliios, que conduce a una
enXeimedad cinica obsiiuciiva de los pulmones,
insuXiciencia pancieaiica exociina y aumenio de la caniidad
de eleciioliios en el sudoi.
O uiilizan como iiansgen R, como celulas diana, las
celulas del epiielio del iiacio iespiiaioiio (nasal y
bionquial), siendo la via de adminisiiacin en Xoima de
aeiosol.
O os vecioies uiilizados: liposomas y adenoviius.
emofi/io
a lemoXilia se maniXiesia en Xoima de lemoiiagias, que
pueden sei esponianeas o pioducidas poi algun golpe o
iiauma. as lemoiiagias inieinas que pueden empezai de
Xoima esponianea sin causa apaienie, si iaidan en
coniiolaise pueden daai las aiiiculaciones y los musculos.
O lemoXilia A, usando como iiansgen el Xacioi VIII, y la
lemoXilia B, usando como iiansgen el Xacioi IX.
O - vecioies uiilizados: ieiioviius, adenoviius, viius
adenoasociados, DNA desnudo.
- via de adminisiiacin usadas: subcuianea, iniiamusculai,
iniialepaiica, iniiapeiiioneal, iniiavenosa.
cncer
as invesiigaciones pieclinicas y clinicas en la ieiapia
genica del cancei esian oiieniadas lacia caiegoiias
disiinias de esiiaiegias como:
O a desiiuccin de las celulas iumoiales medianie la
expiesin en ellas de pioducios ixicos, o en su
deXecio, capaces de aciivai diogas que si lo son.
O a esiimulacin de la iespuesia inmune coniia el
iumoi, poienciando los mecanismos del sisiema
inmune o modiXicando las celulas canceiosas paia
laceilas mas suscepiibles a su desiiuccin.
,e/onomo
l melanoma es una enXeimedad de la piel consisienie en una
iiansXoimacin canceiosa (maligna) de los melanociios
O l melanoma puede diseminaise (poi meiasiasis) iapidamenie a
oiias paiies del cueipo a iiaves de la sangie o del llamado sisiema
linXaiico
Glohlosomo
os iumoies piimaiios del Sisiema Neivioso eniial (SN)
consiiiuyen aliededoi del :% del ioial de las neoplasias en el
adulio y el :o% en nios. os gliomas son el iipo mas Xiecuenie,
con una incidencia del o% en la mayoiia de los casos.
W os ieiioviius que son iniioducidos poi via iniiaiumoial,
iiaiandose de una ieiapia in vivo. l gen usado mas
Xiecueniemenie es la iiiosina quinasa (K).
nfermedodes lnfecciosos
SIDA (Sindiome de InmunodeXiciencia Adquiiido)
s una enXeimedad inXecciosa pioducida poi el viius de
la inmunodeXiciencia lumana (conocido con las siglas
VIH) que aXecia al sisiema inmuniiaiio disminuyendo
las deXensas del oiganismo.
O l vecioi mas usado es el ieiioviius que se suele aplicai
via iniiavenosa. as celulas diana son celulas
sanguineas siendo Xiecuenie iniioducii genes de la
capside o la envoliuia del viius HIV paia que el
oiganismo las ieconozca y ieaccione asi el sisiema
inmuniiaiio.