PASOS DE LA TÉCNICA HISTOLÓGICA

 OBTENCIÓN DE MUESTRAS
 FIJACIÓN
 DESHIDRATACIÓN Y ACLARAMIENTO
 INCLUSIÓN
 CORTE
 MONTAJE
TINCIÓN DE LOS CORTES
 OBTENCIÓN DE MUESTRAS

Todas las muestras de tejido, ya sea

obtenidas de materiales quirúrgicos,
necropsias, biopsias deben ser procesadas
adecuadamente para obtener buenos
cortes histológicos.
 OBTENCIÓN DE MUESTRAS

Se debe obtener toda la

información posible del
material a procesar.
 OBTENCIÓN DE MUESTRAS

En caso de ser necesario se debe realizar

un examen y descripción preliminar de los
materiales y su adecuación para un
correcto procesamiento.
 OBTENCIÓN DE MUESTRAS
  FIJACIÓN

Tratamiento del tejido con sustancias

químicas que no solo retardan las alteraciones
hísticas posteriores a la muerte, sino que
conservan la configuración normal del tejido.
 FIJACIÓN

Fijador:

Sustancia que detiene en forma rápida los

procesos de autólisis y que, al mismo tiempo,
conserva los tejidos, en lo posible, en el estado
en que se encontraban en la vida.
 FIJACIÓN

TIPOS DE FIJADORES

Físicos:
 Desecación: Extendidos, líquidos de punciones.
 Calor seco: Bacteriología.
 Calor húmedo: Microquímica, Zoología.
 Frío: No es una verdadera fijación. Detiene los
procesos de autólisis y necrosis, pero cuando deja
de actuar los mismos se reanudan.
 FIJACIÓN

TIPOS DE FIJADORES

Químicos:
 Aldehídos (no precipitan proteínas y no contrae estructuras) .
 Mercuriales (precipitan proteínas y tóxico por sus vapores).
 Alcoholes (precipitan proteínas).
 Agentes oxidantes (precipitan proteínas y tóxico por sus vapores).
 Picratos (precipitan proteínas).
 FIJACIÓN

TIPOS DE FIJADORES
Químicos:
 Aldehídos (formaldehido/glutaraldehido): Son los más
utilizados. Los tejidos son fijados por uniones
cruzadas en las proteínas, al reaccionar con los
grupos amino.
La Formalina (formaldehido al 40%), se utiliza
normalmente al 10%, en una solución bufferada.
 FIJACIÓN
 FIJACIÓN

No debe olvidarse que:

Un defecto de fijación no
puede ser subsanado.

Es inútil hacer un estudio

histológico de un material
mal fijado.
  DESHIDRATACIÓN
Se obtiene por medio de un reactivo anhidro
pero ávido de agua:

Alcohol Etílico.
Alcohol Isopropílico.
Alcohol Butílico.
Acetona
  ACLARADO
Se debe embeber la pieza con una sustancia
miscible con el alcohol y la parafina:

Xileno.
Tolueno.
Benceno.
  INCLUSIÓN
La parafina penetra en los vasos, en los espacios
intercelulares y también en el interior de las células
embebiendo el tejido y haciendo más fácil la obtención
de cortes con el micrótomo.
Procesador Automático
Procesador Automático
CONFECCIÓN DEL TACO

Obtención del bloque de parafina de forma

regular, para ser cortado con el micrótomo.

 CONFECCIÓN
DEL TACO
  CORTE

Micrótomo Rotativo.
Micrótomo de Deslizamiento.
Micrótomo de Congelación.
Crióstato.
Micrótomo Rotativo.
Micrótomo Rotativo.
Micrótomo Rotativo.
Crióstato
Crióstato
 EXTENSIÓN

 Utilizar portaobjetos limpios y

preparados con el adhesivo
adecuado.

 Se realiza en agua tibia (38oC).

 Precaución: el preparado debe

quedar bien extendido y sin
pliegues.

 Rotular.
  EXTENSIÓN

 Luego de escurrir el exceso de

agua llevar a estufa (60 °C) no
más de dos horas.
  TINCIÓN DE LOS CORTES
Los colorantes pueden agruparse en tres clases principales:

 Colorantes que diferencian los componentes

básicos y ácidos de la célula (hematoxilina y
eosina).

 Colorantes especializados que distinguen los

componentes fibrosos de la matriz extracelular.

 Sales metálicas que se precipitan en los tejidos y

forman depósitos de metales en ellos.
Colorantes empleados con mayor frecuencia en histología:
 TINCIÓN DE LOS CORTES

La reacción de los grupos aniónicos con un

colorante básico se denomina BASOFILIA
(que tiene afinidad por lo básico)

La reacción de los grupos catiónicos con un

colorante ácido se denomina EOSINOFILIA
(que tiene afinidad por lo ácido)
Coloración con Coloración con Coloración
Hematoxilina Eosina Hematoxilina-Eosina
Basófilo
(azul)

Acidófilo
(rosado)