VACUNAS

CONTRA EL
PARVOVIRUS
CANINO TIPO2
Hugo Alexander Rodriguez, Vanessa Acosta, Valentina
Acosta

Introducción
El parvovirus canino es una enfermedad grave
en la medicina veterinaria que causa
gastroenteritis hemorrágica, leucopenia,
náuseas, diarrea y muerte en perros. El agente
causante es el parvovirus canino tipo 2 (CPV-
2), relacionado con el virus de la
panleucopenia felina. La vacunación es crucial
para prevenir esta enfermedad, pero a pesar de
las vacunas disponibles, CPV-2 sigue siendo
común en perros jóvenes, especialmente en
países en desarrollo como Brasil. Este estudio
se centró en caracterizar molecularmente y
cuantificar las vacunas vivas atenuadas (LAV)
de CPV-2 comercializadas en Brasil.
Lo más importante:
El parvovirus canino es una enfermedad grave en
perros que puede llevar a la muerte.
El agente causante es el CPV-2, y la vacunación es
esencial para prevenir la enfermedad.
A pesar de la disponibilidad de vacunas, CPV-2 sigue
siendo común en perros jóvenes en países en
desarrollo.
En Brasil, se comercializan varias vacunas LAV de
CPV-2, pero hay preocupaciones sobre la calidad y la
información completa sobre estas vacunas.
Pregunta de investigación:
¿Cuál es la calidad y la eficacia de las vacunas vivas
atenuadas de CPV-2 comercializadas en Brasil, y cómo
pueden mejorarse para reducir la prevalencia de la
enfermedad en perros jóvenes en el país?
Objetivo de estudio

En resumen, el objetivo principal del estudio es evaluar la

calidad y la eficacia de las vacunas contra el CPV-2 en el
mercado brasileño, así como destacar la necesidad de
seguir monitoreando y actualizando las vacunas para
garantizar la protección de las mascotas.
Metodología :
La metodología utilizada en este estudio se dividió
en varias etapas, y a continuación, se proporciona un
resumen de la metodología y el fundamento detrás
de cada ensayo:
Obtención de muestras de vacunas CPV-2: Se
obtuvieron ochenta viales de ocho LAV CPV-2
comerciales diferentes, con diez viales por
fabricante.
Las vacunas se adquirieron en establecimientos
veterinarios de 20 ciudades del estado de Rio Grande
do Sul durante el período de enero a diciembre de
2019.
Todas las muestras se mantuvieron refrigeradas entre
2 °C y 8 °C hasta el análisis molecular.
Detección, cuantificación y caracterización
molecular de CPV-2: Se extrajo el ADN total de los
viales de vacuna utilizando kits de reactivos
específicos.
Se realizó la PCR en tiempo real para detectar la
presencia de ADN de CPV-2 en las muestras.
Se construyó una curva estándar utilizando una
clonada en un plásmido, lo que permitió cuantificar
el número de copias de ADN por ml.
Secuenciación del gen VP2: Se seleccionó
aleatoriamente un vial por fabricante para la
secuenciación del gen VP2.
Se amplificó el gen VP2 mediante PCR utilizando
cebadores específicos.
Las reacciones de PCR se llevaron a cabo bajo
condiciones específicas de temperatura y tiempo.
Los productos de PCR se sometieron a
secuenciación utilizando un kit de secuenciación.
Las secuencias resultantes se analizaron y se
enviaron a la base de datos NCBI GenBank.
Análisis filogenético y estructural de CPV-2:
Las secuencias de VP2 obtenidas se compararon con
secuencias de VP2 de CPV-2 disponibles en la base
de datos GenBank.
Se alinearon las secuencias de nucleótidos.
Se generó una filogenia de ácidos nucleótidos
utilizando el método de máxima verosimilitud (ML).
La filogenia se editó para su análisis utilizando
software específico.
RESULTADOS
Detección y cuantificación de CPV-2 en los viales de vacuna:
Se detectó ADN de CPV-2 en 71 de los 80 viales de vacuna analizados.
Nueve viales de vacuna producidos por cuatro fabricantes diferentes (uno de Vac-1, uno de Vac-2, seis de
Vac-3 y uno de Vac-5) arrojaron resultados negativos en la prueba de qPCR.
El 88.7% de los viales positivos tenían una carga viral superior a 1E+08 copias de ADN/mL, mientras
que el 11.2% tenía una carga de ADN inferior a 9,90E+07 copias/mL.
La carga viral de ADN de CPV-2 varió significativamente entre las diferentes marcas de vacuna, con
diferencias notables en el número de copias de ADN por mL.
Caracterizaciones moleculares y análisis filogenético de las cepas de la vacuna CPV-2:
Se analizaron filogenéticamente 698 secuencias de CPV-2 VP2, que se agruparon en seis clados
diferentes (OABCDE).
Las cepas de vacuna se agruparon en el clado O, que contiene principalmente secuencias ancestrales de
parvovirus canino con un promedio de aislamiento de más de 40 años atrás.
Las secuencias del clado O provinieron de diferentes regiones del mundo, incluyendo América del Norte,
América del Sur, Europa y Asia.
Epítopos de aminoácidos VP2 en las vacunas CPV-2:
Las secuencias de aminoácidos VP2 de las cepas vacunales fueron similares a las muestras
de referencia originales de CPV-2 (M19296), pero se identificaron algunas sustituciones de
aminoácidos únicas en las cepas vacunales.
La mayoría de las vacunas exhibieron hasta cinco modificaciones de aminoácidos en
comparación con la cepa ancestral, con excepción de Vac-5 y Vac-8, que tuvieron siete
modificaciones.
Se observaron dos modificaciones de aminoácidos (Y367D y D375 N) en muestras más
recientes obtenidas en campo, y estas modificaciones también se encontraron en algunas
vacunas.
Conclusiones y Discusión

El estudio revela que las vacunas CPV-2 en Brasil comparten similitudes en su perfil antigénico y
carga viral de ADN, pero se destaca la necesidad de actualizarlas para garantizar una protección
más efectiva debido a cambios en la proteína del virus a lo largo del tiempo. También se observa
la circulación de diferentes cepas del virus en Brasil, lo que subraya la importancia de monitorear
su evolución y considerar la actualización de las cepas vacunales.
El estudio genera preocupación al detectar la falta de ADN de CPV-2 en algunos viales de
vacuna y variaciones en el ADN entre diferentes marcas, enfatizando la necesidad de una
vigilancia constante de la eficacia de las vacunas para mascotas, similar a la vigilancia en
vacunas para humanos. Este seguimiento debe ser integral, desde la formulación de las vacunas
hasta la administración en los pacientes, para garantizar la salud y protección de las mascotas.
Bibliografía

Vacunas contra parvovirus canino tipo 2 en Brasil: carga viral en viales de vacunas
comerciales y análisis filogenético de los virus vacunales:
https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S1045105623000143